一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑及其制備方法
【專利摘要】本發明涉及一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑及其制備方法，所述的微生物制劑，由22-30重量份數的菌種培養物和70-78重量份數的微生物載體組成；其中，菌種培養物的組分及重量份數為：苦草芽孢桿菌1-2份、巨大芽孢桿菌3-4份、糞鏈球菌1-4份、根瘤菌5-6份、酵母菌12-18份。所述復合微生物制劑的制備方法為苦草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、糞鏈球菌混合培養，根瘤菌單獨培養，發酵完成后離心干燥，按比例配合即可。本發明的優點是，增強有益菌群優勢，抑制鞭毛菌亞門真菌生長，預防及治療油菜白銹病的發生，減少化學農藥的使用，經濟環保，同時加速葉面光合作用、增加根系對于營養元素的吸收，促進油菜生長，減少化肥的使用。
【專利說明】一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑及其制備方法
【技術領域】
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[0001]本發明涉及一種化學肥料，尤其涉及一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑及其制備方法。
【背景技術】
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[0002]油菜屬于十字花科，蕓薹屬，一年生或越年生草本植物，是我國植物油脂和蛋白質的重要來源。油菜生產對于保證我國食用植物油脂和飼用蛋白質供應、改善食物結構、促進養殖業和加工業發展均有重要影響。
[0003]油菜白銹病又叫“龍頭病”，病原菌是一種專性寄生菌白銹病菌，屬于鞭毛菌亞門真菌。油菜受白銹病危害后，初期癥狀為出現淡綠色小點，逐漸變黃后在葉背病斑上長出稍微隆起的有白色光澤的小皰斑，破裂后撒發出白色粉末，嚴重時整個葉片枯黃，幼莖和花軸受到傷害后腫大彎曲形似“龍頭”，上面著生白色皰斑，多不能結實。油菜各個生育階段都可發生該病，冬油菜區發病普遍，尤其以江浙滬、云貴高原等地嚴重，流行年份發病率10-50%，產量損失5-20%，含油量降低1.0-3.29%。目前采用藥劑防治主要為滅菌靈可濕性粉劑、福美雙可濕性粉劑、噁霜靈可濕性粉劑、代森鋅等化學試劑，加重環境代謝，對植物及人體都產生一定的危害，不能可持續發展，易產生抗藥性。
[0004]我國油菜種植面積廣闊，但是由于分散種植以及配套栽培技術不到位，油菜籽單產量水平與國外差距很大，在油菜栽培管理技術中，合理的施肥是其中的一個重要技術環節。目前我國在油菜肥料管理上主要存在施肥盲目性、隨意性大，投入肥料肥效持久性差，利用率低，肥料養分比例不協調，加重了土壤養分的不平衡，油菜抗病性差等問題。而且現在的光合微生物肥料比較單一，菌種活力比較低，作物與微生物之間知識松散的聯合，沒有形成共生組織，所以固氮活動易受限制。
【發明內容】
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[0005]本發明的目的是為油菜提供一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑及其制備方法，可以有效改善作物根系及葉面的微生態環境，促進有益微生物的繁殖，抑制白銹病菌，從而減少白銹病害，并且可以促進油菜生長，減少農藥及化肥的使用，達到一種安全、綠色的種植效果。
[0006]為達到上述目的，本發明的技術方案是:
[0007]一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑，由22-30重量份數的菌種培養物和70-78重量份數的微生物載體組成。
[0008]優選的，所述菌種培養物的組分及重量份數為:苦草芽孢桿菌1-2份、巨大芽孢桿菌3-4份、糞鏈球菌1-4份、根瘤菌5-6份、酵母菌12-18份。
[0009]優選的，所述微生物載體為草木灰、膨潤土或者兩者的混合物。
[0010]一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑的制備方法，其制備步驟為:
[0011]第一步:將第一液體培養基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比96-106:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100-150的比例接種于上述培養基中，充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵4-7天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML并且pH值在3.0-4.0便停止發酵；
[0012]第二步:將第二液體培養基120°C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1:100-150比例接種于第二液體培養基中，充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵1-4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML即停止發酵；
