專利名稱：用于促進骨愈合的組合物和方法
技術領域：
本發明通常涉及用于促進骨愈合的營養組合物以及其用途。
骨是一種動態的活組織并且通過骨基質的再吸收和沉積而不斷被補充。骨的穩定性依賴于基礎的結締組織。Oxlund H.等人已經表明對于骨強度而言，最佳結構的膠原比骨緊密度以及其鈣飽和度更重要(Bone1996；19479-84)。在受骨質疏松癥影響的骨中，膠原鏈間的交聯濃度降低了30％。Knot L.等人已經表明膠原結構以及其纖維網的空間結構對于礦物沉積和骨的緊密度而言很重要，并且膠原的微結構決定了骨強度(Bone1998；22181-7)。Savvas M.等人已經表明由營養不良造成的膠原損失是骨量損失的主要因素(J.Obstetr.Gynecol.1989；961392-4)。研究中厭食的女性表現出脊柱的骨密度降低了18％，股骨的骨密度降低了25％。骨量降低伴有皮膚膠原降低22％。
骨折后的愈合過程是一種涉及多相過程的有序過程，其包括i)形成血腫；ii)形成纖維-軟骨骨痂；iii)形成骨痂；和iv)骨的再建。在愈合過程中，骨折鄰近區域中的多能細胞分化成成骨細胞和軟骨細胞。成骨細胞起源于骨樣組織，并且其敷設了膠原纖維。軟骨細胞產生了肥厚的軟骨細胞，其沉淀了一種形成鈣化軟骨的礦化基質，然后，其改型成骨密質。
盡管整形學技術不斷發展，但是骨折的愈合是一種漫長的過程，既使不是數月的話也需要數周。在數周中，患者的活動常常受到嚴重限制。促進骨愈合和骨折修復(即降低愈合時間)將極大緩解患者的痛苦。在青少年期這是特別希望的，這是因為這種年齡組的個體對醫生建議的順從性最低。當醫生推薦青少年在一定時期內使用拐杖時，其常常比醫生建議的更早地拋棄使用拐杖。
US專利6,258,778公開了一種通過使用血管緊張素以及其類似物來增強骨和軟骨修復的方法。US專利5,502,074公開了一種通過使用苯并噻吩類物質來促進骨愈合的方法。并沒有確定使用這些藥物的安全性。例如，已知血管緊張素可以發揮有效的心血管和腎作用，因此對于患有心衰和腎衰的患者而言，其應用將受到限制。
US專利6,061,597公開了用共振頻率刺激來促進骨折愈合。US專利6,290,714公開了一種治療骨折的低水平激光療法。沒有表明這些方法的效力并且這種方法需要昂貴的去醫學診所看病和/或計算機裝置。這些方法都沒有在臨床中得到驗證。
US專利5,232,709公開了一種用于治療骨損失的具有高劑量鈣的營養補充物。給骨折個體使用高劑量的鈣將造成骨組織的礦化，而不是補充骨膠原。骨礦化的增加使得骨進一步硬化。隨著時間的流逝，受影響的骨變得更脆，這使其在應力下易于發生開放性骨折和粉碎性骨折。
一直需要提供一種可促進人類骨愈合(即降低骨折的愈合時間)的安全、方便、負擔得起和有效的方法。
因此，本發明的技術問題是要提供可以滿足這種需求的手段和方法。權利要求中所表明特征的技術方案解決了這種技術問題。
因此，本發明涉及一種包含賴氨酸、脯氨酸、抗壞血酸、銅、和維生素B6的營養組合物。該營養組合物適用于人應用并且可有效促進骨愈合。該營養組合物也適用于動物應用。所說的動物優選地是哺乳動物，最優選地是狗、貓或馬。
該營養組合物優選地包含27-34％重量的賴氨酸、14-15％重量的脯氨酸、和42-47％重量的抗壞血酸。
該營養組合物優選地被口服給藥。所推薦的數量優選地為1,010mg-8克賴氨酸、560mg-4克脯氨酸、1,500mg-9克抗壞血酸、2μg-6mg銅、和0.5mg-10mg維生素B6。所推薦的數量更優選地為230mg-10克賴氨酸、120mg-5克脯氨酸、360mg-15克抗壞血酸、1.5μg-20mg銅、和0.2mg-20mg維生素B6。所推薦的數量最優選地為1,010mg賴氨酸、560mg脯氨酸、1,500mg抗壞血酸、330μg銅和10mg維生素B6。
該營養組合物的日劑量(以平均體重為72kg的人類個體為基礎)優選為3.2-139mg/kg賴氨酸、1.7-69.4mg/kg脯氨酸、5-208.3mg/kg抗壞血酸、0.02-278μg/kg銅、2.78-279μg/kg維生素B6。
該營養組合物的日劑量更優選地為14-111mg/kg賴氨酸、7.8-55.6mg/kg脯氨酸、20.8-125mg/kg抗壞血酸、0.03-83.3μg/kg銅、和6.94-139μg/kg維生素B6。
該營養組合物的日劑量最優選地為14mg/kg賴氨酸、7.8mg/kg脯氨酸、20.8mg/kg抗壞血酸、4.6μg/kg銅、139μg/kg維生素B6。
該營養組合物優選地進一步包含維生素A、維生素D3、維生素E、維生素B1、維生素B2、煙酸、葉酸、維生素B12、生物素、泛酸、鈣、磷、鎂、鋅、硒、錳、鉻、鉬、鉀、柑橘屬水果果皮生物類黃酮、精氨酸、半胱氨酸、肌醇、肉毒堿、輔酶Q10、和pycnogenol。
