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一種番茄根結線蟲病的生物防治方法及其生防制劑的制作方法_2

文檔序號:9894332閱讀:來源:國知局
,玉米粉2%,葡萄糖0.5%,豆餅粉1%,K2HP04
0.2% ,KH2PO4 0.3%, CaCO3 I %,ρΗ6.0,121°C滅菌40min,將茄瓶內的種子用無菌水洗下,接種于250L的種子罐內,28-32°C培養,通氣量為發酵罐容積的0.6-1.0倍,攪拌速度為150-250r/min,培養時間36-48小時。
[0031 ] (4)固體菌種:采用固體培養基,按麩皮7份、稻殼I份、玉米粉2份,總含水量70%,pH6.0,121°C滅菌40min后冷卻,在混合接種器內將液體菌種與固體培養基混合均勻,接種量為5-10%,接種完畢轉移到固體培養室內培養。
[0032](5)培養:培養基厚度5cm,料溫控制在28-32°C,室溫控制在25-32°C,空氣濕度控制在95-100%,培養時間5-7天。
[0033]培養完畢將固體培養物自然風干,成品含水量控制在5-10%,得綠色木霉LTR-2固體培養物,過100目篩收集孢子粉,留作配制復合微生物菌劑用。
[0034]4、綠色木霉L-1O的液體發酵
[0035]綠色木霉L-1O的液體發酵按以下步驟進行:
[0036](I)斜面菌種:采用固體PDA培養基,將工程菌株L-1O接種在試管內,28°C培養72-96小時;
[0037](2)茄瓶菌種:采用液體PDA培養基,將試管菌種接種在液體三角瓶中,置于搖床上28 °C振蕩培養24-48小時;
[0038](3)液體培養:采用發酵培養基(羧甲基纖維素鈉I %,玉米粉I %,葡萄糖0.5 %,豆餅粉2%,磷酸氫二鉀0.2%,磷酸二氫鉀0.2%,碳酸鈣0.5%,pH6.0),121°C滅菌20min,將三角瓶種接種發酵罐,接種量0.2%, 28 0C培養,溶氧量40-50 %,通氣量1:0.6-0.8,攪拌速度為160r/min,培養30hr后,調整發酵參數:25°C培養,溶氧量20-30%,通氣量1:0.4-0.6,攪拌速度為120r/min,添加0.1 %的誘導劑甲醛,避光培養6_8小時,至厚垣孢子量達到2 X19個/ml以上時,結束發酵;即獲得所述綠色木霉L-1O的厚垣孢子發酵液,留作配制復合微生物菌劑用。
[0039]5、哈茨木霉Tl 1-W的固體發酵
[0040]哈茨木霉Tl1-W的固體發酵按以下步驟進行:
[0041 ] (I)斜面菌種:采用固體MA培養基,將哈茨木霉Tl1-W菌種接種在試管培養基中,28 °C培養48-72小時。
[0042](2)茄瓶菌種:采用液體PDA培養基,將試管菌種接種在液體茄瓶中,于搖床上28°C振蕩培養72-96小時。
[0043](3)固體菌種:采用固體培養基,將麩皮4份、稻殼I份按體積比混合均勻,加入50-70 %的水,pH6.0,121 °C滅菌40min后冷卻,在混合接種器內將液體菌種與固體培養基混合均勻,接種量為5-10%,接種完畢轉移到固體培養室內培養。
[0044](4)培養:培養基厚度5cm,料溫控制在28-32°C,室溫控制在25-32°C,空氣濕度控制在95-100%,培養時間5-7天。
[0045](5)培養完畢將固體培養物自然風干,成品含水量控制在5-10%,得哈茨木霉Tll-W固體培養物,過100目篩收集孢子粉,留作配制復合微生物菌劑用。
[0046]二、將液體或固體發酵的褐球固氮菌YKT41的孢子發酵液、越南伯克霍爾德氏菌P418的孢子發酵液、綠色木霉LTR-2的孢子粉、綠色木霉L-1O的孢子發酵液和哈茨木霉T11 -W孢子粉五種菌劑中的兩種或多種菌劑配制成復合制劑,即得到有效活菌數不低于2億/g的番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑;具體如下:
[0047]a.番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑I
[0048]由褐球固氮菌YKT41的孢子發酵液與越南伯克霍爾德氏菌P418的孢子發酵液按體積比I?5:1?9配制而成。
[0049]b.番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑2
[0050]由哈茨木霉Tll-W孢子粉、綠色木霉LTR-2孢子粉、綠色木霉L-1O的孢子發酵液按質量比I?3:1?3:1?8配制而成。
[0051 ] c.番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑3
[0052]由越南伯克霍爾德氏菌P418的孢子發酵液、哈茨木霉Tll-W孢子粉和綠色木霉L-10的孢子發酵液按質量比I?6:1?8:1?3配制而成。
[0053]三、以復合微生物菌劑為主要功能性成分,添加蛋白渣、褐煤、生化黃腐酸、生物炭、碳酸鈣配制得到有效活菌數不低于0.2億/g,N、P、K的總養分含量不低于5%,有機質含量不低于45 %,蛋白質含量不低于20%的番茄根結線蟲拮抗生物有機肥;蛋白渣為玉米漿、棉籽餅粉、花生餅粉、酵母粉、蛋白胨任一種的發酵殘渣曬干后得到;具體如下:
