含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液及其制備方法

專利名稱：含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液及其制備方法
技術領域：
本發明屬于畜牧藥物制劑領域，具體涉及的是一種含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑 尼松龍的獸用復方混懸液及其制備方法。
背景技術：
隨著我國畜禽養殖業的快速發展，近年來獸醫臨床上各種致病菌愈來愈復雜，大 多病例均呈多病原混合感染，其中既有革蘭氏陽性菌感染，又有革蘭氏陰性菌感染，給獸醫 防治工作帶來極大困難。由于缺乏成熟的對各種致病菌均有良好效果的復方制劑，獸醫工 作者常需聯合使用多種單方藥物制劑來治療混合感染性疾病，且在感染早期常使用糖皮質 激素類藥如潑尼松龍、地塞米松等進行輔助治療。所以，治療一種疾病往往需同時給予多種 藥物制劑才能達到理想的治療效果，既給獸藥工作人員帶來了巨大的工作量，又給患病動 物帶來了極大的應激反應。因此，研發一種對多種致病菌均有良好防治效果的長效復方制 劑，是目前畜牧養殖業防治多病原混合感染性疾病的迫切需求，具有重要意義。在防治多病原混合感染性疾病的復方制劑研究方面，國內尚無較成熟的產品上 市，在國外，雖然美國輝瑞公司研制了阿莫西林、克拉維酸、潑尼松龍的供乳房灌注用滅菌 油性復方混懸溶液，但其主要用途為治療革蘭氏陽性菌和陰性菌引起的奶牛泌乳期乳房 炎；法國維克公司也成功研制了氨芐西林、硫酸粘菌素和地塞米松的復方注射用混懸液，但 該產品亦主要用于奶牛乳房炎的治療。以上現有的兩種復方制劑由于主要適用奶牛乳房炎 的治療，適用范圍窄，不能滿足各種動物(尤其是豬)的混合感染性疾病。

發明內容
本發明提供了一種療效確切的用于防治動物革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌 引起的混合感染和繼發感染的含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用復方混懸液。為解決上述技術問題，本發明采取以下技術方案一種含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液，是以阿莫西林、硫酸粘菌 素和潑尼松龍為有效成分的獸用混懸液。所述獸用混懸液中各有效成分的含量為阿莫西林5-30% (重量/體積百分 比濃度，g/100ml)，優選為 10-20% (g/100ml)；硫酸粘菌素 0. 25-3 % (g/100ml)，優選為 0. 5-2. 5% (g/100ml)；潑尼松龍 0. 01-0. 1 % (g/100ml)，優選為 0. 02-0. 05% (g/100ml)。所述獸用混懸液中還包括以下藥物輔料分散媒、助懸劑、潤濕劑、抗氧劑和防腐 劑。所述分散媒可選自注射用大豆油、油酸乙酯、三乙酸甘油酯、肉豆蔻酸異丙脂和注 射用蓖麻油中的一種或兩種。所述助懸劑可選自硬脂酸鋁、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、膽固醇、凡士林、羧甲基纖 維素鈉和氫化蓖麻油中的一種或兩種。
所述潤濕劑可選自吐溫-80、司盤-60、司盤-80和環氧乙烯-40-氫化蓖麻油中的一種。所述抗氧劑可選自維生素E、硫脲、叔丁基羥基茴香醚、偏重亞硫酸鈉和沒食子酸 丙脂中的一種。所述防腐劑可選自苯甲醇、尼泊金甲酯和尼泊金丙酯中的一種。具體來講，所述獸用混懸液中各成分的含量為阿莫西林5-30% (g/100ml)，優選 為 10-20% (g/100ml)；硫酸粘菌素 0. 25-3 % (g/100ml)，優選為 0. 5-2. 5 % (g/100ml)； 潑尼松龍 0. 01-0. 1 % (g/100ml)，優選為 0. 02-0. 05 % (g/100ml)，助懸劑 0. 1-2 % (g/100ml)，潤濕劑 0. 2-2 % (ml/100ml)，抗氧劑 0. 01-1 % (g/100ml)，防腐劑 0. 005-1 % (g/100ml)，其余為分散媒。本發明的第二個目的是提供一種制備上述含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍 的獸用混懸液的方法。