所推薦的數量優選地為67μg-100mg維生素A、0.7μg-50μg維生素D3、0.7μg-50μg維生素E、1.4mg-8mg維生素B1、1.4mg-8mg維生素B2、9mg-250mg煙酸、18μg-500μg葉酸、4μg-100μg維生素B12、13μg-400μg生物素、8mg-100mg泛酸、7mg-40mg鈣、3mg-300mg磷、40mg-200mg鎂、0.5mg-10mg鋅、20μg-300μg硒、0.8mg-15mg錳、2μg-200μg鉻、0.8μg-100μg鉬、4mg-300mg鉀、20mg-500mg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、10mg-500mg精氨酸、10mg-400mg半胱氨酸、5mg-400mg肌醇、5mg-400mg肉毒堿、1.6mg-70mg輔酶Q10、和1.6mg-70mg pycnogenol。
所推薦的數量更優選地為166μg-50mg維生素A、1.65μg-20μg維生素D3、1.65μg-20μg維生素E、3.5mg-7mg維生素B1、3.5mg-7mg維生素B2、22.5mg-100mg煙酸、45μg-300μg葉酸、10μg-50μg維生素B12、32μg-300μg生物素、20mg-60mg泛酸、17mg-35mg鈣、7mg-100mg磷、50mg-100mg鎂、3mg-8mg鋅、30μg-250μg硒、1mg-3.25mg錳、2μg-75μg鉻、2μg-75μg鉬、8mg-200mg鉀、50mg-250mg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、100mg-300mg精氨酸、80mg-200mg半胱氨酸、80mg-200mg肌醇、80mmg-200mg肉毒堿、3mg-35mg輔酶Q10、和3mg-35mgpycnogenol。
所推薦的數量最優選地為333μg維生素A、3.3μg維生素D3、3.3μg維生素E、7mg維生素B1、7mg維生素B2、45mg煙酸、90μg葉酸、20μg維生素B12、65μg生物素、40mg泛酸、35mg鈣、15mg磷、40mg鎂、7mg鋅、20μg硒、1.3mg錳、10μg鉻、4μg鉬、20mg鉀、100mg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、40mg精氨酸、35mg半胱氨酸、35mg肌醇、35mg肉毒堿、7mg輔酶Q10、和7mgpycnogenol。
該營養組合物優選地包含(以平均體重為72kg的人類個體為基礎)0.9-1,390μg/kg維生素A、0.01-0.694μg/kg維生素D3、0.01-0.694μg/kg維生素E、19.4-111μg/kg維生素B1、19.4-111μg/kg維生素B2、125-3,472μg/kg煙酸、0.25-6.94μg/kg葉酸、0.05-1.39μg/kg維生素B12、0.181-5.56μg/kg生物素、111-1,390μg/kg泛酸、97.2-555μg/kg鈣、42-4,167μg/kg磷、555-2,778μg/kg鎂、6.9-139μg/kg鋅、0.28-4.17μg/kg硒、11.1-208.3μg/kg錳、0.03-2.78μg/kg鉻、0.01-1.39μg/kg鉬、55.6-4,167μg/kg鉀、278-6.944μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、139-6,944μg/kg精氨酸、135-5,555μg/kg半胱氨酸、69-5,555μg/kg肌醇、69-5,555μg/kg肉毒堿、22.2-972μg/kg輔酶Q10、和22.2-972μg/kg pycnogenol的日劑量。
該營養組合物更優選地包含(以平均體重為72kg的人類個體為基礎)2.31-694μg/kg維生素A、0.023-0.278μg/kg維生素D3、0.023-0.278μg/kg維生素E、48.6-97.2μg/kg維生素B1、48.6-97.2μg/kg維生素B2、312.5-3,190μg/kg煙酸、0.6-4.17μg/kg葉酸、0.14-0.69μg/kg維生素B12、0.444-4.17μg/kg生物素、278-833μg/kg泛酸、236-903μg/kg鈣、97.2-1,390μg/kg磷、694-1,390μg/kg鎂、41.7-111μg/kg鋅、0.42-3.47μg/kg硒、13.9-45.1μg/kg錳、0.07-2.78μg/kg鉻、0.03-1.04μg/kg鉬、111.1-2,778μg/kg鉀、694-3,472μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、1,389-4,167μg/kg精氨酸、1,111-2,778μg/kg半胱氨酸、1,111-2,778μg/kg肌醇、1,111-2,778μg/kg肉毒堿、41.7-486μg/kg輔酶Q10、和41.7-486μg/kg pycnogenol的日劑量。
