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一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法

文檔序號:219544閱讀:1061來源:國知局
一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法
【專利摘要】一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法,步驟如下:第一步,按傳統的方法制作母種、原種、栽培種;第二步,培養桑樹苗,栽培上100畝-1000畝的桑樹林,待桑樹長到直徑達10cm粗時,用刀把1/5的桑樹皮削去,既可生長又不至于死樹;第三步,待削去的樹皮處木質部有表面干燥時,用皮帶沖或電鉆打孔5.5-6cm深,孔與孔之間間隔16-18cm,然后把桑黃菌種接入孔中,用黃泥封口;一次接種,可摘桑黃數十年,直到桑樹老死腐爛。本發明可以充分利用林地資源栽培桑黃產品,簡單易行,產出的桑黃個體大,可以大量人工栽培,充分滿足市場的需求。
【專利說明】一種利用野生活樹粧栽培桑黃的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種栽培桑黃的方法,尤其涉及一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法,屬于中藥培育【技術領域】。
【背景技術】
[0002]桑黃,猢猻眼、桑耳、針層孔菌,子實體無柄,菌蓋扁半球形或馬蹄形,2-12*3-21厘米,厚1.5-10厘米,木質,淺肝褐色至暗灰色或黑色,老時常龜裂,無皮殼,初期有細微絨毛,后變無毛,有同心環棱.邊緣鈍,深肉桂色至淺咖啡色,下側無子實層,菌肉深咖啡色,硬,木質.菌管與菌肉近同色,多層,但層次不明顯,年老的菌管層充滿白色菌絲.管口銹褐色至醬色,圓形,每毫米4-5個.孢子近球形,光滑,無色,5-6*3-4微米.剛毛頂端尖銳,基部膨大,10-25*5-7微米.菌絲不分枝,無橫隔,直徑3-5微米。生于楊、柳、樺、櫟等樹干上,分布東北、華北、西北及四川、云南等地。
[0003]現代研究證實桑黃能夠提高人體的免疫力,減輕抗癌劑的副作用,所以可用來輔助腫瘤病人的放療和化療,另外,桑黃對女性月經不調等婦科疾病也有療效。
[0004]桑黃是已知高等真菌中抗癌效果最好的一種菌類,并且其抗癌機理也漸漸被人們所認識,故其市場前景非常樂觀。在韓國桑黃的子實體一直作為名貴藥材出售,其價格高達2300美元/公斤;在日本桑黃藥用也開始進入市場。盡管我國應用桑黃治病已經有2000多年的歷史,但其在市場化發展較慢,可能最主要的原因就是對其藥理作用研究深度不夠,以及栽培方法欠缺。

【發明內容】

[0005]本發明的目的是為了提供一種高效、節能、環保、利用生態野生活樹樁栽培桑黃的方法。
[0006]一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法,步驟如下:
第一步,按傳統的方法制作母種、原種、栽培種;
第二步,培養桑樹苗,栽培上100畝-1000畝的桑樹林,待桑樹長到直徑達IOcm粗時,用刀把1/5的桑樹皮削去,既可生長又不至于死樹;
第三步,待削去的樹皮處木質部有表面干燥時,用皮帶沖或電鉆打孔5.5-6cm深,孔與孔之間間隔16-18cm,然后把桑黃菌種接入孔中,用黃泥封口 ;一次接種,可摘桑黃數十年,直到桑樹老死腐爛。
[0007]采用上述技術方案的有益效果是:
本發明可以充分利用林地資源栽培桑黃產品,簡單易行,產出的桑黃個體大,可以大量人工栽培,充分滿足市場的需求。
【具體實施方式】
[0008]一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法,步驟如下:第一步,按傳統的方法制作母種、原種、栽培種;
第二步,培養桑樹苗,栽培上100畝-1000畝的桑樹林,待桑樹長到直徑達IOcm粗時,用刀把1/5的桑樹皮削去,既可生長又不至于死樹;
