5′－脫氧－5－氟胞苷類衍生物，它的制備方法及其用途的制作方法

專利名稱：5′－脫氧－5－氟胞苷類衍生物，它的制備方法及其用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及具有抗腫瘤和抗病毒活性的5’-脫氧-5-氟胞苷類衍生物，本發明還涉及該類化合物的制備方法所述的化合物在制藥中的用途背景技術5-氟尿嘧啶自從1957年被合成以來，因其較好的選擇性及較低的不良反應而廣泛用于多種腫瘤的治療。然而，5-氟尿嘧啶大部分是靜脈注射劑，給藥不方便。為方便患者使用，業已開發出適合口服的前藥5-氟尿嘧啶的前藥——5’-脫氧-5-氟尿苷。但是口服5’-脫氧-5-氟尿苷具有一定的腸毒性，因此，其適用前景不廣。
所屬技術領域很需要開發出5-氟尿嘧啶的前藥，該類化合物本身應當無細胞毒性，在體內酶的作用下可代謝為5-氟尿嘧啶來發揮抗腫瘤作用。進一步的是，所述的化合物還應當有良好的治療選擇性。

發明內容
本發明的一個目的是提供本身無細胞毒性、在體內酶的作用下可代謝為5-氟尿嘧啶的5’-脫氧-5-氟胞苷類衍生物。
本發明的另一個目的是提供所述5’-脫氧-5-氟胞苷類衍生物的制備方法。
本發明的再一個目的是提供所述5’-脫氧-5-氟胞苷類衍生物在制備抗腫瘤或抗病毒藥物中的應用。
本發明目的通過下列構思來實現一種具有下式(I)的化合物或其藥用鹽
其中，R是選自 -XR3或 的基團；其中R1和R2獨立地選自氫、C1-6直鏈或支鏈烷基、苯基和任選地被C1-6烷基或C1-6烷氧基取代的苯基；條件是R1和R2中有至少一個基團不為氫；X代表O或S；R3選自氫、C1-6直鏈或支鏈烷基、苯基和任選地被C1-6烷基或C1-6烷氧基取代的苯基；R4和R5獨立地選自氫或二(C1-6)烷基氨基，條件是R4和R5中有至少一個基團不為氫；或者R4和R5可結合在一起成環，形成N-取代的吡咯烷基或N-取代的哌啶，所述的取代基選自C1-3烷基。
本發明優選的化合物如下所示 其中，R是選自 -XR3和 的基團；
本發明的另一方面涉及上述5’-脫氧-5-氟胞苷衍生物的制備方法，其合成途徑如下
其中X、R1、R2、R3、R4和R5的定義同上。
起始原料化合物(A)可參照文獻類似方法得到[董輝等 中國醫藥工業雜志，33108(2002)]。
1.首先，將化合物(A)用酰化劑成酯，得通式(B)的化合物。所述的酰化劑為C1-6烷酰氯或C1-6烷酸酐、C6-10芳酰氯或C6-10芳酸酐、對位鹵素取代的芳酰氯或酸酐，優選的酰化劑選自乙酰氯、乙酸酐、丙酰氯、丙酸酐和苯甲酰氯。所用溶劑為含縛酸劑的單鹵或多鹵烷烴、芳烴、乙氰、DMF等或其混合溶劑，所述的縛酸劑為吡啶、三乙胺、碳酸鉀或碳酸鈉。優選的溶劑為多鹵代烴和吡啶的混合液。
2.將通式(B)化合物與1，2，4-三唑(C)縮合，得到通式(D)化合物。所述的縮合劑優選的是三氯氧磷或三溴氧磷；縛酸劑優選的是吡啶、三乙胺；溶劑優選的是單鹵或多鹵烷烴、乙氰。
3.將通式(D)化合物與單取代或雙取代的胺(NR1R2)反應，然后皂化得通式(E)的化合物。與取代胺反應的溶劑優選地選自乙醚、苯、四氫呋喃、單鹵或多鹵烷烴、二氧六環、乙氰，最好的溶劑是多鹵烷烴或二氧六環。皂化反應試劑選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀等無機堿或甲醇鈉、乙醇鈉等1-4個碳原子的醇鈉、氨水等等。皂化反應溶劑選自甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇等1-4個碳原子的脂肪醇、水以及它們的組合。
4.將通式(D)化合物與醇或硫醇(HXR3)反應，然后皂化得通式(F)的化合物。與醇或硫醇反應的溶劑選自乙醚、苯、四氫呋喃、單鹵或多鹵烷烴、二氧六環、乙氰或其組合，優選的溶劑是多鹵烷烴或二氧六環或其組合。
5.將通式(D)化合物與濃氨水反應、皂化然后與N，N-雙取代的二甲縮醛反應得通式(H)的化合物。與濃氨水反應的溶劑選自乙醚、苯、四氫呋喃、單鹵或多鹵烷烴、二氧六環、乙氰，優選的溶劑是多鹵烷烴和二氧六環。皂化反應試劑選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀等無機堿或甲醇鈉、乙醇鈉等1-4個碳原子的醇鈉、氨水。皂化反應溶劑選自C1-4脂肪醇，如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇，水，以及它們的組合。與N，N-雙取代的二甲縮醛反應的溶劑選自C1-4脂肪醇、C1-4單鹵或多鹵烷烴、C1-4脂肪醚、乙腈、二氧六環，優選的溶劑是甲醇、乙醇、乙醚。
需要時，本發明的化合物可按照常規方法制備為藥用鹽的形式。包括其無機酸鹽和有機酸鹽∶無機酸包括(但不限于)鹽酸、硫酸、磷酸、二磷酸、氫溴酸、硝酸；有機酸包括(但不限于)乙酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、琥珀酸、乳酸、對甲苯磺酸、水楊酸、草酸。
本發明的又一方面涉及含有所述化合物或其藥用鹽以及藥學上可接受的載體的藥物組合物。
所述的藥學上可接受的載體可根據所屬技術領域的實踐進行選取，得到固體形式或液體形式的組合物。
本發明的再一個方面涉及所述的化合物或其藥學上可接受的鹽在制備抗腫瘤活性的藥物中的應用。
所述的腫瘤包括食道、胃、腸、口腔、咽、喉、肺、結腸、乳腺、子宮、子宮內膜、卵巢、前列腺、睪丸、膀胱、腎、肝、胰腺、骨、結締組織、皮膚、眼、腦或中樞神經系統發生的癌癥，或者甲狀腺癌、白血病、何杰金氏病、淋巴瘤或骨髓瘤。
本發明的化合物或其藥用鹽可以避免5’-脫氧-5-氟尿苷的腸毒性，而且與其代謝相關的酶(dThdPase)在腫瘤組織內的濃度較正常組織中高。因此，用本發明的化合物或其藥用制成的藥物又有較好的治療選擇性，該類藥物可認為是很有應用前景的抗腫瘤藥。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明作詳細描述，但下列實施例不應看作是對本發明范圍的限制。
