專利名稱：一種中國倉鼠卵巢細胞擴增培養基及其用途的制作方法
技術領域：
發明涉及一種培養基及其用途，更具體地說涉及一種中國倉鼠卵巢細胞擴增 培養基及其用途。屬于生物制品領域。
背景技術：
細胞培養基是生物制品領域中常用的物質，在細菌和細胞培養中十分必要。 目前培養中國倉鼠卵巢細胞的培養基的缺點是目前，動物血清作為哺乳動物細 胞培養基的關鍵成分被廣泛應用，以牛血清為主。但是動物血清缺點是價格昂 貴，成分不明確，產品批間差異大，含有細胞生長抑制成分，且更為嚴重的是可 能含有細菌、病毒等，導致潛在生物性污染。
發明內容
要解決的問題
本發明的目的，是提供一種中國倉鼠卵巢細胞擴增培養基及其用途。
技術方案
本發明的一種中國倉鼠卵巢細胞(CH0細胞)擴增無蛋白培養基，其中，包 括基本培養基，還包括微量元素和Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島素替 代物。
上述的基本培養基包括氨基酸、維生素、無機鹽、其他營養物質。
上述的基本培養基包括的組份及含量為 氨基酸的組成及重量份如下
成份 Mg/L
甘氨酸 2-30
L-丙氨酸 3-40L-精氨酸鹽酸鹽50-450
一水L-門冬酰胺3. 0-45. 0
L-天冬氨酸5. 0-25. 0
L-半胱氨酸鹽酸鹽3. 0-45. 0
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽10. 0-65. 0
L-谷氨酸4-35
一水L-組氨酸鹽酸鹽10-75
L-異亮氨酸20-100
L-亮氨酸15-150
L-賴氨酸鹽酸鹽50-300
L-甲硫氨酸3-40
L-苯丙氨酸1. 0-15
L-脯氨酸15-85
L-絲氨酸3. 0-30
L-蘇氨酸3. 0-30
L-色氨酸0. 5-8
L-酪氨酸二鈉二水3. 0-25
L-纈氨酸15-100
維生素的組成及重量份如下
成份Mg/L
生物素0. 0005-0.
氯化膽》威3. 0-20
D-泛酸4丐0. 5-9
葉酸0. 5-10
肌醇3. 0-35
煙酰胺3. 0—25 鹽酸吡噴醛0. 1-5
鹽酸吡噴辛10-100
核黃素0. 1-3
核氨素鹽酸鹽0. 1-3
維生素B120. 001-0. 9
維生素c0. 001-0. 2
維生素K30. 001-0. 2
煙酸0. 008-0. 3
維生素A醋酸0. 009-0. 3
維生素D20. 001-0. 2
無機鹽的組成及重量份如下
成份Mg/L
氯化4丐45-250
氯化鎂10-65
硫酸鎂20-100
氯化鐘100-800
氯化鈉2500-10000
一水磷酸二氫鈉25-150
磷酸氫二鈉25-150
碳酸氬鈉900-5000
其他營養物質的組成及重量#如下成份Mg/L
葡萄糖2000-6500
酚紅0. 5-15
丙酮酸鈉60-300
黃噪呤 0. 5-4. 5
亞油酸 0.001-0.5
硫辛酸 0. 005-0. 8
腐胺酸 0.001-0.25
谷胱甘肽 G. 1-1. 5
胸香 0. 08-0. 85
4-羥乙基哌。秦乙磺酸 800-3000
乙醇胺 0. 4-4. 0
上述的基本培養基包括的優選組份及含量為: 氨基酸的組成及重量份如下
成份Mg/L
甘氨酸7. 5
L-丙氨酸8. 9
L-精氨酸鹽酸鹽211
一水L-門冬酰胺15. 01
L-天冬氨酸13. 3
L-半胱氨酸鹽酸鹽17. 56
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽31. 29
L-谷氨酸7. 35
一水L-組氨酸鹽酸鹽31. 48
L-異亮氨酸54. 47
