r>[0041]根據以上結果得出，lmg糖精鈉相當于0.5608mg蒜素。
[0042]蒜素標準工作溶液和糖精鈉標準工作溶液的制備方法為：
[0043]準確稱取5mg蒜素標準品至10.OOmL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，作為儲 備液A，然后吸取lmL儲備液A至5mL容量瓶中，用水定容至刻度線，配制成濃度為100mg/L的 標準工作液。
[0044]準確稱取25mg糖精鈉標準品至25.00mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，作為 儲備液B，然后吸取lmL儲備液B至10mL容量瓶中，用水定容至刻度線，配制成濃度為100mg/L 的上機液。
[0045] S4在NY/T 2643-2014《大蒜及制品中蒜素的測定高效液相色譜法》的樣品前處理 及液相色譜條件下，按照步驟S3得到的對應關系，采用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定 待測樣品的蒜素含量。測定及結果計算的具體方法為：
[0046] 4.1)測定:在步驟S2得到的糖精鈉線性關系良好的濃度范圍之內選取一個適當的 濃度-Q作為糖精鈉標準工作溶液質量濃度;稱取一定質量的試料m按照NY/T 2643-2014的 標準前處理定容V得到待測液，注意要使待測液中蒜素含量在步驟S1中得到蒜素線性關系 良好的濃度范圍內；然后分別取適量待測液和糖精鈉標準工作溶液，注入高效液相色譜儀， 以色譜峰面積定量;記錄待測液的主峰面積為A，糖精鈉標準工作溶液的主峰面積為A〇;
[0047] 4.2)結果計算：
[0048] 待測液中蒜素的含量P為：P = apQA/AQ;a表示步驟S3中得到的校正因子，即a = 0.5608；
[0049 ]待測樣品中蒜素的含量W為W=pV/m，V為定容體積;m為試料質量。
[0050]以下將通過一系列實驗對本發明的性能作進一步的描述。
[0051 ] -、蒜素標準工作溶液和糖精鈉標準工作溶液的穩定性實驗
[0052] 1、蒜素標準工作溶液穩定性試驗
[0053]分別配制質量分數為6 · 25mg/L、12 · 5mg/L、25.0mg/L、50 · Omg/L和 100mg/L蒜素系 列標準工作溶液，于4°C冰箱內保存，每天測定一次該系列標準工作溶液，連續測定8天，考 察蒜素標準工作溶液的穩定性，結果見表2。
[0054] 表 2
[0055]
[0056]由表2可以看出蒜素標準工作溶液在室溫下放置8天后，6.25mg/L、12.5mg/L、 25 .Omg/L、50 .Omg/L和100mg/L標準工作溶液峰面積相對第1天的相對相差已依次達到了 36.49%、35.09 %、24.60 %、12.97 %、7.79 %，如果繼續用其作為對照品，誤差已經不可接 受了。說明蒜素標準工作溶液中蒜素的含量隨著時間的增長在不斷降低，在4°C溫度下 6.25、12.5、25.0、50.0和lOOmg/1的蒜素標準工作溶液放置8天，已經不能繼續作為對照品 準確定量了。
[0057] 2、糖精鈉標準工作溶液穩定性試驗
[0058]分別配制質量分數為5mg/L、20mg/L、50mg/L、100mg/lJPI200mg/lJ|精鈉系列標準 工作溶液，于4°C冰箱內保存，每天測定一次該系列標準工作溶液，連續測定8天，考察糖精 鈉標準工作溶液的穩定性，結果見表3。
[0059] 表 3
[0060]
[00611由表3可以看出糖精鈉標準工作溶液在室溫下放置8天后，5mg/L、20mg/L、50mg/L、 100mg/L和200mg/L標準工作溶液峰面積的RSD(相對標準偏差)均在1 %以內，誤差在可接受 范圍內。
[0062]二、實際樣品測試
[0063]隨機在市場上購買1份鮮蒜樣品和1份蒜片樣品，按照NY/T2643-2014《大蒜及制品 中蒜素的測定高效液相色譜法》的方法前處理和上機，使用蒜素標準品和使用糖精鈉替代 蒜素標準品測得的結果分別為鮮蒜樣品：2.84 X 103mg/kg和2.86 X 103mg/kg，如圖6所示； 蒜片樣品：7.21 X 103mg/kg和7.25X 103mg/kg，誤差在可接受范圍內，說明使用糖精鈉標準 品替代蒜素標準品是可行的。
[0064]對于本領域的技術人員來說，可以根據以上的技術方案和構思，作出各種相應的 改變和變形，而所有的這些改變和變形都應該包括在本發明權利要求的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定蒜素含量的檢測方法，其特征在于，包括 如下步驟： S1繪制蒜素標準曲線，得到相關系數超過設定值的線性關系良好的蒜素濃度范圍； S2繪制糖精鈉標準曲線，得到相關系數超過設定值的線性關系良好的糖精鈉濃度范 圍； S3根據步驟S1和S2得到的線性關系良好的蒜素濃度范圍和糖精鈉濃度范圍，計算得 到蒜素和糖精鈉之間的校正因子，從而得到蒜素和糖精鈉之間的對應關系； S4根據步驟S3得出的校正因子，采用糖精鈉標準品代替蒜素標準品，通過高效液相色 譜法測定待測樣品的蒜素含量。2. 根據權利要求1所述的用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定蒜素含量的檢測方法， 其特征在于，步驟S1和步驟S2中的所述設定值為0.99。3. 根據權利要求1所述的用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定蒜素含量的檢測方法， 其特征在于，步驟S1的具體方法為:取一定量蒜素標準品溶解稀釋，并制成多種濃度的上機 液，注入高效液相色譜儀，記錄主峰面積，用蒜素的濃度X對蒜素的峰面積Y進行線性回歸， 得線性回歸方程，相關系數r>0.99對應的蒜素濃度范圍即為線性關系良好的蒜素濃度范 圍。