第三步,待削去的樹皮處木質部有表面干燥時,用皮帶沖或電鉆打孔5.5-6cm深,孔與孔之間間隔16-18cm,然后把桑黃菌種接入孔中,用黃泥封口 ;一次接種,可摘桑黃數十年,直到桑樹老死腐爛。
[0009]所述第一步按傳統的方法制作母種,方法如下:
1.1.1桑黃
桑黃子實體采自陜西省寧陜縣自然保護區海拔約1800 m左右的樺樹枯木上。選尚未木質化、無任何破損的子實體,用紙包好帶回實驗室。
[0010]1.1.2分離培養基
加富PDA培養基:馬鈴薯200g,葡萄糖20g,蛋白胨5g,KH2P031 g,MgS04 0.5g,維生素BllOmg,瓊脂
20g,蒸懼 1000 mL, pH 自然。
[0011]1.2.3碳源測定基礎培養基
蛋白胨 5g,KH2P041g,MgS040.5g,維生素 BllOmg,瓊月旨 20g,蒸餾 1000mL, pH 自然。
[0012]1.2.4氮源測定基礎培養基 葡萄糖208,腿2?0418,1%3040.58,維生素8110 mg,瓊脂 20 g,蒸餾水 1000 mL,pH 自然。
[0013]1.1.5栽培培養基
桑樹鋸木屑培養基:桑樹鋸木屑100%,含水量609^62%。將新鮮無雜質的桑樹鋸木屑按比例加水,混合均勻至用手輕輕捏成團、指縫間有水而不流、觸之即散,然后裝入500mL廣口瓶,每瓶裝干料150g,瓶口用兩層薄紙外加一層防潮塑料扎好,0.1 MPa滅菌2h。
[0014]鮮桑樹枝木段培養基:取直徑3~5cm的新鮮桑樹枝,鋸成4cm長的木段,每條劈兩塊,裝入廣口瓶(瓶口直徑7.5 cm,高12 cm),每瓶裝12塊,瓶口同樣用兩層薄紙外加一層防潮塑料扎好,0.1 MPa滅菌2h。
[0015]1.2 方法
1.2.1桑黃子實體處理
取新鮮桑黃子實體,用干凈刷子刷去菇體表面的雜質,用75%的酒精擦洗固體外表面5次進行消毒,然后置于無菌燒杯中備用。
[0016]1.2.2桑黃組織分離法
將已處理消毒好的子實體在超凈工作臺上撕開,用已滅菌的解剖刀在菌片中央切取米粒大的組織I塊,放入無菌平板培養皿表面,倒置于25°C恒溫箱中培養,待長出菌絲后,取生長快、菌絲長的菌絲塊,移入另一無菌平板培養皿表面培養,待長出菌絲后,取生長快、無雜菌污染的菌絲塊,移入斜面培養基表面,25 °C培養12d、菌絲長滿斜面且無雜菌,即為桑黃菌母種。
[0017]所述第一步按傳統的方法制作原種,方法如下:原種是繁殖栽培中用的菌種,原種是由母種繁殖出來的。經過子實體組織分離獲得的試管母種,生長再好也必須經過原種培養、觀察、鑒定才能進一步作為擴大生產種的再生產,確定菌種的優良性和穩定性。一、原種培養基下面介紹幾種原種培養基的不同配方。1.木屑培養基配方:鋸木屑78%,石膏1%,麥麩20%,白糖1%。鋸木屑一般采用闊葉樹之類的鋸木屑肩較好,其中以青崗樹鋸木屑為最好(松、柏、樟樹和含芳香油的鋸木屑不宜使用),要求新鮮,無霉變。2.棉籽殼44%,木屑44%,麥麩I 0%,石膏粉1%,尿素0.5%:,過磷酸鈣0.5%。3.棉籽殼78%~79%,玉米粉20%,石膏粉I %~2%,含水量65%。4.木屑73%,麩皮25%,糖I %,石膏粉1%。制作過程:將上述原料配方混合均勻,白糖用清水溶化后,加人培養料中充分拌勻,再加清水,使培養料含水量達55%~65%之間.含水量過高.培養料不透氣,菌絲生長緩慢或不長,含水量過低,培養料濕度不夠,菌絲也難生長,并且各種營養成分的轉化必須要有一定的濕度才能進行。為了掌握好準確的含水量,最好邊拌料,邊噴水,邊測定,以防用水過多。方法很簡單,用手捏一把培養料,手指縫間見水不滴為宜(即含水量為65%)。二、滅菌原種培養基滅菌可采用高壓滅菌或常壓滅菌兩種方法。一般原料最好采用高壓滅菌,由于它數量不多,質量要求較高,首先滅菌必須嚴格徹底。高壓滅菌將原料放入高壓鍋內,上緊鍋蓋螺絲,加足水位,然后升火加溫,待壓力表指針上升到0.5磅(I磅=0.453592千克)時,即開始打開放氣閥,排除鍋內的冷空氣,使壓力表指針自動退回原位時即關閉(一般高壓鍋壓力針上升到0.5磅時會自動排冷氣,自動關閉),隨后繼續加溫,使壓力針上升到1.5磅時,保持1.5小時為宜,然后讓它自動冷卻后取出接種。