L-亮氨酸59. 05
L-賴氨酸鹽酸鹽91. 25
L-曱硫氨酸17. 24
L-苯丙氨酸5
L-脯氨酸34. 5
L-絲氨酸10. 5L-蘇氨酸11. 9
L-色氨酸2. 04
L-酪氨酸二鈉二水7. 81
L-纈氨酸46
維生素的組成及重量份如下
成份Mg/L
生物素0. 0035
氯化膽堿8. 98
D-泛酸釣2. 24
葉酸2. 65
肌醇18
煙酰胺12
鹽酸吡。多醛1
鹽酸吡。多辛35
核黃素1
核氨素鹽酸鹽1
維生素B120. 01
維生素c0. 05
維生素K30. 05
煙酸0. 025
維生素A醋酸0. 025
維生素D20. 01
無機鹽的組成及重量份如下
成份Mg/L
氯化4丐116. 6
氯化鎂 28. 64
硫酸鎂 48. 84
氯化鉀 311.8
氯化鈉 6995. 5
一水磷酸二氫鈉 62. 5
磷酸氫二鈉 71. 02
碳酸氫鈉 2200
其他營養物質的組成及重量份如下:
成份Mg/L
葡萄糖3900
酚紅4
丙酮酸鈉150
黃噤呤1. 66
亞油酸0. 035
硫辛酸0. 075
腐胺酸0. 004
谷胱甘肽0. 6
胸苦0. 28
4-羥乙基哌嗪乙磺酸1800
乙醇胺1. 2
上述的微量元素包括的組份及含量為
組份 Mg/L
五水碌b酸銅 0. 0009-0. 02
氟化鈉 0. 0008-0. 01
九水亞石西酸鈉 0. G5-0. 2 醋酸鋇
/V水碌u酸鎘
氧氯化鋯
0. 001-0. 03 0. 0007-0. 004 0. 001—0. 0085
上述的微量元素包括的組份及含量為:
組份 Mg/L
五水》克酸銅 Q. G0182
氟化鈉 0. 00197
九水亞》西酸鈉 0. 094
醋酸鋇 Q. 0079
八水石克酸鎘 Q. 00122
氧氯化鋯 0. 0015
上述的Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島素蛋白替代物包括的組份及 含量為
成份 硫酸鋅
1， 2-花生四烯酰卵磷脂 石克酸亞4失七水 硝酸4失九水水 草酸鐵
乙二胺四乙酸4鈉
Mg/L 1. 0-15 1. 0-16 0. 05-0. 12 0. 01-0. 45 0. 1-2. 0 0. 01-0. 45
上述的Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島素蛋白替代物包括的組份及 含量為
成份 Mg/L 硫酸鋅 5 1,2-花生四烯酰卵磷脂 5
石克酸亞4失七水 0. 094
硝酸鐵九水水 0. 05
草酸鐵 0. 6
乙二胺四乙酸4鈉 0.03
上述培養基在培養中國倉鼠卵巢細胞中有用途。
上述的培養基，此中國倉鼠卵巢細胞擴增無血清培養基，可以直接替換含 血清常規培養基，中國倉鼠卯巢細胞不需要適應過程。
本發明產品的優點是本發明的中國倉鼠卵巢細胞無蛋白培養基，不含任 何動物血清，以氨基酸，維生素，無機鹽，糖類，脂肪酸和微量元素組成。不含 有轉鐵蛋白和胰島素，這兩種成分。以 ZnS04, 1, 2-DiarachidonoyPhosphatidylcholine, FeS04. 7H20 , Fe (N03) 3. 9H20 ， Ferric Oxalate, EDTA 4Na代替。這些替代組分均可人工合成，均為結構明確 的化學物質，使本培養基產品具有極高的一致性和穩定性。轉鐵蛋白和胰島素， 無論動物源性提取純化來源或經重組蛋白技術人工合成獲得，都價格昂貴，用以 上組分替代后，培養基成本顯著降低。另外，因本培養基不含蛋白質組分，使得 應用本培養基培養的中國倉鼠卵巢細胞進行重組蛋白生產時，其下游純化工作極 大簡化，節約成本，利于提高重組蛋白的純度。