4. 根據權利要求3所述的用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定蒜素含量的檢測方法， 其特征在于，步驟S1的方法具體為： 準確稱取5mg蒜素標準品至10.OOmL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，作為儲備液 A，然后分別吸取501^、1001^、2001^、4001^、8001^、111^、21^儲備液八至51^容量瓶中，分別用 水定容至刻度線，即配制成濃度為511^凡、1〇11^凡、2〇11^凡、4〇11^凡、8〇11^凡、10〇11^凡、20〇11^/ L的上機液，注入高效液相色譜儀，液相色譜條件按照NY/T 2643-2014《大蒜及制品中蒜素 的測定高效液相色譜法》，進樣量10uL，記錄主峰面積，用蒜素的濃度X對蒜素的峰面積Y進 行線性回歸，得線性回歸方程，￥=1129(^+2139.2 4 = 0.9999，即蒜素在5-20011^/1濃度范 圍內，線性關系良好。5. 根據權利要求1所述的用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定蒜素含量的檢測方法， 其特征在于:步驟S2的具體方法為:取一定量糖精鈉標準品溶解稀釋，并制成多種濃度的上 機液，注入高效液相色譜儀，記錄主峰面積，用糖精鈉的濃度X對糖精鈉的峰面積Y進行線性 回歸，得線性回歸方程，相關系數r>0.99對應的糖精鈉濃度范圍即為線性關系良好的糖精 鈉濃度范圍。6. 根據權利要求5所述的用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定蒜素含量的檢測方法， 其特征在于，步驟S2的具體方法為： 準確稱取25mg糖精鈉標準品至25. OOmL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，作為儲備 液B，然后分別吸取 251^、501^、1001^、2001^、4001^、8001^、111^、211^儲備液8至511^容量瓶 中，分別用水定容至刻度線，即配制成濃度為5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L、 160mg/L、200mg/L、400mg/L的上機液，注入高效液相色譜儀，液相色譜條件按照NY/T 2643-2014《大蒜及制品中蒜素的測定尚效液相色譜法》，進樣量10uL，記錄主峰面積，用糖 精鈉的濃度X對糖精鈉的峰面積Y進行線性回歸，得線性回歸方程，Y = 6422.2X-1546.3，r = 0.9999，即糖精鈉在5-400mg/L范圍內，線性關系良好。7. 根據權利要求1所述的用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定蒜素含量的檢測方法， 其特征在于，步驟S3的具體方法為:分別在蒜素和糖精鈉線性關系良好的濃度范圍中選擇 任意濃度，并準確配置相應濃度的蒜素標準工作溶液和糖精鈉標準工作溶液;然后將兩標 準工作溶液各自注入液相色譜儀，記錄蒜素、糖精鈉主峰面積，蒜素、糖精鈉標準工作溶液 均連續進樣若干次，以蒜素和糖精鈉各自的主峰峰面積除以相對應的濃度計算各自的響應 因子，再以糖精鈉的響應因子比蒜素的響應因子，得到蒜素對糖精鈉的校正因子，從而得到 蒜素和糖精鈉之間的對應關系，即單位質量糖精鈉相當于多少質量的蒜素。8. 根據權利要求1所述的用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定蒜素含量的檢測方法， 其特征在于，步驟S4中，高效液相色譜法的液相色譜條件及樣品前處理條件按照NY/T 2643-2014《大蒜及制品中蒜素的測定尚效液相色譜法》中的標準，具體步驟為： 4.1) 測定:在步驟S2得到的糖精鈉線性關系良好的濃度范圍之內選取濃度P〇作為糖精 鈉標準工作溶液質量濃度;稱取一定質量的試料m按照NY/T 2643-2014的標準前處理定容V 得到待測液，注意要使待測液中蒜素含量在步驟S1中得到蒜素線性關系良好的濃度范圍 內；然后分別取適量待測液和糖精鈉標準工作溶液，注入高效液相色譜儀，以色譜峰面積定 量，記錄待測液的主峰面積為A，糖精鈉標準工作溶液的主峰面積為A〇; 4.2) 結果計算： 待測液中蒜素的含量P為:P = apQA/AQ;a表示步驟S3中得到的糖精鈉與蒜素的校正因 子； 待測樣品中蒜素的含量W為W=pV/m，V為定容體積;m為試料質量。
【專利摘要】本發明公開了一種用糖精鈉標準品代替蒜素標準品測定蒜素含量的檢測方法，首先分別繪制蒜素和糖精鈉的標準曲線，然后計算蒜素和糖精鈉之間的校正因子，得到兩者的對應關系，最后根據該對應關系采用糖精鈉標準品測定待測樣品的蒜素含量。本發明采用糖精鈉標準品代替蒜素標準品檢測蒜素含量，避免了蒜素標準品在配制后由于不穩定所帶來的試驗誤差，且由于糖精鈉標準品價格遠比蒜素標準品便宜、易購買，也節約了成本。
【IPC分類】G01N30/02, G01N30/06
【公開號】CN105651885
【申請號】
【發明人】劉進璽, 鐘紅艦, 魏紅, 董小海, 馮書惠, 張軍鋒, 賈斌, 王建, 周玲, 祁玉峰, 吳緒金, 馬瑩, 馬婧瑋, 王會鋒, 楊亞琴, 胡永建, 胡京枝, 郝學飛, 司敬沛
【申請人】河南省農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年1月5日