[0054]a.番茄根結線蟲拮抗生物有機肥I
[0055]以5?25%的番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑I號作為主要功能性成分,添加10?30%的蛋白渣、5?30%的褐煤、10?25%的生化黃腐酸、10?35%的生物炭,再按前述混合料添加0.5?2.5 %質量比的碳酸鈣配制得到;
[0056]b.番茄根結線蟲拮抗生物有機肥2:
[0057]以5?25%的番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑2號作為主要功能性成分,添加10?30%的蛋白渣、5?30%的褐煤、10?25%的生化黃腐酸、10?35%的生物炭,再按前述混合料添加0.5?2.5 %質量比的碳酸鈣配制得到;
[0058]c.番茄根結線蟲拮抗生物有機肥3:
[0059]以5?25%的番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑3號作為主要功能性成分,添加10?30%的蛋白渣、5?30%的褐煤、10?25%的生化黃腐酸、10?35%的生物炭,再按前述混合料添加0.5?2.5 %質量比的碳酸鈣配制得到;
[0060]d.上述比例均為質量百分比。
[0061]本發明的有益效果在于:能有效防治番茄根結線蟲病菌的侵染和發病,生態環保,方法簡便。還能明顯提高番茄產質量。
【具體實施方式】
:
[0062]下面通過實施例對本發明作進一步的詳細說明。
[0063]如下實施例的番茄根結線蟲病的生物防治方法的及其生防制劑同
【發明內容】
部分的描述。其中:
[0064]1、番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑由如下步驟得到:
[0065]a.番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑I
[0066]由褐球固氮菌YKT41的孢子發酵液與越南伯克霍爾德氏菌P418的孢子發酵液按體積比I或3或6:1或4或9配制而成。
[0067]b.番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑2
[0068]由哈茨木霉Tll-W孢子粉、綠色木霉LTR-2孢子粉、綠色木霉L-1O的孢子發酵液按質量比I或2或3:1或2或3:1或4或8配制而成。
[0069]c.番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑3
[0070]由越南伯克霍爾德氏菌P418的孢子發酵液、哈茨木霉Tll-W孢子粉和綠色木霉L-10的孢子發酵液按質量比I或3或6: I或4或8: I或2或3配制而成。
[0071 ] 2、番茄根結線蟲拮抗生物有機肥由如下步驟得到:
[0072]a.番茄根結線蟲拮抗生物有機肥I
[0073]以5%或15%或25%的番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑I號作為主要功能性成分,添加10%或20%或30%的蛋白渣、5%或15%或30%的褐煤、10%或15%或25%的生化黃腐酸、10 %或20 %或35 %的生物炭,再按前述混合料質量比添加0.5%或1.5%或2.5%的碳酸鈣配制得到;
[0074]b.番茄根結線蟲拮抗生物有機肥2
[0075]以5%或15%或25%的番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑2號作為主要功能性成分,添加10%或20%或30%的蛋白渣、5%或15%或30%的褐煤、10%或15%或25%的生化黃腐酸、10 %或20 %或35 %的生物炭,再按前述混合料質量比添加0.5%或1.5%或2.5%的碳酸鈣配制得到;
[0076]c.番茄根結線蟲拮抗生物有機肥3
[0077]以5%或15%或25%的番茄根結線蟲拮抗復合微生物菌劑3號作為主要功能性成分,添加10%或20%或30%的蛋白渣、5%或15%或30%的褐煤、10%或15%或25%的生化黃腐酸、10 %或20 %或35 %的生物炭,再按前述混合料質量比添加0.5%或1.5%或2.5%的碳酸鈣配制得到;
[0078]上述步驟三中比例為質量百分比,蛋白渣為玉米漿、或棉籽餅粉、或花生餅粉、或酵母粉、或蛋白胨的發酵殘渣曬干后得到。
[0079]實施例1:
[0080]在番茄出苗后,每隔7天分別噴施一次復合微生物菌劑I號、復合微生物菌劑2號和復合微生物菌劑3號200倍液或500倍液或1000倍液,共3次,未處理的番茄作為對照,成苗后移栽到同一片往年根結線蟲病發病嚴重的田塊,按常規方法進行管理。番茄采摘結束時調查番茄植株根系根結線蟲病發病情況,調查結果顯示:在番茄出苗后分別噴施3次復合微生物菌劑I號、復合微生物菌劑2號和復合微生物菌劑3號對番茄根結線蟲的相對防效在46.59?57.36%之間。
[0081 ] 實施例2:<
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