專利名稱：一種治療肝病的中藥組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發明屬于中藥領域，具體涉及一種治療肝病的中藥組合物及其制備方法和用途。
背景技術：
乙型病毒性肝炎是威脅人類健康的一個重大疾病，全世界乙型肝炎病毒(HBV)感 染者約3. 5億人，約75%分布在亞太地區，每年約100萬人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝 硬化和原發性肝癌。中國大陸HBV感染率高達57. 63%，即全國至少有6億人感染過HBV。 HBsAg陽性率9. 75%，約有1. 2億人，占全球的1/3 ;其中約1/4將發展為慢性肝病，部分患 者可發展為肝硬化，甚至演變為肝癌。每年有23. 7萬人死于乙型肝炎相關的疾病，其中有 15.6萬人死于肝癌。加強病毒性肝炎的預防，研究慢性肝炎的有效治療藥物，是當前亟待解 決的重大問題。 目前對慢性乙型肝炎的治療包括抗病毒治療、免疫調節治療、中醫藥治療、"保 肝"藥物對癥治療、基因治療、心理治療及基礎治療。 世界各國對采用化學藥品治療慢性乙肝作了大量的研究工作，但至今尚無特效藥 問世，且由于化學藥品具有毒副作用，以及新藥的開發耗時長、耗資巨大，發展速度日漸緩 慢，特別是從分子學角度研究乙肝病毒更是困難。 在中醫藥治療中，治療慢性乙肝的單味中藥多采用人參、黨參、白術、鹿茸等調節 機體免疫功能，北山豆根、虎杖、丹參等可抗HBV達到改善患者癥狀、增強患者免疫力及加 強抑制HBV的作用。 近年來中成藥治療慢性乙肝的藥物也很多，但難盡人意，常用的有云芝肝泰、乙肝 寧沖劑、慢性養陰膠囊、復方蟲草珍珠膠囊、香菇多糖片、乙肝散、小柴胡片等。云芝肝泰是 最早用于治療乙肝的中成藥，經過臨床應用，療效欠佳；乙肝寧沖劑是目前對乙肝病毒有一 定療效的中成藥，遠期轉陰率還有待進一步觀察；慢性養陰膠囊是一種以補肝腎健脾祛濕 治療方法為主的中成藥，但對乙肝病毒轉陰率有待長期臨床驗證；香菇多糖片是真菌香菇 菌的提取物，主要成分是甘露醇多肽，具有增強細胞免疫和網狀內皮系統功能，調節體液免 疫的作用，其服藥時間需較長，療效及轉陰率、有效率和保肝降酶效果才較明顯；乙肝散具 有清熱解毒、健脾化濕、舒肝利膽、免疫調節的功能，臨床顯示降酶效果與齊墩果酸類似，對 抑制病毒復制有一定作用。 除了以上列舉的中成藥品種，還有古藺肝蘇顆粒、疏肝理脾片、速立特、龍膽泄肝 丸、甘草甜素片、乙肝扶正膠囊、乙肝解毒膠囊、逍遙沖劑等在臨床上也有使用，但效果均存
在一定局限。
發明內容
本發明的一個目的是提供一種治療肝病的中藥組合物。 本發明的另一個目的是提供一種制備本發明中藥組合物的制備方法。
本發明的再一個目的是提供一種本發明中藥組合物在制備用于治療急性肝損傷 及慢性乙型肝炎的藥物中的用途。 為了實現上述目的，本發明的一個技術方案提供了 一種治療肝病的中藥組合物， 其中該中藥組合物是主要由按下列配比的下述中藥材制成的人參2-4重量份、鹿茸2-4重 量份、淫羊藿30-34重量份、蛤蚧1-3重量份、菟絲子15-19重量份、韭菜子15-19重量份、 蛇床子13-16重量份、吳茱萸9-12重量份、山柰0. 6-0. 9重量份。 中藥材的配比優選為人參2-3重量份、鹿茸2-3重量份、淫羊藿31-32重量份、 蛤階1-2重量份、菟絲子17-18重量份、韭菜子17-18重量份、蛇床子14-15重量份、吳茱萸 10-11重量份、山柰0. 6-0. 8重量份。 優選的是，本發明的中藥組合物中所含人參以人參皂苷Rl^計，不少于0. 017重量份。 還優選的是，本發明的中藥組合物中所含淫羊藿以淫羊藿苷計，不少于0. 085重 量份。 本發明的中藥組合物優選被制為栓劑。 本發明的另一個技術方案提供了一種制備本發明中藥組合物的方法，該方法包括 以下步驟(1)將30-34重量份的淫羊藿、15-19重量份的菟絲子、15-19重量份的韭菜子、 13-16重量份的蛇床子、9-12重量份的吳茱萸加水煎煮并過濾；(2)將由步驟(1)得到的濾 液濃縮至清膏；(3)將2-4重量份的人參、2-4重量份的鹿茸、l-3重量份的蛤蚧、0. 6_0. 9重
量份的山柰與清膏混合。 優選的是，在步驟(3)中，在混合之前，將人參、鹿茸、蛤蚧、山柰制成細粉。所述細 粉指的是全部通過80目篩，并含通過100目篩不少于95%的粉末。 還優選的是，在步驟(3)中，在混合之后，將所得混合物進行干燥并制成最細粉。 所述最細粉指的是全部通過100目篩，并含通過120目篩不少于95%的粉末。
