專利名稱：通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種飲料及其制備方法，特別是涉及一種通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料及其制備方法。
背景技術：
冬蟲夏草學名Cordyceps (Ophiocordyceps) sinensis;Hirsutella sinensis]屬子囊菌亞門、麥角菌科、冬蟲夏草屬，為我國傳統名貴的中草藥類真菌，素有“藥王”之稱，與人參、鹿茸并稱為中國醫學三大補品。自古以來，冬蟲夏草作為滋補佳品在我國已被廣泛認可和使用。現代科技表明，冬蟲夏草中所含的蟲草酸及蟲草素等成分，具有擴張氣管、鎮靜、抗細菌、降血壓的功效，在治療肺結核、咳嗽、衰弱、貧血虛弱、自汗盜汗、病后久虛、洛血
吐血、慢性腎炎等方面均具有良好的效果。研究表明發酵產生的冬蟲夏草菌絲體和天然冬蟲夏草功效相同，兩者均富含冬蟲夏草多糖、氨基酸、甘露醇和蟲草素等功能因子。目前，國內外的相關研究主要集中在冬蟲夏草功能因子的提取及藥理、藥效上。但是，在冬蟲夏草子實體的人工栽培領域，卻受到很多的技術限制，很少大規模地進行工業化生產以及廣泛地民用化使用，同時，該技術領域也難以商業化使用。十年前，自然界中冬蟲夏草子實體的年保有量約有I萬噸，但是目前的保有量卻只有約5千噸，而且，如上所述，冬蟲夏草子實體又由于技術上原因，難以大量的人工生產，因此，人們對冬蟲夏草保健功效和治療功效的渴求與冬蟲夏草子實體保有量的短缺產生了顯著的矛盾。
發明內容
本發明的目的在于，克服上述現有技術的缺陷而提供一種能夠大規模地進行工業化生產，并且能夠以較低的成本生產出效用較高的冬蟲夏草子實體的通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法。為實現上述目的，本發明采取以下設計方案本發明的一種通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法，本發明所述的制備方法包括如下步驟A、將冬蟲夏草菌接入培養液中，并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養72 96小時，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養基中，接種量為5 10%，并在23 27°C的溫度下通氣培養48 72小時，經過生物發酵，獲得發酵的冬蟲夏草菌絲體以及冬蟲夏草菌發酵液；C、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌絲體進行細胞組織破碎后，用水提取，浸提比為O. 8 1:2 5，浸提溫度為90 95°C，浸提時間為2 3小時，從而獲得冬蟲夏草菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液以及步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到冬蟲夏草保健飲料。優選地，在所述步驟D中用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍。優選地，在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。優選地，在所述步驟B中，發酵終止的指標為pH值達到4. O 5. 5，折光糖度達到2. 8 3. 8%,以及菌絲體得率干重達到O. 65 O. 85%。優選地，在所述步驟D中，冬蟲夏草菌發酵液與冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后的自然PH值為6 7，折光糖度為2 6%。優選地，所述步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液中，含有O. I 5mg/100g腺苷以及10 100mg/100g蟲草多糖。優選地，所述步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液中，含有O. 5 10mg/100g腺苷以及10 200mg/100g蟲草多糖。本發明的另一目的在于提供一種通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料，所 述冬蟲夏草保健飲料是由如下方法制備而成A、將冬蟲夏草菌接入培養液中，并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養72 96小時，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養基中，接種量為5 10%，并在23 27°C的溫度下通氣培養48 72小時，經過生物發酵，獲得發酵的冬蟲夏草菌絲體以及冬蟲夏草菌發酵液；C、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌絲體進行細胞組織破碎后，用水提取，浸提比為0. 8 1:2 5，浸提溫度為90 95°C，浸提時間為2 3小時，從而獲得冬蟲夏草菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液以及步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到冬蟲夏草保健飲料。優選地，在所述步驟D中用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍。優選地，在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。本發明的優點是本發明采用菌種原產地(青藏高原)的冬蟲夏草菌進行分離、純化和培育，采用工業化液體深層發酵技術，使得冬蟲夏草菌種能夠在液體培養基中進行大量的繁殖，并且，所得的代謝產物以及菌絲體中均含有與原冬蟲夏草菌效用相同的有效成分，此外，本發明還使得冬蟲夏草菌的子實體能夠在工業化條件進行生產和培育，工藝簡單、成本可控，從而能夠顯著地降低生產成本，使得普通消費者也能使用上名貴的保健飲料。