該營養組合物最優選地包含(以平均體重為72kg的人類個體為基礎)4.6μg/kg維生素A、0.046μg/kg維生素D3、0.046μg/kg維生素E、97.2μg/kg維生素B1、97.2μg/kg維生素B2、625μg/kg煙酸、1.25μg/kg葉酸、0.27μg/kg維生素B12、0.9μg/kg生物素、555μg/kg泛酸、486μg/kg鈣、208μg/kg磷、555μg/kg鎂、97.2μg/kg鋅、0.78μg/kg硒、18.1·μg/kg錳、0.14μg/kg鉻、0.06μg/kg鉬、277.8μg/kg鉀、1,389μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、555μg/kg精氨酸、486μg/kg半胱氨酸、486μg/kg肌醇、486μg/kg肉毒堿、97.2μg/kg輔酶Q10、和97.2μg/kgpycnogenol的日劑量。0.01-0.694μg/kg維生素D3、18.1μg/kg錳、555μg/kg精氨酸、486μg/kg半胱氨酸、4.6μg/kg維生素A、0.046μg/kg維生素E、97.2μg/kg維生素B1、97.2μg/kg維生素B2、0.27μg/kg維生素B12、625μg/kg煙酸、1.25μg/kg葉酸、0.9μg/kg生物素、555μg/kg泛酸、486μg/kg鈣、208μg/kg磷、555μg/kg鎂、97.2μg/kg鋅、0.78μg/kg硒、0.14μg/kg鉻、0.06μg/kg鉬、277.8μg/kg鉀、1,389μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、486μg/kg肌醇、486μg/kg肉毒堿、97.2μg/kg輔酶Q10、和97.2μg/kg pycnogenol。
本發明提供了一種促進哺乳動物骨愈合的方法，其包括給需要其的哺乳動物使用有效量包含賴氨酸、脯氨酸、抗壞血酸、銅、和維生素B6的營養組合物的步驟。
本發明還提供了一種促進哺乳動物骨愈合的方法，其包括給需要其的哺乳動物使用有效量進一步包含維生素A、維生素D3、維生素E、維生素B1、維生素B2、煙酸、葉酸、維生素B12、生物素、泛酸、鈣、磷、鎂、鋅、硒、錳、鉻、鉬、鉀、柑橘屬水果果皮生物類黃酮、精氨酸、半胱氨酸、肌醇、肉毒堿、輔酶Q10、和pycnogenol的營養組合物的步驟。
所說的哺乳動物優選地是人。
所說的營養組合物優選地可有效降低骨折的愈合時間。所說的愈合時間優選地被降低＞約5％。所說的愈合時間更優選地被降低＞約15％。所說的愈合時間最優選地被降低＞約50％。
該營養組合物優選地對于所有年齡的人都有效。該營養組合物優選地適用于促進年齡為40-41和41-50歲的成人的骨愈合。該營養組合物分別使其愈合時間降低了37％和40％。該營養組合物更優選地對10-20歲的人(即，青少年)有效，其使得其愈合時間降低了49％。
該營養組合物優選地被口服、靜脈內、或胃腸外給藥。
這里所用的術語“骨愈合”指的是骨折的愈合。骨愈合還應該包括骨修復過程并且將不限于意外骨折的愈合。骨愈合還涉及骨的手術干預如骨置換(例如髖關節和膝關節置換)和骨移植(例如牙移植)。當骨愈合時，恢復了骨折部位的正常移動性，并且在壓迫該骨折部位時或者在行走時不會引起疼痛并且骨折部位可以被有效全面恢復并且受影響肢干可以無痛地進行運動。
術語“愈合時間”指的是從當發生骨折時開始直至骨折愈合所花費的時間。就在這里所公開的研究中進行的實驗而言，進行測量的愈合時間是從被骨折的骨減少的時間至骨愈合所花費的時間。“減少”指的是骨折點處骨折骨(例如脛骨)頂端的位置對齊至使得可以將骨折骨的頂端融合到一起的過程。“青少年”是年齡為約10至約20歲的人。“有效量”指的是可有效降低骨折愈合時間的本發明營養組合物的數量。“可藥用的”指的是可以與所說制劑的其它成分相容并且對其領受者無害的載體、稀釋劑、和賦形劑。“％重量”指的是為所說營養組合物的總重量的％形式的特定組分的％，例如，27％重量的賴氨酸指的是其中該營養組合物總重量的27％是賴氨酸的營養組合物。
本發明的營養組合物適用于哺乳動物。所說的哺乳動物優選地是人。不同年齡組的人可能表現出不同的骨愈合速度。例如，年紀較大的人較易于發生骨折(由于骨質疏松癥的脫鈣作用)并且同樣其愈合時間更長。發現本發明的營養組合物可有效促進大多數人的愈合；并且并不特定限于特定的年齡組本發明提供了一種用于促進人，特別是青少年人的骨愈合的營養組合物，其包括給需要其的人使用有效量包含賴氨酸、脯氨酸、抗壞血酸、銅、和維生素B6的營養組合物的步驟。該營養組合物優選地包含27-34％重量的賴氨酸、42-47％重量的抗壞血酸和14-15％重量的脯氨酸。
本發明的營養組合物還包含賴氨酸和脯氨酸。賴氨酸和脯氨酸是骨中膠原和蛋白的組分。賴氨酸和脯氨酸可能有助于堿性磷酸酶、一氧化氮、胰島素樣生長因子-I、和I型膠原的成骨細胞增生并且可能對于適宜的骨形成而言是必需的。
賴氨酸可包括賴氨酸鹽如羥基賴氨酸和羥基賴氨酸鹽。推薦3.2-139mg/kg賴氨酸的日劑量。優選地使用14至111mg/kg的賴氨酸；并且更優選地使用14mg/kg的賴氨酸。對于平均體重為72kg的個體而言，所推薦的賴氨酸的日劑量為230mg至10克；優選地為1,010mg至8克；并且更優選地為1,010mg。
脯氨酸是一種非必需氨基酸。但是，其在某些條件下在人體內的合成可能會受到限制。已經報道了骨折應激降低了老人血漿中非必需氨基酸的水平。在該類情況中，因為這種氨基酸在膠原中的存在比例很高，所以如果發生的話，脯氨酸(一種半必需氨基酸)不足將對骨折的愈合產生不利影響。
