專利名稱：微生物強化采油菌種篩選方法及培養條件的制作方法
技術領域：
本發明屬于微生物采油方法技術領域，具體涉及一種微生物強化采油菌種篩選方法及培 養條件技術領域。
背景技術：
微生物采油是利用微生物自身的有益活動如降解原油和/或代謝產物如生物表面活性 劑、有機酸、醇等來提高原油采收率的釆油技術。目前，石油開采常規工藝技術采出的油量只占原始地質儲量的1/ 3 1/ 2 ，而應用微生物 提高石油采收率的技術(MEOR)是一項具有良好發展前景的3次強化采油技術.用于微生物 采油的菌種，必須適應油層的地層條件，所以，不同條件油層必須采用不同特性的菌種,這是由 ME0R的作用機制所決定的.我國現今尚有許多廢棄或枯竭井，等待應用微生物強化3次采油 技術的再開發.本發明選擇了青海石油管理局海西州花土溝華巖山油田油井,歷時2年，進行 了微生物采油菌種的篩選及培養條件的研究，為在相似條件下油田的開發提供了菌株。發明內容本發明的目的是提供一種微生物強化采油菌種篩選方法，利用改種生物菌種可以提高原油產率。本發明的另外一個目的是提供上述這種采油用菌種的培養條件。 為實現上述目的，本發明采取的技術方案是-一種微生物強化采油菌種篩選方法，其步驟依次是分離樣品、富集、初篩、復篩，最 后得到優良菌株。其中初篩的具體方法是分離樣品經富集15 d后,涂布在用培養基I制成的油皿上，于37 t:(油井地層溫度37 40 。C)培養7 d ,挑取在平板上生長并使平板上的原油更清澈的單菌落, 再涂布到用培養基II制成的蠟皿上,37 t:培養i周，挑取產生分解圈的單菌落于斜面上培養， 得到7株菌,供復篩用。其中復篩的具體方法是根據油田油井具體清蠟增產的要求,將初篩選出的7株菌處理華 巖山油田原油，測定處理前后原油的粘度及凝固點變化。所用的培養基為蛋白胨0.5 lg、牛肉膏0.5g、硫酸銨lg、石蠟ig、原油10ml、磷
酸氫二鉀O. 025 0. 3g、氯化鈉5g、微量元素液100ml、瓊脂l. 3g、糠漿2ml，其余為水。上述的微量元素液是按地層水離子濃度及總礦化度配制的微量元素液。 上述菌種的培養條件是PH值7.0 7.5、溫度范圍25 45 °C、鹽濃度7 10%。 綜上所述，通過初篩、復篩試驗,篩選到4株菌，能在以原油、石蠟作碳源的環境中生長。 依據華巖山油井深度、礦化度及所要求溫度，4株菌與油田環境具有良好的適應性。因此，本 實驗結果為采油工藝及現場應用施工提供了有益的借鑒。為了發揮油田微生物的協同作用， 應更多的使用混合菌株。
具體實施方式
下面結合具體實施方式
對本發明作進一步的說明 實驗方法分離篩選流程分離樣品一富集一初篩一復篩一優良菌株菌種培養斜面菌種一活化一接種到裝有Oll L液體培養基的0125 L三角瓶中，于37 。C 靜置培養20 h ，供分析測定用。分析測定用HAAKE粘度計(旋轉粘度計RV 100 ，測量系統為CV 100),測定原油粘度變 化.用BY21凝固點測定原油凝固點變化.用722型分光光度計于波長6(X) nm處測菌濃度。菌株的分離篩選初篩分離樣品經富集15 d后,涂布在用培養基I制成的油皿上,于37 °C (油井地層溫度 37~40 。C)培養7 d ,挑取在平板上生長并使平板上的原油更清澈的單菌落，再涂布到用培養 基II制成的蠟皿上,37 'C培養1周,挑取產生分解圈的單菌落于斜面上培養，得到7株菌,供 復篩用。復篩根據油田油井具體清蠟增產的要求，將初篩選出的7株菌處理華巖山油田原油,測 定處理前后原油的粘度及凝固點變化.其結果很好. 成 份I II~~ III蛋白胨(g)().5 1 牛肉膏(g)0.5 0.5 硫酸銨(g)1 1 石蠟(g) 1v0. 5
原油(m:l) 10磷酸氫二鉀(g) 0.03 0.03磷酸二氫鉀(g) 0.025 ().(:)25 氯化鈉(g) 5 5微量元素液(ml) 100 100 瓊 月旨 1.3 1.3H20 100 pH 7. 0 7. 5糠漿(ml) 20. 030. 0255100 1. 35100
權利要求
1、一種微生物強化采油菌種篩選方法，其步驟依次是分離樣品、富集、初篩、復篩，最后得到優良菌株。
2、 如權利要求1所說的微生物強化采油菌種篩選方法，其特征在于初篩的具體方法是分離樣品經富集15 d后，涂布在用培養基I制成的油皿上，于37 'C(油井地層溫度37 40 °C)培養7 d ，挑取在平板上生長并使平板上的原油更清澈的單菌落,再涂布到用培養基II 制成的蠟皿上,37 T培養l周,挑取產生分解圈的單菌落于斜面上培養,得到7株菌,供復篩用。
3、 如權利要求1所說的微生物強化采油菌種篩選方法，其特征在于復篩的具體方法是根 據油田油井具體清蠟增產的要求，將初篩選出的7株菌處理華巖山油田原油，測定處理前 后原油的粘度及凝固點變化。
4、 一種微生物強化采油菌種的培養條件，該條件是所用的培養基為蛋白胨0.5 lg、牛 肉膏0.5g、硫酸銨lg、石蠟lg、原油10ml、磷酸氫二鉀0.025 0.3g、氯化鈉5g、 微量元素液100ml、瓊脂1.3g、糠漿2m]，其余為水；pH值7.0 7.5、溫度范圍25 45 。C、鹽濃度7 10%。
全文摘要
本發明屬于微生物采油方法技術領域，具體涉及一種微生物強化采油菌種篩選方法及培養條件技術領域。本發明所述的微生物強化采油菌種篩選方法，其步驟依次是分離樣品、富集、初篩、復篩，最后得到優良菌株。綜上所述，通過初篩、復篩試驗，篩選到4株菌，能在以原油、石蠟作碳源的環境中生長。依據華巖山油井深度、礦化度及所要求溫度，4株菌與油田環境具有良好的適應性。因此，本實驗結果為采油工藝及現場應用施工提供了有益的借鑒。
文檔編號C12N1/20GK101130758SQ20061003044
公開日2008年2月27日 申請日期2006年8月25日 優先權日2006年8月25日
發明者翁天波 申請人:上海中油企業集團有限公司