專利名稱：一種天然海藻內生真菌二萜生物堿類化合物的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及殺蟲劑領域，具體地說是一種天然海藻內生真菌二萜生物堿類化合物的應用。隨著化學合成農藥使用時間的推移，其產生的不良影響已越來越突出。化學農藥大規模地生產和無限制地大量使用，使70 % 80 %的農藥直接滲透到環境中，殘留非常嚴重，對土壤、地表水、地下水造成污染，并進一步進入生物鏈，對生物和人類健康都造成直接和潛在的危害。我國加入世界貿易組織后，因化學農藥殘留而導致的“綠色壁壘”嚴重制約著我國農產品的出口，傳統農業產業面臨著更大的風險和挑戰。農業部已從2001年起在全國范圍內實施“無公害食品行動計劃”，而使用無公害農藥又是實施這一目標的關鍵措施， 于是人們把目光投向對環境更友好的生物農藥。與傳統的化學合成農藥相比，生物農藥具有對人畜和非靶標生物安全，環境兼容性好，不易產生抗性等優點。生物農藥的開發應用對人類健康，環境保護和農業的可持續發展都具有極其重要的意義。
發明內容
本發明的目的是提供一種天然的海藻內生真菌二萜生物堿類化合物的應用。為實現上述目的，本發明采用的技術方案為一種天然海的藻內生真菌二萜生物堿類化合物所述天然海藻內生真菌二萜生物堿類化合物具有殺蟲作用，海藻內生真菌二萜生物堿類化合物如式(I)所示
權利要求
1. 一種天然海藻內生真菌二萜生物堿類化合物，其特征在于所述天然海藻內生真菌萜生物堿類化合物具有殺蟲作用，海藻內生真菌二萜生物堿類化合物如式(I)所示
2.按權利要求1所述的天然藻內生真菌二萜生物堿類化合物的應用，其特征在于所述海藻內生真菌二萜生物堿類化合物可作為殺蟲劑。
3.按權利要求1所述的天然海藻內生真菌二萜生物堿類化合物的應用，其特征在于 所述海藻內生真菌二萜生物堿類化合物按如下步驟制備1)將米曲霉(Aspergillusoryzae) cf_2接種于真菌液體培養基中靜止發酵20-25天， 過濾，發酵液經乙酸乙酯萃取濃縮，收集的菌絲體用有機溶劑提取，而后再經乙酸乙酯萃取濃縮，發酵液所得濃縮物和菌絲體所得濃縮物合并，即為粗提物；所述米曲霉(Asp. 0ryZae)Cf-2，其于2010年3月1日保存于中國典型培養物保藏中心 CCTCC，保藏編號為 CCTCC M 2010045，株號為 cf-2 ；2)取步驟1)中的粗提物進行硅膠柱層析，用有機溶劑進行梯度洗脫，收集洗脫液，洗脫液經薄層層析檢測；3)收集步驟幻中以洗脫液體積比5-8 1梯度的洗脫組分，將收集的洗脫組分進行凝膠柱層析、硅膠柱層析和薄層層析分離純化，純化收集Rf值為0. 6-0. 7組分，即得海藻內生真菌二萜生物堿類化合物。
4.按權利要求3所述的天然海藻內生真菌二萜生物堿類化合物的應用，其特征在于 步驟1)中的有機溶劑提取液為氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇或甲醇中一種或幾種。
5.按權利要求3所述的天然海藻內生真菌二萜生物堿類化合物的應用，其特征在于 步驟2)中的有機溶劑為石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮。
6.按權利要求3所述的天然海藻內生真菌二萜生物堿類化合物的制備方法，其特征在于步驟幻所述凝膠柱層析洗脫液為體積比1-2 1的氯仿-甲醇或氯仿-乙醇；硅膠柱層析洗脫液為體積比3-8 1比石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮；薄層層析展開劑為體積比為31的氯仿-乙酸乙酯。
7.按權利要求3所述的天然海藻內生真菌二萜生物堿類化合物的制備方法，其特征在于步驟幻所述凝膠柱層析時收集經TLC檢測藍紫色斑點的組分；硅膠柱層析時收集以洗脫液體積比5-8 1梯度的洗脫液。
全文摘要
本發明涉及殺蟲劑領域，具體地說是一種天然的海藻內生真菌二萜生物堿類化合物的應用。所述海藻內生真菌二萜生物堿類化合物具有殺蟲作用，海藻內生真菌二萜生物堿類化合物如式(I)所示；本發明通過分離于海洋紅藻異管藻的真菌米曲霉(Aspergillus oryzae)cf-2發酵經提取、分離獲得的二萜生物堿類天然化合物，經殺蟲活性實驗得出此二萜生物堿類化合物在100微克/毫升時對鹵蟲的致死率為60.3％。
文檔編號C12R1/69GK102190614SQ20101013113
公開日2011年9月21日 申請日期2010年3月19日 優先權日2010年3月19日
發明者喬明鋒, 季乃云 申請人:中國科學院煙臺海岸帶研究所