實施例1制備5’-脫氧-5-氟-N4-甲基胞苷(化合物1)A、2’，3’-二-O-乙酰-5’-脫氧-5-氟尿苷(通式B化合物，其中R6為乙酰基)參照文獻方法(董輝等中國醫藥工業雜志，33108(2002))得到起始原料5’-脫氧-5-氟尿苷(化合物A)。取2g(8.1毫摩爾)化合物A溶于40ml無水吡啶中，滴加1.8ml(18毫摩爾)醋酐，室溫攪拌過夜。然后加入5ml甲醇繼續攪拌15分鐘，溶液蒸干。固體溶于40ml二氯甲烷，用40ml的10％碳酸氫鈉水溶液洗，水相再用二氯甲烷10ml×2萃取。合并二氯甲烷液，無水硫酸鈉干燥，過濾，蒸干。殘渣用10ml乙醇重結晶，得白色固體2.4g，收率90％，熔點187到189℃。
B、1-(2’，3’-二-O-乙酰-β-D-5’-脫氧呋喃核糖基)-4-(1，2，4-三唑-1-基)-嘧啶-2-(1H)-酮(通式D化合物，其中R6為乙酰基)取6.4g(93毫摩爾)1，2，4-三唑加入150ml無水乙腈中，冰浴冷卻至5℃以下，攪拌滴加2.0ml(21毫摩爾)三氯氧磷和15ml(108毫摩爾)三乙胺，然后再攪拌30分鐘。撤掉冰浴，加入2.4g(7.3毫摩爾)2’，3’-二-O-乙酰-5’-脫氧-5-氟尿苷，20℃攪拌2小時。溶液傾入120ml的5％碳酸氫鈉水溶液中，用二氯甲烷75ml×2萃取。回收有機溶劑，殘渣可不經純化直接用于下一步反應。用硅膠H柱層分離得白色固體2.2g，收率80％，熔點128到130℃。
C、5’-脫氧-5-氟-N4-甲基胞苷(化合物1)取3.5g(10毫摩爾)1-(2’，3’-二-O-乙酰-β-D-5’-脫氧呋喃核糖基)-4-(1，2，4-三唑-1-基)-嘧啶-2-(1H)-酮加入到10ml甲胺水溶液和30ml二氧六環的混合液中，室溫攪拌1h，蒸干。然后依次加入60ml四氫呋喃、50ml甲醇和12.5ml水。冷至0℃，加入12.5ml的2N氫氧化鈉溶液，攪拌10分鐘后用732型陽離子交換樹脂中和至pH＝7左右。濾去樹脂，溶液蒸干，殘渣經硅膠柱純化，得白色固體2g，收率80％，熔點96到98℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.26(3H，d，4’-CH3)，2.80(3H，s，N-CH3)，3.64(1H，d，3’-H)，3.79到3.82(1H，m，4’-H)，3.97(1H，d，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.25(1H，d，OH)，5.68(1H，d，1’-H)，7.68(1H，d，CHCF)，8.02(1H，s，NH)。
實施例2制備5’-脫氧-5-氟-N4-乙基胞苷(化合物2)取3.5g(10毫摩爾)1-(2’，3’-二-O-乙酰-β-D-5’-脫氧呋喃核糖基)-4-(1，2，4-三唑-1-基)-嘧啶-2-(1H)-酮加入到5ml乙胺和30ml二氧六環的混合液中，室溫攪拌1h，蒸干。然后依次加入60ml四氫呋喃、50ml甲醇和12.5ml水。冷至0℃，加入12.5ml的2N氫氧化鈉溶液，攪拌10分鐘后用732型陽離子交換樹脂中和至pH＝7左右。濾去樹脂，溶液蒸干，殘渣經硅膠柱純化，得白色固體2.3g，收率85％，熔點100到102℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.10(3H，t，N-CH2CH3)，1.28(3H，d，4’-CH3)，3.00到3.10(2H，m，N-CH2)，3.66(1H，d，3’-H)，3.80到3.83(1H，m，4’-H)，3.99(1H，d，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.70(1H，d，1’-H)，7.71(1H，d，CHCF)，8.05(1H，s，NH)。
實施例3制備5’-脫氧-5-氟-N4-丙基胞苷(化合物3)按照實施2的描述方法，以丙胺代替乙胺，得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4-丙基胞苷。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)0.90(3H，t，N-CH2CH2CH3)，1.27(3H，d，4’-CH3)，1.40到1.45(2H，m，N-CH2CH2CH3)，3.00到3.08(2H，m，N-CH2)，3.65(1H，d，3’-H)，3.80到3.84(1H，m，4’-H)，3.95(1H，d，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.71(1H，d，1’-H)，7.72(1H，d，CHCF)，8.10(1H，s，NH)。
實施例4制備5’-脫氧-5-氟-N4-丁基胞苷(化合物4)按照實施2的描述方法，以丁胺代替乙胺，得白色粘稠狀的5’-脫氧-5-氟-N4-丁基胞苷。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)0.87(3H，t，N-CH2CH2CH2CH3)，1.27到1.32(5H，m，4’-CH3和N-CH2CH2CH2CH3)，1.47到1.52(2H，m，N-CH2CH2CH2CH3)，3.32到3.39(2H，m，N-CH2)，3.63到3.65(1H，m，3’-H)，3.79到3.84(1H，m，4’-H)，3.98到3.99(1H，m，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.68(1H，d，1’-H)，7.68(1H，d，CHCF)，8.05(1H，s，NH)。
實施例5制備5’-脫氧-5-氟-N4-異丙基胞苷(化合物5)按照實施2的描述方法，以異丙胺代替乙胺，得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4-異丙基胞苷。熔點40到42℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.07到1.27(9H，m，4’-CH3和N-CH(CH3)2)，3.33到3.40(1H，m，N-CH)，3.79到3.82(1H，m，3’-H)，3.96到3.99(1H，m，4’-H)，4.19到4.23(1H，m，2’-H)，4.95(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.67(1H，d，1’-H)，7.68(1H，d，CHCF)，7.84(1H，s，NH)。
