專利名稱：啤酒花提取物、其生產方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及啤酒花提取物、其生產方法和用途，用于預防和治療由雌激素不足或者性激素相關代謝、尤其是雌激素代謝調節異常導致的病理疾病。
啤酒花最大的價值仍然是用于生產啤酒。由于其苦味和香味成分，其對啤酒的味道起決定性作用。而且，這些成分由于有抗微生物的特征而對啤酒的保藏有一定的作用。
在80年代初期在啤酒花領域的科學知識使當時的聯邦健康局機構E對其作了正面的專論(Bundesanzeiger分別為1985年12月5日和1990年3月13日)。這樣，使用啤酒花治療失眠、興奮和焦慮已經基本被允許。
由于具有一定的藥物作用，所以啤酒花在公共醫學中作為溫和的鎮靜劑已經有很長時間。可能是對氧化敏感的α-和β-苦酸使其具有這種鎮靜效果。最近的研究表明這些成分還顯示出自由基陷阱特征和脂質過氧化作用抑制性能(M.Tagashira等，Biosci.Biotech.Biochem.59，740-742(1995))。此外，在歐洲專利申請0 677 289 A2中還描述了治療骨質疏松的藥物組合物，該藥物組合物含有選自α-苦酸和α-異苦酸的化合物。
在過去幾年里，除了α-苦酸和β-苦酸，還檢查了啤酒花的酚成分(J.Hlzl，Zeitschrift für Phytotherapie 13，155-161(1992))，并且除了早就知道的酒花查爾酮1外，在啤酒花植物中還發現了黃酮類化合物(J.F.Stevens等，Phytochemistry 44，1575-1585(1997)，J.F.Stevens等，J.Chromat.A 832(1-2)，97-107(1999))。這些化合物主要是異戊二烯化的黃酮類化合物，如6-或8-異戊二烯基柚皮素(2)和(3)以及忽布素(4)。Stevens等(Phytochemistry 53，759-775(2000))還檢查了啤酒花種類的化學分類學和啤酒花的分類。
反復地觀察到在采摘啤酒花的婦女中出現月經異常，這可追溯到啤酒花中的雌激素物質，但是這些影響不能明確地和一種或多種成分相聯系。同時可以證實啤酒花的這種雌激素活性。這樣，已經證明8-異戊二烯基柚皮素3是造成這些影響的主要原因(S.R.Milligan等，J.Clin.Endocrinol.Metab.84，2249-2252(1999))。從該化合物對雌激素受體的相對結合親和性，特別是通過刺激Ishikawa-Var-I-細胞中的堿性磷酸酶的試驗發現該化合物的體外雌激素活性。這樣，已經證明8-異戊二烯基柚皮素比目前已知的植物雌激素如香豆雌酚、染料木黃酮或黃豆苷原有更顯著的活性，比17β雌二醇的作用稍弱。Milligan等(J.Endocrin.Metabol.85，4912-4915(2000))還報道了啤酒花不同的酚成分對酵母細胞中表達的人雌激素受體的結合。由此，8-異戊二烯基柚皮素又一次顯示出最強的雌激素活性。6-異戊二烯基柚皮素、6，8-二異戊二烯基柚皮素和8-香葉基柚皮素的雌激素性能較弱。Miyamoto等(Planta Med.64，516-519(1998))證明8-異戊二烯基柚皮素使卵巢被切除的大鼠的子宮重量和骨密度正常化。而且，在JP 08165238(ref.CA 125158632)中描述了包括8-異戊二烯基柚皮素的一系列8-異戊二烯化黃酮衍生物的雌激素激動活性。