[0013]第三步:將第一步跟第二步所得培養物相對離心力3000-4000 Xg下離心10-30分鐘后35-40°C熱風干燥10-20小時，使含水量降低到25%以下；
[0014]第四步:將第三步得到的菌種培養物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過150-300微米孔徑篩后即得成品。
[0015]優選的，所述第一液體培養基的組分及質量份數為:豆柏粉3-5份、大豆粉2-4份、碳酸氫銨0.05-0.4份、葡糖糖1-10份、磷酸二氫鉀1.5-3份、硫酸鎂0.1-1份、硫酸錳0.1-0.8份、丙酸鈉0.1-0.5份、硝酸銨0.1-0.4份、四水八硼酸鈉3-10份，無菌水80-90份。
[0016]優選的，所述第二液體培養基的組分及質量份數為:甘露醇8-10份、豆柏粉5-10份、葡糖糖1-5份、玉米粉3-5份、磷酸二氫鉀1-5份、磷酸二氫鈉0.2-0.9份、硫酸鎂1_2份、無菌水50-80份。
[0017]本發明所用的四種菌種為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)、類鏈球菌(Streptococcus faecalis)、根瘤菌(Root nodulebacteria)、酵母菌。
[0018]本發明的優點為:
[0019]1.本發明采用可以抑制土壤及葉面環境中白銹病菌的有益細菌及真菌，合理配伍，具有增強有益菌群優勢、增強植物抗逆性及抵抗力、預防及治療油菜白銹病的發生、減少化學農藥的使用的作用，經濟環保。
[0020]2.本發明肥料可以促進腐殖質形成、降解有毒物質、促進氮磷鉀等營養元素的吸收，進而促進生長，減少化肥的使用。
[0021]3.本發明肥料含有具有特殊吸附功能的載體，提高在土壤及葉面的存活率，有效的改善作物根系及葉面的微生態環境，達到一種安全、綠色的種植效果。
[0022]4.本發明產品中有益菌群高達109/g，并含有多種活性代謝物質，可以改善土壤結構，分解土壤及作物中殘存農藥，提高作物對養分的吸收轉換，提高經濟及生態效益。
[0023]5.本發明的培養基主要采用糧食作物及其副產品，成本低，來源廣，產品安全可
A+-.與巨O
【具體實施方式】
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[0024]下面將結合具體實施例來詳細說明本發明，在此發明的示意性實施例以及說明用來解釋本發明，但并不作為對本發明的限定。
[0025]實施例一
[0026]—種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑，由30重量份數的菌種培養物和80重量份數的微生物載體組成，其中:苦草芽孢桿菌2份、巨大芽孢桿菌4份、糞鏈球菌3份、根瘤菌6份、酵母菌15份，以上菌種均可以在中國農業微生物菌種保藏管理中心購買；微生物載體為草木灰。
[0027]制備步驟為:
[0028]第一步:將第一液體培養基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比100:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100的比例接種于上述培養基中，充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵7天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML并且pH值在4.0便停止發酵；
[0029]第二步:將第二液體培養基120 °C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1::100比例接種于第二液體培養基中，充分充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵1-4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML即停止發酵；
[0030]第三步:將第一步跟第二步所得培養物相對離心力4000Xg下離心20分鐘后在35°C熱風干燥15小時，含水量降低到25%以下；
[0031]第四步:將第三步得到的菌種培養物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過200微米孔徑篩后即得成品。
[0032]其中第一液體培養基的組分及質量份數為:豆柏粉4份、大豆粉4份、碳酸氫銨0.05份、葡糖糖3份、磷酸二氫鉀3份、硫酸鎂I份、硫酸錳0.1份、丙酸鈉0.5份、硝酸銨0.4份、四水八硼酸鈉10份，無菌水80份。第二液體培養基的組分及質量份數為:甘露醇8份、豆柏粉5份、葡糖糖3份、玉米粉3份、磷酸二氫鉀I份、磷酸二氫鈉0.9份、硫酸鎂I份、無菌水80份。
[0033]實施例二
[0034]一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑，由22重量份數的菌種培養物和78重量份數的微生物載體組成，其中菌種培養物的組分及重量份數為:枯草芽孢桿菌I份、巨大芽孢桿菌3份、糞鏈球菌I份、根瘤菌5份、酵母菌12份，以上菌種均可以在中國農業微生物菌種保藏管理中心購買，微生物載體為膨潤土。