此中國倉鼠卵巢細胞無血清培養基，可以直接替換含血清常規培養基，中 國倉鼠卵巢細胞不需要適應過程。
圖1為無血清培養基中國倉鼠卯巢細胞擴增培養基的實施例3的培養曲線；
圖2為無血清培養基中國倉鼠卵巢細胞擴增培養基的實施例2的培養曲線。
具體實施例方式
實施例1
培養基由基本培養基、微量元素和Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島 素替代物組成，其中，基本培養基的組成和成份如下
氨基酸的組成及重量份如下
成份 Mg/L甘氨酸7. 5
L-丙氨酸8. 9
L-精氨酸鹽酸鹽211
一水L-門冬酰胺15. 01
L-天冬氨酸13. 3
L-半胱氨酸鹽酸鹽17. 56
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽31. 29
L-谷氨酸7. 35
一水L-組氨酸鹽酸鹽31. 48
L-異亮氨酸54. 47
L-亮氨酸59. 05
L-賴氨酸鹽酸鹽91. 25
L-曱硫氨酸17. 24
L-苯丙氨酸5
L-脯氨酸34. 5
L-絲氨酸10. 5
L-蘇氨酸11. 9
L-色氨酸2. 04
L-酪氨酸二鈉二水7. 81
L-纈氨酸46
維生素的組成及重量份如下:
成份 生物素 氯化膽堿 D-泛酸4丐 葉酸
17
Mg/L 0. 0035 8. 98 2. 24 2. 65
肌醇18
煙酰胺12
鹽酸吡。多醛1
鹽酸吡。多辛35
核黃素1
核氨素鹽酸鹽1
維生素B120. 01
維生素c0. 05
維生素K30. 05
煙酸0. 025
維生素A醋酸0. 025
維生素D20. 01
無機鹽的組成及重量份如下
成份Mg/L
氯化鈣116. 6
氯化鎂28. 64
硫酸鎂48. 84
氯化鉀311. 8
氯化鈉6995. 5
一水磷酸二氬鈉62. 5
磷酸氬二鈉71. 02
碳酸氫鈉2200
其他營養物質的組成及重量份如下成份Mg/L
葡萄糖3900
酚紅4
丙酮酸4內150
黃噪呤1. 66
亞油酸0. 035
硫辛酸0. 075
腐胺酸0. 004
谷胱甘肽0. 6
胸苷0. 28
4-羥乙基哌。秦乙磺酸1800
乙醇胺1. 2
微量元素包括的組份及含量為:
組份 Mg/L
五水石危酸銅 Q. G0182
氟化鈉 0. 00197
九水亞竭酸鈉 0. 094
醋酸鋇 Q. 0079
八水硫酸鎘 0. 00122
氧氯化鋯 G. 0015
Transferrin轉鐵蛋白和Insul in胰島素蛋白替代物包括的組份及含量為:
成份 Mg/L
硫酸鋅 5
1，2-花生四烯酰卵磷脂 5
石危酸亞纟失七水 0.094
硝酸鐵九水水 0. 05
草酸鐵 0. 6
乙二胺四乙酸4鈉 0.03
實施例2
培養基由基本培養基、微量元素和Transferrin轉鐵蛋白和InsuLin胰島 素替代物組成，其中，基本培養基的組成和成份如下 氨基酸的組成及重量份如下
成份 Mg/L
甘氨酸 2
L-丙氨酸 3
L-精氨酸鹽酸鹽 50
一水L-門冬酰胺 3.0
L-天冬氨酸 5. 0
L-半胱氨酸鹽酸鹽 3. 0
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽 10.0
L-谷氨酸 4
一水L-組氨酸鹽酸鹽 10
L-異亮氨酸 20
L-亮氨酸 15
L-賴氨酸鹽酸鹽 50
L-曱硫氨酸 3
L-苯丙氨酸 1. 0
L-脯氨酸 15
L-絲氨酸 3. 0
L-蘇氨酸 3. 0
L-色氨酸 0.5
L-酪氨酸二鈉二水 3. 0
L-纈氨酸 15
維生素的組成及重量份如下