最近的研究可以證明啤酒花的某些黃酮類化合物、特別是酒花查爾酮1能夠影響細胞代謝。它們能夠積極的影響在腫瘤細胞的發育中起重要作用的酶促反應。由于該原因，可以認為這些化合物是抗癌的預防性藥物(德國啤酒花研究機構會議，當前德國啤酒花研究機構，啤酒花成分酒花查爾酮的最新知識，1998年3月24日，Aschheim)。Miranda等(Food Chem.Tox.37(4)，271-285(1999))報道了酒花查爾酮1和忽布素4在人乳腺癌細胞MCF-7、結腸癌細胞系HAT-29和卵巢癌細胞系A-2780中的強烈的抗增殖活性。
還可進一步證明酒花查爾酮1對骨質溶解有抑制作用。在歐洲專利EP0 679 393 B1中描述了其作為抗骨質疏松的治療藥物的用途。盡管發明人推測酒花查爾酮具有雌激素性能，但是這些性能還沒有被證明。相反地，S.R.Milligan等(Pharm.Pharmacol.Lett.7，83-86(1997))清楚地排除了酒花查爾酮的骨質疏松抑制活性是基于雌激素作用，這是因為對于人子宮內膜癌細胞系Ishikawa和在酵母報道基因測定中都沒有檢測到相應的活性(S.R.Milligan等，J.Clin.Endocrinol.Metabol.84，2249-2252(1999))。和這些檢測相反，本發明證明酒花查爾酮1和忽布素4具有相當的結合雌激素受體α和β的活性。
Kumai和Okamoto(Toxicology Letters 21，203-207(1984))報道了從啤酒花單純的水提取物得到的高分子糖類部分，其可降低用PMS促性腺激素預處理的幼齡大鼠的卵巢的重量。Okamoto和Kumai(ActaEndocrinologica 127，371-377(1992))發現通過施用啤酒花單純的水提取物而導致17β雌二醇和LH在血液中的水平降低了，據此他們證實了這些結果。
在德國專利申請DE 199 39 350 A1中描述了酒花查爾酮含量增加的啤酒花提取物。該提取物將被加到啤酒和含有果汁的軟飲料中。對于該提取物中是否存在異戊二烯化的柚皮素還一無所知。根據一個實施方案，用50％(按重量計算)的乙醇從啤酒花中提取酒花查爾酮。然而，該濃度的乙醇提取酒花查爾酮的效果不理想，因為酒花查爾酮向提取物轉移的程度不高，直到使用高含量(按重量計算＞80％)的乙醇方可獲得理想的效果。
在WO 83/00701 A1中要求保護一種從啤酒花中分離具有雌激素活性的化合物的方法，其特征是加入水作為夾帶劑首先從啤酒花產生二氧化碳提取物，然后用醚提取或者色譜方法從該提取物中得到具雌激素活性的化合物。而且，WO 83/00701 A1中還要求保護這些化合物的用途，用于動物飼料和化妝品添加劑或者作為沐浴添加劑。但是，對該類型的雌激素活性化合物的細節未有提及。
在WO 01/30961 A1中要求保護一種用于釀造啤酒的穩定添加劑的分離方法，其特征是將二氧化碳提取后的啤酒花殘渣用極性溶劑、優選熱水提取，并將提取物酸化，用非極性溶劑、優選己烷洗滌，任選地干燥后，用作釀造添加劑。將剩余的殘滓丟棄。
本發明的目的是提供植物提取物，該提取物適于生產預防和治療由雌激素缺乏或者性相關激素的代謝、尤其是雌激素代謝調節異常導致的病理疾病的藥物。
本發明的另一個目的是提供生產這些提取物和含有相同提取物的藥物制劑的方法，所述藥物制劑適于治療上面提到的病理疾病。