實施例6制備5’-脫氧-5-氟-N4-異戊基胞苷(化合物6)按照實施2的描述方法，以異戊胺代替乙胺，得白色液體5’-脫氧-5-氟-N4-異戊基胞苷。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)0.86到0.89(6H，m，N-CH(CH2CH3)2)，1.14到1.16(4H，m，N-CH(CH2CH3)2)，1.29(3H，d，4’-CH3)，3.43到3.46(1H，m，N-CH)，3.65到3.69(1H，m，3’-H)，3.91到3.94(1H，m，4’-H)，4.10到4.11(1H，m，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.70(1H，d，1’-H)，7.70(1H，d，CHCF)，8.06(1H，s，NH)。
實施例7制備5’-脫氧-5-氟-N4-烯丙基胞苷(化合物7)按照實施2的描述方法，以烯丙胺代替乙胺，得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4-烯丙基胞苷。熔點145到147℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.27(3H，d，4’-CH3)，3.64到3.66(1H，m，3’-H)，3.80到3.82(1H，m，4’-H)，3.93到3.97(2H，m，N-CH2)，3.99到4.02(1H，m，2’-H)，4.96到5.19(3H，m，OH和N-CH2CH＝CH2)，5.24(1H，d，OH)，5.70(1H，d，1’-H)，5.83到5.93(1H，m，N-CH2CH＝CH2)，7.69(1H，d，CHCF)，8.05(1H，s，NH)。
實施例8制備5’-脫氧-5-氟-N4-苯基胞苷(化合物8)按照實施2的描述方法，以苯胺代替乙胺，得黃色固體5’-脫氧-5-氟-N4-苯基胞苷。熔點117到120℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.28(3H，d，4’-CH3)，3.63(1H，d，3’-H)，3.80到3.82(1H，m，4’-H)，3.99(1H，d，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.26(1H，d，OH)，5.68(1H，d，1’-H)，7.07到7.73(6H，m，CHCF和Ar-H)，8.05(1H，s，NH)。
實施例9制備5’-脫氧-5-氟-N4-苯甲基胞苷(化合物9)按照實施2的描述方法，以苯甲胺代替乙胺，得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4-苯甲基胞苷。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.26(3H，d，4’-CH3)，3.64到3.67(1H，m，3’-H)，3.80到3.82(1H，m，4’-H)，3.98到4.00(1H，d，2’-H)，4.54到4.55(2H，m，N-CH2)，4.96(1H，d，OH)，5.25(1H，d，OH)，5.68(1H，s，1’-H)，7.23到7.34(5H，m，Ar-H)，7.75(1H，d，CHCF)，8.61(1H，t，NH)。
實施例10制備5’-脫氧-5-氟-N4-對甲氧苯基胞苷(化合物10)按照實施2的描述方法，以對甲氧苯胺代替乙胺，得黃棕色固體5’-脫氧-5-氟-N4-對甲氧苯基胞苷。熔點113到115℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.28(3H，d，4’-CH3)，3.65到3.67(1H，m，3’-H)，3.74(3H，s，OCH3)，3.80到3.83(1H，m，4’-H)，3.98到4.01(1H，d，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.25(1H，d，OH)，5.68(1H，s，1’-H)，6.91到7.55(4H，m，Ar-H)，7.76(1H，d，CHCF)，8.51(1H，t，NH)。
實施例11制備5’-脫氧-5-氟-N4，N4-甲基胞苷(化合物11)按照實施2的描述方法，以二甲胺代替乙胺，得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4，N4-二甲基胞苷。熔點143到144℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.27(3H，d，4’-CH3)，3.06(6H，s，N-(CH3)2)，3.66(1H，d，3’-H)，3.77到3.82(1H，m，4’-H)，3.96到3.97(1H，m，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.25(1H，d，OH)，5.68(1H，d，1’-H)，7.69(1H，d，CHCF)，8.02(1H，s，NH)。
實施例12制備5’-脫氧-5-氟-N4，N4-二乙基胞苷(化合物12)按照實施2的描述方法，以二乙胺代替乙胺，得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4，N4-二乙基胞苷。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.16(6H，t，N-(CH2CH3)2)，1.27(3H，d，4’-CH3)，3.00到3.03(4H，m，N-(CH2CH3)2)，3.65(1H，d，3’-H)，3.79到3.82(1H，m，4’-H)，3.96到3.97(1H，m，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.25(1H，d，OH)，5.66(1H，d，1’-H)，7.69(1H，d，CHCF)，7.95(1H，s，NH)。