三、接種桑黃接種可根據原種數量多少決定,數量多可采用接種室接種,數量少可采用接種箱接種。原種一般數量都不太多,最好用接種箱接,因為接種箱雖然操作困難,接種速度慢,但不易被雜菌感染,成活率高。接種箱消毒,接種前預先將接種箱打掃干凈,用75%的酒精或高錳酸鉀溶液擦洗一遍,再把菌種瓶,及其他用具都擦洗一遍放人接種箱。消毒方法可采用兩種方法同時進行。紫外燈照射、高錳酸鉀和甲醛混合進行氣化消毒30分鐘接種。接種時,雙手先用75%的酒精消毒后,再伸入接種箱,點燃酒精燈,把接種針放在火焰上燒紅晾涼后使用。母種試管的棉塞表皮可在酒精火焰上燒一下,再拔掉棉塞,用接種鉤把試管內的母種培養基挑取蠶豆大的一塊,放在原種瓶內的培養基上,長有菌絲的那面培養基應朝上,有利于菌絲發育接觸木屑培養基,接種后塞上棉塞,再進行第二瓶操作。每支試管母種可接原種5~8瓶。4-24四、培養接種后的原種放在25°C — 28°C左右的恒溫條件下培養5— 7天后,就可看到培養基的表面白母種塊上長出白色的絨毛菌絲,向培養基深部或四周擴散發展。此時應隨時檢查是否感染雜菌,若出現雜菌應及時淘汰`,直到菌絲布滿培養基表面為止。原種接種后,在正常的溫度下,一般在25天左右可長滿瓶底,I 7— I 8天左右菌絲長到培養基的一半時,表面會出現子實體原基。作為原種的菌種不管子實體如何生長都不能拔掉瓶塞,以免雜菌進入瓶口內。菌絲在生長過程中,因呼吸作用要散發一定的熱量,往往瓶溫高于室溫或自然溫度2V~3°C,因此,菌種瓶在發菌時不宜堆疊過高或過擠,以免溫度過高,而使菌種質量F降。五、原種的保存桑黃原種菌絲長滿瓶后,應及時使用,不宜存放過久,在常溫下可保存一個月左右,只要子實體未停止生長。沒有枯干的都可作擴種使用,總之菌齡盡量縮短為好。原種的保存方法一般采用低溫下避光保存較好,溫度控制在5 °C~7°C保存為宜,有條件的地方可用電冰箱保存。4-25所述第一步按傳統的方法制作栽培種,方法如下:
栽培種是用原種擴制直接用于栽培的菌種。栽培種有兩種制作方法,一種是鋸木屑之類的菌種,另一種是木塊菌種。鋸木屑的菌種用于瓶栽和塑料袋栽比較適宜,木塊菌種用于段木栽培,栽培種的選料和操作方法與原種制作基本相似。一、木塊、玉米芯培養基由于桑黃的栽培基本采用段木栽培,因此,以下介紹木塊栽培種的原料配方。木塊、玉米芯培養基配方:木塊1000千克,過磷酸鈣2千克,玉米芯I 8千克,pH6~6.5,麥麩10千克,水適量,石膏2千克。這種培養基配方含糖量較高,不需另加白糖,以防偏酸,,后期子實體發育不良。具體操作:將原料按選擇的配方比例混合均勻后,再加入用清水溶化的白糖拌勻,保持培養料含水量為65%。含水量的測定方法同原種測定相同,然后再用氫氧化鈉或稀鹽酸調至所需要的PH范圍。二、裝瓶方法把拌好的料裝入瓶中,邊裝邊將菌種瓶上下抖動,使培養料逐步緊實,但不能太緊。不能用其他東西將培養料往瓶內擠壓以免造成松緊不勻,要求整個瓶中的培養料松緊適合,上下一致。一般來說培養料裝得過松,菌絲生長快,但很稀、出現子實體遲;培養料過緊,菌絲生長慢,緊密,出現子實體原基較早。松緊不勻的培養料會加劇菌絲畸形生長。培養料裝至瓶口后,再用鐵鏟將培養基表面壓平,用水洗去瓶壁內外黏附的培養基,塞上棉塞,進行高溫滅菌。一般來說最好當天裝的瓶當天就進行高溫滅菌,因為培養料中有很多微生物不斷地進行活動,不及時進行高溫滅菌,其他雜菌就會繁殖,影響培養基的正常營養成分。三、滅菌方法生產栽培種和原種滅菌一樣,但是一般栽培種數量較大,高壓滅菌鍋裝的數量少,最好采用土甑滅菌。土甑大小可根據生產量多少來決定,一般采用磚和水泥即可建成,土甑滅菌要求密封比較嚴密。土甑制作采用方形比圓形好,方形土甑便于放瓶子或袋子,一般宜深不宜淺。一立方密度的空間可裝750克的瓶800個左右,塑料袋大約250袋左右,瓶子和塑料袋的放法都采角平放,豎放縫隙太大。不要在一個大甑內放幾十瓶進行高溫消毒,數量過少,甑內空隙過大,再加上土甑沒有一定的高壓裝置,就不能達到徹底滅菌的目的。滅菌時,從水煮沸起應保持足夠的火力4飛小時,要求甑內空間溫度達到100。