專利名稱：治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物制劑的質量控制方法，特別是涉及治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，屬于對藥品進行質量控制的技術領域。
背景技術：
臨床常見的甲型、乙型、丙型、戊型肝炎均為全身性傳染病，主要分為急性肝炎(有黃疸型及無黃疸型)、慢性肝炎(慢性遷延性型、慢性活動性型)，也表現為有黃疸或無黃疸。屬于中醫“黃疸”、“脅痛”、“郁癥”、“集聚”等病范疇。中醫認為，本病多因感受濕熱、疫癘或飲食失當所引起，而濕熱蘊結在肝炎整個過程中占有重要地位。其主要表現為面目發黃，小便黃如濃茶，惡心、厭食，胃脘及右肋悶痛等，于中醫中屬雜病類。無論急慢性肝炎及有無黃疸，均可見食欲不振、脘悶惡心、脅痛腹脹、肢體因重乏力或風黃疸，也可見舌紅苔膩、脈弦、弦滑等濕熱蘊結證。
因此，提供一種療效確切、安全方便、副作用小的治療急慢性肝炎的藥物顯得十分重要。本申請人已向國家知識產權局申請的專利(200610200369.2)，提供了一種治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑及其制備方法，對濕熱蘊結之實證肝炎有很好的療效。但藥品如果沒有嚴格的質量標準，得到的產品質量可靠性不高，其結果必然是治療效果不明顯；所以為提高藥物的治療作用，減少藥物副作用，制定一個嚴格可靠的質量標準成為保證藥品質量的基本要求。隨著現代儀器分析技術的發展，高效液相色譜法，氣相色譜法等分析方法在藥品的質量控制中得到了越來越廣泛的應用，保證了藥物質量的可控性，從而確保了用藥的安全。
發明內容
本發明的目的在于提供一種治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，所述制劑包括片劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、散劑、微丸劑、滴丸劑和口服液體制劑等。本發明根據復方丹梔制劑中各藥味所表現出的薄層色譜特征，制定了薄層色譜鑒別方法；參考中國藥典建立了高效液相色譜法測定制劑中梔子苷的含量；并根據多次測定梔子苷含量的結果確定了制劑中梔子苷含量的合理范圍。
本發明所述的復方丹梔制劑是由苦參90～160份、梔子2～3份、黃柏100～200份、丹參100～200份、水飛薊素100～200份再配以適當輔料制成的。其制備方法為取苦參、梔子、黃柏、丹參加水煎煮三次，第一次1.5小時，第二、三次各1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至25℃相對密度為1.12～1.15的清膏，加入水飛薊素及適量輔料，按常規方法制成不同的制劑。
本發明所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括對制劑中黃柏、丹參、苦參和水飛薊素的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中梔子所含梔子苷的含量測定。
其中，黃柏的鑒別方法是以鹽酸小檗堿對照品為對照，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑的薄層色譜法。
丹參的鑒別方法是以原兒茶醛對照品為對照，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑的薄層色譜法。
苦參的鑒別方法是以苦參堿對照品為對照，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑的薄層色譜法。
水飛薊素的鑒別方法是以水飛薊素對照品為對照，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑的薄層色譜法。
具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2.0mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～10μ1、對照品溶液0.5～1.5μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(2)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液1～3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.1～0.3mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液1～3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
(4)取本制劑1～5g，研細，加甲醇10～30ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液濃縮至2～8ml，作為供試品溶液；另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.2～0.8mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液2～8μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
梔子中梔子苷的含量測定方法是以梔子苷對照品為對照，以0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動相的高效液相色譜法。
具體的含量測定方法為色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動相，檢測波長230～250nm，理論塔板數以梔子苷峰計算應不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取在80～120℃干燥1～3小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.2mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內容物，研細，取0.2～0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理20～60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5～15μl，注入液相色譜儀，測定，即得；各制劑以相當每日服用生藥量的成品量為單位量，每單位量含梔子苷C17H14O10不得少于30mg。
本發明所述質量控制方法包括性狀其外觀或內容物為淺棕色至棕褐色；鑒別(1)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2.0mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～10μl、對照品溶液0.5～1.5μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(2)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液1～3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取苦參堿對照品，加甲醇制成每lml含0.1～0.3mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液1～3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取本制劑1～5g，研細，加甲醇10～30ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液濃縮至2～8ml，作為供試品溶液；另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.2～0.8mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液2～8μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合中國藥典各制劑項下有關的各項規定；含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動相，檢測波長230～250nm，理論塔板數以梔子苷峰計算應不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取在80～120℃干燥1～3小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.2mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內容物，研細，取0.2～0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理20～60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5～15μl，注入液相色譜儀，測定，即得；各制劑以相當每日服用生藥量的成品量為單位量，每單位量含梔子苷C17H14O10不得少于30mg。
為了確保本發明質量控制方法科學、合理、可行，申請人進行了以下試驗研究和方法學考察一、鑒別考察配制方法一本制劑1～3g、加甲醇2～18ml、超聲20～60分鐘、對照品鹽酸小檗堿0.5～2.0mg/ml取樣量對照品0.5～1.5μl、供試品5～10μl展開劑正丁醇-醋酸-水(1～5∶0.5～1.5∶0.5～1-5)測定波長365nm檢驗結果薄層板上，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