實施例13制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(甲氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物13)取3.5g(10毫摩爾)1-(2’，3’-二-O-乙酰-β-D-5’-脫氧呋喃核糖基)-4-(1，2，4-三唑-1-基)-嘧啶-2-(1H)-酮加入到50ml無水甲醇和5ml無水三乙胺的混合液中，回流30分鐘，蒸干。然后依次加入60ml四氫呋喃、50ml甲醇和12.5ml水。冷至0℃，加入12.5ml的2N氫氧化鈉溶液，攪拌10分鐘后用732型陽離子交換樹脂中和至pH＝7左右。濾去樹脂，溶液蒸干，殘渣溶于100ml二氯甲烷中，用100ml水洗滌。分出有機層，用無水MgSO4干燥，過濾，有機溶劑蒸干。經硅膠柱純化，得白色固體2.3g，收率89％，熔點183到185℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.31(3H，d，4’-CH3)，3.68到3.69(1H，d，3’-H)，3.86到3.93(1H，m，4’-H)，3.94(3H，s，OCH3)，4.05(1H，s，2’-H)，4.94(1H，s，OH)，5.27(1H，s，OH)，5.69(1H，d，1’-H)，8.03(1H，d，CHCF)。
實施例14制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(乙氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物14)按照實施13的描述方法，以無水乙醇代替無水甲醇，得白色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(乙氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.25(3H，t，OCH2CH3)，1.30(3H，d，4’-CH3)，3.68到3.69(1H，d，3’-H)，3.86到3.89(1H，m，4’-H)，3.90到3.94(2H，m，OCH2)，4.03(1H，s，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.27(1H，d，OH)，5.69(1H，d，1’-H)，8.03(1H，d，CHCF)。
實施例15制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(丙氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物15)按照實施13的描述方法，以丙醇代替無水甲醇，得白色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(丙氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)0.95(3H，t，OCH2CH2CH3)，1.27(3H，d，4’-CH3)，1.30到1.35(2H，m，OCH2CH2CH3)，3.66到3.67(1H，d，3’-H)，3.86到3.90(1H，m，4’-H)，3.92到3.94(2H，m，OCH2)，4.00到4.01(1H，m，2’-H)，4.95(1H，d，OH)，5.27(1H，d，OH)，5.69(1H，d，1’-H)，8.00(1H，d，CHCF)。
實施例16制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(正丁氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物16)按照實施13的描述方法，以正丁醇代替無水甲醇，得白色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(正丁氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)0.89(3H，t，OCH2CH2CH2CH3)，1.29到1.35(5H，m，4’-CH3和OCH2CH2CH2CH3)，1.47到1.50(2H，m，OCH2CH2CH2CH3)，m，OCH2)，3.66到3.67(1H，d，3’-H)，3.86到3.88(1H，m，4’-H)，3.94到3.98(2H，m，OCH2)，4.00到4.02(1H，m，2’-H)，4.95(1H，d，OH)，5.28(1H，d，OH)，5.68(1H，d，1’-H)，7.95(1H，d，CHCF)。
實施例17制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(異丙氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物17)按照實施13的描述方法，以異丙醇代替無水甲醇，得白色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(異丙氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.17到1.28(6H，m，OCH(CH3)2)，1.33(3H，d，4’-CH3)，3.72到3.74(1H，m，3’-H)，3.90到3.92(1H，m，4’-H)，3.92到3.95(1H，m，OCH)，4.19到4.21(1H，m，2’-H)，4.95(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.67(1H，d，1’-H)，7.88(1H，d，CHCF)。