本發明的制備方法優選還包括(4)將由步驟(3)得到的混合物與混合脂肪酸甘 油酯混合；(5)將由步驟(4)得到的混合物制成栓劑。 本發明的再一個技術方案提供了本發明中藥組合物在制備用于治療急性肝損傷 或慢性乙型肝炎的藥物中的用途。 本發明的中藥組合物具有溫補脾腎、疏肝解郁的功效。本發明的中藥組合物可用 于急性肝損傷及慢性乙型肝炎脾腎陽虛，肝氣郁結證，癥見食欲不振，食后腹脹，脅肋脹痛， 畏寒肢冷，腰膝酸軟，倦怠乏力，尿清便溏，面色晦暗，舌淡胖苔白，脈沉細或沉遲。本發明的 中藥組合物無明顯不良反應，且療效確切。 本發明還提供了一種治療急性肝損傷或慢性乙型肝炎的方法，該方法包括給需要 治療的患者施用有效劑量的本發明中藥組合物。所述的患者包括人，也包括貓、狗等動物。 所述的有效劑量會隨患者的疾病嚴重程度、體重、體質、年齡、患病歷史等因素有所變化。但 是，醫師或藥劑師有能力為不同的患者確定出合適的施用量。
具體實施例方式
本發明的中藥組合物主要由人參、鹿茸、淫羊藿、蛤蚧、菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳 茱萸和山柰九味中藥材組成，以人參和鹿茸為君藥，以淫羊藿和蛤蚧為臣藥，以菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳茱萸和山柰為佐藥。 本發明的中藥組合物中的各中藥材具有本領域內所使用的相應名稱的一般含義。 各中藥材的主要成分如下。 人參含皂苷、糖類、酶、氨基酸、蛋白質、多肽、有機酸、生物堿、揮發油等。其中人 參總皂苷為其主要有效成分，具有促進肝內核酸合成、提高機體免疫力、抗腫瘤、抗心律失 常、抗衰老和益智作用。 鹿茸主含磷脂類、酯類、多胺類、前列腺素類化學成分與氨基酸、膽固醇等。
淫羊藿主含黃酮類、木脂體類化學成分以及少量的揮發油、蠟醇、三十一烷、植物 甾醇、鞣質及油脂等。其中淫羊藿苷為其主要有效成分之一，具有促進性腺功能、抗病原微 生物、降血糖、抗炎與提高免疫力等作用。 蛤蚧主含膽固醇、膽固醇酯、甘油酯、糖脂、磷脂和脂肪酸，尚含多肽成分和肌酸 等活性成分。 菟絲子主含香豆精、甾萜、黃酮類化合物、糖樹脂、淀粉、蛋白質、糖類、有機酸、脂 肪酸、蛋白酶等。
韭菜子主含生物堿與皂苷類成分。尚含豐富的氨基酸與大量的微量元素。
蛇床子主含揮發油、香豆素類成分。
吳茱萸主含生物堿、揮發油、檸檬苦素類等成分。
山柰主含揮發油、黃酮類成分。 本發明的中藥組合物中，淫羊藿、菟絲子、韭菜子、蛇床子和吳茱萸五味中藥材的 主要有效成分多為水溶性成分，宜水提；其余人參等四味中藥材中有貴細藥材，有處方量極 小的藥材，有含非水溶性藥效成分的藥材，宜粉碎入藥。 本發明的中藥組合物可以被制成各種劑型，例如栓劑、顆粒劑、合劑、片劑、散劑、 蜜丸、膠囊、注射齊U、滴劑、貼劑等劑型。制備這些劑型的方法和所用的助劑是本領域的技術 人員已知的，例如，可參見《中藥藥劑學》(上海科學技術出版社，1986年11月出版)、《藥用 輔料大全》(四川科學技術出版社，1995年1月出版)、《中國藥典》2005年版一部(化學工 業出版社，2005年1月出版)等。本發明的中藥組合物優選被制為栓劑。
對于本發明中藥組合物的給藥途徑也沒有過多的限制，例如可以通過口服、注射、 透皮、鼻腔給藥、直腸給藥等方式，優選直腸給藥方式。 本發明的制備方法包括以下步驟(1)將30-34重量份的淫羊藿、15-19重量份的 菟絲子、15-19重量份的韭菜子，13-16重量份的蛇床子，9-12重量份的吳茱萸加水煎煮并 過濾；(2)將由步驟(1)得到的濾液濃縮至清膏；(3)將清膏與2-4重量份的人參、2-4重量 份的鹿茸、l-3重量份的蛤蚧、和0. 6-0. 9重量份的山柰混合。本發明的制備方法還可以包 括(4)將由步驟(3)得到的混合物與混合脂肪酸甘油酯混合；(5)將由步驟(4)得到的混 合物制成栓劑。 在本發明方法的步驟(1)中，加水煎煮過程可進行1-3次，優選2次；每次可進行 2-3小時，例如第1次進行3小時，第2次進行2小時；另外，所加的水量可為步驟(1)中所 用藥材的8-14倍(重量)，優選10倍；煎煮溫度可為90°C -IO(TC。 在本發明方法的步驟(2)中，可將由步驟(1)得到的濾液在40-8(TC減壓濃縮至清 膏，該清膏可為相對密度為1. 10-1. 15(50°C )的清膏。