脯氨酸可包括脯氨酸鹽如羥基脯氨酸和羥基脯氨酸鹽。推薦1.7-69.4mg/kg脯氨酸的日劑量。優選地使用7.8至56mg/kg；并且更優選地使用7.8mg/kg的日劑量。對于平均體重為72kg的個體而言，所推薦的脯氨酸日劑量為120mg至5克；優選地為560mg至4克；并且更優選地為560mg。
本發明的營養組合物包含抗壞血酸。抗壞血酸可促進成骨細胞表型的進化發展并且可促進骨愈合，因此其對于成骨細胞和成軟骨細胞的分化和增殖而言也是必需的。
抗壞血酸和維生素C可以互換使用。術語抗壞血酸包括抗壞血酸以及其鹽。本發明所用的抗壞血酸優選地是抗壞血酸鈣、抗壞血酸鎂或抗壞血酸棕櫚酸鹽。推薦5-208mg/kg抗壞血酸的日劑量。優選地使用20.8-125mg/kg；并且更優選地使用20.8mg/kg的日劑量。對于平均重量為72kg的個體而言，所推薦的抗壞血酸日劑量為360mg至15克；優選地為1,500mg至9克；并且更優選地為1,500mg。
本發明還提供了一種還進一步包含礦物和/或微量元素的營養組合物。微量元素可幫助催化這些結締組織結構和功能所需大分子的產生。本發明優選的微量元素有鐵、碘、銅、鋅、錳、鈷、鉬、硒、鉻、鎳、錫、氟或釩。
作為賴氨酰氧化酶輔因子的銅是膠原中分子內和分子間交聯所必需的。已經表明缺乏銅會損害骨的機械強度。已經推測相對高數量的抗壞血酸、維生素B6、L-賴氨酸和L-脯氨酸與銅一起使用時將對骨膠原健康和功能具有顯著影響，從而在補充組和安慰劑組骨折骨的愈合時間之間產生了顯著差異。
銅化合物可包括甘氨酸銅。推薦0.02至278μg/kg銅的日劑量。優選使用0.03至83μg/kg；更優選使用4.6μg/kg的日劑量。對于平均重量為72kg的個體而言，所推薦的日劑量為1.5μg至20mg；優選地為2μg至6mg；并且更優選地為330μg。
維生素B6在骨愈合中是很重要的，這是因為其可作為提供降低礦化作用必需的等同物的手段。維生素B6不足顯著降低了perisoteal骨形成和骨痂形成中葡萄糖6-磷酸酯脫氫酶的活性。其還造成了成骨細胞和破骨細胞失調的骨暗示(bone suggestive)中的改變。
維生素B6化合物可包括吡多素(pryridosine)HCl。推薦2.8至279μg/kg維生素B6的日劑量。優選使用7至139μg/kg維生素B6；并且更優選使用139μg/kg的日劑量。對于平均重量為72kg的個體而言，所推薦的維生素B6日劑量為0.2至20mg；更優選地為0.5至10mg；并且更優選地為10mg。
本發明營養組合物的某些成分以很高的數量存在。特定地，賴氨酸的存在量為27-34％重量(優選地為28-33％重量)；脯氨酸的存在量為14-16％重量(優選地為15-16％重量)；并且抗壞血酸的存在量為42-47％重量(優選地為43-46％重量)。
本發明出乎意料地發現這里所指定的營養組合物可有效地促進人，特別是青少年骨折的骨愈合(即降低了愈合時間)。給予本發明的營養組合物不僅有利地有效促進了骨愈合，而且還改善了其總體幸福感，并且在成本上很經濟。
所推薦的日劑量包括3.2-139mg/kg賴氨酸、1.37-69mg/kg脯氨酸、5-208mg/kg抗壞血酸、2.78-279μg/kg維生素B6、和0.02-278μg/kg銅。所推薦的日口服劑量優選地為14-111mg/kg賴氨酸、7.8-56mg/kg脯氨酸、20.8-125mg/kg抗壞血酸、6.9-139μg/kg維生素B6、和0.03-83μg/kg銅。所推薦的日口服劑量更優選地為14mg/kg賴氨酸、7.8mg/kg脯氨酸、20.8mg/kg抗壞血酸、139μg/kg維生素B6、4.6μg/kg銅。每天優選地使用3片所說營養組合物的片劑(即，早晨服用一片、下午服用一片和晚上服用一片)。
對于正常的骨代謝而言，需要一些其它飲食組分，如蛋白、鈣、鎂、鋅、銅、鐵、氟化物、和維生素D、A和K。所有這些營養物都會影響骨折愈合，只是一些物質的影響比其它一些更直接。表明骨折損傷造成了肝中銅、錳、和鋅水平的降低，這表明骨折后這些礦物質的需要增加。
本發明的營養組合物可進一步包含維生素D3、錳、精氨酸、半胱氨酸、維生素A、E、B1、B2、B12、煙酸、葉酸、生物素、泛酸、鈣、磷、鎂、鋅、硒、鉻、鉬、鉀、柑橘屬水果果皮生物類黃酮、肌醇、肉毒堿、輔酶Q10、和pycnogenol。
促進骨愈合(即降低愈合時間)所需的本發明營養組合物的特定劑量將取決于該醫學情況的嚴重程度、給藥途徑和被治療的特定個體。可以通過各種途徑將本發明的營養組合物進行給藥，所說的各種途徑包括口服、靜脈內、或胃腸外給藥。所說的營養組合物優選地為單位劑型，例如片劑或膠囊形式。因此，推薦以口服片劑的形式將本發明的營養組合物進行給藥。