具體實施例方式實施例I :如下為本發明一種通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法的優選實施例，本發明所述的制備方法包括以下主要步驟A、首先，將冬蟲夏草菌接入培養液中，本發明的培養液可以為現有技術中的各種適于冬蟲夏草菌液體培養的培養液，并在18°C的溫度下以300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養72小時，獲得菌種液；B、然后，將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8%大麥芽、重量份6%大豆的液體培養基中，接種量為5%，并在27°C的溫度下通氣培養48小時，經過生物發酵，獲得發酵的冬蟲夏草菌絲體以及冬蟲夏草菌發酵液；C、再將步驟B中得到的冬蟲夏草菌絲體進行細胞組織破碎后，用水提取，浸提比為0. 8: 5，浸提溫度為95°C，浸提時間為2小時，從而獲得冬蟲夏草菌絲體提取液；進一步，本發明主要利用工業化液體深層發酵技術獲得的冬蟲夏草發酵液及濕菌體，來制備及生產冬蟲夏草保健飲料；D、最后，將步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液以及步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2倍，從而得到冬蟲夏草保健飲料。因此，通過本發明的制備方法，可以生產大眾直飲產品，包括保健品和飲料。并且，本發明的制備方法可以直接應用于工業化生產，且成本低，所得產品營養功能高，有利于消費者及人民大眾的日常保健。更具體地，本發明的制備方法能夠直接進行工業化大規模的連續生產。批量生產后，通過本發明的制備方法可以每日生產10噸以上的冬蟲夏草菌發酵液，及每日生產20噸 50噸以上的最終產品。另一方面，在本發明制備方法的步驟D中，用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍，優選地，在本實施例中，用水將所述混合液稀釋2倍；并且，進一步，在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。這些輔料可以提高本發明方法所制備飲料的口感，使得消費者在飲用本發明所述的 保健飲料時，能夠減少或去除中藥的味苦，而更多的是日常飲料的爽口。并且，通過本發明方法獲得的一定量的冬蟲夏草保健飲料，其功能性成分的含量與冬蟲夏草子實體相近或高于冬蟲夏草子實體，其效用與直接服用冬蟲夏草相當。更優選地，在本實施例所述的步驟B中，發酵終止的指標為pH值達到4. O 5. 5，折光糖度達到2. 8 3. 8%，同時菌絲體得率干重達到O. 65 O. 85%，上述三種指標(pH值、折光糖度、菌絲體得率)優選為同時達到各自相應的參數，即可終止發酵。另外，在本實施例所述的步驟D中，冬蟲夏草菌發酵液與冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后的自然pH值為6 7,折光糖度為2 6%。一方面，本發明所述步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液中，含有O. I 5mg/100g腺苷以及10 100mg/100g蟲草多糖。因此，在本發明步驟B中所得到的冬蟲夏草菌發酵液里，這兩種功能性成分(腺苷和蟲草多糖)含量的數據范圍，符合現代藥理學研究分析結果中對天然冬蟲夏草含量的數值認定。另一方面，本發明所述步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液中，含有O. 5 10mg/100g腺苷以及10 200mg/100g蟲草多糖。因此，在本發明步驟C中所得到的冬蟲夏草菌絲體提取液里，該兩種功能性成分(腺苷和蟲草多糖)含量的數據范圍，遠超出現代藥理學研究分析對天然冬蟲夏草成分含量的數值認定范圍，且本發明方法所得產物的功能性含量和質量均非常穩定。本發明制備方法的工業化控制能力強，且其成本遠低于天然原料。實施例2 如下將提供本發明制備方法的另一種優選實施例。本實施例的制備方法包括:A、首先，選用食、藥用菌冬蟲夏草(Ophiocordyceps sinensis),將冬蟲夏草菌接入培養液中，并在28°C的溫度下以200次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養96小時，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份12%大麥芽、重量份3%大豆的液體培養基中，接種量為10%，并在23°C的溫度下通氣培養72小時，經過生物發酵，獲得發酵的冬蟲夏草菌絲體以及冬蟲夏草菌發酵液；C、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌絲體進行細胞組織破碎后，用水提取，浸提比為1:2，浸提溫度為90°C，浸提時間為3小時，從而獲得冬蟲夏草菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液以及步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋5倍，從而得到冬蟲夏草保健飲料。