根據本發明，通過根據權利要求1和2的啤酒花提取物、根據權利要求3到12的方法、根據權利要求13的藥物制劑和根據權利要求14到16的提取物的用途或者藥物制劑達到了這些目的。
本發明尤其是基于這樣一個令人驚訝的觀察從啤酒花藥材得到的提取物在除去親脂性和親水性纖維后仍然含有啤酒花的藤黃酚類苦酸，并且同時含有富集形式的游離和/或結合的查爾酮類和黃酮類，如酒花查爾酮、忽布素以及6-和8-異戊二烯基柚皮素。6-和8-異戊二烯基柚皮素的含量依賴于水的預提取物的溫度(參見實施例3)并且該含量可以提高至多達約2倍，這一事實特別令人驚訝。
圖1證明所分析的成分的濃度對水預提取溫度的依賴性。
這種提取物可以用C5-C7-烷或者超臨界的CO2進行1次或多次提取(除去脂肪的步驟)獲得，然后用水提取剩余的藥渣，用選自醇、醇水溶液、酮、酮水溶液、酯的中等極性溶劑提取剩余的藥渣，任選地隨后進行液-液分配。令人驚訝的是，啤酒花的苦酸向親脂性提取物的轉移并不完全，而只是部分轉移。另一方面，在用水提取的過程中，查爾酮類和黃酮類幾乎完全保留在藥渣中。因此，可以得到含有平衡比例的所有藥用相關成分(苦酸類、查爾酮類、黃酮類)。由于該種有利的組合利用了幾種治療成分，所以該提取物可理想地應用于抗由雌激素缺乏或者其他激素相關調節異常導致的病理疾病。
根據本發明的啤酒花提取物適于預防和治療婦女中更年期相關癥狀或者絕經后相關癥狀，這些癥狀主要包括熱潮、抑郁、焦慮、精神混亂、失眠和絕經后相關的嚴重健康問題，如骨質疏松、心血管系統疾病、大腦梗塞(中風)、癡呆和腫瘤疾病。其他基于性激素相關代謝調節異常并且可以用根據本發明的提取物治療的疾病為例如，閉經、無排卵周期、月經頻多、經期前病癥和產后抑郁。同樣，這些提取物可用于治療男性中依賴于性激素的疾病，例如良性前列腺肥大或者前列腺癌。
用人雌激素受體α和β的競爭性受體結合測定以及重組酵母測定證明，與17β雌二醇活性相比，根據本發明的啤酒花提取物具有令人驚訝的高雌激素活性。相反，相同劑量的傳統的標準啤酒花提取物顯示出明顯較低的活性或者根本沒有活性。圖2說明在酵母報道基因測定中測定的對比提取物的活性和根據本發明的兩種啤酒花提取物的活性。
和傳統的、特別是醇水溶液提取物相比，根據本發明的啤酒花提取物具有含量增加的游離和/或結合的查爾酮類和黃酮類，特別是6-和8-異戊二烯基柚皮素、酒花查爾酮和忽布素，本發明的啤酒花提取物同時還含有α、可能含有β-苦酸(分別是律草酮和蛇麻酮及它們的衍生物)。
此外，根據本發明，還提供制備這些啤酒花提取物的方法，該方法包括以下步驟(a)用C5-C7-烷或者超臨界CO2進行一次或多次提取啤酒花并從提取液中分離藥渣；(b)用水對步驟(a)中得到的藥渣進行一次或多次提取并分離藥渣；(c)用選自醇、醇水溶液、酮、酮水溶液和酯的溶劑對步驟(b)中得到的藥渣進行一次或多次提取并過濾所得提取液；(d)合并步驟(c)所得提取液，除去溶劑并干燥所得殘渣。每個提取步驟的藥物-溶劑比率為約1∶7到約1∶12。
步驟(a)中用C5-C7-烷或者超臨界CO2的提取優選進行1次、2次或3次，尤其是3次。
尤其優選用超臨界CO2進行提取。
步驟(a)中所用C5-C7-烷優選為選自正戊烷、正己烷和正庚烷的C5-C7-正-烷，尤其優選正庚烷。
根據步驟(b)的提取優選在60到95℃、優選90℃的溫度下進行，其中提取的時間可以是一個或幾個小時。
步驟(c)中所用溶劑優選選自乙醇、乙醇水溶液、甲醇、甲醇水溶液、丙酮、丙酮水溶液和乙酸乙酯，分別優選80％到96％(w/w)的乙醇、74％到99％(w/w)的甲醇和66％到99％(w/w)的丙酮，尤其優選92％(w/w)的乙醇。