所推薦的日劑量(以平均體重為72kg的人類個體為基礎)可進一步包含0.9-1,390μg/kg維生素A、0.01-0.694μg/kg維生素D3、0.01-0.694μg/kg維生素E、19.4-111μg/kg維生素B1、19.4-111μg/kg維生素B2、125-3,472μg/kg煙酸、0.25-6.94μg/kg葉酸、0.05-1.39μg/kg維生素B12、0.181-5.56μg/kg生物素、111-1,390μg/kg泛酸、97.2-555μg/kg鈣、42-4,167μg/kg磷、555-2,778μg/kg鎂、6.9-139μg/kg鋅、0.28-4.17μg/kg硒、11.1-208.3μg/kg錳、0.03-2.78μg/kg鉻、0.01-1.39μg/kg鉬、55.6-4,167μg/kg鉀、278-6.944μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、139-6,944μg/kg精氨酸、135-5,555μg/kg半胱氨酸、69-5,555μg/kg肌醇、69-5,555μg/kg肉毒堿、22.2-972μg/kg輔酶Q10、和22.2-972μg/kg pycnogenol。
所推薦的日劑量(以平均體重為72kg的人類個體為基礎)優選地可進一步包含2.31-694μg/kg維生素A、0.023-0.278μg/kg維生素D3、0.023-0.278μg/kg維生素E、48.6-97.2μg/kg維生素B1、48.6-97.2μg/kg維生素B2、312.5-3,190μg/kg煙酸、0.6-4.17μg/kg葉酸、0.14-0.69μg/kg維生素B12、0.444-4.17μg/kg生物素、278-833μg/kg泛酸、236-903μg/kg鈣、97.2-1,390μg/kg磷、694-1,390μg/kg鎂、41.7-111μg/kg鋅、0.42-3.47μg/kg硒、13.9-45.1μg/kg錳、0.07-2.78μg/kg鉻、0.03-1.04μg/kg鉬、111.1-2,778μg/kg鉀、694-3,472μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、1,389-4,167μg/kg精氨酸、1,111-2,778μg/kg半胱氨酸、1,111-2,778μg/kg肌醇、1,111-2,778μg/kg肉毒堿、41.7-486μg/kg輔酶Q10、和41.7-486μg/kg pycnogenol。
該營養組合物最優選地可進一步包括(以平均體重為72kg的人類個體為基礎)4.6μg/kg維生素A、0.046μg/kg維生素D3、0.046μg/kg維生素E、97.2μg/kg維生素B1、97.2μg/kg維生素B2、625μg/kg煙酸、1.25μg/kg葉酸、0.27μg/kg維生素B12、0.9μg/kg生物素、555μg/kg泛酸、486μg/kg鈣、208μg/kg磷、555μg/kg鎂、97.2μg/kg鋅、0.78μg/kg硒、18.1μg/kg錳、0.14μg/kg鉻、0.06μg/kg鉬、277.8μg/kg鉀、1,389μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、555μg/kg精氨酸、486μg/kg半胱氨酸、486μg/kg肌醇、486μg/kg肉毒堿、97.2μg/kg輔酶Q10、和97.2μg/kg pycnogenol的日劑量。0.01-0.694μg/kg維生素D3、18.1μg/kg錳、555μg/kg精氨酸、486μg/kg半胱氨酸、4.6μg/kg維生素A、0.046μg/kg維生素E、97.2μg/kg維生素B1、97.2μg/kg維生素B2、0.27μg/kg維生素B12、625μg/kg煙酸、1.25μg/kg葉酸、0.9μg/kg生物素、555μg/kg泛酸、486μg/kg鈣、208μg/kg磷、555μg/kg鎂、97.2μg/kg鋅、0.78μg/kg硒、0.14μg/kg鉻、0.06μg/kg鉬、277.8μg/kg鉀、1,389μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、486μg/kg肌醇、486μg/kg肉毒堿、97.2μg/kg輔酶Q10、和97.2μg/kg pycnogenol。
本發明的營養組合物可包括可藥用的載體、稀釋劑、或賦形劑。本發明的營養組合物可以用現有技術中已知的方法來進行制備。可以用常用的賦形劑、稀釋劑、或載體來對各成分進行配制，并將其成形為片劑、膠囊、混懸液、粉末等等。賦形劑、稀釋劑、和載體的實例包括i)填充劑和膨脹劑如淀粉、糖類、甘露醇、和硅衍生物；ii)粘合劑如羧甲基纖維素和其它纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠、和聚乙烯吡咯烷酮；iii)保濕劑如甘油；崩解劑如碳酸鈣和碳酸氫鈉；用于延遲溶出的物質如石蠟；iv)再吸收加速劑如季銨化合物；v)表面活性劑如乙酰醇、和甘油單硬脂酸酯；v)吸附劑載體如高嶺土和皂土；和vi)潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鈣和硬脂酸鎂、和固體聚乙二醇(polyethyl glycols)。
該營養組合物還可以被制備成可方便地進行口服給藥的酏劑或溶液形式或者適于胃腸外給藥，例如通過肌內、皮下或靜脈內途徑進行給藥的溶液形式。該制劑理想地為丸劑、片劑、膠囊、錠劑、液體或相似的劑型。該營養組合物可能十分適于為例如緩釋劑型等等制劑形式。