成份 Mg/L
生物素 0. 0005
氯化膽堿 3. 0
D-泛酸4丐 0. 5
葉酸 0. 5
肌醇 3. 0
煙酰胺 3. 0
鹽酸吡噴醛 0. 1
鹽酸吡口多辛 10
核黃素 0. 1
核氨素鹽酸鹽 0. 1
維生素B12 0.001
維生素C 0. 001
維生素K3 0.001
煙酸 0. 008
維生素A醋酸 Q. 009
維生素D2 Q. 001
無機鹽的組成及重量份如下
成份 Mg/L
氯化4丐 45
氯化鎂 10
硫酸鎂 20
氯化鉀 100 氯化鈉2500
一水磷酸二氫鈉25
磷酸氫二鈉25
碳酸氬鈉900
其他營養物質的組成及重量份如下:成份
葡萄糖2000
酚紅0. 5
丙酮酸鈉60
黃噤呤0. 5
亞油酸0. 001
硫辛酸0. 005
腐胺酸0. 001
谷胱甘肽0. 1
胸普0. 08
4-羥乙基哌。秦乙磺酸800
乙醇胺0. 4。
微量元素包括的組份及含量為:
組份Mg/L
五水好b酸銅0. 0009
氟化鈉0. 0008
九水亞竭酸鈉0. 05
醋酸鋇0. 001
八水;克酸鎘0. 0007
氧氯化鋯0. 001。
Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島素蛋白替代物包括的組份及含量為:
成份 Mg/L
硫酸鋅 1. 0
1, 2-花生四烯酰卵磷脂 1. 0
石克酸亞4失七水 0. 05
硝酸鐵九水水 0. 01
草酸鐵 0. 1
乙二胺四乙酸4鈉 0.01。
實施例3
培養基由基本培養基、微量元素和Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島 素替代物組成，其中，基本培養基的組成和成份如下 氨基酸的組成及重量份如下
成份 Mg/L
甘氨酸 30
L-丙氨酸 40
L-精氨酸鹽酸鹽 450
一水L-門冬酰胺 45.0
L-天冬氨酸 25. 0
L-半胱氨酸鹽酸鹽 45. 0
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽 65. 0
L-谷氨酸 35
一水L-組氨酸鹽酸鹽 75
L-異亮氨酸 100
L-亮氨酸 150
L-賴氨酸鹽酸鹽 300 L-甲硫氨酸40
L-苯丙氨酸15
L-脯氨酸85
L-絲氨酸30
L-蘇氨酸30
L-色氨酸8
L-酪氨酸二鈉二水25
L-纈氨酸100
維生素的組成及重量份如下:
成份
生物素0. 09
氯化膽減^20
D-泛酸4丐9
葉酸10
肌醇35
煙酰胺25
鹽酸吡噴醛5
鹽酸吡。多辛100
核黃素3
核氨素鹽酸鹽3
維生素B120. 9
維生素c0. 2
維生素K30. 2
煙酸0. 3
維生素A醋酸0. 3
維生素D20. 2
無才幾鹽的組成及重量份如下:
成份M
氯化鈣250
氯化鎂65
硫酸鎂100
氯化鉀800
氯化鈉10000
一水磷酸二氫鈉150
磷酸氫二鈉150
碳酸氯鈉5000
其他營養物質的組成及重量份如下:成份M
葡萄糖6500
酚紅15
丙酮酸鈉300
黃噪呤4. 5
亞油酸0. 5
硫辛酸0. 8
腐胺酸0. 25
谷胱甘肽1. 5
胸香0. 85
4-羥乙基哌。秦乙磺酸3000
乙醇胺4. 0。
微量元素包括的組份及含量為: 組份 Mg/L
五水碌u酸銅 0. 02
氟化鈉 0. 01
九水亞》西酸鈉 0. 2
醋酸鋇 0. 03
/^水辟b酸鎘 0. 004
氧氯化鋯 0.0085。
T r a n s f e r r i n轉鐵蛋白和I n s u 1 i n胰島素蛋白替代物包括的組份及含量為:
成份 Mg/L
硫酸鋅 15
1,2-花生四烯酰卵磷脂 16
為t酸亞4失七水 0.12