[0035]制備步驟為:
[0036]第一步:將第一液體培養基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比96:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100的比例接種于上述培養基中，充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵6天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML并且pH值在3.0便停止發酵；
[0037]第二步:將第二液體培養基120 °C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1::100比例接種于第二液體培養基中，充分充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵1-4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML即停止發酵；
[0038]第三步:將第一步跟第二步所得培養物相對離心力3000Xg下離心10分鐘后在35°C熱風干燥10小時，含水量降低到25%以下；
[0039]第四步:將第三步得到的菌種培養物與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過150微米孔徑篩后即得成品。
[0040]其中，第一液體培養基的組分及質量份數為:豆柏粉3份、大豆粉4份、碳酸氫銨0.05份、葡糖糖I份、磷酸二氫鉀1.5份、硫酸鎂0.1份、硫酸錳0.1份、丙酸鈉0.1份、硝酸銨0.1份、四水八硼酸鈉3份，無菌水80份，第二液體培養基的組分及質量份數為:甘露醇8份、豆柏粉5份、葡糖糖I份、玉米粉3份、磷酸二氫鉀I份、磷酸二氫鈉0.2份、硫酸鎂I份、無菌水50份。
[0041]實施例三
[0042]一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑，由26重量份數的菌種培養物和74重量份數的微生物載體組成。菌種培養物的組分及重量份數為:枯草芽孢桿菌2份、巨大芽孢桿菌3份、糞鏈球菌2份、根瘤菌5份、酵母菌14份，以上菌種均可以在中國農業微生物菌種保藏管理中心購買，微生物載體為草木灰。
[0043]制備步驟為:
[0044]第一步:將第一液體培養基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比106:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:150的比例接種于上述培養基中，充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵7天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML并且pH值在3.0便停止發酵；
[0045]第二步:將第二液體培養基120°C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1:150比例接種于第二液體培養基中，充分充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML即停止發酵；
[0046]第三步:將第一步跟第二步所得培養物相對離心力4000Xg下離心30分鐘后在40°C熱風干燥10小時，含水量降低到25%以下；
[0047]第四步:將第三步得到的菌種培養物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過300微米孔徑篩后即得成品。
[0048]其中，第一液體培養基的組分及質量份數為:豆柏粉5份、大豆粉4份、碳酸氫銨0.4份、葡糖糖2份、磷酸二氫鉀3份、硫酸鎂I份、硫酸錳0.8份、丙酸鈉0.5份、硝酸銨0.4份、四水八硼酸鈉10份，無菌水80份，第二液體培養基的組分及質量份數為:甘露醇9份、豆柏粉5份、葡糖糖5份、玉米粉3份、磷酸二氫鉀5份、磷酸二氫鈉0.9份、硫酸鎂I份、無菌水80份。
[0049]實施例四
[0050]一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑，由28重量份數的菌種培養物和72重量份數的微生物載體組成，所述菌種培養物的組分及重量份數為:苦草芽孢桿菌，2份、巨大芽孢桿菌4份、糞鏈球菌2份、根瘤菌6份、酵母菌14份，
[0051]微生物載體為草木灰與膨潤土重量比1:1的混合物。
[0052]制備步驟為:
[0053]第一步:將第一液體培養基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比100:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100的比例接種于上述培養基中，充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵5天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML并且pH值在4.0便停止發酵；