片劑制劑將表1所列的成分制成片劑。這些片劑包含關鍵組分賴氨酸(1,010mg)、脯氨酸(560mg)、抗壞血酸(1,500mg)、銅(330g)和維生素B6(10mg)。
這些片劑還包含另外的組分，包括維生素D3、錳、精氨酸、半胱氨酸、維生素A、E、B1、B2、B12、煙酸、葉酸、生物素、泛酸、鈣、磷、鎂、鋅、硒、鉻、鉬、鉀、柑橘屬水果果皮生物類黃酮、肌醇、肉毒堿、輔酶Q10、和pycnogenol。
表1-分送規模(Serving Size)-三片/天
*體重指的是平均體重為72kg的人類個體臨床研究患者選擇進行一種隨機雙盲安慰劑對照的研究。該臨床研究是根據Declaration of Helsinki，其修正和AMG來進行的。患者加入的包含標準為(i)脛骨體的單側移置性閉合性或I級開放性骨折；和(ii)年齡大于10歲。患者進入的排除標準為(i)患有其它主要損傷的患者，(ii)患有心肺、風濕性(rheumatological)、神經病學或新陳代謝疾病的患者，(iii)患有影響其一般功能的先前的損傷的患者，(iv)在離脛骨粗隆遠側5cm內或者踝關節近側5cm內出現骨折的患者。
被允許加入的患者接受標準護理和安慰劑或者補加了使用包含賴氨酸、脯氨酸、抗壞血酸、銅和維生素B6的營養補充物的標準護理。在進入所說的研究時，對取得資格的患者進行臨床檢查并且對其受影響的肢干照X光照片，在麻醉下將骨折復位并在膝蓋上方應用石膏模型。
努力確保兩組中的年齡分布和骨折類型具有相等的分布。這些患者從2001年2月開始進入該研究至2002年12月。一共對113名患有單側移置性閉合性或I級開放性脛骨骨折的患者進行了研究。被允許參與該研究的患者都給出了表示同意的信息。參與者知道由該研究獲得的數據將被公開。在這些患者中，54名患者被分配到補充組，59名患者被指定到安慰劑組。表2概括了一共131名患者的年齡分布。
表2-年齡組的患者分布
*圓括號中的值表示全體患者中特定年齡組的百分比臨床方案在麻醉下對所有的骨折進行復位(閉合復位術)并在膝蓋上方應用石膏模型。在復位前和復位后通常對骨折的肢干拍射線照片。將表1所列的營養組合物提供給補充組的患者，給安慰劑組的患者提供包含安慰劑片劑的小瓶。對表1所列的營養組合物進行研究以評價建議所需的補充物是否能確保有足夠可以影響骨折愈合的營養物。安慰片包含無醫學作用的物質如纖維素、果糖等等，但其在外觀上與營養物片劑沒有區別。要求所有的患者都每天三次(早晨、下午和晚上)每次服用一片片劑。
取尿樣以對患者的基準抗壞血酸水平進行評估。取血樣以對其基準鈣水平進行評估(圖3)。然后，患者出院并要求其每四周回來檢查一次直至主治的矯形外科醫師認為骨折已經痊愈。在每次跟蹤檢查時，對脛骨骨折拍射線照片，并對患者進行臨床檢查并對其尿維生素C水平和血鈣水平進行分析。進行放射學檢查以證實骨折部分仍然位于被復位的位置和骨痂形成正在令人滿意地進行。用分光光度法對尿的抗壞血酸含量進行檢查并用商品化試劑盒來對血鈣水平進行測定。將愈合定義為臨床上在骨折部位不存在異常活動并且在壓迫該骨折或行走時不會引起疼痛。用放射照相證實的骨痂形成來作為支持愈合的證據。(對于放射性照相術的實例而言見
圖1和2)。認為在沒有任何手術干預的情況下20周以上的愈合期是愈合延遲。
統計分析將該結果表示為組的均值±標準誤差。對各組間的骨折愈合時間進行Wilcoxon檢驗。在P＜0.05下有統計學顯著意義。
結果對29名補充組的患者和42名安慰組的患者常規追蹤至認為骨折痊愈。
總的來說，補充組患者的尿抗壞血酸含量高于安慰組(圖3)。在這些檢查隨訪的任何一次中，在8名補充組患者中探測到尿抗壞血酸水平低(低于5mg/100ml尿)和在6名安慰組患者中探測到了高抗壞血酸值(高于5mg/100ml尿)。在進行評估時將這些患者排除在外。因此，在該研究結束時，在補充組中僅剩下21名患者，和在安慰組中僅剩下36名患者。該研究中所有參與者的血鈣水平都在正常的范圍內。
在表2中對患者的年齡分布進行了詳細描述。補充組患者的年齡范圍為15至65歲，平均為35歲。安慰組患者的年齡范圍為12至75歲，平均為32歲。
在表4中對患者的愈合時間進行了詳細描述。補充組患者的平均愈合時間為14.0±1.1周。安慰組患者的平均愈合時間為16.9±1.2周。這些數據表明補充組的總平均愈合時間比安慰組(即17.2周)短大約三周。這種差異在t＝1.07，p＝0.288下達到了統計學顯著水平。
該數據的百分位數分類表明，在補充組中，百分位數75th患者的骨折在17周內愈合，而安慰組中百分位數為75th的患者在19周內愈合(表3)。
表3-補充對骨折愈合時間的影響
補充組中33％的患者較早(10周或更低)經歷了骨折愈合，其與安慰組的11.1％有差異(Chi-square分析＝2.853，p＝0.091)。愈合延遲的患者的百分比在補充組中為9.5％和在安慰組中為19.4％(表4)。
表4-患者骨折愈合時間分布(％)