實施例3 如下將提供本發明制備方法的再一種優選實施例。本實施例的制備方法包括如下步驟A、將冬蟲夏草菌接入培養液中，并在22°C的溫度下以260次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養80小時，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份10%大麥芽、重量份5%大豆的液體培養基中，接種量為7%，并在25°C的溫度下通氣培養60小時，經過生物發酵，獲得發酵的冬蟲夏草菌絲體以及冬蟲夏草菌發酵液；C、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌絲體進行細胞組織破碎后，用水提取，浸提比為O. 9: 4，浸提溫度為93°C，浸提時間為2. 5小時，從而獲得冬蟲夏草菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液以及步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋4倍，從而得到冬蟲夏草保健飲料。實施例4 本實施例提供一種通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料，所述冬蟲夏草保健飲料是由如下方法制備而成A、將選用食、藥用冬蟲夏草菌接入培養液中，并在18 280C的溫度(本實施例優選為20°C )下以200 300次/分鐘(本實施例優選為260次/分鐘)的震蕩頻率在搖床上震蕩培養72 96小時(本實施例優選為82小時)，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%(本實施例優選為11%)大麥芽、重量份3 6% (本實施例優選為5%)大豆的液體培養基中，接種量為5 10% (本實施例優選為8%)，并在23 27°C (本實施例優選為26°C)的溫度下通氣培養48 72小時(本實施例優選為56小時，經過生物發酵，獲得發酵的冬蟲夏草菌絲體以及冬蟲夏草菌發酵液；C、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌絲體進行細胞組織破碎后，用水提取，浸提比為O. 8 1:2 5 (本實施例優選為1:3)，浸提溫度為90 95°C (本實施例優選為92°C)，浸提時間為2. 5小時，從而獲得冬蟲夏草菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液以及步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到冬蟲夏草保健飲料。其中，在步驟D中用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍，優選地，在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。這些輔料可以提高本發明所述飲料的口感，使得消費者在飲用本發明的保健飲料時，能夠減少或去除中藥的味苦，而更多的是日常飲料的爽口。并且，本發明的冬蟲夏草保健飲料，其功能性成分的含量與冬蟲夏草子實體相近或高于冬蟲夏草子實體，其效用與直接服用冬蟲夏草相當。優選地，在本實施例所述的步驟B中，發酵終止的指標為pH值達到4. O 5. 5，折光糖度達到2. 8 3. 8%，同時菌絲體得率干重達到O. 65 O. 85%，上述三種指標(pH值、折光糖度、菌絲體得率)同時達到各自相應的指標，即可終止發酵。另外，在本實施例所述的步驟D中，冬蟲夏草菌發酵液與冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后的pH值為6 7，折光糖度為2 6%。優選地，所述步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液中，含有O. I 5mg/100g腺苷以及10 100mg/100g蟲草多糖。優選地，所述步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液中，含有O. 5 10mg/100g腺苷以及10 200mg/100g蟲草多糖。
本發明一種通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料的其他實施例與上述實施例1、2和3相同或相近，在此不再贅述。對于本領域技術人員而言，不難從上述實施例I、2和3中獲得相關的技術啟示，并用以制備或生產冬蟲夏草保健飲料。顯而易見，本領域的普通技術人員，可以用本發明的一種通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料及其制備方法，形成各種類型的保健飲料及其制備方法。上述實施例僅供說 明本發明之用，而并非是對本發明的限制，有關技術領域的普通技術人員，在不脫離本發明范圍的情況下，還可以作出各種變化和變型，因此所有等同的技術方案也應屬于本發明的范疇，本發明的專利保護范圍應由各權利要求限定。
權利要求