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在本發明方法的步驟(3)中，可在混合之前將人參、鹿茸、蛤蚧、和山柰制成細粉， 例如通過冷凍粉碎的方式制成細粉。在步驟(3)中，可在混合之后將所得混合物進行干燥， 例如在60-8(TC下減壓干燥，優選在7(TC下減壓干燥。在步驟(3)中，可將干燥后的混合物 粉碎，過IOO目篩，以制得細粉。 在本發明方法的步驟(4)中所用混合脂肪酸甘油酯是月桂酸、硬脂酸與甘油酯化 而成的脂肪酸甘油酯混合物。在本發明方法的步驟(4)中，混合脂肪酸甘油酯與由步驟(3) 得到的混合物的重量之比為20 : 2-20 : 18，優選為20 : 2-20 : 6，最優選為20 : 3。在 本發明方法的步驟(4)中，在混合之前混合脂肪酸甘油酯的溫度可保持在45-85t:，優選保 持在55-65 °C。 在本發明方法的步驟(5)中，可將由步驟(4)得到的混合物灌入栓劑模中，冷卻 (例如，在ot:冷卻30分鐘)后取出，脫模，以得到栓劑。 以下參照實施例和試驗例來對本發明進行進一步說明，應該理解本發明不限于這 些例子。 實施例1 本實施例的中藥組合物各組分用量為人參40g、鹿茸40g、淫羊藿450g、蛤蚧20g、 菟絲子250g、韭菜子250g、蛇床子200g、吳茱萸150g、山柰10g。 步驟取上述用量的淫羊藿、菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳茱萸加水煎煮2次，其中 第一次加水16920g，煎煮3. 0小時，第二次加水l棚g，煎煮2. 0小時，合并煎液，濾過，濾 液濃縮至相對密度為1. 10-1. 15(50°C )的清膏，冷卻；將人參、鹿茸、蛤蚧、山柰分別冷凍粉 碎成細粉(處方用量以細粉計)；將上述清膏和細粉混勻，干燥，粉碎成最細粉。取混合脂肪 酸甘油酯2000g(可購自湖南富日醫藥化工有限公司)，加熱溶化，溫度保持在6(TC ±5°C， 加入上述藥物最細粉300g，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻后取出，制成1000粒，即得。規格為每 粒2. 3g(含藥物細粉(即，最終的藥物最細粉)0. 3g或相當于原生藥材1. 41g)。
實施例1的成分檢測
供試品溶液的制備 取實施例l所得藥品5粒，置索氏提取器中，加三氯甲烷50ml，加熱回流2小時， 棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，加水飽和正丁醇100ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨 試液洗滌3次，每次30ml，放置分層，取上層液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶 液。
(1)人參有效成分的鑒別 取人參對照藥材0. 2g，同法制成對照藥材溶液。再取人參皂苷Rbp人參皂苷Re、 人參皂苷Rgl對照品，加甲醇制成每lml各含2mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色 譜法(《中國藥典》2005版一部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各5iU，分別點于同一 硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15 : 40 : 22 : IO)I(TC以下放置的
下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加熱至斑點顯色清
晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相
應位置上，分別顯相同顏色的斑點或熒光斑點。 (2)淫羊藿有效成分的鑒別 取淫羊藿苷對照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005版一部附錄VI B)試驗，分別吸取上述兩種溶液各2iU，分別點 于同一用0. lmol/L磷酸二氫鈉制成的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯_三氯甲烷_甲酸_水
(io : i : i : i)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，i05t:加熱i5分鐘，置紫