賄酸4失九水水 0.45
草酸鐵 2. 0
乙二胺四乙酸4鈉 0.45。
實施例4
培養基由基本培養基、微量元素和Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島 素替代物組成，其中，基本培養基的組成和成份如下 氨基酸的組成及重量份如下
成份 Mg/L
甘氨酸 2
L-丙氨酸 40
L-精氨酸鹽酸鹽 50
一水L-門冬酰胺 45.0
L-天冬氨酸 5. 0 L-半胱氨酸鹽酸鹽 45. 0
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽 10.0
L-谷氨酸 35
一水L-組氨酸鹽酸鹽 10
L-異亮氨酸 100
L-亮氨酸 15
L-賴氨酸鹽酸鹽 300
L-曱硫氨酸 3
L-苯丙氨酸 15
L-脯氨酸 15
L-絲氨酸 30
L-蘇氨酸 3. 0
L-色氨酸 8
L-酪氨酸二鈉二水 3. 0
L-纈氨酸 100
維生素的組成及重量份如下
成份 Mg/L
生物素 Q. 0005
氯化膽》威 20
D-泛酸4丐 0. 5
葉酸 10
肌醇 3. 0
煙酰胺 25
鹽酸吡噴搭 0. 1
鹽酸吡噴辛 100
核黃素 0. 1
核氨素鹽酸鹽 3
維生素B12 0.001
維生素C 0. 2
維生素K3 0. 001
煙酸 0. 3
維生素A醋酸 0.009
維生素D2 0. 2
無機鹽的組成及重量份如下
成份 Mg/L
氯化4丐 45
氯化鎂 65
硫酸鎂 20
氯化鉀 800
氯化鈉 2500
一水磷酸二氫鈉 150
磷酸氫二鈉 25
碳酸氫鈉 5000
其他營養物質的組成及重量份如下
成份 Mg/L
葡萄糖 2000
酚紅 15
丙酮酸鈉 60
黃噤呤 4. 5
亞油酸 0.001
硫辛酸 0. 8
腐胺酸 0.001
谷胱甘肽 1. 5
胸芬 0. 08
4-羥乙基哌溱乙磺酸 3000
乙醇胺 0.4。
微量元素包括的組份及含量為
組份 Mg/L
五水硫酸銅 0. 02
氟化鈉 0. 0008
九水亞硒酸鈉 0. 2
醋酸鋇 0. 001
八水碌u酸鎘 0. 004
氧氯化鋯 Q. 001。
Transferrin轉鐵蛋白和Insul in胰島素蛋白替代物包括的組份及含量為:
成份 Mg/L
硫酸鋅 15
1,2-花生四烯酰卵磷脂 1.0
石克酸亞牽失七水 0.12
硝酸鐵九水水 0. 01
草酸鐵 2. 0
乙二胺四乙酸4鈉 0.01。
實施例5
培養基由基本培養基、微量元素和Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島素替代物組成，其中，基本培養基的組成和成份如下: 氨基酸的組成及重量份如下
成份 Mg/L
甘氨酸 30
L-丙氨酸 3
L-精氨酸鹽酸鹽 450
一水L-門冬酰胺 3.0
L-天冬氨酸 25. 0
L-半胱氨酸鹽酸鹽 3. 0
一水L-半胱氨酸鹽酸鹽 65.0
L-谷氨酸 4
一水L-組氨酸鹽酸鹽 75
L-異亮氨酸 20
L-亮氨酸 150
L-賴氨酸鹽酸鹽 50
L-曱硫氨酸 40
L-苯丙氨酸 1. 0
L-脯氨酸 85
L-絲氨酸 3. 0
L-蘇氨酸 30
L-色氨酸 0.5
L-酪氨酸二鈉二水 25
L-纈氨酸 15
維生素的組成及重量份如下
成份 Mg/L
生物素 0. 09 氯化膽堿3. 0
D-泛酸鈣9
葉酸0. 5
肌醇35
煙酰胺3. 0
鹽酸吡噴醛5
鹽酸吡噴辛10
核黃素3
核氨素鹽酸鹽0. 1
維生素B120. 9
維生素c0. 001
維生素K30. 2
煙酸0. 008
維生素A醋酸0. 3
維生素D20. 001