綜合評價符合規定配制方法二本制劑0.1～0.9g、加甲醇0.5～1.9ml、超聲10～19分鐘、對照品鹽酸小檗堿0.1～0.4mg/ml取樣量對照品0.1～0.4μl、供試品1～4μl展開劑正丁醇-醋酸-水(0.5～0.9∶0.1～0.4∶0.1～0.4)測定波長365nm檢驗結果薄層板上，供試品在對照藥材色譜相應的位置上，跑出斑點不明顯，且各組分分離不明顯。
綜合評價不符合規定因此，本發明薄層鑒別選用配制方法一。
二、含量測定高效液相色譜法考察配制方法一對照品溶液0.5～1.5mg/ml供試品溶液取本制劑0.5～4ml，置25ml量瓶中取樣5～20μl流動相0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(50～100∶8～15)測定波長200nm～229nm結果吸光度響應值不明顯綜合評價不符合規定配制方法二對照品溶液0.5～1.5mg/ml
供試品溶液取本制劑0.5～4ml，置25ml量瓶中取樣5～20μl流動相0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(50～100∶8～15)測定波長230nm～250nm結果吸光度響應值明顯綜合評價符合規定配制方法三對照品溶液0.5～1.5mg/ml供試品溶液取本制劑0.5～4ml，置25ml量瓶中取樣5～20μl流動相0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(50～100∶8～15)測定波長251nm～270nm結果吸光度響應值不明顯綜合評價不符合規定因此，本發明含量測定高效液相色譜法選用配制方法二。
三、含量測定的方法學考察1、儀器與試藥儀器高效液相色譜儀島津LC-10A、SPD-10A檢測器、Class-vp色譜工作站。
柱子大連依利特色譜柱(柱號2105219)試藥甲醇(HPLC級)，乙腈(色譜純)對照品梔子苷對照品為中國藥品生物制品檢定所提供(供含量測定用)。
2、色譜條件0.02mol/L磷酸氫二鈉溶液-乙腈(88∶12)為流動相，檢測波長240nm，在本實驗選定的條件下，按梔子苷峰計算，理論塔板(N)為2400以上，樣品中梔子與其它組分分離度符合要求，陰性樣品圖譜在梔子苷峰位置處無假陽性峰。
3、線性關系考察精密吸取梔子苷對照品溶液(0.102mg/ml)各4、8、12、16、20μl，注入色譜儀，以進樣量(Xμg)對峰面積(YmAU.s)回歸計算。
表1 梔子苷標準曲線數據
線性方程y＝14425.49x-191.4，r＝0.9999，結果表明梔子苷在0.408μg～2.04μg范圍內具有良好線性關系。
4、精密度試驗取梔子苷對照品溶液10μl，各進樣5次，記錄色譜圖，結果見表2，相對標準偏差(RSD)為0.37％。可看出精密度良好。
表2 精密度試驗
5、重復性試驗按擬定的含量測定方法，取同一批號(批號20040201)樣品各5份約0.5g精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續濾液，即得。每次進樣量為10μl，測得峰面積值并計算含量，結果見表3。梔子苷平均含量為2.13mg，RSD為1.28％；結果表明重復性良好。
表3 重復性試驗(批號20040201)
6、回收率試驗(1)梔子苷精密稱取與重復性實驗同一批號(批號20040201)的樣品各9份，約0.5g，分別加入梔子苷對照品溶液(0.102mg/ml)2ml、2.5ml、3ml，依法處理，進樣，記錄色譜，計算回收率，結果見表4。
表4 梔子苷加樣回收試驗
7.樣品含量測定本測定采用法定的外標法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI D)計算含量。
表5 以顆粒劑為例每方丹梔10批樣品含量測定
經過對10批樣品的含量進行測定(表5)，結果表明本含量測定法具有回收率好，精密度、重現性高，樣品處理簡便，分析快速的優點，符合《中國藥典》2005年版一部附錄VID高效液相色譜法的各項規定。
測得10批樣品每克制劑的梔子苷標示含量其平均值為1.98mg，故暫定每10g制劑含梔子苷應不低于15mg。
其它制劑含量測定結果為
與現有技術相比，本發明質量控制方法專屬性強，精密度高，重現性好，回收率高，樣品處理簡便，分析速度快，測量結果準確，達到了有效控制藥物質量的目的，從而確保藥物的療效。
具體實施例方式實施例1膠囊劑的質量控制性狀其內容物為淺棕色至棕褐色。
鑒別(1)取本制劑1g，研細，加甲醇2ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含2.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液0.5μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(2∶1∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本制劑1g，研細，加甲醇2ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(2∶6∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑2g，研細，加甲醇2ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液8μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(3∶2∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本制劑2g，研細，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液6μl，分別點于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶0.05)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查應符合膠囊劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄IL)。
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.01mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(70∶10)為流動相，檢測波長240nm，理論塔板數以梔子苷峰計算不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在90℃干燥1小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑內容物0.6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl注入液相色譜儀，測定，即得。
本制劑每粒含梔子以梔子苷(C17H14O10)計，不得少于2mg。
實施例2片劑的質量控制性狀本制劑為棕色片。
鑒別(1)取本制劑3g，研細，加甲醇8ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液7μl、對照品溶液1.0μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(4∶0.8∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本制劑2g，研細，加甲醇3ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液15μl、對照品溶液3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(6∶10∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑3g，研細，加甲醇8ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(3∶3∶0.5∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本制劑1g，研細，加甲醇30ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液濃縮至8ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液15μl、對照品溶液8μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-水(10∶2∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查應符合片劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄I D)。
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(75∶8)為流動相，檢測波長230nm，理論塔板數以梔子苷峰計算不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在105℃干燥2小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑研細，取0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理40分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各15μl注入液相色譜儀，測定，即得。
本制劑每片含梔子以梔子苷(C17H14O10)計，不得少于1.0mg。
實施例3分散片的質量控制性狀本制劑為棕色片。
