本發明涉保健食品領域，尤其涉及一種增強人體免疫力和抗抑郁保健食品的制備方法。
背景技術：
人體的免疫功能是一道防線，護衛著人體健康；又是一種祛病能力，在人患病之后可促進康復，這就成為人體強身抗病的根本所在。然而，在日常生活中，有許多因素使人體免疫力下降或出現免疫紊亂。比如，膳食不合理，蛋白質、維生素、微量元素攝入不足；生活不規律，睡眠不足；缺少運動鍛煉，對環境的適應能力較差；精神緊張，過度勞累；使用激素、抗生素等藥物的不良反應，抑制了免疫力；患急性病時暫時降低了免疫力，患慢性病時則長期處于免疫力低下狀態等等。若長時間免疫力低下，人體就會出現健康和疾病的中間狀態－亞健康狀態。而亞健康狀態是不斷變化發展的，如不能及時得到改善，很有可能向疾病狀態轉化。所以，提高人體自身免疫功能，是遠離亞健康，走向健康的根本方法。
大量的研究已證實精神狀態和免疫系統之間存在相互作用，即精神活動能調節免疫功能，而免疫系統的紊亂不僅能導致機體疾病，也與心理精神、行為、性格和衰老的變化有關。人體的免疫力低下與抑郁癥息息相關。抑郁癥能導致人體免疫力下降，免疫力下降又進一步加重抑郁癥癥狀。然而目前安全、有效、適于長期服用的增強人體免疫力又能抗抑郁的藥物仍然缺乏。
技術實現要素：
本發明要解決的技術問題是：提供一種增強人體免疫力和抗抑郁保健食品的制備方法，本制備方法操作簡單、安全有效，按照該方法制備的保健食品能有效提高機體免疫力，抗抑郁，安全有效。
為實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：
一種增強人體免疫力和抗抑郁保健食品的制備方法，包括如下步驟：
步驟1、按重量份數準備原料，所述原料及其重量配比為：靈芝2～10份、刺五加6～18份、三七4～12份、梔子1～6份；
步驟2、將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，備用；
步驟3、將靈芝、三七粉碎，過篩，得細粉，備用；
步驟4、將步驟2所得清膏干燥得干浸膏；
步驟5、將步驟4所得干浸膏粉碎過篩，得干浸膏粉；
步驟6、將步驟3所得細粉與步驟5所得干浸膏粉混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤劑制軟材；
步驟7、將步驟6所得軟材過篩制粒，得濕顆粒，濕顆粒干燥，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
所述步驟1中，所述原料及其重量配比為：靈芝3～8份、刺五加7～15份、三七5～10份、梔子2～5份。
所述步驟1中，所述原料及其重量配比為：靈芝4份、刺五加12份、三七6份、梔子2份。
本發明中所提到的靈芝為為多孔菌科真菌赤芝ganodermalucidum(leyss.exfr.)karst.或紫芝ganodermasinensezhao，xuetzhang的干燥子實體。全年采收，除去雜質，剪除附有朽木、泥沙或培養基質的下端菌柄，陰干或在
本發明中所提到的刺五加為五加科植物刺五加acanthopanaxseuticosus(rupr.etmaxim.)harms的干燥根和根壟或蓮。春、秋二季采收，洗凈，干燥，即《中國藥典》(2015年版，一部)收載的刺五加。
本發明中所提到的三七為五加科植物三七parmxnotoginseng(burk.)f.h.chen的干燥根和根莖。秋季花開前采挖，洗凈，分開主根、支根及根莖，干燥。支根習稱“筋條”，根莖習稱“剪口”，即《中國藥典》(2015年版，一部)收載的三七。
本發明中所提到的梔子為為菌草科植物扼子ganiemaellis的干燥成熟果實。
本發明所提到的藥學上可接受的輔料，包括填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質等。填充劑包括：淀粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括：淀粉、預膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉等；潤滑劑包括：硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括：淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括：糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括：甜味劑及各種香精；防腐劑包括：尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質包括：peg6000，peg4000，蟲蠟等。
