一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法

一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法
【專利摘要】一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法，步驟如下：第一步，按傳統的方法制作母種、原種、栽培種；第二步，培養桑樹苗，栽培上100畝-1000畝的桑樹林，待桑樹長到直徑達10cm粗時，用刀把1/5的桑樹皮削去，既可生長又不至于死樹；第三步，待削去的樹皮處木質部有表面干燥時，用皮帶沖或電鉆打孔5.5-6cm深，孔與孔之間間隔16-18cm，然后把桑黃菌種接入孔中，用黃泥封口；一次接種，可摘桑黃數十年，直到桑樹老死腐爛。本發明可以充分利用林地資源栽培桑黃產品，簡單易行，產出的桑黃個體大，可以大量人工栽培，充分滿足市場的需求。
【專利說明】一種利用野生活樹粧栽培桑黃的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種栽培桑黃的方法，尤其涉及一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法，屬于中藥培育【技術領域】。
【背景技術】
[0002]桑黃，猢猻眼、桑耳、針層孔菌，子實體無柄，菌蓋扁半球形或馬蹄形，2-12*3-21厘米，厚1.5-10厘米，木質，淺肝褐色至暗灰色或黑色，老時常龜裂，無皮殼，初期有細微絨毛，后變無毛，有同心環棱.邊緣鈍，深肉桂色至淺咖啡色，下側無子實層，菌肉深咖啡色，硬，木質.菌管與菌肉近同色，多層，但層次不明顯，年老的菌管層充滿白色菌絲.管口銹褐色至醬色，圓形，每毫米4-5個.孢子近球形，光滑，無色，5-6*3-4微米.剛毛頂端尖銳，基部膨大，10-25*5-7微米.菌絲不分枝，無橫隔，直徑3-5微米。生于楊、柳、樺、櫟等樹干上，分布東北、華北、西北及四川、云南等地。
[0003]現代研究證實桑黃能夠提高人體的免疫力，減輕抗癌劑的副作用，所以可用來輔助腫瘤病人的放療和化療，另外，桑黃對女性月經不調等婦科疾病也有療效。
[0004]桑黃是已知高等真菌中抗癌效果最好的一種菌類，并且其抗癌機理也漸漸被人們所認識，故其市場前景非常樂觀。在韓國桑黃的子實體一直作為名貴藥材出售，其價格高達2300美元/公斤；在日本桑黃藥用也開始進入市場。盡管我國應用桑黃治病已經有2000多年的歷史，但其在市場化發展較慢，可能最主要的原因就是對其藥理作用研究深度不夠，以及栽培方法欠缺。

【發明內容】

[0005]本發明的目的是為了提供一種高效、節能、環保、利用生態野生活樹樁栽培桑黃的方法。
[0006]一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法，步驟如下:
第一步，按傳統的方法制作母種、原種、栽培種；
第二步，培養桑樹苗，栽培上100畝-1000畝的桑樹林，待桑樹長到直徑達IOcm粗時，用刀把1/5的桑樹皮削去，既可生長又不至于死樹；
第三步，待削去的樹皮處木質部有表面干燥時，用皮帶沖或電鉆打孔5.5-6cm深，孔與孔之間間隔16-18cm，然后把桑黃菌種接入孔中，用黃泥封口 ；一次接種，可摘桑黃數十年，直到桑樹老死腐爛。
[0007]采用上述技術方案的有益效果是:
本發明可以充分利用林地資源栽培桑黃產品，簡單易行，產出的桑黃個體大，可以大量人工栽培，充分滿足市場的需求。
【具體實施方式】
[0008]一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法，步驟如下:第一步，按傳統的方法制作母種、原種、栽培種；
第二步，培養桑樹苗，栽培上100畝-1000畝的桑樹林，待桑樹長到直徑達IOcm粗時，用刀把1/5的桑樹皮削去，既可生長又不至于死樹；
第三步，待削去的樹皮處木質部有表面干燥時，用皮帶沖或電鉆打孔5.5-6cm深，孔與孔之間間隔16-18cm，然后把桑黃菌種接入孔中，用黃泥封口 ；一次接種，可摘桑黃數十年，直到桑樹老死腐爛。
