本發明涉及生物發酵領域，尤其涉及一種柑橘酵素的制備方法。
背景技術：
：柑橘果實含有的人體必需脂肪酸、生物堿、酚類、蛋白質、維生素，并含有18種人體必需氨基酸，其微量元素也很豐富，此外還含有較多的還原多糖和色素類物質，尤其是含有豐富的天然類黃酮類物質。具有降血糖、抗疲勞、提高機體免疫力作用、抗氧化防衰老作用、抗癌抗腫瘤作用。柑橘中所含多糖具有良好的調節作用已被大量研究所證實，且還具有提高耐缺氧能力、增強免疫等多種生理活性，許多研究表明，柑橘多糖具有很多免疫調節功能，包括各種免疫細胞的活化，中醫最新研究顯示，柑橘多糖能夠增強細胞介入免疫和體液免疫反應；柑橘的成熟漿果富含豐富的色素類多酚物質，黃酮和類黃酮等，許多研究工作者的試驗都證明了類黃酮類物質具有清除自由基和抗氧化的功能，其抗氧化能力是維生素e的50倍；研究發現柑橘多糖和色素類多酚還對腫瘤和癌癥具有一定預防和抵抗作用，通過臨床實驗研究發現，類黃酮類物質可以預防直腸癌，并且對直腸癌的預防性高于結腸癌。因此，提出一種柑橘酵素的制備方法很有實際意義。技術實現要素：本發明正是針對現有技術存在的不足，提供了一種柑橘酵素的制備方法。為解決上述問題，本發明所采取的技術方案如下：一種柑橘酵素的制備方法，柑橘酵素的制備方法，包括以下步驟：s1：選果取新鮮柑橘果，剔除病斑、污染果及爛果，選留合格柑橘果；s2：帶皮打漿將柑橘果洗凈，帶皮壓榨打漿，棄掉種子和皮渣，收集果漿；s3：復合酶解先向果漿內添加果膠酶和纖維素復合酶進行一次酶解，添加量為30-50mg/l，果膠酶和纖維素復合酶的重量比為1∶1，酶解溫度50-60℃，酶解時間2-3h；再向果漿內添加蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶進行二次酶解，蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶的添加量分別為15-20mg/l、15-20mg/l、30-50mg/l，酶解溫度40-50℃，酶解時間1-2h；s4：復合發酵向s3中的果漿中接種入酵母菌、乳酸菌和醋酸菌，30℃下發酵培養1-2天，取上清汁液，其中入酵母菌、乳酸菌和醋酸菌的接種量分別為2-3％、3-5％、1-2％；s5：調配在s4中的上清汁液中加入10g/l木糖醇，得到柑橘酵素液；s6：制粉取s5中的柑橘酵素液進行冷凍干燥，碎粉，得到柑橘酵素粉。優選地，所述果膠酶是聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶和果膠酯酶中的任意一種或組合。優選地，所述蛋白酶為胃蛋白酶、胰蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的任意一種或組合。優選地，所述酵母菌是酒精酵母和生香酵母中的任意一種。優選地，所述乳酸菌為植物乳桿菌、嗜熱鏈球菌、保加利亞乳桿菌、瑞士乳桿菌、雙歧桿菌中的任意一種或幾種。優選地，在s6中冷凍干燥方式為：取s5中的柑橘酵素液-20℃速凍2-4h后，至于真空冷凍干燥機中凍干，凍干溫度-60℃，真空度70pa。本發明與現有技術相比較，本發明的實施效果如下：本發明所述的柑橘酵素的制備方法，利用傳統水果柑橘作為原料制備酵素，發酵所得酵素產品不僅具有豐富的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶、超氧化物歧化酶、代謝產物和大量的益生菌細胞，而且還具有微量元素、礦物質、維生素、氨基酸、蛋白質、碳水化合物等，具有減輕腸道負荷，激活健康循環體系，調節微生態平衡，增強人體細胞活力，凈化血液，促進新陳代謝，增強新陳代謝功能，長期食用可達到排毒養顏、軟化血管、改善微循環、提高機體抗氧化能力、延緩衰老、緩解視疲勞等的醫療價值和保健作用。此外，其制備條件模擬酵素的自然生成條件，原理科學，設備簡單，適于大規模生產。附圖說明圖1是本發明提出的柑橘酵素的制備方法的流程示意圖。具體實施方式下面將結合具體的實施例來說明本發明的內容。如圖1所示，圖1是本發明提出的柑橘酵素的制備方法的流程示意圖。參照圖1，一種柑橘酵素的制備方法，柑橘酵素的制備方法，包括以下步驟：s1：選果取新鮮柑橘果，剔除病斑、污染果及爛果，選留合格柑橘果；s2：帶皮打漿將柑橘果洗凈，帶皮壓榨打漿，棄掉種子和皮渣，收集果漿；s3：復合酶解先向果漿內添加果膠酶和纖維素復合酶進行一次酶解，添加量為30-50mg/l，果膠酶和纖維素復合酶的重量比為1∶1，酶解溫度50-60℃，酶解時間2-3h；再向果漿內添加蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶進行二次酶解，蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶的添加量分別為15-20mg/l、15-20mg/l、30-50mg/l，酶解溫度40-50℃，酶解時間1-2h；s4：復合發酵向s3中的果漿中接種入酵母菌、乳酸菌和醋酸菌，30℃下發酵培養1-2天，取上清汁液，其中入酵母菌、乳酸菌和醋酸菌的接種量分別為2-3％、3-5％、1-2％；s5：調配在s4中的上清汁液中加入10g/l木糖醇，得到柑橘酵素液；s6：制粉取s5中的柑橘酵素液進行冷凍干燥，碎粉，得到柑橘酵素粉。上述方案中，所述果膠酶是聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶和果膠酯酶中的任意一種或組合，所述蛋白酶為胃蛋白酶、胰蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的任意一種或組合。