外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光 斑點。 (3)吳茱萸有效成分的鑒別 取吳茱萸對照藥材O. 6g，同法制成對照藥材溶液。再取吳茱萸次堿對照品，加甲醇 制成每lml含0. 2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005版一部附 錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各3ia，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷-三氯
甲烷-乙酸乙酯(5 : i : i)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，晾干，置
紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相
同顏色的熒光斑點。 (4)蛇床子有效成分的鑒別 取蛇床子對照藥材lg，同法制成對照藥材溶液。再取蛇床子素對照品，加甲醇制 成每lml含0. 2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005版一部附錄 VI B)試驗，吸取上述三種溶液各3ia，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷-三氯甲 烷-乙酸乙酯(5:1:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試 品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(5)鹿茸有效成分的鑒別 取在供試品溶液的制備過程中得到的濾渣少許，以5%氫氧化鈉溶液封片，置顯微 鏡下觀察粉末黃棕色或紅棕色，表皮角質層可見，凹凸不平。茸毛脫落后的毛窩呈圓洞狀， 邊緣較平整。骨碎片棕色或棕黃色，呈不規則碎塊，骨陷窩較多，呈類圓形，橫斷面可見大的 圓形空洞，邊緣凹凸不平。 (6)經檢查，實施例1所得藥品符合《中國藥典》2005版一部附錄I W栓劑項下有
關的各項規定。 (7)人參含量的測定 人參含量照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動 相A，以水為流動相B，按下表進行梯度洗脫；檢測波長為203nm。理論板數按人參皂苷Rl^ 峰計算應不低于8000。人參皂苷Rl^主峰與相鄰雜質峰的分離度應符合要求。
時間(分鐘)流動相A(Q/iO流動相B(Q/iO
0 10 10 25 25 3510 10 — 25 2590 90 — 75 75
35 7025 — 3975 — 61 對照品溶液的制備取人參皂苷Rl^對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每lml含0. 4mg的溶液，搖勻，即得。 供試品溶液的制備取實施例1所得藥品10粒，精密稱定，加三氯甲烷100ml，超 聲處理30分鐘，棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，加甲醇100ml，加熱回流90分鐘，放冷，濾 過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，濾過，濾液通過DIOI型大孔吸附樹脂柱(內徑1. 5cm， 長18cm)，以水50ml洗脫，棄去水液；再用30%乙醇100ml洗脫，棄去30%乙醇洗脫液；繼 用80%乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加50%甲醇溶解并定量轉移至10ml量瓶 中，加50 %甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測 定，即得。 實施例1所得藥品每粒含人參以人參皂苷Rt^ (C54H92023)計，不少于0. 25mg。
(8)淫羊藿含量的測定 淫羊藿含量照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VID)測定。