[0009]所述第一步按傳統的方法制作母種，方法如下:
1.1.1桑黃
桑黃子實體采自陜西省寧陜縣自然保護區海拔約1800 m左右的樺樹枯木上。選尚未木質化、無任何破損的子實體，用紙包好帶回實驗室。
[0010]1.1.2分離培養基
加富PDA培養基:馬鈴薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH2P031 g，MgS04 0.5g，維生素BllOmg,瓊脂
20g,蒸懼 1000 mL, pH 自然。
[0011]1.2.3碳源測定基礎培養基
蛋白胨 5g，KH2P041g，MgS040.5g，維生素 BllOmg，瓊月旨 20g，蒸餾 1000mL, pH 自然。
[0012]1.2.4氮源測定基礎培養基 葡萄糖208，腿2?0418，1%3040.58，維生素8110 mg,瓊脂 20 g，蒸餾水 1000 mL，pH 自然。
[0013]1.1.5栽培培養基
桑樹鋸木屑培養基:桑樹鋸木屑100%，含水量609^62%。將新鮮無雜質的桑樹鋸木屑按比例加水，混合均勻至用手輕輕捏成團、指縫間有水而不流、觸之即散，然后裝入500mL廣口瓶，每瓶裝干料150g，瓶口用兩層薄紙外加一層防潮塑料扎好，0.1 MPa滅菌2h。
[0014]鮮桑樹枝木段培養基:取直徑3~5cm的新鮮桑樹枝，鋸成4cm長的木段，每條劈兩塊，裝入廣口瓶(瓶口直徑7.5 cm，高12 cm)，每瓶裝12塊，瓶口同樣用兩層薄紙外加一層防潮塑料扎好，0.1 MPa滅菌2h。
[0015]1.2 方法
1.2.1桑黃子實體處理
取新鮮桑黃子實體，用干凈刷子刷去菇體表面的雜質，用75%的酒精擦洗固體外表面5次進行消毒，然后置于無菌燒杯中備用。
[0016]1.2.2桑黃組織分離法
將已處理消毒好的子實體在超凈工作臺上撕開，用已滅菌的解剖刀在菌片中央切取米粒大的組織I塊，放入無菌平板培養皿表面，倒置于25°C恒溫箱中培養，待長出菌絲后，取生長快、菌絲長的菌絲塊，移入另一無菌平板培養皿表面培養，待長出菌絲后，取生長快、無雜菌污染的菌絲塊，移入斜面培養基表面，25 °C培養12d、菌絲長滿斜面且無雜菌，即為桑黃菌母種。
[0017]所述第一步按傳統的方法制作原種，方法如下:原種是繁殖栽培中用的菌種，原種是由母種繁殖出來的。經過子實體組織分離獲得的試管母種，生長再好也必須經過原種培養、觀察、鑒定才能進一步作為擴大生產種的再生產，確定菌種的優良性和穩定性。一、原種培養基下面介紹幾種原種培養基的不同配方。1.木屑培養基配方:鋸木屑78%,石膏1%,麥麩20%，白糖1%。鋸木屑一般采用闊葉樹之類的鋸木屑肩較好，其中以青崗樹鋸木屑為最好(松、柏、樟樹和含芳香油的鋸木屑不宜使用)，要求新鮮，無霉變。2.棉籽殼44%，木屑44%，麥麩I 0%，石膏粉1%，尿素0.5%:，過磷酸鈣0.5%。3.棉籽殼78%~79%，玉米粉20%，石膏粉I %~2%，含水量65%。4.木屑73%，麩皮25%，糖I %，石膏粉1%。制作過程:將上述原料配方混合均勻，白糖用清水溶化后，加人培養料中充分拌勻，再加清水，使培養料含水量達55%~65%之間.含水量過高.培養料不透氣，菌絲生長緩慢或不長，含水量過低，培養料濕度不夠，菌絲也難生長，并且各種營養成分的轉化必須要有一定的濕度才能進行。為了掌握好準確的含水量，最好邊拌料，邊噴水，邊測定，以防用水過多。方法很簡單，用手捏一把培養料，手指縫間見水不滴為宜(即含水量為65%)。二、滅菌原種培養基滅菌可采用高壓滅菌或常壓滅菌兩種方法。一般原料最好采用高壓滅菌，由于它數量不多，質量要求較高，首先滅菌必須嚴格徹底。高壓滅菌將原料放入高壓鍋內，上緊鍋蓋螺絲，加足水位，然后升火加溫，待壓力表指針上升到0.5磅(I磅=0.453592千克)時，即開始打開放氣閥，排除鍋內的冷空氣，使壓力表指針自動退回原位時即關閉(一般高壓鍋壓力針上升到0.5磅時會自動排冷氣，自動關閉)，隨后繼續加溫，使壓力針上升到1.5磅時，保持1.5小時為宜，然后讓它自動冷卻后取出接種。