根據本發明的(干燥的)啤酒花提取物的特征是α-苦酸的含量至少為0.5％、優選至少0.8％、尤其優選1％，酒花查爾酮的含量至少2％、優選至少3％、尤其優選至少4％，異戊二烯化黃酮類的含量至少0.5％、優選至少0.7％。異戊二烯化黃酮類優選含有6-異戊二烯基柚皮素、8-異戊二烯基柚皮素和忽布素。在本發明中，酒花查爾酮不在異戊二烯黃酮類之列。百分率是基于啤酒花提取物的重量。
所得提取物可以和常規的藥學上可接受的添加劑一起加工成藥物制劑如膠囊、膜包衣片劑或包衣片劑。填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑和膜包衣片劑與包衣片劑的包衣材料以及作為明膠膠囊填充劑的油和脂肪可以用作藥物添加劑。
根據本發明的提取物可以用于預防和治療由雌激素缺乏或其他激素相關調節異常所導致的病理疾病，如尤其是更年期癥狀、依賴于性激素的癌癥疾病、良性前列腺肥大、骨質疏松、阿爾茨海默氏病和心血管系統疾病。對于依賴于性激素的癌癥疾病，根據本發明的提取物可尤其被用于預防和治療乳腺癌、子宮癌和前列腺癌。
根據本發明的提取物的劑量為0.005g到2g提取物，每天四次，優選0.02g到1g，每天1到2次。對于具體的個體而言，劑量依賴于臨床癥狀和病人的自身情況，并且可以由醫生根據具體的需要進行調整。
下面的實施例用以說明本發明，不應認為是對本發明的限制。除非特別說明，所有的百分數均為重量百分數。
比較實施例不預先脫脂用96％(W/W)乙醇生產提取物將50g啤酒花藥材(“Hallertauer Magnum”類)與500g96％(w/w)的乙醇混合并用ultraturrax碎成小塊。在60℃下提取1小時。然后用Seitz1500型過濾器過濾提取物。用同樣的方法進一步提取藥物2次。在旋轉蒸發儀上蒸發合并的提取液并在真空干燥箱中于50℃干燥過夜。用下面的HPLC方法測定干物質中特征性成分的含量。該HPLC方法也應用于測定其他實施例的樣品成分。
產量(96％(w/w)乙醇提取物)18.38g＝＞36.8％HPLC法測定的啤酒花α-苦酸的含量19.8％HPLC法測定的啤酒花β-苦酸的含量4.2％HPLC法測定的酒花查爾酮的含量1.3％HPLC法測定的6-和8-異戊二烯基柚皮素以及忽布素的含量低于檢測限(＜0.01％)實施例1a啤酒花提取物的生產(用CO2提取然后在90℃用水預提取)用超臨界CO2、水和92％(w/w)的乙醇依次提取用超臨界CO2預提取(條件碾磨為10mm大小顆粒，用CO2在250巴/50℃下提取，分離提取物，產率為30％)的80.6克啤酒花藥材(“Hallertauer Magnum”類)先在ultraturrax上用960g水提取5分鐘，然后攪拌下在90℃下提取1小時。隨后將水提取物用Seitz Supra 1500型過濾器過濾。然后將仍然有點濕的藥渣用800g92％(w/w)的乙醇在60℃下提取兩次，每次1小時。隨后將其用Seitz Supra 1500過濾并在水浴溫度為55到65℃的旋轉蒸發儀上蒸發乙醇提取液，并將其在干燥箱中于60℃下干燥。
產量水提取所得殘渣18.96g(23.5％)92％(w/w)乙醇提取所得殘渣9.83g(12.2％)HPLC法測定的各成分的含量(基于用92％(w/w)乙醇提取的提取物)啤酒花α-苦酸的含量 2％啤酒花β-苦酸的含量 0.5％酒花查爾酮的含量5.83％6-異戊二烯基柚皮素的含量0.63％8-異戊二烯基柚皮素的含量0.21％忽布素的含量0.42％