實施例18制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(苯氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物18)按照實施13的描述方法，以苯酚代替無水甲醇，以二氧六環作溶劑，得灰色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(苯氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.29(3H，d，4’-CH3)，3.66到3.67(1H，m，3’-H)，3.85到3.89(1H，m，4’-H)，4.01到4.05(1H，d，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.25(1H，d，OH)，5.68到5.69(1H，m，1’-H)，7.27到7.73(6H，m，CHCF和Ar-H)。
實施例19制備5’-脫氧-5-氟-硫代尿苷(化合物19)取3.5g(10毫摩爾)1-(2’，3’-二-O-乙酰-β-D-5’-脫氧呋喃核糖基)-4-(1，2，4-三唑-1-基)-嘧啶-2-(1H)-酮懸浮于100ml乙睛中，攪拌下滴加5ml硫代乙酸，室溫攪拌過夜。溶液用250ml二氯甲烷稀釋后用250ml飽和碳酸氫鈉溶液和250ml飽和食鹽水洗。有機層用無水Na2SO4干燥，濃縮。無水三乙胺的混合液中，回流30分鐘，蒸干。固體殘渣依次加入60ml四氫呋喃、50ml甲醇和12.5ml水。冷至0℃，加入12.5ml的2N氫氧化鈉溶液，攪拌10分鐘后用732型陽離子交換樹脂中和至pH＝7左右。濾去樹脂，溶液蒸干，殘渣溶于100ml二氯甲烷中，用100ml水洗滌。分出有機層，用無水MgSO4干燥，過濾，有機溶劑蒸干。經硅膠柱純化，得淡黃色固體2g，收率80％，熔點180到182℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.34(3H，d，4’-CH3)，3.71到3.73(1H，d，3’-H)，3.86到3.93(1H，m，4’-H)，4.05到4.08(1H，m，2’-H)，4.94(1H，s，OH)，5.26(1H，s，OH)，5.69(1H，d，l’-H)，7.56(1H，d，CHCF)，9.80(1H，s，NH)。
實施例20制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(乙硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物20)按照實施19的描述方法，以乙硫醇代替硫代乙酸得黃色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(乙硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.21(3H，t，SCH2CH3)，1.31(3H，d，4’-CH3)，2.91到2.94(2H，m，SCH2)，3.60到3.62(1H，d，3’-H)，4.00到4.02(1H，m，4’-H)，4.10到4.12(1H，s，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.28(1H，d，OH)，5.69到5.72(1H，m，1’-H)，8.05(1H，d，CHCF)。
實施例21制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(丙硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物21)按照實施19的描述方法，以丙硫醇代替硫代乙酸得黃色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(丙硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)0.96(3H，t，SCH2CH2CH3)，1.26(3H，d，4’-CH3)，1.90到1.55(2H，m，SCH2CH2CH3)，2.90到2.98(2H，m，SCH2)，3.66(1H，d，3’-H)，3.88到3.89(1H，m，4’-H)，3.95到3.99(1H，m，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.73(1H，d，1’-H)，7.74(1H，d，CHCF)。
實施例22制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(丁硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物22)按照實施19的描述方法，以丁硫醇代替硫代乙酸得黃色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(丁硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)0.92(3H，t，SCH2CH2CH2CH3)，1.28到1.32(5H，m，4’-CH3和SCH2CH2CH2CH3)，1.86到1.90(2H，m，SCH2CH2CH2CH3)，2.88到2.92(2H，m，SCH2)，3.62到3.65(1H，m，3’-H)，3.81到3.84(1H，m，4’-H)，3.98到4.00(1H，m，2’-H)，4.95(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.70(1H，d，1’-H)，7.64(1H，d，CHCF)。