靈芝味甘，性平，歸心、肺、肝、腎經，具有補氣安神，止咳平喘的作用，用于心神不寧，失眠心悸，肺虛咳喘，虛勞短氣，不思飲食。
刺五加味辛、微苦，溫，歸脾、腎、心經，具有益氣健脾，補腎安神的作用，用于脾肺氣虛，體虛乏力，食欲不振，肺腎兩虛，久咳虛喘，腎虛腰膝酸痛，心脾不足，失眠多夢。
三七味甘、微苦，性溫，歸肝、胃經。具有散瘀止血，消腫定痛的作用，用于咯血，吐血，鯉血，便血，崩漏，外傷出血，胸腹刺痛，跌撲腫痛。
梔子味苦，性寒，歸心、肺、三焦經；具有瀉火除煩，清熱利濕，涼血解毒的作用，用于熱病心煩，濕熱黃疸，淋證澀痛”血熱吐衄，目赤腫痛，火毒瘡瘍；外治扭挫傷痛。
與現有技術相比，本發明具有以下有益效果：
(1)本發明選用靈芝、刺五加、三七、梔子作為原料藥，通過科學組方、按一定的重量配比組成。經動物試驗證明，具有增強免疫、抗抑郁的作用，本發明工藝簡單，操作簡便，原料來源價廉易得，最后所得成品率高，安全有效。
(2)本發明用藥精妙，配伍得當，諸藥合藥，能有效增強免疫和抗抑郁。本發明原料中，靈芝歸心、肺、肝、腎經，功能重在補氣安神；刺五加歸脾、腎、心經，益氣健脾，補腎安神；三七歸肝、胃經，散瘀止血，消腫定痛；梔子歸心、肺、三焦經，瀉火除煩。本方以靈芝為君藥，取其補氣安神之功效，以刺五加為臣藥，共奏益氣、安神的功效，佐以三七、梔子，瀉火除煩、散瘀定痛。全方配方相輔相成，治療衛氣失常所致的衛氣虛損、肝郁化滯，從而起到增強免疫力和抗抑郁的作用。
(3)本發明的原料藥均為常用的傳統中藥，易于獲得道地藥材，原料來源穩定，質量易于控制。
(5)本發明中的靈芝和三七未經提取，直接以全粉入藥，最大限度保留了有效成分，減少了用藥劑量，同時以粉末入藥，減少了輔料的用量。本發明采用科學、合理的制備方法，制備出安全有效的制劑，使得調節機體免疫力的效果更加穩定、可控。
(6)本發明采用了口服制劑，方便生產、儲存、運輸、攜帶和服用。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明作進一步說明，本發明的方式包括但不僅限于以下實施例。
一種增強人體免疫力和抗抑郁保健食品的制備方法，包括如下步驟：
步驟1、按重量份數準備原料，所述原料及其重量配比為：靈芝2～10份、刺五加6～18份、三七4～12份、梔子1～6份；
步驟2、將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，備用；
步驟3、將靈芝、三七粉碎，過篩，得細粉，備用；
步驟4、將步驟2所得清膏干燥得干浸膏；
步驟5、將步驟4所得干浸膏粉碎過篩，得干浸膏粉；
步驟6、將步驟3所得細粉與步驟5所得干浸膏粉混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤劑制軟材；
步驟7、將步驟6所得軟材過篩制粒，得濕顆粒，濕顆粒干燥，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
所述步驟1中，所述原料及其重量配比為：靈芝3～8份、刺五加7～15份、三七5～10份、梔子2～5份。
所述步驟1中，所述原料及其重量配比為：靈芝4份、刺五加12份、三七6份、梔子2份。
本發明在制備過程中，所述保健食品是以靈芝、刺五加、三七、梔子為原料藥，加入藥學上可接受的輔料按照常規方法制備而成的制劑；所述制劑由刺五加、梔子用常規方法提取制備成提取物，靈芝、三七制備成細粉制成；所述提取物為水煎物，所述制劑為口服制劑，所述口服制劑可以制成顆粒劑、片劑或膠囊劑中的任意一種。
為了使本技術領域技術人員更好地理解本發明的精髓，特提供以下實施實例加以說明。
實施例1
1.靈芝粉碎工藝考察
方法：稱取靈芝凈藥材3份，各50g，于60℃低溫干燥后，粉碎成細粉，過100目篩，稱量，計算出粉率，結果見表1。
表1藥材粉碎工藝考察結果
試驗結果表明，靈芝粉碎的平均出粉率為96.28％。
2.三七粉碎工藝考察
方法：稱取三七凈藥材3份，各50g，于60℃低溫干燥后，粉碎成細粉，過100目篩，稱量，計算出粉率，結果見表1。
表1藥材粉碎工藝考察結果
試驗結果表明，靈芝粉碎的平均出粉率為95.61％。
實施例2
組成：靈芝40g、刺五加120g、三七60g、梔子20g、硬脂酸鎂3g。
制備方法：按重量份數稱取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過篩，得細粉，與干浸膏混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤劑制軟材，過篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