三、接種桑黃接種可根據原種數量多少決定，數量多可采用接種室接種，數量少可采用接種箱接種。原種一般數量都不太多，最好用接種箱接，因為接種箱雖然操作困難，接種速度慢，但不易被雜菌感染，成活率高。接種箱消毒，接種前預先將接種箱打掃干凈，用75%的酒精或高錳酸鉀溶液擦洗一遍，再把菌種瓶，及其他用具都擦洗一遍放人接種箱。消毒方法可采用兩種方法同時進行。紫外燈照射、高錳酸鉀和甲醛混合進行氣化消毒30分鐘接種。接種時，雙手先用75%的酒精消毒后，再伸入接種箱，點燃酒精燈，把接種針放在火焰上燒紅晾涼后使用。母種試管的棉塞表皮可在酒精火焰上燒一下，再拔掉棉塞，用接種鉤把試管內的母種培養基挑取蠶豆大的一塊，放在原種瓶內的培養基上，長有菌絲的那面培養基應朝上，有利于菌絲發育接觸木屑培養基，接種后塞上棉塞，再進行第二瓶操作。每支試管母種可接原種5~8瓶。4-24四、培養接種后的原種放在25°C — 28°C左右的恒溫條件下培養5— 7天后，就可看到培養基的表面白母種塊上長出白色的絨毛菌絲，向培養基深部或四周擴散發展。此時應隨時檢查是否感染雜菌，若出現雜菌應及時淘汰`，直到菌絲布滿培養基表面為止。原種接種后，在正常的溫度下，一般在25天左右可長滿瓶底，I 7— I 8天左右菌絲長到培養基的一半時，表面會出現子實體原基。作為原種的菌種不管子實體如何生長都不能拔掉瓶塞，以免雜菌進入瓶口內。菌絲在生長過程中，因呼吸作用要散發一定的熱量，往往瓶溫高于室溫或自然溫度2V~3°C，因此，菌種瓶在發菌時不宜堆疊過高或過擠，以免溫度過高，而使菌種質量F降。五、原種的保存桑黃原種菌絲長滿瓶后，應及時使用，不宜存放過久，在常溫下可保存一個月左右，只要子實體未停止生長。沒有枯干的都可作擴種使用，總之菌齡盡量縮短為好。原種的保存方法一般采用低溫下避光保存較好，溫度控制在5 °C~7°C保存為宜，有條件的地方可用電冰箱保存。4-25所述第一步按傳統的方法制作栽培種，方法如下:
栽培種是用原種擴制直接用于栽培的菌種。栽培種有兩種制作方法，一種是鋸木屑之類的菌種，另一種是木塊菌種。鋸木屑的菌種用于瓶栽和塑料袋栽比較適宜，木塊菌種用于段木栽培，栽培種的選料和操作方法與原種制作基本相似。一、木塊、玉米芯培養基由于桑黃的栽培基本采用段木栽培，因此，以下介紹木塊栽培種的原料配方。木塊、玉米芯培養基配方:木塊1000千克，過磷酸鈣2千克，玉米芯I 8千克，pH6~6.5，麥麩10千克，水適量，石膏2千克。這種培養基配方含糖量較高，不需另加白糖，以防偏酸，，后期子實體發育不良。具體操作:將原料按選擇的配方比例混合均勻后，再加入用清水溶化的白糖拌勻，保持培養料含水量為65%。含水量的測定方法同原種測定相同，然后再用氫氧化鈉或稀鹽酸調至所需要的PH范圍。二、裝瓶方法把拌好的料裝入瓶中，邊裝邊將菌種瓶上下抖動，使培養料逐步緊實，但不能太緊。不能用其他東西將培養料往瓶內擠壓以免造成松緊不勻，要求整個瓶中的培養料松緊適合，上下一致。一般來說培養料裝得過松，菌絲生長快，但很稀、出現子實體遲；培養料過緊，菌絲生長慢，緊密，出現子實體原基較早。松緊不勻的培養料會加劇菌絲畸形生長。培養料裝至瓶口后，再用鐵鏟將培養基表面壓平，用水洗去瓶壁內外黏附的培養基，塞上棉塞，進行高溫滅菌。一般來說最好當天裝的瓶當天就進行高溫滅菌，因為培養料中有很多微生物不斷地進行活動，不及時進行高溫滅菌，其他雜菌就會繁殖，影響培養基的正常營養成分。三、滅菌方法生產栽培種和原種滅菌一樣，但是一般栽培種數量較大，高壓滅菌鍋裝的數量少，最好采用土甑滅菌。土甑大小可根據生產量多少來決定，一般采用磚和水泥即可建成，土甑滅菌要求密封比較嚴密。土甑制作采用方形比圓形好，方形土甑便于放瓶子或袋子，一般宜深不宜淺。一立方密度的空間可裝750克的瓶800個左右，塑料袋大約250袋左右，瓶子和塑料袋的放法都采角平放，豎放縫隙太大。不要在一個大甑內放幾十瓶進行高溫消毒，數量過少，甑內空隙過大，再加上土甑沒有一定的高壓裝置，就不能達到徹底滅菌的目的。滅菌時，從水煮沸起應保持足夠的火力4飛小時，要求甑內空間溫度達到100。