無機鹽的組成及重量份如下:
成份
氯化鈣250
氯化鎂10
疏酸鎂100
氯化鉀100
氯化鈉10000
一水磷酸二氬鈉25
磷酸氫二鈉150
碳酸氬鈉900
其他營養物質的組成及重量份如下:
成份，
葡萄糖6500
酚紅0. 5
丙酮酸鈉300
黃。票呤0. 5
亞油酸0. 5
硫辛酸0. 005
腐胺酸0. 25
谷胱甘肽0. 1
胸苦0. 85
4-羥乙基哌。秦乙石黃酸3000
乙醇胺0. 4。
微量元素包括的組份及含量為:
組份 Mg/L
五水碌u酸銅 0. 02
氟化鈉 0. 0008
九水亞石西酸鈉 0. 2
醋酸鋇 0. 001
八水硫酸鎘 0. 004
氧氯化鋯 Q. 001。
Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島素蛋白替代物包括的組份及含量為 成份 Mg/L
硫酸鋅 15
1， 2-花生四烯酰卵磷脂 1. 0
硫酸亞鐵七水 0. 12
硝酸鐵九水水 0. 01
草酸鐵 2. 0
乙二胺四乙酸4鈉 0.01。
此中國倉鼠卵巢細胞無血清培養基，可以直接替換含血清常規培養基，中 國倉鼠卵巢細胞不需要適應過程。
權利要求
1.一種中國倉鼠卵巢細胞擴增無蛋白培養基，其特征在于包括基本培養基，還包括微量元素和Transferr in轉鐵蛋白和Insulin胰島素替代物。
2. 如權利要求1所述的培養基，其特征在于其中所述的基本培養基包括氨 基酸、維生素、無機鹽、其他營養物質。
3. 如權利要求2所述的培養基，其特征在于其中所述的基本培養基包括的組 份及含量為氨基酸的組成及重量份如下成份Mg/L甘氨酸2-30L-丙氨酸3-40L-精氨酸鹽酸鹽50-450一水L-門冬酰胺3. 0-45. 0L-天冬氨酸5. 0-25. 0L-半胱氨酸鹽酸鹽3. 0-45. 0一水L-半胱氨酸鹽酸鹽10. 0-65. 0L-谷氨酸4-35一水L-組氨酸鹽酸鹽10-75L-異亮氨酸20-100L-亮氨酸15-150L-賴氨酸鹽酸鹽50-300L-曱硫氨酸3-40L-苯丙氨酸1. 0-15L-脯氨酸15-85L-絲氨酸3. 0-30L-蘇氨酸3. 0-30L-色氨酸0. 5-8L-酪氨酸二鈉二水3. 0-25L-纈氨酸.15-100維生素的組成及重量份如下成份Mg/L生物素0. 0005—0. 09氯化膽堿3. 0-20D-泛酸《丐0. 5-9葉酸0. 5-10肌醇3. 0-35煙酰胺3. 0-25鹽酸吡噴醛0. 1-5鹽酸吡噴辛10-100核黃素0. 1-3核氨素鹽酸鹽0. 1-3維生素B120. 001-0. 9維生素c0. 001-0. 2維生素K30. 001—0. 2煙酸0. 008-0. 3維生素A醋酸0. 009-0. 3維生素D20. 001-0. 2無機鹽的組成及重量份如下成份Mg/L氯化鈣45-250氯化鎂10-65 硫酸鎂 20-100氯化鉀 1 GO-800氯化鈉 2500-10000一水磷酸二氫鈉 25-150磷酸氫二鈉 25-150石友酸氬鈉 900-5000其他營養物質的組成及重量份如下成份 Mg/L葡萄糖 2000-6500酚紅 0. 5-15丙酮酸鈉 60-300黃噤呤 0. 5-4. 5亞油酸 0.001-0.5硫辛酸 0. 005-0. 8腐胺酸 0.001-0.25谷胱甘肽 0. 1-1. 5胸香 0.08-0.854-羥乙基哌。秦乙磺酸 800-3000乙醇胺 0.4-4.0。