實施例3
組成：靈芝10g、刺五加40g、三七20g、梔子20g、微晶纖維素10g、硬脂酸鎂2g。
制備方法：按重量份數稱取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過篩，得細粉，與向晶纖維素、干浸膏混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤劑制軟材，過篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，壓片，包裝，即得片劑。
實施例4
組成：靈芝50g、刺五加100g、三七100g、梔子80g、硬脂酸鎂5g。
制備方法：按重量份數稱取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過篩，得細粉，與干浸膏混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤劑制軟材，過篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
實施例5
組成：靈芝60g、刺五加120g、三七150g、梔子10g、微晶纖維素15g、硬脂酸鎂3g。
制備方法：按重量份數稱取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過篩，得細粉，與向晶纖維素、干浸膏混合均勻，加入適量85％乙醇為濕潤劑制軟材，過篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，壓片，包裝，即得片劑。
實施例6
組成：靈芝40g、刺五加50g、三七70g、梔子30g、硬脂酸鎂4g。
制備方法：按重量份數稱取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過篩，得細粉，與干浸膏混合均勻，加入加入適量85％乙醇為濕潤劑制軟材，過篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
實施例7
組成：靈芝30g、刺五加80g、三七40g、梔子60g、硬脂酸鎂2g。
制備方法：按重量份數稱取原料；將刺五加、梔子加水煎煮，煎液濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮得到清膏，干燥，得干浸膏；將靈芝、三七粉碎，過篩，得細粉，與干浸膏混合均勻，加入加入適量85％乙醇為濕潤劑制軟材，過篩制粒，得濕顆粒，干燥，加入硬脂酸鎂，整粒，裝膠囊，包裝，即得膠囊劑。
實施例8
增強免疫力試驗
(一)受試藥
本發明制劑1：按實施例2制備得膠囊劑，加水制成混懸液。
本發明制劑2：按實施例2制備得片劑，加水制成混懸液。
陰性對照：蒸餾水。
(二)試驗動物：雌性icr小鼠，體重18-22g，由四川省醫學科學院實驗動物研究所提供。
(三)試驗數據采用spss10.0forwindows軟件包處理。
(四)試驗方法及結果
按照《保健食品檢驗與評價技術規范》(2003年版)操作。
1、對小鼠細胞免疫功能的影響
1.1對小鼠遲發型變態反應(dth)的影響
1.1.1試驗方法：遲發型變態反應(dth)(耳腫脹法)
按照《保健食品檢驗與評價技術規范》(2003年版)操作。灌胃30天后，給小鼠腹部皮膚脫毛，約3cm×3cm，用dnfb溶液50μl均勻涂抹致敏。5天后，用dnfb溶液10μl涂抹于小鼠右耳(兩面)進行攻擊。攻擊后24小時處死小鼠，剪下左右耳殼，用打孔器取下直徑8mm的耳片，稱重。
1.1.2試驗結果下表。
表1對小鼠遲發型變態反應(dth)的影響
由表1可見，連續灌胃30天后，本發明制劑中、高劑量組動物的耳朵腫脹度與陰性對照組相比較均有顯著性差異(p<0.05)。
1.2對cona誘導的小鼠淋巴細胞轉化試驗的影響
1.2.1試驗方法：cona誘導的小鼠淋巴細胞轉化試驗(mtt法)