實施例23制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(異丙硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物23)按照實施19的描述方法，以異丙硫醇代替硫代乙酸得黃色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(異丙硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.31到1.36(9H，m，4’-CH3和SCH(CH3)2)，2.90到2.92(1H，m，SCH)，3.75到3.78(1H，m，3’-H)，3.96到3.98(1H，m，4’-H)，4.20到4.23(1H，m，2’-H)，4.95(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.69(1H，d，1’-H)，7.70(1H，d，CHCF)。
實施例24制備1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(苯硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮(化合物24)按照實施19的描述方法，以苯硫酚代替硫代乙酸得黃色固體1-(5’-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(苯硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.25(3H，d，4’-CH3)，3.64(1H，d，3’-H)，3.85到3.87(1H，m，4’-H)，3.99到4.01(1H，m，2’-H)，4.95(1H，d，OH)，5.26(1H，d，OH)，5.71(1H，d，1’-H)，7.04到7.63(6H，m，CHCF和Ar-H)。
實施例25制備5’-脫氧-5-氟-N4-((二甲胺基)亞甲基)胞苷(化合物25)
A.5’-脫氧-5-氟-胞苷(化合物G)按照實施2的描述方法，以濃氨水代替乙胺，得白色固體5’-脫氧-5-氟-胞苷。熔點192到193℃。
B.N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛將63g(0.5mol)脫水后新蒸的硫酸二甲酯加入36.5g(0.5mol)干燥的N，N-二甲基甲酰胺中。在攪拌下加熱到75℃左右，此溫度維持3小時，然后在冰鹽水中冷卻待用。將27g(0.5mol)甲醇鈉懸浮于200ml的30到60℃的石油醚中，冰鹽浴冷卻下慢慢滴加前面制備的混合液，保持溫度-5℃以下。滴加完畢，繼續攪拌0.5小時，濾去固體。澄清液蒸餾，收集104到106℃餾分，得無色液體40g，收率65％。
C.5’-脫氧-5-氟-N4-((二甲胺基)亞甲基)胞苷(化合物25)2.5g(10毫摩爾)5’-脫氧-5-氟-胞苷加入40ml甲醇，攪拌下慢慢滴加1.8ml(13毫摩爾)N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛。室溫攪拌2小時后，固體過濾，依次用乙醇和乙醚洗，干燥，得白色固體2.7g，收率90％，熔點204到205℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.46(3H，d，4’-CH3)，3.18和3.0(6H，2s，N-CH3×2)，3.90到3.92(1H，m，3’-H)，4.18到4.20(1H，m，4’-H)，4.27到4.29(1H，d，2’-H)，5.80到5.82(1H，d，1’-H)，7.88(1H，d，CHCF)，8.65(1H，s，N＝CH)。
實施例26制備5’-脫氧-5-氟-N4-((二乙胺基)亞甲基)胞苷(化合物26)按照實施25的描述方法，以N，N-二乙基甲酰胺二甲基縮醛代替N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4-((二乙胺基)亞甲基)胞苷，熔點164到166℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.14到1.22(6H，2t，CH2CH3×2)，1.29(2H，d，4’-CH3)，3.52到3.59(4H，m，N-CH2CH3×2)，3.65到3.66(1H，m，3’-H)，3.84到3.86(1H，m，4’-H)，4.01(1H，s，2’-H)，4.90(1H，s，OH)，5.33(1H，，OH)，5.70(1H，s，1’-H)，7.82(1H，d，CHCF)，8.66(1H，s，N＝CH)。
實施例27制備5’-脫氧-5-氟-N4-((二丙胺基)亞甲基)胞苷(化合物27)按照實施25的描述方法，以N，N-二丙基甲酰胺二甲基縮醛代替N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4-((二丙胺基)亞甲基)胞苷。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)0.90到0.95(6H，m，N-CH2CH2CH3×2)，1.22到1.26(6H，2t，N-CH2CH2CH3×2)，1.28(2H，d，4’-CH3)，3.50到3.54(4H，m，N-CH2CH2CH3×2)，3.64到3.66(1H，m，3’-H)，3.88到3.89(1H，m，4’-H)，4.01到4.03(1H，m，2’-H)，4.90(1H，s，OH)，5.33(1H，，OH)，5.70(1H，s，1’-H)，7.80(1H，d，CHCF)，8.65(1H，s，N＝CH)。