1.通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法，其特征在于所述制備方法包括如下步驟 A、將冬蟲夏草菌接入培養液中，并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養72 96小時，獲得菌種液； B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養基中，接種量為5 10%，并在23 27°C的溫度下通氣培養48 72小時，經過生物發酵，獲得發酵的冬蟲夏草菌絲體以及冬蟲夏草菌發酵液； C、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌絲體進行細胞組織破碎后，用水提取，浸提比為0.8 1:2 5，浸提溫度為90 95°C，浸提時間為2 3小時，從而獲得冬蟲夏草菌絲體提取液； D、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液以及步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到冬蟲夏草保健飲料。
2.根據權利要求I所述的通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法，其特征在于在所述步驟D中用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍。
3.根據權利要求2所述的通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法，其特征在于在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。
4.根據權利要求2或3所述的通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法，其特征在于在所述步驟B中，發酵終止的指標為pH值達到4. 0 5. 5，折光糖度達到2. 8 3.8%,以及菌絲體得率干重達到0. 65 0. 85%。
5.根據權利要求4所述的通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法，其特征在于在所述步驟D中，冬蟲夏草菌發酵液與冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后的pH值為6 7，折光糖度為2 6%。
6.根據權利要求I或4所述的通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法，其特征在于所述步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液中，含有0. I 5mg/100g腺苷以及10 100mg/100g蟲草多糖。
7.根據權利要求I或4所述的通過液體深層發酵制備冬蟲夏草保健飲料的方法，其特征在于所述步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液中，含有0. 5 10mg/100g腺苷以及10 200mg/100g蟲草多糖。
8.—種通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料，其特征在于所述冬蟲夏草保健飲料是由如下方法制備而成 A、將冬蟲夏草菌接入培養液中，并在18 28°C的溫度下以200 300次/分鐘的震蕩頻率在搖床上震蕩培養72 96小時，獲得菌種液； B、將步驟A中得到的菌種液接入含重量份8 12%大麥芽、重量份3 6%大豆的液體培養基中，接種量為5 10%，并在23 27°C的溫度下通氣培養48 72小時，經過生物發酵，獲得發酵的冬蟲夏草菌絲體以及冬蟲夏草菌發酵液； C、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌絲體進行細胞組織破碎后，用水提取，浸提比為0.8 1:2 5，浸提溫度為90 95°C，浸提時間為2 3小時，從而獲得冬蟲夏草菌絲體提取液； D、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液以及步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2 5倍，從而得到冬蟲夏草保健飲料。
9.根據權利要求8所述的通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料，其特征在于在所述步驟D中用水或菌絲體提取液將所述混合液稀釋2 5倍。
10.根據權利要求8所述的通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料，其特征在于在所述稀釋液中，還加入飲料輔料，所述飲料輔料包括蔗糖、檸檬酸、本草苷提取物及蜂蜜中的一種或幾種。
全文摘要
本發明涉及通過液體深層發酵制備的冬蟲夏草保健飲料及其制備方法。其中制備方法包括A、將冬蟲夏草菌接入培養液中，并在搖床上震蕩培養，獲得菌種液；B、將步驟A中得到的菌種液接入含大麥芽、大豆的液體培養基中，通氣培養后，獲得發酵的冬蟲夏草菌絲體以及冬蟲夏草菌發酵液；C、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌絲體進行細胞組織破碎后，用水提取，從而獲得冬蟲夏草菌絲體提取液；D、將步驟B中得到的冬蟲夏草菌發酵液以及步驟C中得到的冬蟲夏草菌絲體提取液相互混合后，將混合液稀釋2～5倍，從而得到冬蟲夏草保健飲料。本發明采用液體深層發酵技術，使得冬蟲夏草菌種能夠在液體培養基中進行工業化的大量繁殖，因此，工藝簡單、成本較低。
文檔編號A23L1/29GK102805401SQ20121025493
公開日2012年12月5日 申請日期2012年7月20日 優先權日2012年7月20日
發明者黃曉青 申請人:黃曉青