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈_水 (28 : 72)為流動相；檢測波長為270nm。理論板數按淫羊藿苷峰計算應不低于5000。淫 羊藿苷主峰與相鄰雜質峰的分離度應符合要求。 對照品溶液的制備取淫羊藿苷對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每lml含 50iig的溶液，搖勻，即得。 供試品溶液的制備取實施例1所得藥品10粒，精密稱定，剪碎，取約2. 3g，精密 稱定，加入三氯甲烷與水各50ml，于8(TC加熱回流60分鐘，放冷，溶液定量轉移至分液漏斗 中，靜置分層，分取水層，濾過，濾液蒸干，殘渣加50 %甲醇溶解并定量轉移至25ml量瓶中， 加50 %甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測 定，即得。 實施例1所得藥品每粒含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H4。015)計，不少于1. 2mg。
實施例2 本實施例的中藥組合物各組分用量為人參45g、鹿茸50g、淫羊藿470g、蛤蚧20g、 菟絲子230g、韭菜子240g、蛇床子190g、吳茱萸155g、山柰10g。 步驟取上述用量的淫羊藿、菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳茱萸加水煎煮2次，其中 第一次加水16920g，煎煮3. 0小時，第二次加水l棚g，煎煮2. 0小時，合并煎液，濾過，濾 液濃縮至相對密度為1. 10-1. 15(50°C )的清膏，冷卻；將人參、鹿茸、蛤蚧、山柰分別冷凍粉 碎成細粉(處方用量以細粉計)；將上述清膏和細粉混勻，干燥，粉碎成最細粉。取混合脂肪 酸甘油酯2000g(可購自湖南富日醫藥化工有限公司)，加熱溶化，溫度保持在6(TC ±5°C， 加入上述藥物最細粉300g，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻后取出，制成1000粒，即得。規格為每 粒2. 3g(含藥物細粉(即，最終的藥物最細粉)0. 3g或相當于原生藥材1. 41g)。
實施例3 本實施例的中藥組合物各組分用量為人參35g、鹿茸38g、淫羊藿452g、蛤蚧22g、 菟絲子247g、韭菜子246g、蛇床子205g、吳茱萸153g、山柰12g。 步驟取上述用量的淫羊藿、菟絲子、韭菜子、蛇床子、吳茱萸加水煎煮2次，其中 第一次加水16920g，煎煮3. 0小時，第二次加水l棚g，煎煮2. 0小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 10-1. 15(50°C )的清膏，冷卻；將人參、鹿茸、蛤蚧、山柰分別冷凍粉 碎成細粉(處方用量以細粉計)；將上述清膏和細粉混勻，干燥，粉碎成最細粉。取混合脂肪 酸甘油酯2000g(可購自湖南富日醫藥化工有限公司)，加熱溶化，溫度保持在60°C ±5°C， 加入上述藥物最細粉300g，攪勻，灌入栓劑模中，冷卻后取出，制成1000粒，即得。規格為每 粒2. 3g(含藥物細粉(即，最終的藥物最細粉)0. 3g或相當于原生藥材1. 41g)。
以上實施例2、3按照實驗例1中所述的方法進行試驗，結論如下
實施例1實施例2實施例3
人參有效成分的鑒別檢出檢出檢出
淫羊藿有效成分的鑒別檢出檢出檢出
吳茱萸有效成分的鑒別檢出檢出檢出
蛇床子有效成分的鑒別檢出檢出檢出
鹿茸有效成分的鑒別檢出檢出檢出
栓劑項下有關的各項規定符合規定符合規定符合規定
人參含量的測定0. 31mg/粒0. 33mg/粒0. 27mg/粒
淫羊藿含量的測定2. 0mg/粒2. 4mg/粒1. 5mg/粒 試驗例1藥效學試驗 (1)實施例1所得藥品對四氯化碳(CC14)所致大鼠急性肝損傷的影響 連續ig(灌胃)實施例l所得藥品O. l、0.2、0.4g/kg.d 7d(天)，按體表等效量推 算，分別相當于臨床使用劑量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，對CC14致大鼠急性肝損傷的ALT 和LDH兩項指標，實施例1所得藥品中、高劑量組與ig聯苯雙酯0. 05g/(kg. d) —樣均有顯 著(P < 0. 05)或非常顯著(P < 0. 01)的抑制作用，此外實施例1所得藥品高劑量組對TBA 亦有降低作用(P〈0.05)，對T-BIL有下降趨勢。提示實施例1所得藥品能有效減輕肝細 胞的損傷程度，對CC14急性肝損傷有一定保護作用。 (2)實施例1所得藥品對BCG+LPS誘導小鼠免疫性肝損傷的影響