在表6表明了不同年齡患者骨折的愈合時間。在年齡為10-20歲的患者中，愈合時間從17.6周降低至9周(降低了49％)。在年齡為31-40歲的患者中，愈合時間從17.1周降低至10.7周(降低了37％)。在年齡為41-50歲的患者中，愈合時間從21.2周降低至12.7周(降低了40％)。在年齡＞50歲的患者中，愈合時間從16周降低至15.7周(降低了1.8％)。總的來說，除21-30歲的年齡組外，補充組的愈合時間降低。(表5)。
表5-各年齡組的愈合時間(以“周”為單位)
該數據表明給骨折患者以所指定的數量的本發明的營養組合物可有效將75％患者的愈合時間降低至少兩周。補充組的患者還報道了在研究其間的總幸福感增強。在青少年組(即10至20歲)中可以觀察到最強的作用，其愈合時間降低了49％。41-50歲的患者和31-40歲的患者的愈合時間也顯著降低(即，分別降低了40％和37％)。相信如果對該營養補充物的劑量進行優化，則其它年齡組的患者同樣可以獲得相同的益處。
補充組與安慰組患者的血鈣水平間沒有顯著差異。發現所有患者的血鈣水平都在正常范圍內。
認為愈合時間的降低是由于補充了包含賴氨酸、脯氨酸、抗壞血酸、銅和維生素B6的關鍵成分以及本研究所用的另外的組分。本發明的數據提供了對患有骨折的患者補加營養補充物可促進愈合(即，降低了愈合時間)的證據。給骨折患者使用本發明的營養組合物將對早期的功能恢復具有積極影響、可改善幸福感、降低醫療費用、和降低商業費用。
應當清楚的是，并不是要將本發明限制到所公開的優選實施方案上，本發明覆蓋落入本發明主旨和范圍內的所有變型和改變解釋。這里所提及的所有公開物和其它參考資料都被全部引入作為參考。
附圖表示圖1描述了就在復位前的脛骨體骨折的射線照片。
圖2描述了在12周時在愈合時脛骨體骨折的射線照片。
圖3描述了補充(第1-29名患者)和安慰(第30-70名患者)組的抗壞血酸水平(尿分析)。
圖4描述了患者脛骨骨折愈合時間的分布(百分比)。
權利要求
1.一種適于促進哺乳動物骨折愈合的營養組合物，其包含賴氨酸、脯氨酸、抗壞血酸、銅、和維生素B6。
2.如權利要求1所述的營養組合物，其中所說的營養組合物包含27-34％重量的賴氨酸、14-15％重量的脯氨酸、和42-47％重量的抗壞血酸。
3.如權利要求1所述的營養組合物，其中所說的營養組合物提供了a)230mg-10克賴氨酸、120mg-5克脯氨酸、360mg-15克抗壞血酸、1.5μg-20mg銅、和0.2mg-20mg維生素B6；b)1,010mg-8克賴氨酸、560mg-4克脯氨酸、1,500mg-9克抗壞血酸、2μg-6mg銅、和0.5mg-10mg維生素B6；或c)1,010mg賴氨酸、560mg脯氨酸、1,500mg抗壞血酸、330μg銅和10mg維生素B6的日劑量。
4.如權利要求1所述的營養組合物，其中所說的組合物提供了a)3.2-139mg/kg賴氨酸、1.7-69.4mg/kg脯氨酸、5-208.3mg/kg抗壞血酸、0.02-278μg/kg銅、2.78-279μg/kg維生素B6；b)14-111mg/kg賴氨酸、7.8-55.6mg/kg脯氨酸、20.8-125mg/kg抗壞血酸、0.03-83.3μg/kg銅、和6.94-139μg/kg維生素B6；或c)14mg/kg賴氨酸、7.8mg/kg脯氨酸、20.8mg/kg抗壞血酸、4.6μg/kg銅、139μg/kg維生素B6的每單位體重日劑量。
5.如權利要求1至4中任意一項所述的營養組合物，其中所說的營養組合物還進一步包含維生素A、維生素D3、維生素E、維生素B1、維生素B2、煙酸、葉酸、維生素B12、生物素、泛酸、鈣、磷、鎂、鋅、硒、錳、鉻、鉬、鉀、柑橘屬水果果皮生物類黃酮、精氨酸、半胱氨酸、肌醇、肉毒堿、輔酶Q10、和pycnogenol。
6.如權利要求5所述的營養組合物，其中所說的營養組合物提供了a)67μg-100mg維生素A、0.7μg-50μg維生素D3、0.7g-50μg維生素E、1.4mg-8mg維生素B1、1.4mg-8mg維生素B2、9mg-250mg煙酸、18μg-500μg葉酸、4μg-100μg維生素B12、13μg-400μg生物素、8mg-100mg泛酸、7mg-40mg鈣、3mg-300mg磷、40mg-200mg鎂、0.5mg-10mg鋅、20μg-300μg硒、0.8mg-15mg錳、2μg-200μg鉻、0.8μg-100μg鉬、4mg-300mg鉀、20mg-500mg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、10mg-500mg精氨酸、10mg-400mg半胱氨酸、5mg-400mg肌醇、5mg-400mg肉毒堿、1.6mg-70mg輔酶Q10、和1.6mg-70mg pycnogenol；b)166μg-50mg維生素A、1.65μg-20μg維生素D3、1.65μg-20μg維生素E、3.5mg-7mg維生素B1、3.5mg-7mg維生素B2、22.5mg-100mg煙酸、45μg-300μg葉酸、10μg-50μg維生素B12、32μg-300μg生物素、20mg-60mg泛酸、17mg-35mg鈣、7mg-100mg磷、50mg-100mg鎂、3mg-8mg鋅、30μg-250μg硒、1mg-3.25mg錳、2μg-75μg鉻、2μg-75μg鉬、8mg-200mg鉀、50mg-250mg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、100mg-300mg精氨酸、80mg-200mg半胱氨酸、80mg-200mg肌醇、80mg-200mg肉毒堿、3mg-35mg輔酶Q10、和3mg-35mg