本發明所提供的制備方法，可包括以下步驟1)取助懸劑、抗氧化劑和防腐劑溶于或分散于熱分散媒中，得到A液；2)取配方量40-80%的分散媒倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A 液，待全部加入完全，邊攪拌邊加入潤濕劑；3)待全部輔料加入完全，依次加入阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍，然后采用循 環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；4)檢查顆粒細度，符合要求后停止研磨，加分散媒至配方量，混勻，灌裝，密封，滅 菌，得到本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液。在上述藥物的制備方法中，所述分散媒可選自注射用大豆油、油酸乙酯、三乙酸甘 油酯、肉豆蔻酸異丙脂和注射用蓖麻油中的一種或兩種。所述助懸劑可選自硬脂酸鋁、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、膽固醇、凡士林、羧甲基纖 維素鈉和氫化蓖麻油中的一種或兩種。所述潤濕劑可選自吐溫-80、司盤-60、司盤-80和環氧乙烯_40_氫化蓖麻油中的 一種或兩種。所述抗氧劑可選自維生素E、硫脲、叔丁基羥基茴香醚、偏重亞硫酸鈉和沒食子酸 丙脂中的一種或兩種。所述防腐劑可選自苯甲醇、尼泊金甲酯和尼泊金丙酯中的一種或兩種。具體來講，所述獸用混懸液中各成分的含量為阿莫西林5-30% (g/100ml)，優選 為 10-20% (g/100ml)；硫酸粘菌素 0. 25-3 % (g/100ml)，優選為 0. 5-2. 5 % (g/100ml)； 潑尼松龍 0. 01-0. 1 % (g/100ml)，優選為 0. 02-0. 05 % (g/100ml)，助懸劑 0. 1-2 % (g/100ml)，潤濕劑 0. 2-2 % (ml/100ml)，抗氧劑 0. 01-1 % (g/100ml)，防腐劑 0. 005-1 % (g/100ml)，其余為分散媒。上述獸用混懸液的用法用量一般為0. 1-0. 2mL/kg體重，1天1次，連用3_5天。注 射劑量和療程可根據實際情況適當調整。本發明提供了一種含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液及其制備方 法。本發明的優點和積極效果如下(1)利用阿莫西林、硫酸粘菌素這兩個具有不同抗菌機理的抗生素，聯合使用發揮
4了兩藥的協同抗菌優勢，拓寬了抗菌譜，增強抗菌效力，降低、延緩耐藥性的產生。(2)潑尼松龍給藥后吸收迅速，血藥濃度高，組織親和力強，能迅速到達炎癥部位 發揮抗炎作用，本發明的混懸液對混合感染性疾病效果良好，為獸醫臨床提供了一種良好 的制劑。(3)將阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍聯合使用，拓寬了抗菌譜，增強了抗菌效 力，避免單藥使用帶來的局限性，延緩耐藥性的產生，并且具有抗炎、抗毒素的作用。此外， 采用復方制劑僅需每天給藥一次，既可以降低由于頻繁給藥(原單藥均需每天給藥兩或三 次)對動物產生的應激反應，又節省人力、物力和財力。(4)本發明的混懸液采用油性溶劑作為制劑的分散媒，不但解決了阿莫西林在水 性溶液中易降解的難題，而且在油性混懸液中，硫酸粘菌素在體內緩慢釋放，血藥濃度平 穩，降低了硫酸粘菌素的毒副作用。此外，本發明的含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液是采用分散法 將阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍分散于溶媒中，并加入助懸劑、潤濕劑和抗氧劑，利用 膠體磨研磨而得，生產工藝簡單，降低成本，易于實現產業化。綜上所述，本發明將時間依賴型抗生素阿莫西林、濃度依賴型抗生素硫酸粘桿菌 素有機地結合，既很好地利用單藥的抗菌作用，又發揮了兩藥聯用的協同抗菌優勢，兩藥聯 用擴大了抗菌譜，增強了抗菌效力，同時結合潑尼松龍的抗炎、消炎優勢，三者合用具有抗 感染、抗炎的作用。針對近年來我國獸醫臨床畜禽疾病多呈混合感染或繼發感染的流行特 點，本發明臨床上主要用于防治動物革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌引起的混合感染和 繼發感染。本發明制備工藝簡單，易于實現產業化，且成本低、低毒而高效，具有極高的推廣 應用價值。下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細說明。