連續ig實施例l所得藥品O. 2、0. 4、0. 8g/kg. d 10d，按體表等效量推算，分別相當 于臨床使用劑量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，對BCG+LPS所致小鼠免疫性肝損傷的ALT、AST、 T-BIL、肝脾系數升高均有不同程度的抑制作用，且對10h動物存活率有不同程度的提高， 其中高劑量組存活率顯著提高，15只小鼠中存活了 9只，而模型組15只小鼠僅存活2只，并 且這2只處于瀕臨死亡的邊緣。病理切片結果顯示高劑量組肝巨噬細胞大量增生動物數 較模型對照組明顯減少，與陽性對照組相等；而巨噬細胞中等量增生動物數較陽性對照組
9明顯減少，低劑量組巨噬細胞大量增生動物數亦顯著低于模型對照組和陽性對照組，甚至 低于高劑量組。表明實施例l所得藥品防止小鼠免疫性肝損傷的發生效果明顯。在該模型 中還做了肛灌給藥途經，發現肛灌O. 8g/(kg. d)給藥組肝脾系數和肝功的各種指標與ig給 藥組比較均無明顯差異，提示ig與肛灌給藥以免疫性肝損傷的療效相近。
(3)實施例1所得藥品對D-氨基半乳糖(D-GalN)致小鼠急性肝細胞損傷的影響
連續ig實施例1所得藥品0. 2、0. 4、0. 8g/kg. d 7d，按體表等效量推算，分別相當 于臨床使用劑量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，對D-GalN所致小鼠急性肝細胞損傷所致的AST、 GGT、 LDH、 T-BIL、 TBA升高均有顯著或非常顯著的抑制作用(P < 0. 001)，高劑量對ALT的 升高亦有顯著抑制作用(P〈0.001)，這些作用與聯苯雙酯的作用相似。中、小劑量也呈現 出對AKP升高亦有良好抑制作用，而聯苯雙酯沒有對AKP的作用。用藥組可見肝組織病變 范圍較模型組小，病變程度顯著較模型組輕，但較陽性對照組重。中劑量組病理觀察與高劑 量組基本相似，表明實施例1所得藥品對D-GalN所致肝細胞壞死有一定的保護作用。
(4)實施例1所得藥品對異硫氰酸苯酯(APIT)致小鼠阻塞性黃疸型肝損傷的影響
連續肛灌0. 8g/ (kg. d)或ig實施例1所得藥品0. 2、0. 4、0. 8g/ (kg. d) 7d，按體表 等效量推算，分別相當于臨床使用劑量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，對APIT所致黃疸型肝損 傷小鼠的血清ALT、 AKP、 AST、 LDH、 TBA、 a-HDH均有不同程度抑制作用，且作用顯著；聯苯雙 酯僅對TP、ALT、TBA、AKP有抑制作用，表明實施例1所得藥品對APIT致動物的肝損傷的修 復范圍更寬，作用更強。提示實施例l所得藥品對黃疸型肝炎可能有良好的抑制作用。實 施例1所得藥品對防止甲苯異氰酸酯致小鼠黃疸型肝損傷的發生有效，說明實施例1所得 藥品具有抑制肝組織阻塞性黃疸的發生，及進一步阻止肝細胞損傷和壞死。
(5)實施例1所得藥品對大鼠膽汁分泌量的影響 大鼠利膽試驗表明，ig實施例1所得藥品0. 1、0. 2、0. 4g/kg 1次后，按體表等效 量推算，分別相當于臨床使用劑量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，4小時內，均有明顯的促進膽 分泌作用，提示實施例1所得藥品良好的利膽作用。
(6)實施例1所得藥品對CC14所致大鼠慢性肝損傷的影響 連續ig不同劑量的實施例1所得藥品0. 1、0. 2、0.4g/(kg. d)X63d后，按體表等 效量推算，分別相當于臨床使用劑量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，實施例1所得藥品各組在不 同期對CC14所致慢性肝損傷大鼠肝功能中的ALT、 AST、 GGT、 a-HDH及LDH有不同程度抑制 作用，對T-BIL和TBA亦有不同程度的抑制作用。 (7)實施例1所得藥品對二硝基氯苯所致小鼠遲發型皮膚過敏反應和環磷酰胺致 小鼠免疫功能低下癥的影響 連續ig不同劑量的實施例1所得藥品0. 2、0. 4、0. 8g/(kg. d) 10-12d，按體表等效
量推算，分別相當于臨床使用劑量的2. 2倍、4. 4倍和8. 8倍，對二硝基氯苯致小鼠的遲發
型過敏反應的光密度均有顯著提高，提示實施例1所得藥品有增強T細胞免疫功能作用，且
對CY所致小鼠免疫低下癥有良好保護作用，各種劑量的保護系數均在有效范圍內，提示實
施例1所得藥品對動物的免疫功能有良好的影響。 (8)實施例1所得藥品在2215細胞上對HBsAg、 HBeAg的作用 實施例1所得藥品在2215細胞上對HBsAg、HBeAg的作用顯示，對HBeAg治療指數
