專利名稱：一種耐逆性相關蛋白及其編碼基因與應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種耐逆性相關蛋白及其編碼基因與應用。
背景技術：
低溫、干旱、高溫等逆境因子是影響農作物產量與品質的重要因素，據估計，僅 低溫造成世界各地水稻平均每年減產5-10%，嚴重低溫的年份(3-4年一次)造成減產 20-40% ο在逆境脅迫下植物體內會產生一系列應答反應，伴隨著許多生理生化及發育上的 變化。明確植物對逆境的反應機制，將為抗逆基因工程研究和應用提供科學論據。目前，植 物抗逆性研究已逐漸深入到細胞、分子水平，并與遺傳學和遺傳工程研究相結合，探索用生 物技術來改進植物生長特性，其目的是提高植物對逆境的適應能力。在干旱、高鹽和低溫等環境脅迫的逆境條件下，植物能夠在分子、細胞和整體水平 上做出相應的調整，以最大程度上減少環境所造成的傷害并得以生存。許多基因受脅迫誘 導表達，這些基因的產物不僅能夠直接參與植物的脅迫應答，而且能夠調節其它相關基因 的表達或參與信號傳導途徑，從而使植物避免或減少傷害，增強對脅迫環境的抗性。
發明內容
本發明的目的是提供一種耐逆性相關蛋白及其編碼基因與應用。本發明提供的耐逆性相關蛋白，來自秈稻(Oryza sativa)，是如下(a)或(b)(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；(b)將序列1的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或 添加且與植物耐逆性相關的由序列1衍生的蛋白質。為了使(a)中的蛋白質便于純化，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成 的蛋白質的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標簽。表1標簽的序列
權利要求
1.一種蛋白，是如下(a)或(b)的蛋白質(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；(b)將序列1的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加 且與植物耐逆性相關的由序列1衍生的蛋白質。
2.權利要求1所述蛋白的編碼基因或基因組基因。
3.根據權利要求2所述的編碼基因，其特征在于所述編碼基因為如下1)或2)或3) 或4)或5)的DNA分子1)序列表中序列2自5’末端第73至789位核苷酸所示的DNA分子；2)序列表中序列2自5’末端第5至856位核苷酸所示的DNA分子；3)序列表中序列2所示的DNA分子；4)在嚴格條件下與1)或2)或3)限定的DNA序列雜交且編碼植物耐逆性相關蛋白的 DNA分子；5)與1)或2)或3)或4)限定的DNA序列具有90%以上同源性且編碼植物耐逆性相 關蛋白的DNA分子。
4.根據權利要求2所述的基因組基因，其特征在于所述基因組基因為如下1)或2)或 3)或4)的DNA分子1)序列表中序列3所示的DNA分子；2)序列表中序列4所示的DNA分子；3)在嚴格條件下與1)或2)限定的DNA序列雜交且編碼植物耐逆性相關蛋白的DNA分子；4)與1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性且編碼植物耐逆性相關蛋白 的DNA分子。
5.含有權利要求2或3或4所述編碼基因或基因組基因的重組表達載體、表達盒、轉基 因細胞系或重組菌。
6.根據權利要求5所述的重組表達載體，其特征在于所述重組表達載體為在 PCAMBIA1300的Kpn I和Sal I酶切位點之間插入特異DNA片段得到的重組質粒；所述特 異DNA片段是用限制性內切酶Kpn I和Xhol雙酶切pJIT163_AK068115得到的小片段；所 述pJIT163-AK068115是將序列表中序列2自5，末端第5至856位核苷酸所示的DNA分子 插入pJIT163的BamH I和HindIII酶切位點之間得到的重組質粒。
7.擴增權利要求2或3或4所述基因的引物。
8.一種培育轉基因植物的方法，是將權利要求2或3或4所述編碼基因或基因組基因 導入目的植物中，得到如下㈧和/或⑶和/或(C)的轉基因植物(A)耐逆性高于所述目的植物的轉基因植物；(B)株高高于所述目的植物的轉基因植物；(C)谷穗和/或谷粒大于所述目的植物的轉基因植物。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于權利要求3所述編碼基因通過權利要求6 所述重組表達載體導入所述目的植物中。
10.根據權利要求8或9所述的方法，其特征在于所述目的植物為單子葉植物或雙子 葉植物；所述單子葉植物優選為水稻；所述耐逆性為耐寒性。
全文摘要
本發明公開了一種耐逆性相關蛋白及其編碼基因與應用。本發明提供的蛋白，是如下(a)或(b)的蛋白質(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；(b)將序列1的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物耐逆性相關的由序列1衍生的蛋白質。該蛋白與耐逆性、株高以及谷穗和谷粒大小相關，可用于培育耐逆性轉基因植株，也可用于培育生長速度快、谷穗谷粒大的轉基因植株，在作物遺傳改良方面具有重要的應用價值。
文檔編號C12N15/63GK101993484SQ20101024972
公開日2011年3月30日 申請日期2010年8月5日 優先權日2009年8月10日
發明者夏新界, 黃梅 申請人:中國科學院亞熱帶農業生態研究所