具體實施例方式本發明是國家“十一五”科技支撐計劃課題(課題名稱獸用復方新制劑的研制與 應用；課題編號2006BAD31B08)的部分內容。本發明為了提供一種能普遍用于各種動物的混合感染性疾病的復方注射液，以 豬、牛、雞等不同動物臨床病例中分離的多種常見致病菌為研究對象，從恩諾沙星、阿莫西 林、泰樂菌素、硫酸粘菌素等多種常用藥物中篩選出協同作用較好且對革蘭氏陽性菌和革 蘭氏陰性菌均有極強作用的復方組合(阿莫西林和硫酸粘菌素)，同時結合潑尼松龍的消 炎作用，成功研制了可廣泛應用于防治各種動物的混合感染性疾病的阿莫西林、硫酸粘菌 素、潑尼松龍復方注射液。本發明把阿莫西林、硫酸粘菌素、潑尼松龍三種藥物研制成復方制劑的優點是克 服了因同時給予多種藥物對動物造成的應激反應，降低了獸醫人員的工作量。尤其重要的 是本復方制劑不但克服了單方制劑抗菌譜窄和現有復方制劑適用范圍小的缺陷，而且增強 了阿莫西林和硫酸粘菌素的抗菌效力，并延緩了此兩種藥物耐藥性的產生。本發明提供一種含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的復方制劑。在復方組配過 程中，需要特別考慮藥物之間的協同性，并通過篩選恰當的藥用輔料來形成療效確切且穩 定性良好的制劑。
本發明中所用藥物，優化使用有時間依賴型抗生素阿莫西林和濃度依賴型抗生素 硫酸粘桿菌素，兩種抗生素聯用，可以協同抗菌優勢，擴大抗菌譜，增強抗菌效力(參見后 續實驗一和實驗二)；再結合使用具有抗炎、消炎優勢的潑尼松龍，三者合用具有抗感染、 抗炎的效果(參見后續實驗三、四——臨床效果試驗)。其中注射液中各藥物成分含量阿 莫西林 5-30% (g/100ml)，優選為 10-20% (g/100ml)；硫酸粘菌素 0. 25-3 % (g/100ml)， 優選為 0. 5-2. 5 % (g/100ml)；潑尼松龍 0. 01-0. 1 % (g/100ml)，優選為 0. 02-0. 05 % (g/100ml)。本發明利用復方藥物結合適宜的藥用輔料制成獸用混懸液，包括使用分散媒、助 懸劑、潤濕劑、抗氧劑和防腐劑等藥物輔料。分散媒可選自注射用大豆油、油酸乙酯、三乙酸甘油酯、肉豆蔻酸異丙脂和注射 用蓖麻油中的一種或兩種的復合，優選油酸乙酯與注射用大豆油的復合分散媒。本發明中 特別選用油性溶劑作為制劑的分散媒，解決了阿莫西林在水性溶液中易降解的難題，且在 油性混懸液中，硫酸粘菌素在體內緩慢釋放，血藥濃度平穩，降低了硫酸粘菌素的毒副作用。助懸劑可選自硬脂酸鋁、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、膽固醇、凡士林、羧甲基纖維 素鈉和氫化蓖麻油中的一種或兩種的復合，助懸劑的種類和用量依據藥物用量和分散媒種 類進行調整，以利于形成穩定的注射液。在注射液中助懸劑含量為0.1-2% (g/100ml)。潤濕劑可選自吐溫-80、司盤-60、司盤-80和環氧乙烯-40-氫化蓖麻油中的一 種，在制藥過程中盡可能選用單一組分，但不排除使用多種復合的方式。在注射液中潤濕劑 含量為 0.2-2% (ml/100ml)。抗氧劑可選自維生素E、硫脲、叔丁基羥基茴香醚、偏重亞硫酸鈉和沒食子酸丙 脂中的一種，在制藥過程中盡可能選用單一組分，但不排除使用多種復合的方式。在注射液 中抗氧劑含量為0.01-1% (g/100ml)。防腐劑可選自苯甲醇、尼泊金甲酯和尼泊金丙酯中的一種，在制藥過程中盡可 能選用單一組分，但不排除使用多種復合的方式。在注射液中防腐劑的含量為0.005-1% (g/100ml)。依據本發明形成的獸用混懸液中各成分的含量可以為阿莫西林5-30% (g/100ml)，優選為 10-20 % (g/100ml)；硫酸粘菌素 0. 25-3 % (g/100ml)，優選為 0. 5-2. 5% (g/100ml)；潑尼松龍 0. 01-0. 1 % (g/100ml)，優選為 0. 02-0. 05 % (g/100ml)， 助懸劑 0. 1-2% (g/100ml)，潤濕劑 0. 2-2% (ml/100ml)，抗氧劑 0. 01-1 % (g/100ml)，防腐 劑 0.005-1% (g/100ml)，其余為分散媒(ml)。以下以具體實施例進一步說明本發明。下述實施例1-10采用本發明的最佳實驗 方案，本領域的普通技術人員能夠依據本發明公開的內容顯而易見地想到一些雷同、替代 方案，均應屬于本發明的公開內容。實施例中所用方法如無特別說明均為常規方法。實施例1本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下阿莫西林20kg，硫酸粘菌素1. 5kg，潑尼松龍0. 04kg,