4.如權利要求3所述的培養基，其特征在于其中所述的基本培養基包括的組 份及含量為氨基酸的組成及重量份如下成份 Mg/L甘氨酸 7. 5L-丙氨酸 8.9L-精氨酸鹽酸鹽 211一水L-門冬酰胺 15.01L-天冬氨酸13. 3L-半胱氨酸鹽酸鹽17. 56一水L-半胱氨酸鹽酸鹽31. 29L-谷氨酸7. 35一水L-組氨酸鹽酸鹽31. 48L-異亮氨酸54. 47L-亮氨酸59. 05L-賴氨酸鹽酸鹽91. 25L-甲硫氨酸17. 24L-苯丙氨酸5L-脯氨酸34. 5L-絲氨酸10. 5L-蘇氨酸11. 9L-色氨酸2. 04L-酪氨酸二鈉二水7. 81L-纈氨酸46維生素的組成及重量份如下成份Mg/L生物素0. 0035氯化膽堿8. 98D-泛酸4丐2. 24葉酸2. 65肌醇18煙酰胺12鹽酸吡。多醛11鹽酸吡噴辛35核黃素1核氨素鹽酸鹽1維生素B120. 01維生素c0. 05維生素K30. 05煙酸0. 025維生素A醋酸0. 025維生素D20. 01無機鹽的組成及重量份如下成份Mg/L氯化4丐116. 6氯化鎂28. 64硫酸鎂48. 84氯化鉀311. 8氯化鈉6995.5一水磷酸二氫鈉62. 5磷酸氫二鈉71. 02碳酸氬鈉2200其他營養物質的組成及重量份如下成份Mg/L葡萄糖3900酚紅4丙酮酸鈉150黃嘌呤1. 66亞油酸硫辛酸腐胺酸谷胱甘肽胸苷4-羥乙基哌溱乙磺酸 乙醇胺0. 035 0. 075 0. 004 0. 60. 28 18001. 2。
5.如權利要求1所述的培養基，其特征在于所述的微量元素包括的組份及含 量為組份 Mg/L五水斬u酸銅 0. 0009-0. 02氟化鈉 0. 0008-0. 01九水亞石西酸鈉 0. 05-0. 2醋酸鋇 0. 001-0. 03/\水碌"酸鎘 0. 0007-0. 004氧氯化鋯 0.001-0.0085。
6.如權利要求5所述的培養基，其特征在于所述的微量元素包括的組份及含 量為組份 Mg/L五水好u酸銅 0.00182氟化鈉 0. 00197九水亞i西酸鈉 0. 094醋酸鋇 Q. 0079八水石克酸鎘 0. 00122氧氯化鋯 0.0015。
7. 如權利要求1所述的培養基，其特征在于所述的Transferrin轉鐵蛋白和 Insulin胰島素蛋白替代物包括的組份及含量為成份 Mg/L硫酸鋅 1.0-151， 2-花生四烯酰卵磷脂 1. 0-16石克酸亞4失七水 0.05-0.12硝酸鐵九水水 G. 01-0. 45草酸鐵 0. 1-2. 0乙二胺四乙酸4鈉 0.01-0.45。
8. 如權利要求7所述的培養基，其特征在于所述的Transferrin轉鐵蛋白和 Insul in胰島素蛋白替代物包括的組份及含量為成份 Mg/L硫酸鋅 51,2-花生四烯酰卵磷脂 5硫酸亞鐵七水 0. 094硝酸鐵九水水 0. 05草酸鐵 0. 6乙二胺四乙酸4鈉 0.03。
9. 如權利要求1-8中任意一項所述的培養基在培養中國倉鼠卵巢細胞中的用 途。
10. 如權利要求9所述的用途，其特征在于所述的培養基，此中國倉鼠卵巢細 胞擴增無血清培養基，可以直接替換含血清常規培養基，中國倉鼠卯巢細胞 不需要適應過程。
全文摘要
發明涉及一種培養基及其用途，更具體地說涉及一種中國倉鼠卵巢細胞擴增培養基及其用途。屬于生物制品領域。本發明的一種中國倉鼠卵巢細胞擴增無蛋白培養基，其中，包括基本培養基，還包括微量元素和Transferrin轉鐵蛋白和Insulin胰島素替代物。此中國倉鼠卵巢細胞無血清培養基，可以直接替換含血清常規培養基，中國倉鼠卵巢細胞不需要適應過程。
文檔編號C12N5/06GK101195816SQ20071030707
公開日2008年6月11日 申請日期2007年12月28日 優先權日2007年12月28日
發明者唐賀文, 黃宗堂 申請人:天津百若克醫藥生物技術有限責任公司