實施例1b啤酒花提取物的生產(用CO2提取并隨后在90℃下用水預提取)用超臨界CO2、水和92％(w/w)乙醇依次提取首先用超臨界CO2預提取(條件碾磨為10mm大小顆粒，用CO2在250巴/50℃下提取，分離提取物，產率為30％)的504.26克啤酒花藥材(“Hallertauer Magnum”類)在ultraturrax上用6kg水提取5分鐘，然后攪拌下在90℃下提取1小時。隨后將水提取物用Seitz Supra 1500型過濾器過濾。然后將仍然有點濕的藥渣用5kg92％(w/w)的乙醇在60℃下提取兩次，每次1小時。隨后將其用Seitz Supra 1500過濾并在水浴溫度為55到65℃的旋轉蒸發儀上蒸發乙醇提取液，并將其在干燥箱中于60℃下干燥。
產量水提取所得殘渣105.9g(21％)92％(w/w)乙醇提取所得殘渣69.37g(13.8％)HPLC法測定的各成分的含量(基于用92％(w/w)乙醇提取的提取物)啤酒花α-苦酸的含量 1％啤酒花β-苦酸的含量 0.5％酒花查爾酮的含量4.41％6-異戊二烯基柚皮素的含量0.49％8-異戊二烯基柚皮素的含量0.15％忽布素的含量0.6％實施例2啤酒花提取物的生產(用CO2提取并隨后在60℃下用水預提取)用超臨界CO2、水和92％(w/w)乙醇依次提取用超臨界CO2預提取(條件碾磨為10mm大小顆粒，用CO2在250巴/50℃下提取，分離提取物，產率為30％)的80.36克啤酒花藥材(“Hallertauer Magnum”類)首先在ultraturrax上用964g水提取5分鐘，然后攪拌下在60℃下提取1小時。隨后將水提取物用Seitz Supra 1500型過濾器過濾。然后將仍然有點濕的藥渣用800g92％(w/w)的乙醇在ultraturrax上先提取兩次，每次5分鐘，然后再在60℃、攪拌下提取兩次，每次1小時。隨后將其用Seitz Supra 1500過濾并在水浴溫度為55到65℃的旋轉蒸發儀上蒸發乙醇提取液，并將其在干燥箱中于60℃下干燥。
產量水提取所得殘渣17.91g(22％)92％(w/w)乙醇提取所得殘渣9.95g(12.4％)HPLC法測定的各成分的含量(基于用92％(w/w)乙醇提取的提取物)啤酒花α-苦酸的含量 1.58％啤酒花β-苦酸的含量 0％酒花查爾酮的含量 6.1％6-異戊二烯基柚皮素的含量 0.4％8-異戊二烯基柚皮素的含量 0.09％忽布素的含量 0.21％實施例3啤酒花提取物的生產(用正庚烷提取并隨后在90℃下用水預提取)將247.6g啤酒花藥材(“Hallertauer Magnum”類)用其7倍重量的正庚烷提取7次，先在ultraturrax上提取，每次5分鐘，然后在攪拌下提取1小時。在Seitz Supra 1500上將庚烷提取液過濾后將其用同樣的方法再提取一次。然后，在真空干燥箱中所得藥渣從庚烷中分離出來。然后將干燥的藥渣(205g)與其12倍重量的水混合并在90℃下保持1小時。隨后，將其再次過濾，將仍然有點濕的藥渣用其10倍重量的92％(w/w)的乙醇在攪拌下于60℃提取兩次。隨后將其用Seitz Supra 1500過濾并在水浴溫度為55到65℃的旋轉蒸發儀上蒸發乙醇提取液，并將其在干燥箱中于60℃下干燥。
產量
