一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝。主要解決了現有的接種工藝滅菌程度以及自動化程度都不高的問題。包括以下步驟：對無菌操作箱以及整個接種發酵裝置進行空氣排空且以蒸汽滅菌；把裝有菌種的管體放入無菌操作箱內并滅菌；打開接種罐上的接種頭并倒入菌種；菌種通過管道輸送到發酵箱內。整個裝置以及裝有菌種的管體均進行了徹底的滅菌，不會殘留任何雜菌，提高了發酵的有效性，工藝操作簡單，不繁瑣；對菌種的添加采用自動化輸送，科學高效。
【專利說明】一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種工業發酵領域，具體涉及一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝。
【背景技術】
[0002]發酵有時也寫作酸酵，其定義由使用場合的不同而不同。通常所說的發酵，多是指生物體對于有機物的某種分解過程。
[0003]發酵時需要在發酵箱內接入菌種(一般為人工接入)，且不能混入雜菌，這樣就對滅菌效果有很高的要求。
[0004]通常在工業上的接種為人工點火式接種，在發酵箱上打開一個小口，在開口周圍涂上酒精并點燃，一段時間后再倒入從實驗室中取來的帶有菌種的藥劑。這種方式的接種雖然在一定程度上消滅了雜菌，但是還殘留了少量雜菌，同時點火式接種難度較高，而且對于工作人員還有一定的危險性。
[0005]另外一種常用的接種方式是在發酵箱體側面打開一個小口，再放一個無菌操作箱，工作人員通過無菌操作箱已經消毒，倒入藥劑。這種方式雖然能保證滅菌的程度，但是操作很繁瑣，沒有實現自動 化，導致效率較低。
【發明內容】
[0006]為了克服【背景技術】的不足，本發明提供一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝，主要解決了現有的接種工藝滅菌程度以及自動化程度都不高的問題。
[0007]本發明所采用的技術方案是:一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝，包括以下步驟:
(1)滅菌，先進行管道滅菌，操作閥門使管道的兩端分別與蒸汽源及外界相通，此時管道與發酵罐之間不通，管道內充入溫度為130—145°C、壓力0.2—0.3MPa的蒸汽，排空管道內的原有空氣，持續10 —15分鐘；然后，進行接種罐以及經過管道系統的發酵罐滅菌，操作閥門使管道與外界關閉且管道與發酵罐相通，蒸汽對接種罐以及發酵罐內進行滅菌持續10 —15分鐘；最后，進行無菌操作箱滅菌，關閉無菌操作箱的門，打開操作箱內的紫外線燈，對無菌操作箱內進行滅菌，持續10 —15分鐘；
(2)從實驗室中取出裝有菌種的管體，打開四分之一無菌操作箱的側開門，同時打開箱體內的正壓無菌風口，把管體放在箱體內一側，打開紫外線燈，關上玻璃門，持續10 —15分鐘；
(3)關閉紫外線燈，打開無菌操作箱的玻璃門，再打開接種罐上的接種蓋，將接種蓋掛于旁邊的支架上，遠離操作箱底，然后把菌種倒入接種罐內，蓋上接種蓋，關閉玻璃門；
(4)打開接種罐上的增壓裝置，增壓到0.3—0.35MPa，接種罐內的壓力大于發酵罐內的壓力，菌種就通過管道被輸送到了發酵罐內。
[0008]步驟(1)中的無菌蒸汽為135°C，0.25MPa ;上述的滅菌持續時間為15分鐘，步驟(4)中增壓到0.3MPa。
[0009]步驟(2 )中的菌種3% — 5%的液體菌種。
[0010]所述的菌種為5%的液體菌種。
[0011]本發明的有益效果是:由于采取上述技術方案，整個裝置以及裝有菌種的管體均進行了徹底的滅菌，不會殘留任何雜菌，提高了發酵的有效性，工藝操作簡單，不繁瑣；對菌種的添加采用自動化輸送，科學高效，增加了接種的成功率。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0012]圖1為本發明涉及裝置的結構示意圖。
[0013]圖中1、接種罐；2、無菌操作箱；3、發酵罐；4、管道；5、閥門；6、增壓裝置。
【具體實施方式】
[0014]下面結合附圖對本發明實施例作進一步說明:
一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝，包括以下步驟:
(I)滅菌，先進行管道滅菌，操作閥門使管道的兩端分別與蒸汽源及外界相通，此時管道與發酵罐3之間不通，管道4內充入溫度為130— 145°C、壓力0.2—0.3MPa的蒸汽，排空管道4內的原有空氣，持續10 —15分鐘；然后，進行接種罐I以及經過管道系統的發酵罐3滅菌，操作閥門使管道與外界關閉且管道與發酵罐3相通，蒸汽對接種罐I以及發酵罐3內進行滅菌持續10 —15分鐘；最后，進行無菌操作箱滅菌，關閉無菌操作箱的門，打開操作箱內的紫外線燈，對無菌操作箱內進行滅菌，持續10 —15分鐘；
整個接種發酵裝置包括內設有接種罐I的無菌操作箱2以及發酵罐3，無菌操作箱2與外部的發酵罐3通過管道4連接，且管道4上設有控制開關以及控制換向的閥門5，無菌操作箱2采用側開玻璃門密閉結構;無菌操作箱體2上部設有紫外線燈，箱體內設有正壓無菌風口。
[0015](2)從實驗室中取出裝有菌種的管體，打開四分之一無菌操作箱的側開門，同時打開箱體內的正壓無菌風口，把管體放在箱體內一側，打開紫外線燈，關上玻璃門，持續10—15分鐘；在打開箱體的同時，打開正壓吹風口，這樣可以保證雜物不會隨著門的打開而進入。
[0016](3)關閉紫外線燈，打開無菌操作箱的玻璃門，再打開接種罐I上的接種蓋，將接種蓋掛于旁邊的支架上，遠離操作箱底，然后把菌種倒入接種罐I內，蓋上接種蓋，關閉玻璃門；接種蓋為上下兩層把手式的鎖控，這樣設計可以避免接種蓋感染雜菌從而影響接種。
[0017](4)打開接種罐I上的增壓裝置，增壓到0.3—0.35MPa，接種罐I內的壓力大于發酵罐3內的壓力，菌種就通過管道被輸送到了發酵罐內。
[0018]優選方案為:步驟(1)中的無菌蒸汽為135°C，0.25MPa ;上述的滅菌持續時間為15分鐘，步驟(4)中增壓到0.3MPa。
[0019]步驟(2)中的菌種3% — 5%的液體菌種。經實驗驗證，優選方案為:所述的菌種為5%的液體菌種。`
[0020]各位技術人員須知:雖然本發明已按照上述【具體實施方式】做了描述，但是本發明的發明思想并不僅限于此發明，任何運用本發明思想的改裝，都將納入本專利專利權保護范圍內。
【權利要求】
1.一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝，其特征在于:包括以下步驟: (1)滅菌，先進行管道滅菌，操作閥門使管道的兩端分別與蒸汽源及外界相通，此時管道與發酵罐之間不通，管道內充入溫度為130— 145°C、壓力0.2—0.3MPa的蒸汽，排空管道內的原有空氣，持續10 —15分鐘；然后，進行接種罐以及經過管道系統的發酵罐滅菌，操作閥門使管道與外界關閉且管道與發酵罐相通，蒸汽對接種罐以及發酵罐內進行滅菌持續10 —15分鐘；最后，進行無菌操作箱滅菌，關閉無菌操作箱的門，打開操作箱內的紫外線燈，對無菌操作箱內進行滅菌，持續10 —15分鐘； (2)從實驗室中取出裝有菌種的管體，打開四分之一無菌操作箱的側開門，同時打開箱體內的正壓無菌風口，把管體放在箱體內一側，打開紫外線燈，關上玻璃門，持續10 —15分鐘； (3)關閉紫外線燈，打開無菌操作箱的玻璃門，再打開接種罐上的接種蓋，將接種蓋掛于旁邊的支架上，遠離操作箱底，然后把菌種倒入接種罐內，蓋上接種蓋，關閉玻璃門； (4)打開接種罐上的增壓裝置，增壓到0.3—0.35MPa，接種罐內的壓力大于發酵罐內的壓力，菌種就通過管道被輸送到了發酵罐內。
2.根據權利要求1所述的一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝，其特征在于:步驟Cl)中的無菌蒸汽為135°C，0.25MPa;上述的滅菌持續時間為15分鐘，步驟(4)中增壓到0.3MPa。
3.根據權利要求1所述的一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝，其特征在于:步驟(2)中的菌種3% — 5%的液體菌種。
4.根據權利要求3所述的一種以無菌操作箱的方式改良接種工藝，其特征在于:所述的菌種為5%的液體菌種。
【文檔編號】C12N1/00GK103571750SQ201310292058
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2013年7月10日 優先權日:2013年7月10日
【發明者】章方國 申請人:溫州兆曜機械科技有限公司