TI = 8. 22，對HBsAg治療指數TI = 1. 60。提示該藥對HBeAg和HBsAg有一定的抑制作用。
(9)實施例1所得藥品抗鴨乙型肝炎病毒作用的實驗研究 實施例1所得藥品抗鴨乙型肝炎病毒作用的試驗研究表明受試藥物實施例1所 得藥品小、中劑量組(0. 1， 0. 2g/kg/d) 28天療程各時點血清DHBV-DNA變化差異不顯著，但 大劑量組(0. 4g/kg/d)給藥14， 21和28天均有抑制血清DHBV-DNA作用，其小、中、大劑量 分別相當于臨床使用劑量的1. 6倍、3. 2倍和6. 4倍，與給藥前比較，P值< 0. 05 ;給藥中途 21天與對照組相同時間比較P值〈0. 05。大劑量組加拉米夫定(3TC) 20mg/kg/d可顯著抑 制血清DHBV-DNA。表明實施例1所得藥品中、小二個劑量組在鴨體內對DHBV-DNA抑制作用 不顯著，但大劑量組有一定的抑制作用。 以上研究結果表明，實施例1所得藥品對CC14、 D-CalN、 APIT、 BCG+PLPS所引起的
急性肝損傷有明顯的保護作用；對CCl4所致大鼠慢性肝損傷有不同程度的抑制作用；ig或
肛塞后可迅速抑制轉氨酶的升高；對肝損傷動物的免疫功能有明顯的增強功能；且有一定
利膽作用；在2215細胞上對HBsAg和HBeAg有一定的抑制作用；大劑量(400mg/kg/d)在鴨
體內對DHBV-DNA有一定的抑制作用。提示實施例l所得藥品用于治療急性肝炎和慢性肝
炎均有一定的療效。 試驗例2—般藥理學試驗 24只畢格犬隨機分為4組，每組6只，雌雄各半，分別直腸給予實施例1所得藥品 30、 120、480mg/kg/d三個劑量(分別相當于臨床使用劑量的3、 12、48倍，按體表面積計)和 空白栓劑陰性對照組1次，觀察對其行為的影響；小鼠灌服實施例1所得藥品原料粉200、 400、800mg/kg三個劑量(分別相當于臨床使用劑量的4、8、16倍，按體表面積計)1次，進行 小鼠自主活動試驗；小鼠灌服實施例1所得藥品原料粉200、400、800mg/kg三個劑量(分別 相當于臨床使用劑量的4、8、 16倍，按體表面積計)1次，進行小鼠戊巴比妥鈉閾下催眠劑量 試驗；大鼠灌服實施例1所得藥品原料粉100、200、400mg/kg三個劑量(分別相當于臨床使 用劑量的4、8、16倍，按體表面積計)1次，進行轉棒試驗；麻醉犬直腸給予實施例1所得藥 品30、120、480mg/kg三個劑量(分別相當于臨床使用劑量的3、12、48倍，按體表面積計)1 次，觀察測定收縮壓、舒張壓和平均壓等血壓指標，P波、R波、T波、P-R間期、QRS間期、QT 間期、S-T段等心電指標，呼吸頻率和呼吸深度等呼吸指標。 結果顯示，在本實驗條件下，通過犬一般行為影響試驗、小鼠自主活動試驗、小鼠 閾下劑量催眠試驗和大鼠轉棒試驗，表明實施例1所得藥品對小鼠、大鼠和犬的神經系統 沒有明顯影響。通過對麻醉犬血壓、心電、呼吸試驗，表明直腸給予實施例1所得藥品30、 120、480mg/kg三個劑量(分別相當于臨床使用劑量的3、12、48倍，按體表面積計)1次，對 血壓和呼吸沒有明顯影響，480mg/kg劑量給藥90、 120分鐘時QRS間期一過性延長，稍后恢 復，對其余心電指標未見明顯影響。提示臨床用藥時要注意對心電的監控。
試驗例3急性毒性試驗
(1)家兔急性毒性試驗 20只家兔隨機分為2組，其中陰性對照組10只，給藥組10只，雌雄各半，用最大耐 受量法進行單次給藥毒性試驗。試驗結果顯示，家兔直腸給予實施例1所得藥品的最大耐 受量(MTD)大于5. 76g生藥/kg，約為臨床使用劑量的250倍。試驗期間外觀體征未見明顯 異常，沒有動物死亡，尸檢沒有發現明顯病變。
(2)犬急性毒性試驗
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6只畢格犬隨機分為2組，其中陰性對照組3只，給藥組3只，雌雄兼有，用最大給 藥量法進行單次給藥毒性試驗。試驗結果顯示，犬直腸給予實施例l所得藥品的最大耐受 量(MTD)大于2. 16g/kg，約為臨床使用劑量的108倍。試驗期間沒有動物死亡，外觀體征未 見明顯異常，尸檢沒有發現明顯病變。