鑒別(1)取本制劑2g，研細，加甲醇6ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液5μl、對照品溶液1.5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(5∶1.5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本制劑3g，研細，加甲醇8ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液5μl、對照品溶液1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(5∶8∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑1g，研細，加甲醇6ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液5μl、對照品溶液1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(5∶5∶1.5∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本制劑3g，研細，加甲醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至6ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液5μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(10∶1∶0.05)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查應符合片劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄ID)。
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.02mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(80∶9)為流動相，檢測波長250nm，理論塔板數以梔子苷峰計算不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在100℃干燥3小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑研細，取0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10ml，稱定重量，超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得。
本制劑每片含梔子以梔子苷(C17H14O10)計，不得少于1.0mg。
實施例4軟膠囊劑的質量控制性狀其內容物為淺棕色至棕褐色。
鑒別(1)取本制劑3g，研細，加甲醇4ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液8μl、對照品溶液1.5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(5∶1.5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本制劑3g，研細，加甲醇5ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(2∶10∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑3g，研細，加甲醇2ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液15μl、對照品溶液1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(1∶5∶0.5∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本制劑5g，研細，加甲醇30ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液濃縮至5ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液4μl，分別點于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(20∶l∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查應符合膠囊劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄I L)。
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.02mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(50∶15)為流動相，檢測波長244nm，理論塔板數以梔子苷峰計算不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在80℃干燥3小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑內容物0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇40ml，稱定重量，超聲處理50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl注入液相色譜儀，測定，即得。
本制劑每粒含梔子以梔子苷(C17H14O10)計，不得少于2mg。
實施例5顆粒劑的質量控制性狀本品為棕色顆粒。
鑒別(1)取本制劑2g，研細，加甲醇5ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液6μl、對照品溶液0.5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(1∶1.5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本制劑2g，研細，加甲醇6ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液15μl、對照品溶液1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(6∶5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑1g，研細，加甲醇4ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液15μl、對照品溶液3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(5∶1∶1.5∶0.05)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本制劑3g，研細，加甲醇20ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液濃縮至4ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.7mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液15μl、對照品溶液8μl，分別點于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(10∶3∶0.05)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查應符合顆粒劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄IC)。
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(100∶8)為流動相，檢測波長240nm，理論塔板數以梔子苷峰計算不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在120℃干燥1小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑研細，取0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇40ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各8μl注入液相色譜儀，測定，即得。
本制劑每袋含梔子以梔子苷(C17H14O10)計，不得少于10mg。
實施例6散劑的質量控制性狀本制劑為棕色細顆粒。
鑒別(1)取本制劑1g，研細，加甲醇3ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含2.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μ1、對照品溶液1.0μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(5∶0.5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本制劑1g，研細，加甲醇8ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液5μl、對照品溶液3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(2∶5∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑2g，研細，加甲醇8ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(3∶3∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本制劑5g，研細，加甲醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版-部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液5μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(20∶3∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查應符合散劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄IB)。
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.01mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(60∶8)為流動相，檢測波長230nm，理論塔板數以梔子苷峰計算不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在110℃干燥2小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得。
本制劑每袋含梔子以梔子苷(C17H14O10)計，不得少于5mg。
實施例7微丸劑的質量控制性狀本制劑為棕色微丸。
鑒別(1)取本制劑3g，研細，加甲醇7ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液9μl、對照品溶液0.5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(1∶1.5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本制劑1g，研細，加甲醇4ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液12μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(4∶5∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑2g，研細，加甲醇5ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液12μl、對照品溶液3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(4∶4∶1.5∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本制劑2g，研細，加甲醇10ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至3ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液12μl、對照品溶液3μl，分別點于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(15∶2∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查應符合丸劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄IA)。
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.03mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(100∶15)為流動相，檢測波長245nm，理論塔板數以梔子苷峰計算不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在110℃干燥3小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑內容物0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各12μl注入液相色譜儀，測定，即得。
本制劑每袋含梔子以梔子苷(C17H14O10)計，不得少于5mg。
實施例8滴丸劑的質量控制性狀本制劑為棕色滴丸。
鑒別(1)取本制劑1g，研細，加甲醇4ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含2.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液5μl、對照品溶液1.5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(5∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本制劑3g，研細，加甲醇7ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液8μl、對照品溶液1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(3∶6∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑1g，研細，加甲醇3ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液5μl、對照品溶液1μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(5∶5∶0.5∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本制劑4g，研細，加甲醇20ml，超聲處理40分鐘，濾過，濾液濃縮至7ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液8μl、對照品溶液3μl，分別點于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯一甲醇一水(18∶2∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查應符合滴丸劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄IK)。
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.02mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(90∶10)為流動相，檢測波長230nm，理論塔板數以梔子苷峰計算不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在120℃干燥1小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑內容物0.7g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30ml，稱定重量，超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各15μl注入液相色譜儀，測定，即得。
本制劑每粒含梔子以梔子苷(C17H14O10)計，不得少于0.15mg。
實施例9口服液體制劑的質量控制性狀本制劑為淺棕色至棕褐色液體。
鑒別(1)取本制劑2ml，研細，加甲醇6ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液8μl、對照品溶液1.0μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-醋酸-水(3∶0.5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；置紫外光燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)取本制劑2ml，加甲醇6ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯-甲苯-甲酸(4∶8∶1)為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(3)取本制劑3ml，加甲醇7ml，超聲處理60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-甲苯-醋酸乙酯-濃氨試液(3∶4∶1∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本制劑4ml，加甲醇10ml，超聲處理50分鐘，濾過，濾液濃縮至6ml，作為供試品溶液。另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μl、對照品溶液7μl，分別點于同一硅膠GF254薄層版上，以醋酸乙酯-甲醇-水(12∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
檢查應符合糖漿劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄IH)。
含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.01mol/L磷酸氫二鈉-乙腈(60∶15)為流動相，檢測波長243nm，理論塔板數以梔子苷峰計算不低于2000。
對照品溶液的制備精密稱取在80℃干燥2小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本制劑0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20ml，稱定重量，超聲處理50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，測定，即得。
本制劑每瓶含梔子以梔子苷(C17H14O10)計，不得少于5mg。
權利要求