硬脂酸鋁1kg，司盤-801L,沒食子酸丙酯0. 02kg,苯甲醇0.5kg_注射用大豆油加至100L。用本發明制備含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液，具體方法包 括以下步驟1)將配方量的硬脂酸鋁、沒食子酸丙酯加入2L注射用大豆油中，加熱攪拌使其完 全溶解，加入配方量的苯甲醇，得到A液；2)取60L注射用大豆油倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A液，待全 部加入完全，邊攪拌邊加入配方量的司盤-80 ；3)待全部輔料加入完全，依次加入配方量的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍，然 后采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；4)檢查顆粒細度，結果符合要求(標準為粒徑大于15μπι的顆粒數應少于10%)， 停止研磨，加注射用大豆油至100L，混勻，灌裝，密封，滅菌，得到本發明的含有阿莫西林、硫 酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液。實施例2本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下阿莫西林20kg，硫酸粘菌素1kg，潑尼松龍0. 03kg,氫化蓖麻油1kg，司盤-600.5L，沒食子酸丙酯0. 02kg,尼泊金甲酯0.05kg，_肉豆蔻酸異丙脂加至100L。用本發明的方法制備含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液，具體 方法包括以下步驟1)取配方量的氫化蓖麻油、沒食子酸丙酯和尼泊金甲酯加入2L肉豆蔻酸異丙脂 中，加熱攪拌使其完全溶解得到A液；2)取40L肉豆蔻酸異丙脂倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A液，待 全部加入完全，邊攪拌邊加入配方量的司盤-60 ；3)待全部輔料加入完全，依次加入配方量的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍，然 后采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；4)檢查顆粒細度，結果符合要求，停止研磨，加肉豆蔻酸異丙脂至100L，混勻，灌 裝，密封，滅菌，得到本發明的含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液。實施例3
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本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下阿莫西林IOkg,
硫酸粘菌素Ikg,
潑尼松龍0. 05kg,
氫化蓖麻油0. 5kg,
凡士林0. 25kg,
司盤-800. 2L,
硫脲0. 2kg，
尼泊金甲酯0. 05kg,
油酸乙酯30L,_注射用大豆油加至100L。用本發明的方法制備含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液，具體 方法包括以下步驟1)取配方量的氫化蓖麻油、凡士林、硫脲和尼泊金甲酯加入2L注射用大豆油中， 加熱攪拌使其完全溶解，得到A液；2)取配方量的油酸乙酯和30L注射用大豆油倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩 緩加入上述A液，待全部加入完全，邊攪拌邊加入配方量的司盤-80 ；3)待全部輔料加入完全，依次加入配方量的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍，然 后采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；4)檢查顆粒細度，結果符合要求，停止研磨，加注射用大豆油至100L，混勻，灌裝， 密封，滅菌，得到本發明的含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液。