無菌取脾，置于盛有適量無菌hank's液的平皿中，制成細胞懸液，經200目篩網過濾。用hank's液洗2次，每次離心l0min(1000r/min)。然后將細胞懸浮于1ml完全培養液中，計數活細胞數，用rpmi1640培養液調整細胞濃度為3*106個/ml.。再將細胞懸液分兩孔加入24孔培養板中，每孔1ml，在其中一孔加入75ulcona液(相當于7.5ul/ml)，另一孔作為對照，置5％co2，37℃二氧化碳孵箱中培養72h。培養結束前4h輕輕吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的rpmi1640培養液，同時加入mtt(5mg/ml)50ul/孔，繼續培養4h。培養結束后，每孔加入1ml酸性異丙醇，吹打混勻，使紫色結晶完全溶解，然后分裝到96孔培養板中，每個孔作3個平行孔，用酶標儀，以570nm波長測定光密度值。淋巴細胞的增殖能力用加cona孔的光密度值減去不加cona孔的光密度值表示。
1.2.2試驗結果下表。
表2對cona誘導的小鼠淋巴細胞轉化試驗的影響
由表2可見，本發明制劑1、2的中高劑量組連續對小鼠灌胃30天后，小鼠的淋巴細胞增殖能力與陰性對照組相比較均有顯著性差異(p<0.05)。
1.3結論
由表1、表2的結果表明，本發明對小鼠的細胞免疫試驗結果呈陽性。
2對小鼠nk細胞活性的影響
2.1試驗方法：nk細胞活性測定(乳酸脫氫酶ldh測定法)
頸椎脫臼處死動物，取出脾臟，撕碎，過200目篩網后，用hank’s液洗3次，每次1000r/min離心10min，取細胞漿，滅菌水裂解紅細胞，臺酚蘭染色計數(應在95％以上)，用完全1640培養液配成2x107個/ml細胞懸液。將各只小鼠的細胞懸液取300μl分置于96孔培養板中，每孔100μl，每孔加靶細胞(yac-1細胞，4x105個/m)100μl，同時做靶細胞自然釋放孔(靶細胞100μl，培養液100μl)及最大釋放孔(靶細胞100μ+2.5％triton100μl)各3孔，37℃5％co2培養4小時，取出1500r/min離心5min。將各孔上清液100μl置于另一培養板中，每孔加入100μl基質，10分鐘后加1mol/lhcl30μl終止反應，在490nm處測定od值，計算nk細胞活性率。
2.2試驗結果，見表3。
表3對小鼠nk細胞活性的影響
由表3可見，本發明制劑1、2的中高劑量組連續對小鼠灌胃30天后，小鼠nk細胞活性與陰性對照組相比，經統計學處理，均有顯著性差異(p<0.05)。
2.3結論
表3的結果表明，本發明對小鼠nk細胞活性試驗結果陽性。
綜上，本發明對小鼠細胞免疫試驗結果呈陽性、對小鼠nk細胞活性試驗結果呈陽性。本發明具有增強免疫力的作用。
實施例9
抗抑郁作用試驗
(一)受試藥
本發明制劑1：按實施例2制備得膠囊劑，加水制成混懸液。
本發明制劑2：按實施例2制備得片劑，加水制成混懸液。
陰性對照：蒸餾水。
(二)試驗動物：雄性icr小鼠，體重20-24g，由四川省醫學科學院實驗動物研究所提供。
(三)試驗數據采用spss10.0forwindows軟件包處理。
(四)試驗方法及結果
1動物及分組
健康雄性昆明種小鼠，體質量20-24g，清潔級動物。動物經3天適應性喂養后，隨機分組，自由攝食和飲水，并維持室溫(22±2)℃，相對濕度(55±5)％，每籠5只。行為學實驗于在安靜溫暖的環境中，各實驗組平行進行。
2懸尾實驗
取70只雄性小鼠，實驗室適應3天后，進行懸尾實驗篩選，剔除不動時間不足20s或超過160s的小鼠，選取50只，按不動時間長短隨機分為陰性對照組，試驗組，每組10只；每天上午按時給藥，連續7天，每次給藥前1h禁食不禁水。第3次和第7次給藥后1h進行懸尾實驗。動物為克服不正常體位而掙扎活動，但活動一段時間后，出現間斷性不動，顯示失望狀態。觀察6min，記錄后5min內的累計不動時間。
試驗結果見表4。
表4小鼠懸尾實驗結果表
由表4可見，本發明制劑1、2的中高劑量組減少小鼠懸尾實驗中的不動時間與陰性對照組相比，經統計學處理，均有顯著性差異(p<0.05)。
3強迫游泳實驗
取70只雄性小鼠，實驗室適應3天后，進行懸尾實驗篩選，剔除不動時間不足20s或超過160s的小鼠，選取50只，按不動時間長短隨機分為陰性對照組，試驗組，每組10只；第3次和第7次給藥后1h進行強迫游泳實驗。將小鼠分別置于一透明玻璃容器中游泳6min，累計后4min內小鼠在水中停止掙扎或者呈漂浮狀態，僅微小肢體運動以保持頭部浮在水面的持續時間(即不動時間)。每只動物更換一次水。
試驗結果，見表5。
表5強迫游泳實驗結果表
由表5可見，本發明制劑1、2的低、中、高劑量組減少強迫游泳實驗中的不動時間與陰性對照組相比，經統計學處理，均有顯著性差異(p<0.05)。
綜上，本發明能減少小鼠懸尾實驗和強迫游泳實驗中的不動時間。本發明具有抗抑郁的作用。
上述實施例僅為本發明的優選實施方式之一，不應當用于限制本發明的保護范圍，但凡在本發明的主體設計思想和精神上作出的毫無實質意義的改動或潤色，其所解決的技術問題仍然與本發明一致的，均應當包含在本發明的保護范圍之內。