實施例28制備5’-脫氧-5-氟-N4-((二丁胺基)亞甲基)胞苷(化合物28)按照實施25的描述方法，以N，N-二丁基甲酰胺二甲基縮醛代替N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4-((二丁胺基)亞甲基)胞苷。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)0.87到0.89(6H，m，N-CH2CH2CH2CH3×2)，1.27到1.35(7H，m，4’-CH3和N-CH2CH2CH2CH3×2)，1.49到1.54(2H，m，N-CH2CH2CH2CH3×2)，3.50到3.60(4H，m，N-CH2CH2CH2CH3×2)，3.63到3.65(1H，m，3’-H)，3.50到3.55(1H，m，4’-H)，3.98到3.99(1H，m，2’-H)，4.96(1H，d，OH)，5.24(1H，d，OH)，5.68(1H，d，1’-H)，7.78(1H，d，CHCF)，8.68(1H，s，N＝CH)。
實施例29制備5’-脫氧-5-氟-N4-(2-(1-甲基)吡咯烷亞基)胞苷(化合物29)按照實施25的描述方法，以N-甲基吡咯烷二甲基縮醛代替N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4-(2-(1-甲基)吡咯烷亞基)胞苷，熔點198到200℃。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.28(3H，d，4’-CH3)，1.97到2.04(2H，m)，3.01到3.05(5H，m)，3.50到3.54(2H，m)，3.66到3.70(1H，m，3’-H)，3.83到3.87(1H，m，4’-H)，4.01到4.05(1H，m，2’-H)，4.88(1H，d，OH)，5.18(1H，d，OH)，5.70到5.71(1H，d，1’-H)，7.71(1H，d，CHCF)。
實施例30制備5’-脫氧-5-氟-N4-(2-(1-甲基)哌啶亞基)胞苷(化合物30)按照實施25的描述方法，以N-甲基哌啶二甲基縮醛代替N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛得白色固體5’-脫氧-5-氟-N4-(2-(1-甲基)哌啶亞基)胞苷。1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1.30(3H，d，4’-CH3)，1.97到2.14(4H，m)，3.05到3.08(5H，m)，3.52到3.56(2H，m)，3.68到3.70(1H，m，3’-H)，3.85到3.88(1H，m，4’-H)，4.02到4.05(1H，m，2’-H)，4.86(1H，d，OH)，5.16(1H，d，OH)，5.70到5.71(1H，d，1’-H)，7.73(1H，d，CHCF)。
試驗實施例本發明化合物的抗腫瘤活性試驗對本發明的化合物進行了腫瘤細胞增殖抑制試驗。試驗方法采用常規的MTT法。
細胞株選用TGC-007(A549，肺癌)，TGC-043(HCT116，結腸癌)，TGC-019(MCF-7，乳腺癌)，TGC-039(BEL-7402，肝癌)。實驗中所用四種細胞的濃度皆為5×106/ml。
樣品配制將110.8mg藥物放在消毒研缽中，加入50ul吐溫-80(占最終藥物溶液總體積的1％)濕潤作助懸劑，再加入以生理鹽水配制的0.5％羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液7.72ml，研成混懸液應用。濃度分別為實施例13(CMC混懸，灌胃，劑量為1毫摩爾/kg)，配制濃度為10.4mg/ml，取90mg藥物用8.65ml CMC液混懸；實施例25(CMC混懸，灌胃，劑量為1毫摩爾/kg)，配制濃度為12mg/ml，取97.8mg藥物用8.15ml CMC液混懸；實施例26(CMC混懸，灌胃，劑量為1毫摩爾/kg)，配制濃度為13.12mg/ml，取111mg藥物用8.46ml CMC液混懸；實施例29(CMC混懸，灌胃，劑量為1毫摩爾/kg)配制濃度為13.04mg/ml，取106mg藥物用8.13ml CMC液混懸。
將上市的抗腫瘤藥物卡培他濱作陽性對照，給藥劑量l毫摩爾/kg，CMC液混懸后灌胃。
配制濃度為14.36mg/ml，取110.8mg藥物用7.72ml CMC液混懸。
陰性對照組用藥配制方法同上，僅在研磨時不加入藥物。給藥體積＝0.5ml/20g。
動物采用BALB/CA-nu鼠(20-24g)，中國科學院上海實驗動物中心。
MTT實驗按照中空纖維測定操作規程進行，540nm-630nm讀數。sc代表皮下接種，ip代表腹腔接種。
表1測試化合物對腫瘤細胞的抑制率(％)

以上實驗結果表明，本發明的化合物具有良好的抗腫瘤活性，多個化合物活性高于上市藥物卡培他濱，因此本發明化合物或其藥用鹽類可以用于制備抗腫瘤藥物。
權利要求
1.一種具有下式(I)的化合物或其藥用鹽 其中，R是選自 -XR3或 的基團；其中R1和R2獨立地選自氫、C1-6直鏈或支鏈烷基、苯基和任選地被C1-6烷基或C1-6烷氧基取代的苯基；條件是R1和R2中有至少一個基團不為氫；X代表O或S；R3選自氫、C1-6直鏈或支鏈烷基、苯基和任選地被C1-6烷基或C1-6烷氧基取代的苯基；R4和R5獨立地選自氫或二(C1-6)烷基氨基，條件是R4和R5中有至少一個基團不為氫；或者R4和R5可結合在一起成環，形成N-取代的吡咯烷基或N-取代的哌啶，所述的取代基選自C1-3烷基。
2.如權利要求1所述的化合物或其藥用鹽，其中R1、R2、XR3、R4和R5選自