實施例4本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下阿莫西林15kg，硫酸粘菌素2.5kg，潑尼松龍0.04kg，卵磷脂0.8kg，司盤-801L，維生素E0. 05kg,尼泊金丙酯0.05kg，_注射用蓖麻油加至100L。用本發明的方法制備含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液，具體 方法包括以下步驟(1)取配方量的卵磷脂、維生素E和尼泊金丙酯加入2L注射用蓖麻油中，加熱攪拌 使其完全溶解，得到A液；(2)取80L注射用蓖麻油倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A液，待全 部加入完全，邊攪拌邊加入配方量的司盤-80 ；
(3)待全部輔料加入完全，依次加入配方量的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍， 然后采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；(4)檢查顆粒細度符合要求后，停止研磨，加注射用蓖麻油至100L，混勻，灌裝，密 封，滅菌，得到本發明的含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液。實施例5本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下阿莫西林15kg，硫酸粘菌素2kg，潑尼松龍0.05kg，卵磷脂0.2kg，氫化蓖麻油0.5kg，司盤-600. 8L,叔丁基羥基茴香醚0.05kg，尼泊金甲酯0.05kg，_油酸乙酯加至100L。用本發明的方法制備含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液，具體 方法包括以下步驟1)取配方量的氫化蓖麻油、卵磷脂、叔丁基羥基茴香醚和尼泊金甲酯加入2L油酸 乙酯中，加熱攪拌使其完全溶解，得到A液；2)取60L油酸乙酯倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A液，待全部加 入完全，邊攪拌邊加入配方量的司盤-60 ；3)待全部輔料加入完全，依次加入配方量的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍，開 始研磨，采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；4)檢查顆粒細度，結果符合要求，停止研磨，加油酸乙酯100L，混勻，灌裝，密封， 滅菌，得到本發明的含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液。實施例6
本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下
阿莫西林20kg
硫酸粘菌素2kg
潑尼松龍0. 04kg
氫化蓖麻油0. 3kg
卵磷脂0. 5kg
司盤-800. 6L
維生素E0. 05kg
尼泊金甲酯0. 05kg
油酸乙酯加至IOOL
所述的阿莫西林、硫酉髮粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的制備方法包括如下步
9驟(1)取配方量的氫化蓖麻油、卵磷脂和尼泊金甲酯溶于2L熱油酸乙酯中，為A液；(2)取60L油酸乙酯倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A液，待全部加 入完全，邊攪拌邊加入配方量的司盤-80 ；(3)待全部輔料加入完全，依次加入配方量的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍， 開始研磨，采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；(4)檢查顆粒細度符合要求后，停止研磨，加油酸乙酯至100L，混勻，灌裝，密封， 滅菌，即得所述的混懸液。實施例7本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下阿莫西林20kg