試驗例4長期毒性試驗 32只畢格犬隨機分為4組，每組8只，雌雄各半，分別直腸給予實施例1所得藥品 60、240、960mg/kg/d三個劑量(分別相當于臨床使用劑量的3、 12、48倍，按體表面積計)和 空白栓劑陰性對照組，連續九個月。分別于給藥前(兩次)、給藥13周、給藥20周、給藥26 周、給藥34周、給藥39周及恢復6周做尿液分析檢查、心電圖檢查以及血常規、血凝、生化 指標和電解質指標檢查。在末次給藥后24小時，每組處理犬4只，雌雄各半，作系統尸檢，取 12個臟器稱重計算臟器系數，30個臟器作病理學檢查。剩余動物停藥作恢復期觀察6周， 然后處死作如上全部指標檢測。 結果顯示，在本實驗條件下，犬連續39周直腸給予實施例l所得藥品60、240、 960mg/kg/d三個劑量(分別相當于臨床使用劑量的3、 12、48倍，按體表面積計)，對動物的 外觀、一般行為、體重增長和體溫均無明顯影響。在20周時，三個劑量組動物均出現一過性 P-R間期延長，在以后的檢測中未出現該現象；低劑量有一定的升紅作用；尿液檢查發現有 一定的腎功異常，表現為尿比重降低，尿ra值增高，但血生化檢查卻未見相關指標的異常。 以上毒副作用在停藥6周后基本恢復，是可逆的。中毒的靶器官為腎臟和心臟，臨床長期 用藥時應注意對尿液和心電的檢查。鑒于上述異常指標均是一過性的、無明顯劑量關系的 或者沒有相應佐證的，因此認為該藥的三個劑量基本都是安全的，無毒副反應的安全劑量 《960mg/kg/d(相當于臨床使用劑量的48倍，按體表面積計)。
試驗例5剌激性試驗 用家兔在GLP實驗條件下，對實施例1所得藥品進行直腸局部剌激試驗。試驗結 果顯示在本實驗條件下，家兔直腸給藥，每日給藥1次，連續七天，O. 3g/粒規格(相當于臨 床使用劑量的5倍)對家兔直腸及肛周無明顯剌激作用，而1.2g/粒規格(相當于臨床使 用劑量的20倍)對家兔直腸及肛周有一定剌激作用，可引起直腸和肛管粘膜急慢性炎癥反 應。 盡管結合優選例子對本發明進行了說明，但本發明并不局限于上述例子，應該理 解，在本發明構思的引導下，本領域技術人員可進行各種修改和改進，所附權利要求概括了 本發明的范圍。
權利要求
一種治療肝病的中藥組合物，其中該中藥組合物是主要由按下列配比的下述中藥材制成的人參2-4重量份、鹿茸2-4重量份、淫羊藿30-34重量份、蛤蚧1-3重量份、菟絲子15-19重量份、韭菜子15-19重量份、蛇床子13-16重量份、吳茱萸9-12重量份、山柰0.6-0.9重量份。
2. 根據權利要求1所述的中藥組合物，其中所述中藥材的配比為人參2-3重量份、鹿茸2-3重量份、淫羊藿31-32重量份、蛤階1_2重量份、菟絲子17-18 重量份、韭菜子17-18重量份、蛇床子14-15重量份、吳茱萸10-11重量份、山柰0. 6-0. 8重 量份。
3. 根據權利要求2所述的中藥組合物，其中該中藥組合物中所含人參以人參皂苷Rbl 計，不少于0.017重量份。
4. 根據權利要求2所述的中藥組合物，其中該中藥組合物中所含淫羊藿以淫羊藿苷 計，不少于O. 085重量份。
5. 根據權利要求1-4中任一項所述的中藥組合物，其中，該中藥組合物被制為栓劑。
6. —種制備權利要求1所述的中藥組合物的方法，該方法包括以下步驟(1) 將30-34重量份的淫羊藿、15-19重量份的菟絲子、15-19重量份的韭菜子、13-16 重量份的蛇床子、9-12重量份的吳茱萸加水煎煮并過濾；(2) 將由步驟(1)得到的濾液濃縮至清膏；(3) 將2-4重量份的人參、2-4重量份的鹿茸、l-3重量份的蛤階、0. 6-0. 9重量份的山 柰與所述清膏混合。
7. 根據權利要求6所述的方法，其中在步驟(3)中，在所述混合之前，將人參、鹿茸、蛤 蚧、山柰制成細粉。
8. 根據權利要求7所述的方法，其中在步驟(3)中，在所述混合之后，將所得混合物進 行干燥并制成最細粉。
9. 根據權利要求6-8中任一項所述的方法，該方法還包括(4) 將由步驟(3)得到的混合物與混合脂肪酸甘油酯混合；(5) 將由步驟(4)得到的混合物制成栓劑。
10. 權利要求1-4中任一項所述的中藥組合物在制備用于治療急性肝損傷或慢性乙型 肝炎的藥物中的用途。
全文摘要
本發明提供一種治療肝病的中藥組合物及其制備方法和用途。本發明的中藥組合物是主要由按下列配比的下述中藥材制成的人參2-4重量份、鹿茸2-4重量份、淫羊藿30-34重量份、蛤蚧1-3重量份、菟絲子15-19重量份、韭菜子15-19重量份、蛇床子13-16重量份、吳茱萸9-12重量份、山柰0.6-0.9重量份。本發明的中藥組合物具有溫補脾腎、疏肝解郁的功效。本發明的中藥組合物可用于治療急性肝損傷及慢性乙型肝炎等病癥。
文檔編號A61K35/56GK101721598SQ20081016734
公開日2010年6月9日 申請日期2008年10月22日 優先權日2008年10月22日
發明者陸擎天 申請人:維康力(國際)有限公司