3.如權利要求1所述的化合物或其藥用鹽，其中所述的化合物選自5′-脫氧-5-氟-N4-甲基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-乙基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-丙基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-丁基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-異丙基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-異戊基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-烯丙基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-苯基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-苯甲基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-對甲氧苯基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4，N4-二甲基胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4，N4-二乙基胞苷；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(甲氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(乙氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(丙氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(正丁氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(異丙氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(苯氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；5′-脫氧-5-氟-硫代尿苷；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(乙硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(丙硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(丁硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(異丙硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(苯硫基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；5′-脫氧-5-氟-N4-((二甲胺基)亞甲基)胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-((二乙胺基)亞甲基)胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-((二丙胺基)亞甲基)胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-((二丁胺基)亞甲基)胞苷；5′-脫氧-5-氟-N4-(2-(1-甲基)吡咯烷亞基)胞苷；或5′-脫氧-5-氟-N4-(2-(1-甲基)哌啶亞基)胞苷。
4.如權利要求1所述的化合物或其藥用鹽，其中所述的化合物選自1-(5′-脫氧-β-D-呋喃核糖)-4-(甲氧基)-5-氟-嘧啶-2-(1H)-酮；5′-脫氧-5-氟-N4-((二甲胺基)亞甲基)胞苷5′-脫氧-5-氟-N4-((二乙胺基)亞甲基)胞苷；或5′-脫氧-5-氟-N4-(2-(1-甲基)吡咯烷亞基)胞苷。
5.如權利要求1-4任一所述的化合物或其藥用鹽的制備方法，包括(a)使化合物(B)與 (C)反應，得通式(D)的化合物 接著(b)使化合物(D)與 反應，然后皂化得通式(E)化合物 或者(c)使化合物D與HXR3反應，然后皂化，得到通式F化合物 或者(d)使化合物(D)與NH3反應，皂化后得到化合物(G)，然后再與 反應，得到通式(H)化合物 其中所述的X、R1-R5的定義與權利要求1中的相同(e)需要時，步驟(b)、(c)或(d)得到的化合物轉化為其藥用鹽。
6.如權利要求5所述的制備方法，其中，所述的皂化劑選自無機堿或C1-4醇鈉或氨水；所述的皂化反應溶劑選自C1-4脂肪醇，水或其組合。
7.如權利要求6所述的制備方法，其中所述的無機堿選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉或碳酸鉀，所述的C1-4醇鈉選自甲醇鈉或乙醇鈉；所述的C1-4脂肪醇選自甲醇、乙醇、丙醇或異丙醇。
8.如權利要求5所述的制備方法，其中步驟(a)與1，2，4-三唑反應的縮合劑優選的是三氯氧磷或三溴氧磷；縛酸劑優選的是吡啶、三乙胺；溶劑優選的是單鹵或多鹵烷烴、乙氰；步驟(b)與HR1R2反應的溶劑選自乙醚、苯、四氫呋喃、單鹵或多鹵烷烴、二氧六環、乙氰，最好的溶劑是多鹵烷烴或二氧六環；步驟(c)中與HXR3反應的溶劑選自乙醚、苯、四氫呋喃、單鹵或多鹵烷烴、二氧六環、乙氰或其組合，優選的溶劑是多鹵烷烴或二氧六環或其組合；步驟(d)中與NH3反應的溶劑選自乙醚、苯、四氫呋喃、單鹵或多鹵烷烴、二氧六環、乙氰，優選的溶劑是多鹵烷烴和二氧六環；步驟(d)中與N，N-雙取代的二甲縮醛反應的溶劑選自C1-4脂肪醇、C1-4單鹵或多鹵烷烴、C1-4脂肪醚、乙腈、二氧六環，優選的溶劑是甲醇、乙醇、乙醚。
9.一種抗腫瘤藥物組合物，它包含如權利要求1-4任一所述的化合物或其藥用鹽，以及藥學上可接受的載體。
10.如權利要求1-4任一所述的化合物或其藥用鹽在制備抗腫瘤藥物中的應用。
全文摘要
本發明涉及通式(I)化合物或其藥用鹽，其中R
文檔編號A61K31/7068GK1931869SQ20051002962
公開日2007年3月21日 申請日期2005年9月14日 優先權日2005年9月14日
發明者余建鑫, 張萬年, 李科, 呂加國, 周有駿, 朱駒, 姚建忠, 宋云龍, 盛春泉, 張珉, 陳軍 申請人:中國人民解放軍第二軍醫大學