C以上,注意火力大小與時間長短結合安排。無論采用高壓滅菌或土法滅菌,滅菌壓力不能過高或時間過長,壓力過高或時聞過長會破壞營養基中的養分,使酸堿度下降,不利于桑黃菌絲生長。滅菌時間過短或溫度過低,培養基中的雜菌以及其他微生物未殺死,將來就會繁殖,給生產帶來嚴重損失。一定要掌握滅菌的溫度壓力和時間。滅菌后,不要馬上取出,最好在鍋中悶一夜,第二天取出待瓶溫下降到30。C后,再進行接種。四、接種生產種接種數量大,采用接種箱接種速度太慢,最好采用接種室接種,接種室首先要求清潔迎生,空氣不流動,這樣有利于徹底消毒滅菌。接種室消毒:在接種前一天,預先把接種室打掃干凈,再用自來水把接種室的四周墻壁沖洗干凈,使室內濕度增大,空氣為靜止狀態。再用甲醛和高錳酸鉀混合消毒,用藥量按每立方米的空間需要甲醛10毫升、高錳酸鉀5克計算。消毒時,應關閉門窗悶一天 或一夜,第二天放人滅菌的瓶子、原種、用其等。放好后再進行藥物消毒一次,同時可采用紫外燈照射半小時后接種。接種工作準備:工作人員應在接種室外邊的緩沖間預先換好接種衣,戴上口罩、乳膠手套、帽子等,再進入接種室接種。接種室接種操作比接種箱方便,速度較快。接種室空氣條件差,氧氣少,接種工作時間太長,對人體呼吸有影響,因此進入接種室一定要抓緊時間操作.接種操作:先點燃酒精燈,再將原種瓶棉塞拔掉,把原種表面一層約I厘米厚的培養基表層去掉,再用接種鉤挑取手指頭大的I一2塊迅速放在生廣種培養基上,塞上棉塞。每瓶原種大約可接栽培種100瓶左右。接完后,打開門窗,將接種后的瓶子搬到培養室去培養。五、培養栽培種在培養過程中,主要的工作是溫度管理和雜菌觀察。若是采用5~9月份的自然氣溫培養,就不需要人工加溫或降溫,若是當年9月份至第二年4月份生產,自然氣溫過低不能滿足桑黃所需要的溫度,就必須進行人工加溫。桑黃菌絲雖然在3°C~4°C均能生長,但最好把溫度控制在20°C~30°C左右,這樣有利于菌絲的正常生長。接種后的雜菌觀察,一般桑黃菌絲開始萌發時雜菌也就開始生長。雜菌的生長原因由多種因素引起,有接種室空間消毒不嚴,有操作時帶進的雜菌,有高溫滅菌不徹底的原因而造成雜菌感染,還有原種是否有雜菌感染等。這些原因都可以鑒別出來,若是高溫滅菌不徹底,整個菌種培養基的雜菌是從瓶子中部或底部發生;若是原種本身有雜菌,接種后菌種培養料表面全是雜菌,但不會從瓶底部或中部發生雜菌;若是接種操作不當,只是部分瓶子表面滋生雜菌,這種情況不會全部感染雜菌。還有另一種情況,接種后的種塊既不長雜菌,又不萌發菌絲,這類情況要從多方面檢查:菌種是否老化,接種溫度是否過高,培養基酸堿度是否合適,培養溫度是否正常,培養基營養成分是否符合要求,使用的原種是否可靠等,這些都會造成菌絲不萌發。桑黃純菌絲生長速度不快不慢、生長整齊均勻,純白色,菌絲健壯,一般菌絲長到I / 3時,培養基表面就會出現子實體原基,原基不斷生長擴大。菌絲長到瓶底時,子實體可長到瓶口棉塞處,但不能讓它長出棉塞,以免過多的分解培養基中的營養。一般從接種到菌絲生長結束大約需要25~30天左右,長滿后,放在低 溫下妥善保存備用。
【權利要求】
1.一種利用野生活樹樁栽培桑黃的方法,其特征在于:步驟如下: 第一步,按傳統的方法制作母種、原種、栽培種; 第二步,培養桑樹苗,栽培上100畝-1000畝的桑樹林,待桑樹長到直徑達10cm粗時,用刀把1/5的桑樹皮削去,既可生長又不至于死樹; 第三步,待削去的樹皮處木質部有表面干燥時,用皮帶沖或電鉆打孔5.5-6cm深,孔與孔之間間隔16-18cm,然后把桑黃菌種接入孔中,用黃泥封口 ;一次接種,可摘桑黃數十年,直到桑樹老死腐爛。
【文檔編號】A01G1/04GK103493685SQ201310476360
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2013年10月14日 優先權日:2013年10月14日
【發明者】張禮珍 申請人:貴州省施秉縣民生天麻科技有限公司
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