[0054]第二步:將第二液體培養基120°C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1:100比例接種于第二液體培養基中，充分充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML即停止發酵；
[0055]第三步:將第一步跟第二步所得培養物相對離心力3500Xg下離心10分鐘后40°C熱風干燥15小時，使含水量降低到25%以下；
[0056]第四步:將第三步得到的菌種培養物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過300微米孔徑篩后即得成品。
[0057]其中，第一液體培養基的組分及質量份數為:豆柏粉5份、大豆粉3份、碳酸氫銨0.4份、葡糖糖8份、磷酸二氫鉀3份、硫酸鎂I份、硫酸錳0.8份、丙酸鈉0.5份、硝酸銨0.4份、四水八硼酸鈉3份，無菌水80份。第二液體培養基的組分及質量份數為:甘露醇8份、豆柏粉9份、葡糖糖5份、玉米粉5份、磷酸二氫鉀5份、磷酸二氫鈉0.9份、硫酸鎂2份、無菌水70份。
[0058]本產品在研發完成后進行對比試驗，一次性添加量為200克/畝，本微生物制劑肥料使用后油菜白銹病降低80-95%，油菜產量提高15-35%，根系長度平均增長2_5厘米，油菜成熟提前10-15天。
[0059]上述實施例僅例示性說明本發明的原理及其功效，而非用于限制本發明。任何熟悉此技術的人士皆可在不違背本發明的精神及范疇下，對上述實施例進行修飾或改變。因此，舉凡所屬【技術領域】中具有通常知識者在未脫離本發明所揭示的精神與技術思想下所完成的一切等效修飾或改變，仍應由本發明的權利要求所涵蓋。
【權利要求】
1.一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑，其特征在于:所述的微生物制劑，由22-30重量份數的菌種培養物和70-78重量份數的微生物載體組成。
2.根據權利要求1所述的一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑，其特征在于:所述菌種培養物的組分及重量份數為:苦草芽孢桿菌1-2份、巨大芽孢桿菌3-4份、糞鏈球菌1-4份、根瘤菌5-6份、酵母菌12-18份。
3.根據權利要求1所述的一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑，其特征在于:所述微生物載體為草木灰、膨潤土或者兩者的混合物。
4.一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑的制備方法，其特征在于:其制備步驟為: 第一步:將第一液體培養基120°C滅菌20分鐘后與吐溫以重量比96-106:1混合，將枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和糞鏈球菌混合物按照重量比1:100-150的比例接種于上述培養基中，充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵4-7天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定pH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML并且pH值在3.0-4.0便停止發酵； 第二步:將第二液體培養基120 °C滅菌20分鐘后通氣，將根瘤菌按照重量比1:100-150比例接種于第二液體培養基中，充分攪拌10分鐘后密閉靜置發酵1-4天，抽樣檢測菌體生長情況并且測定PH值、平板計數，當活菌總濃度超過109/ML即停止發酵； 第三步:將第一步跟第二步所得培養物相對離心力3000-4000 Xg下離心10-30分鐘后35-40°C熱風干燥10-20小時，使含水量降低到25%以下； 第四步:將第三步得到的菌種培養物及酵母菌與微生物載體按照比例混合，室溫破碎后過150-300微米孔徑篩后即得成品。
5.根據權利要求4所述的一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑的制備方法，其特征在于:所述第一液體培養基的組分及質量份數為:豆柏粉3-5份、大豆粉2-4份、碳酸氫銨0.05-0.4份、葡糖糖1-10份、磷酸二氫鉀1.5-3份、硫酸鎂0.1-1份、硫酸錳0.1-0.8份、丙酸鈉0.1-0.5份、硝酸銨0.1-0.4份、四水八硼酸鈉3-10份，無菌水80-90份。
6.根據權利要求4所述的一種用于防治油菜白銹病的復合微生物制劑的制備方法，其特征在于:所述第二液體培養基的組分及質量份數為:甘露醇8-10份、豆柏粉5-10份、葡糖糖1-5份、玉米粉3-5份、磷酸二氫鉀1-5份、磷酸二氫鈉0.2-0.9份、硫酸鎂1_2份、無菌水50-80份。
【文檔編號】A01P3/00GK104472554SQ201410852398
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月31日 優先權日:2014年12月31日
【發明者】周美華 申請人:吳中區金庭小美華家庭農場