所述酵母菌是酒精酵母和生香酵母中的任意一種。所述乳酸菌為植物乳桿菌、嗜熱鏈球菌、保加利亞乳桿菌、瑞士乳桿菌、雙歧桿菌中的任意一種或幾種。在s6中冷凍干燥方式為：取s5中的柑橘酵素液-20℃速凍2-4h后，至于真空冷凍干燥機中凍干，凍干溫度-60℃，真空度70pa。。本發明與現有技術相比較，本發明的實施效果如下：實施例一挑選健康柑橘，清洗，瀝干；將帶皮柑橘破碎打漿，分離種子和皮渣，得果汁。采用聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶對上述果汁進行一次酶解，加熱溫度50℃，聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶的加入量15g/t，酶解時間2h。采用蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶進行二次酶解，加熱溫度40℃，蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶的加入量15g/t，酶解時間2h。將酶解后的柑橘果汁分離取汁，加入酒精酵母菌(接種量為2％)、植物乳桿菌(接種量為5％)、醋酸桿菌(接種量為1％)進行復合發酵，發酵溫度為30℃，發酵時間24h。發酵結束后，收集上清液，即得柑橘酵素液。將所述柑橘酵素液進行真空冷凍干燥；將干燥好的枸杞酵素粉碎，即得柑橘酵素粉。實施例2：挑選健康柑橘，清洗，瀝干；將帶皮柑橘破碎打漿，分離種子和皮渣，得果汁。采用聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶進行一次酶解，加熱溫度50℃，聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶的加入量15g/t，酶解時間2h；采用蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶進行二次酶解，加熱溫度40℃，蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶的加入量15g/t，酶解時間2h。將酶解后的柑橘果汁分離取汁，加入酒精酵母菌(接種量為2％)、植物乳桿菌(接種量為5％)、醋酸桿菌(接種量為1％)進行復合發酵，發酵溫度為30℃，發酵時間24h。發酵結束后，收集上清液，即得柑橘酵素液。將所述柑橘酵素液進行真空冷凍干燥；將干燥好的枸杞酵素粉碎，即得柑橘酵素粉。實施例3挑選健康柑橘，清洗，瀝干；將帶皮柑橘破碎打漿，分離種子和皮渣，得果汁。采用聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶進行一次酶解，加熱溫度50℃，聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶的加入量15g/t，酶解時間2h；采用蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶進行二次酶解，加熱溫度40℃，蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶的加入量15g/t，酶解時間2h。將酶解后的柑橘果汁分離取汁，加入酒精酵母菌(接種量為2％)、植物乳桿菌(接種量為5％)、醋酸桿菌(接種量為1％)進行復合發酵，發酵溫度為30℃，發酵時間24h。發酵結束后，收集上清液，即得柑橘酵素液。將所述柑橘酵素液進行真空冷凍干燥；將干燥好的枸杞酵素粉碎，即得柑橘酵素粉。柑橘酵素活性成分含量將實施例1-3的柑橘酵素分別按照sn/t4260-2015中多糖測定方法和ny/t2336-2013食品總黃酮測定方法和gb/t5009.171～2003保健食品中超氧化物歧化酶(sod)活性的測定方法分別測量多糖和總黃酮含量以及sod活性，取鮮榨的柑橘果汁作為對比例。結果如下表所示：實施例1實施例2實施例3對比例多糖(％)25.826.025.911.85總黃酮(g/l)10.2310.0910.166.71sod活性(cfu/ml)172.15171.98172.36120.84結果顯示，本發明的柑橘酵素包含豐富的多糖和總黃酮活性成分，具有優異的sod活性，較柑橘果汁具有顯著提高，取得了顯著的技術效果，是一種非常優異的保健產品。本發明所述的柑橘酵素的制備方法，利用傳統水果柑橘作為原料制備酵素，發酵所得酵素產品不僅具有豐富的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶、超氧化物歧化酶、代謝產物和大量的益生菌細胞，而且還具有微量元素、礦物質、維生素、氨基酸、蛋白質、碳水化合物等，具有減輕腸道負荷，激活健康循環體系，調節微生態平衡，增強人體細胞活力，凈化血液，促進新陳代謝，增強新陳代謝功能，長期食用可達到排毒養顏、軟化血管、改善微循環、提高機體抗氧化能力、延緩衰老、緩解視疲勞等的醫療價值和保健作用。此外，其制備條件模擬酵素的自然生成條件，原理科學，設備簡單，適于大規模生產。以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，并不用以限制本發明，凡在本發明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。當前第1頁12