硫酸粘菌素2kg
潑尼松龍0. 04kg
氫化蓖麻油0. 3kg
卵磷脂0. 3kg
司盤-801. 5L
維生素E0.075kg
尼泊金甲酯0. 05kg
油酸乙酯IOL _注射用大豆油加至100L所述的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的制備方法包括如下步 驟(1)取配方量的氫化蓖麻油、卵磷脂和尼泊金甲酯溶于2L熱注射用大豆油中，為A 液；(2)取50L注射用大豆油和配方量的油酸乙酯倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩 緩加入上述A液，待全部加入完全，邊攪拌邊加入配方量的司盤-80 ；(3)待全部輔料加入完全，依次加入配方量的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍， 開始研磨，采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；(4)檢查顆粒細度符合要求后，停止研磨，加注射用大豆油至100L，混勻，灌裝，密 封，滅菌，即得所述的混懸液。實施例8本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下阿莫西林15kg硫酸粘菌素2.5kg潑尼松龍0.05kg卵磷脂1.5kg司盤-600. 5L維生素E0. 075kg
尼泊金甲酯0.05kg_肉豆蔻酸異丙脂加至100L所述的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的制備方法包括如下步 驟(1)取配方量的卵磷脂、維生素E和尼泊金甲酯溶于2L熱肉豆蔻酸異丙脂中，為A 液；(2)取60L肉豆蔻酸異丙脂倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A液，待 全部加入完全，邊攪拌邊加入配方量的司盤-60 ；(3)待全部輔料加入完全，依次加入配方量的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍， 開始研磨，采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；(4)檢查顆粒細度符合要求后，停止研磨，加注射用肉豆蔻酸異丙脂至IOOLjg 勻，灌裝，密封，滅菌，即得所述的混懸液。實施例9本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下阿莫西林30kg硫酸粘菌素0.5kg潑尼松龍0.02kg膽固醇0. Ikg環氧乙烯-40-氫化蓖麻油1.0L叔丁基羥基茴香醚0.01kg尼泊金甲酯0.005kg_三乙酸甘油酯加至100L所述的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的制備方法包括如下步 驟(1)取配方量的膽固醇、尼泊金甲酯和叔丁基羥基茴香醚溶于2L三乙酸甘油酯 中，為A液；(2)取60L三乙酸甘油酯倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A液，待全 部加入完全，邊攪拌邊加入配方量的環氧乙烯-40-氫化蓖麻油；(3)待全部輔料加入完全，依次加入配方量的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍， 開始研磨，采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；(4)檢查顆粒細度符合要求后，停止研磨，加注射用三乙酸甘油酯至100L，混勻， 灌裝，密封，滅菌，即得所述的混懸液。實施例10本發明含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的配方如下阿莫西林IOkg硫酸粘菌素2kg潑尼松龍0. Ikg