C以上，注意火力大小與時間長短結合安排。無論采用高壓滅菌或土法滅菌，滅菌壓力不能過高或時間過長，壓力過高或時聞過長會破壞營養基中的養分，使酸堿度下降，不利于桑黃菌絲生長。滅菌時間過短或溫度過低，培養基中的雜菌以及其他微生物未殺死，將來就會繁殖，給生產帶來嚴重損失。一定要掌握滅菌的溫度壓力和時間。滅菌后，不要馬上取出，最好在鍋中悶一夜，第二天取出待瓶溫下降到30。C后，再進行接種。四、接種生產種接種數量大，采用接種箱接種速度太慢，最好采用接種室接種，接種室首先要求清潔迎生，空氣不流動，這樣有利于徹底消毒滅菌。接種室消毒:在接種前一天，預先把接種室打掃干凈，再用自來水把接種室的四周墻壁沖洗干凈，使室內濕度增大，空氣為靜止狀態。再用甲醛和高錳酸鉀混合消毒，用藥量按每立方米的空間需要甲醛10毫升、高錳酸鉀5克計算。消毒時，應關閉門窗悶一天 或一夜，第二天放人滅菌的瓶子、原種、用其等。放好后再進行藥物消毒一次，同時可采用紫外燈照射半小時后接種。接種工作準備:工作人員應在接種室外邊的緩沖間預先換好接種衣，戴上口罩、乳膠手套、帽子等，再進入接種室接種。接種室接種操作比接種箱方便，速度較快。接種室空氣條件差，氧氣少，接種工作時間太長，對人體呼吸有影響，因此進入接種室一定要抓緊時間操作.接種操作:先點燃酒精燈，再將原種瓶棉塞拔掉，把原種表面一層約I厘米厚的培養基表層去掉，再用接種鉤挑取手指頭大的I一2塊迅速放在生廣種培養基上，塞上棉塞。每瓶原種大約可接栽培種100瓶左右。接完后，打開門窗，將接種后的瓶子搬到培養室去培養。五、培養栽培種在培養過程中，主要的工作是溫度管理和雜菌觀察。若是采用5~9月份的自然氣溫培養，就不需要人工加溫或降溫，若是當年9月份至第二年4月份生產，自然氣溫過低不能滿足桑黃所需要的溫度，就必須進行人工加溫。桑黃菌絲雖然在3°C~4°C均能生長，但最好把溫度控制在20°C~30°C左右，這樣有利于菌絲的正常生長。接種后的雜菌觀察，一般桑黃菌絲開始萌發時雜菌也就開始生長。雜菌的生長原因由多種因素引起，有接種室空間消毒不嚴，有操作時帶進的雜菌，有高溫滅菌不徹底的原因而造成雜菌感染，還有原種是否有雜菌感染等。這些原因都可以鑒別出來，若是高溫滅菌不徹底，整個菌種培養基的雜菌是從瓶子中部或底部發生；若是原種本身有雜菌，接種后菌種培養料表面全是雜菌，但不會從瓶底部或中部發生雜菌；若是接種操作不當，只是部分瓶子表面滋生雜菌，這種情況不會全部感染雜菌。還有另一種情況，接種后的種塊既不長雜菌，又不萌發菌絲，這類情況要從多方面檢查:菌種是否老化，接種溫度是否過高，培養基酸堿度是否合適，培養溫度是否正常，培養基營養成分是否符合要求，使用的原種是否可靠等，這些都會造成菌絲不萌發。桑黃純菌絲生長速度不快不慢、生長整齊均勻，純白色，菌絲健壯，一般菌絲長到I / 3時，培養基表面就會出現子實體原基，原基不斷生長擴大。菌絲長到瓶底時，子實體可長到瓶口棉塞處，但不能讓它長出棉塞，以免過多的分解培養基中的營養。一般從接種到菌絲生長結束大約需要25~30天左右，長滿后，放在低 溫下妥善保存備用。
【權利要求】
1.一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法，其特征在于:步驟如下: 第一步，按傳統的方法制作母種、原種、栽培種； 第二步，培養桑樹苗，栽培上100畝-1000畝的桑樹林，待桑樹長到直徑達10cm粗時，用刀把1/5的桑樹皮削去，既可生長又不至于死樹； 第三步，待削去的樹皮處木質部有表面干燥時，用皮帶沖或電鉆打孔5.5-6cm深，孔與孔之間間隔16-18cm，然后把桑黃菌種接入孔中，用黃泥封口 ；一次接種，可摘桑黃數十年，直到桑樹老死腐爛。
【文檔編號】A01G1/04GK103493685SQ201310476360
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2013年10月14日 優先權日:2013年10月14日
【發明者】張禮珍 申請人:貴州省施秉縣民生天麻科技有限公司