庚烷提取物26.4g(10.7％)水提取物41.1g(16.6％)92％(w/w)乙醇提取物52.0g(21.0％)HPLC法測定的各成分的含量(基于用92％(w/w)乙醇提取的提取物)啤酒花α-苦酸 0.86％啤酒花β-苦酸 0.05％酒花查爾酮3.3％6-異戊二烯基柚皮素0.45％8-異戊二烯基柚皮素0.13％忽布素0.25％實施例46-異戊二烯基柚皮素、8-異戊二烯基柚皮素和忽布素對用水預提取的溫度的依賴性提取將用CO2預提取的約80g啤酒花藥材在ultraturrax用12倍其重量的水初提5分鐘，然后攪拌下在60、70、80、90和95℃下提取1小時。然后將水提物用Seitz Supra 1500型過濾器過濾。隨后，在ultraturrax上將仍然有點濕的藥渣分別用800g92％(w/w)的乙醇先提取5分鐘，然后在攪拌下于60℃下提取1小時。然后將其在Seitz Supra 1500上過濾并在水浴溫度為55到65℃的旋轉蒸發儀上蒸發乙醇提取液，并將其在干燥箱中于60℃下干燥。
在圖1中用圖表示的結果顯示所分析的異戊二烯化成分對于用水預提取的溫度具有顯著的依賴性。
實施例5檢驗啤酒花提取物的雌激素活性進行競爭性受體結合測定以檢驗提取物——對比提取物和根據本發明的提取物的單個成分與人雌激素受體α(ER-α)和雌激素受體β(ER-β)的相互作用。為此，首先使放射性標記的雌二醇與人雌激素受體結合，然后用對受試物質進行處理。這樣，一部分樣品將與雌激素受體結合的標記的雌二醇置換了。在復合物結合到羥基磷灰石后，洗去多余的雌二醇。作為重組人受體的雌二醇受體ER-α和ER-β可通過商業途徑得到。試驗制劑組成為1000μl TEDG緩沖液(10mM tris，1.5mM EDTA，10％甘油，pH7.5)、5μl受體(200nM)、10μl 3H-雌二醇和10μl乙醇(對照值)、10μl diethylstiloestrol(100mM，陽性對照)或者10μl提取物或者提取物成分。將制劑小心混合并在暗處于室溫下孵育約16小時。孵育后，加入250μl羥基磷灰石(HAP)以吸附蛋白。在孵育的15分鐘期間，分別手工混合制劑，間隔為5分鐘。10,000rpm下離心分離沉淀物幾秒鐘并移液除去上清液。分別用1000μl TEDG緩沖液洗滌沉淀物3次，加入1000μl乙醇進行測定，將混合物勻漿并轉移到閃爍瓶。加入9ml閃爍劑液體(ReadySafe，Beckmann)后用Beckmann Beta-計數器進行完全3H視窗測量。
通過測定雌二醇置換的劑量-作用圖得到的ED50值來表征受試物質的結合能力。結果報道于表1，這些結果說明所有被檢驗的成分與兩種雌激素受體都有強的相互作用。令人驚訝的是，證明根據本發明的提取物比預期的單個成分的活性顯著高很多。相反，與兩種受體都有活性的對比提取物所顯示出的活性比根據本發明的提取物的活性小至少10倍。
表1提取物——根據本發明的提取物和對比提取物的成分對人雌激素受體α(ER-α)和雌激素受體β(ER-β)的結合。
此外，利用酵母細胞(酵母屬)用報道基因測定進行提取物的雌激素性能的試驗。將細胞用人α-雌激素受體和含有雌激素應答元件和β-半乳糖苷酶基因的表達質粒穩定轉染。所有樣品以20mg/ml的濃度溶于DMSO中，并且不稀釋或者用DMSO以1/10、1/100或者1/1000的比率稀釋到1μl到100μl的培養基體積后置于96孔平底微量滴定板。接著，加入100μl酵母懸浮液和生色底物氯酚紅-β-D-吡喃半乳糖苷。在每個板上提供對照孔，對照孔中只加入培養基或者溶劑，或者標準濃度的17β雌二醇。在32℃下孵育酵母細胞72小時，之后在微量滴定板光度計中在540nm下測量培養基的吸收。部分樣品檢測兩次。