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卵磷脂0. 5kg膽固醇0. 5kg尼泊金甲酯0.5kg_油酸乙酯50L注射用大豆油加至100L所述的阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液的制備方法包括如下步 驟(1)按量取卵磷脂、膽固醇、尼泊金甲酯溶于2L油酸乙酯中，為A液；(2)取余量油酸乙酯倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A液，待全部 加入完全，邊攪拌邊按量加入環氧乙烯-40-氫化蓖麻油；(3)待全部輔料加入完全，依次加入阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍，開始研磨， 采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；(4)檢查顆粒細度符合要求后，停止研磨，加注射用大豆油至100L，混勻，灌裝，密 封，滅菌，即得所述的混懸液。實驗一、阿莫西林與硫酸粘菌素聯合抗菌作用為探討阿莫西林與硫酸粘桿菌素聯合應用是否能增強對豬大腸桿菌、豬多殺性巴 氏桿菌、豬霍亂沙門氏菌、豬鏈球菌、豬胸膜肺炎放線桿菌、奶牛乳房炎性金葡球菌、奶牛乳 房炎性鏈球菌等常見病原菌感染的療效，本發明進行了兩藥的體外聯合抗菌試驗。1材料與儀器1.1供試藥品阿莫西林(AMO)，含量為99. 5%，批號20080312，珠海聯邦制藥股份有限公司；硫酸粘桿菌素(COS)，含量為23694IU/mg，批號N0710003J，麗珠集團福州福興制 藥股份有限公司；1.2受試菌株分離菌株豬大腸桿菌17株；豬巴氏桿菌6株；豬、雞沙門氏菌共8株；奶牛乳房 炎金葡球菌10株；豬、牛鏈球菌共16株；豬胸膜肺炎放線桿菌7株。質控菌株ATCC25922、ATCC29213、ATCC49619，均購自中國獸藥監察所。1. 3培養基MH肉湯培養基，批號20071102，MH瓊脂培養基，批號20071103，北京奧博星生物技 術責任有限公司。上述各種培養基按照常規方法制備，經過無菌檢查合格后，置于4°C冰箱 中保存，用于培養大腸桿菌、豬霍亂沙門氏菌和金葡球菌。用于培養豬多殺性巴氏桿菌、鏈 還球菌的培養基則在上述配制方法中添加5% (V/V)的優級胎牛血清。用于培養豬胸膜肺 炎放線桿菌的培養基為PPLO培養基。1. 4主要儀器(1)分光光度計721型，山東高密分析儀器廠。(2)微量棋盤稀釋法聯合藥敏試驗板天津金章科技開發有限公司。(3)連續微量加樣器、八道微量加樣器美國Eppendorf公司。2試驗方法
2. 1藥物原液的配制及保存阿莫西林原液用0. lmol/L磷酸鹽緩沖液(pH6. 0)將阿莫西林配成濃度為 1280μ g/mL的藥物原液，用高壓滅菌過的0. 2μπι孔徑濾頭過濾，分裝至2mL離心管中， 置-20°C冰箱中保存，待用。硫酸粘菌素原液用蒸餾水將硫酸粘菌素配成濃度為2560 μ g/mL的藥物原液，用 高壓滅菌過的0. 2 μ m孔徑濾頭過濾，分裝至滅菌2mL塑料離心管中，密封，置-20°C冰箱中 保存，待用。2. 2菌液的制備2. 2. 1大腸桿菌、沙門氏菌、金葡球菌菌液的制備從保存菌種的培養基斜面上蘸取少許菌落，接種于MH肉湯培養液中，在37°C培養 18h，將培養所得原菌液以10—1倍比稀釋，分別如下=Io-1Uo-2UO-3UO-4UO-5UO-6UO-7UO-8 ； 將各菌液分別取10_6、10_7、10_8的濃度以微量加樣器取100 μ L到預先準備好的MH瓊脂平板 中，L型玻璃棒灼燒滅菌，冷卻后，將菌液均勻涂布在培養基表面(無菌檢查合格)；然后將 平板培養基放入隔水式恒溫培養箱中，培養24小時后觀察，計算菌液濃度。確定原菌原液 的濃度，然后用滅菌生理鹽水稀釋到106CFU/ml，置4°C冰箱備用，保存時間不超過6h。2. 2. 2多殺性巴氏桿菌、鏈球菌菌液的制備從保存菌種的斜面上蘸取少許菌苔，接種鮮血MH肉湯培養液中，在37°C培養18h， 將原菌液以10—1倍稀釋，分別如下=IO-1UO-2UO-3UO-4UO-5UO-6UO-7UO-8 ；將各菌液分別 取10_6、10—7、10_8的濃度以微量加樣器取100 μ L到預先準備好的鮮血MH瓊脂平板中，將L 型玻璃棒在火焰上灼燒滅菌，冷卻后，將菌液均勻推散在培養基表面(無菌檢查合格)；然 后將平板培養基放入隔水式恒溫培養箱中，培養24小時后觀察，計算菌液濃度。