1.治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，所述制劑包括片劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、顆粒劑、散劑、微丸劑、滴丸劑和口服液體制劑等，其特征在于所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括對制劑中黃柏、丹參、苦參和水飛薊素的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中梔子所含梔子苷的含量測定。
2.按照權利要求1所述治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，其特征在于黃柏的鑒別方法是以鹽酸小檗堿對照品為對照，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑的薄層色譜法。
3.按照權利要求1所述治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，其特征在于丹參的鑒別方法是以原兒茶醛對照品為對照，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑的薄層色譜法。
4.按照權利要求1所述治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，其特征在于苦參的鑒別方法是以苦參堿對照品為對照，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑的薄層色譜法。
5.按照權利要求1所述治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，其特征在于水飛薊素的鑒別方法是以水飛薊素對照品為對照，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑的薄層色譜法。
6.按照權利要求1、2、3、4或5所述治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2.0mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～10μl、對照品溶液0.5～1.5μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(2)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液1～3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.1～0.3mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液1～3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取本制劑1～5g，研細，加甲醇10～30ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液濃縮至2～8ml，作為供試品溶液；另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.2～0.8mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液2～8μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
7.按照權利要求1所述治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，其特征在于梔子中梔子苷的含量測定方法是以梔子苷對照品為對照，以0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動相的高效液相色譜法。
8.按照權利要求1或7所述治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，其特征在于具體的含量測定方法為色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動相，檢測波長230～250nm，理論塔板數以梔子苷峰計算應不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取在80～120℃干燥1～3小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.2mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內容物，研細，取0.2～0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理20～60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5～15μl，注入液相色譜儀，測定，即得；各制劑以相當每日服用生藥量的成品量為單位量，每單位量含梔子苷C17H14O10不得少于30mg。
9.按照權利要求1所述治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法包括性狀其外觀或內容物為淺棕色至棕褐色；鑒別(1)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5～2.0mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～10μl、對照品溶液0.5～1.5μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以正丁醇∶醋酸∶水＝1～5∶0.5～1.5∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(2)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1ml含0.5～1.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液1～3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲酸乙酯∶甲苯∶甲酸＝2～6∶5～10∶0.5～1.5為展開劑，展開，取出，晾干；噴以二硝基苯肼試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑1～3g，研細，加甲醇2～8ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；取苦參堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.1～0.3mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液1～3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮∶甲苯∶醋酸乙酯∶濃氨試液＝1～5∶1～5∶0.5～1.5∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取本制劑1～5g，研細，加甲醇10～30ml，超聲處理20～60分鐘，濾過，濾液濃縮至2～8ml，作為供試品溶液；另取水飛薊素對照品，加甲醇制成每1ml含0.2～0.8mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液5～15μl、對照品溶液2～8μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙酯∶甲醇∶水＝10～20∶1～3∶0.05～0.2為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合中國藥典2005年版一部附錄I各制劑項下有關的各項規定；含量測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；0.01～0.03mol/L磷酸氫二鈉溶液∶乙腈＝50～100∶8～15為流動相，檢測波長230～250nm，理論塔板數以梔子苷峰計算應不低于2000；對照品溶液的制備精密稱取在80～120℃干燥1～3小時的梔子苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.05～0.2mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑或其內容物，研細，取0.2～0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10～50ml，稱定重量，超聲處理20～60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，濾過，取續濾液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5～15μl，注入液相色譜儀，測定，即得；各制劑以相當每日服用生藥量的成品量為單位量，每單位量含梔子苷C17H14O10不得少于30mg。
全文摘要
本發明提供了一種治療急慢性肝炎的復方丹梔制劑的質量控制方法，所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑒別包括對制劑中黃柏、丹參、苦參和水飛薊素的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中梔子所含梔子苷的含量測定。與現有技術相比，本發明質量控制方法專屬性強，精密度高，重現性好，回收率高，樣品處理簡便，分析速度快，測量結果準確，達到了有效控制藥物質量的目的，從而確保藥物的療效。
文檔編號A61P1/16GK1883604SQ200610200558
公開日2006年12月27日 申請日期2006年6月13日 優先權日2006年6月13日
發明者張芝庭, 郭宗華, 雷蕾, 王媛媛 申請人:貴州神奇集團控股有限公司