pycnogenol；或c)333μg維生素A、3.3μg維生素D3、3.3μg維生素E、7mg維生素B1、7mg維生素B2、45mg煙酸、90μg葉酸、20μg維生素B12、65μg生物素、40mg泛酸、35mg鈣、15mg磷、40mg鎂、7mg鋅、20μg硒、1.3mg錳、10μg鉻、4μg鉬、20mg鉀、100mg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、40mg精氨酸、35mg半胱氨酸、35mg肌醇、35mg肉毒堿、7mg輔酶Q10、和7mg pycnogenol的日劑量。
7.如權利要求5所述的營養組合物，其中所說的組合物還進一步包含a) 0.9-1,390μg/kg維生素A、0.01-0.694μg/kg維生素D3、0.01-0.694μg/kg維生素E、19.4-111μg/kg維生素B1、19.4-111μg/kg維生素B2、125-3,472μg/kg煙酸、0.25-6.94μg/kg葉酸、0.05-1.39μg/kg維生素B12、0.181-5.56μg/kg生物素、111-1,390μg/kg泛酸、97.2-555μg/kg鈣、42-4,167μg/kg磷、555-2,778μg/kg鎂、6.9-139μg/kg鋅、0.28-4.17μg/kg硒、11.1-208.3μg/kg錳、0.03-2.78μg/kg鉻、0.01-1.39μg/kg鉬、5 5.6-4,167μg/kg鉀、278-6.944μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、139-6,944μg/kg精氨酸、135-5,555μg/kg半胱氨酸、69-5,555μg/kg肌醇、69-5,555μg/kg肉毒堿、22.2-972μg/kg輔酶Q10、和22.2-972μg/kgpycnogenol；b)2.31-694μg/kg維生素A、0.023-0.278μg/kg維生素D3、0.023-0.278μg/kg維生素E、48.6-97.2μg/kg維生素B1、48.6-97.2μg/kg維生素B2、312.5-3,190μg/kg煙酸、0.6-4.17μg/kg葉酸、0.14-0.69μg/kg維生素B12、0.444-4.17μg/生物素、278-833μg/kg泛酸、236-903μg/kg鈣、97.2-1,390μg/kg磷、694-1,390μg/kg鎂、41.7-111μg/kg鋅、0.42-3.47μg/kg硒、13.9-45.1μg/kg錳、0.07-2.78μg/kg鉻、0.03-1.04μg/kg鉬、111.1-2,778μg/kg鉀、694-3,472μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、1,389-4,167μg/kg精氨酸、1,111-2,778μg/kg半胱氨酸、1,111-2,778μg/kg肌醇、1,111-2,778μg/kg肉毒堿、41.7-486μg/kg輔酶Q10、和41.7-486μg/kg pycnogenol；或c)4.6μg/kg維生素A、0.046μg/kg維生素D3、0.046μg/kg維生素E、97.2μg/kg維生素B1、97.2μg/kg維生素B2、625μg/kg煙酸、1.25μg/kg葉酸、0.27μg/kg維生素B12、0.9μg/kg生物素、555μg/kg泛酸、486μg/kg鈣、208μg/kg磷、555μg/kg鎂、97.2μg/kg鋅、0.78μg/kg硒、18.1μg/kg錳、0.14μg/kg鉻、0.06μg/kg鉬、277.8μg/kg鉀、1,389μg/kg柑橘屬水果果皮生物類黃酮、555μg/kg精氨酸、486μg/kg半胱氨酸、486μg/kg肌醇、486μg/kg肉毒堿、97.2μg/kg輔酶Q10、和97.2μg/kgpycnogenol的每單位體重的日劑量。
8.如權利要求1至7中任意一項所述的營養組合物，其中所說的哺乳動物是人。
9.一種包含如權利要求1至8中任意一項所述的營養組合物的藥物組合物。
10.如權利要求1至8中任意一項所述的營養組合物用于制備促進哺乳動物骨愈合的藥物組合物的用途。
11.如權利要求10所述的用途，其中所說的哺乳動物是人。
12.如權利要求10或11所述的用途，其中所說的組合物被口服、靜脈內或胃腸外給藥。
全文摘要
本發明提供了一種可以有效促進人的骨愈合的營養組合物，其包含賴氨酸、脯氨酸、抗壞血酸、銅、維生素B
文檔編號A23L1/304GK1845683SQ200480025244
公開日2006年10月11日 申請日期2004年6月24日 優先權日2003年9月5日
發明者馬賽厄斯·拉思, 什里朗·內特克, 瓦希德·M·魯米, 瓦迪姆·伊瓦諾夫, 亞里山德拉·涅季維茨基 申請人:馬賽厄斯·拉思