結果
測定結果繪于圖2。在此，與17β雌二醇標準曲線相比，將活性顯著高于背景值(相應于最大刺激的約10％)的那些提取物歸類為“有活性”。
權利要求
1.啤酒花提取物，其特征是α-苦酸的含量至少為0.5％，酒花查爾酮的含量至少為2％，并且選自6-異戊二烯基柚皮素、8-異戊二烯基柚皮素和忽布素的異戊二烯基黃酮類的含量至少為0.5％。
2.根據權利要求1的酒花提取物，其特征是α-苦酸的含量至少為0.8％，酒花查爾酮的含量至少為3％，并且選自6-異戊二烯基柚皮素、8-異戊二烯基柚皮素和忽布素的異戊二烯基黃酮類的含量至少為0.7％。
3.獲得啤酒花提取物的方法，該方法包括下列步驟(a)用C5-C7-烷或者超臨界CO2一次或多次從啤酒花中提取藥物并從提取液中分離藥渣；(b)用水對步驟(a)中得到的藥渣進行一次或多次提取并分離藥渣；(c)用選自醇、醇水溶液、酮、酮水溶液和酯的溶劑對步驟(b)中得到的藥渣進行一次或多次提取并過濾所得提取液；和(d)合并步驟(c)所得提取液，除去溶劑并干燥所得殘渣。
4.根據權利要求3的方法，其中步驟(a)中的提取進行1次、2次或3次。
5.根據權利要求3或4的方法，其中步驟(a)中的溶劑選自正戊烷、正己烷和正庚烷。
6.根據權利要求5的方法，其中步驟(a)中的溶劑為正庚烷。
7.根據權利要求3到6中任一項的方法，其中步驟(b)中提取在溫度為60到95℃、優選約90℃下進行。
8.根據權利要求3到7中任一項的方法，其中步驟(c)中的溶劑選自甲醇、甲醇水溶液、乙醇、乙醇水溶液、丙酮、丙酮水溶液和乙酸乙酯。
9.根據權利要求8的方法，其中步驟(c)中的溶劑選自80％-96％(w/w)的乙醇、74％-99％(w/w)的甲醇和60％-99％(w/w)的丙酮。
10.根據權利要求8或9的方法，其中步驟(c)中的溶劑為92％(w/w)的乙醇。
11.根據權利要求1的方法，其中步驟(a)中的溶劑為正庚烷，步驟(c)中的溶劑為92％(w/w)的乙醇。
12.根據權利要求1的方法，其中步驟(a)中的溶劑為超臨界CO2，步驟(c)中的溶劑為92％(w/w)的乙醇。
13.藥物制劑，其含有根據權利要求1或2的提取物和常規的藥學上可接受的添加劑。
14.根據權利要求1或2的啤酒花提取物或者根據權利要求13的藥物制劑的用途，用于預防和治療由雌激素缺乏或者性激素相關代謝、尤其是雌激素代謝調節異常導致的病理疾病。
15.根據權利要求14的用途，其中所述病理疾病選自更年期癥狀、依賴于性激素的癌、良性前列腺肥大、骨質疏松、阿爾茨海默氏病和心血管系統疾病。
16.根據權利要求15的用途，其中所述性激素相關的癌選自乳腺癌、前列腺癌和子宮癌。
全文摘要
本發明涉及異戊二烯化查爾酮類和黃酮類含量增加的新的啤酒花提取物、其生產方法、含有這些啤酒花提取物的藥物制劑和這些提取物的用途，用于預防和治療由雌激素缺乏或者性激素相關的代謝調節異常導致的病理疾病。
文檔編號A61P13/00GK1541262SQ02815697
公開日2004年10月27日 申請日期2002年8月9日 優先權日2001年8月10日
發明者C·埃德勒邁爾, E·科赫, C 埃德勒邁爾 申請人:維爾馬爾施瓦克博士兩合公司