確定菌原 液的濃度，然后用滅菌生理鹽水稀釋到106CFU/ml，置4°C冰箱備用，保存時間不超過6h。2. 2. 3豬胸膜肺炎放線桿菌菌液的制備從保存菌種的斜面上蘸取少許菌苔，接種于PPLO培養基中，在37°C培養18h，將 原菌液以 ο—1倍稀釋，分別如下=Io-1Uo-2UO-3UO-4UO-5UO-6UO-7UO-8 ；將各菌液分別取 10_6、10_7、10_8的濃度以微量加樣器取100 μ L到預先準備好的PPLO培養基中，將L型玻璃 棒在火焰上灼燒滅菌，冷卻后，將菌液均勻推散在培養基表面(無菌檢查合格)；然后將平 板培養基放入隔水式恒溫培養箱中，培養24小時后觀察，計算菌液濃度。確定菌原液的濃 度，然后用滅菌生理鹽水稀釋到106CFU/ml，置4°C冰箱備用，保存時間不超過6h。2. 3MIC 的測定2. 3. 1大腸桿菌、沙門氏菌和金葡球菌MIC的測定采用肉湯微量稀釋法以滅菌MH肉湯將阿莫西林原液、硫酸粘桿菌素原液倍比 稀釋11個濃度(阿莫西林從0. 125-512 μ g/mL,硫酸粘桿菌素從0. 0625-128 μ g/mL)，分 別取100 μ L加入96孔板微量孔中，之后加入一定濃度菌懸液，使每孔最終細菌濃度為 5X105CFU/mL，并設細菌生長對照和空白對照，37°C恒溫培養箱中培養24h，以無細菌生長 的最低抗菌單藥藥物濃度為MIC。大腸桿菌ATCC25922為MIC測定的質控菌。2. 3. 2巴氏桿菌和鏈球菌MIC的測定采用肉湯微量稀釋法以血清肉湯將阿莫西林原液、硫酸粘菌素原液倍比稀釋11 個濃度(阿莫西林從0. 125-128 μ g/mL，硫酸粘桿菌素從0. 031—64 μ g/mL)，分別取100 μ L加入96孔板微量孔中，之后加入一定濃度菌懸，使每孔最終細菌濃度為5 X 105CFU/mL，并設 細菌生長對照和空白對照，37°C恒溫培養箱中培養24h，以無細菌生長的最低抗菌單藥藥濃 度為MIC。2. 3. 3豬胸膜肺炎放線桿菌MIC的測定以PPLO培養基將阿莫西林原液、硫酸粘菌素原液倍比稀釋11個濃度(阿莫西林 從0. 125-128 μ g/mL,硫酸粘桿菌素從0. 031-64 μ g/mL)，分別取100 μ L加入96孔板微量 孔中，之后加入一定濃度菌懸，使每孔最終細菌濃度為5 X 105CFU/mL，并設細菌生長對照和 空白對照，37°C恒溫培養箱中培養24h，以無細菌生長的最低抗菌單藥濃度為MIC。2. 4聯合藥敏試驗根據單藥的MIC的結果，將阿莫西林原液、硫酸粘菌素原液分別用肉湯倍比稀釋 成6個不同的工作濃度，按棋盤法設計，將兩藥先后分別加入到96孔板的每個孔中，每孔 中每種抗菌藥物取50μ 1，使各孔中的每種藥物最終濃度分別為其單藥的1/8MIC、1/4MIC、 1/2MIC、1MIC、2MIC和4MIC，并分別設兩藥的單藥對照、細菌生長對照和空白對照。再將 106CFU/mL的菌液100 μ L加入各孔中，使各孔中細菌的終濃度為5 X 105CFU/mL，37°C培養 24h，觀察并記錄結果。每菌株重復棋盤試驗3次。選擇最佳組合效應時各自的MIC申藥聯用、 MICi藥賴以計算FIC指數。FIC指數計算與判讀標準
權利要求
一種含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液，是以阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍為有效成分的獸用混懸液。
2.根據權利要求1所述的獸用混懸液，其特征在于所述獸用混懸液中各有效藥物成 分的含量為阿莫西林5-30%，優選10-20% ；硫酸粘菌素0. 25-3%，優選0. 5-2.5% ；潑尼 松龍 0.01-0. 1%，優選 0.02-0. 05% ； %含義為 g/IOOmLο
3.根據權利要求1或2所述的獸用混懸液，其特征在于所述獸用混懸液中還包括以 下藥物輔料分散媒、助懸劑、潤濕劑、抗氧劑和防腐劑。
4.根據權利要求3所述的獸用混懸液，其特征在于所述分散媒選自注射用大豆油、油 酸乙酯、三乙酸甘油酯、肉豆蔻酸異丙脂和注射用蓖麻油中的一種或兩種的復合。
5.根據權利要求3所述的獸用混懸液，其特征在于所述助懸劑選自硬脂酸鋁、聚乙烯 吡咯烷酮、卵磷脂、膽固醇、凡士林、羧甲基纖維素鈉和氫化蓖麻油中的一種或兩種的復合； 助懸劑含量為0. 2-1. 5% (g/IOOmL)。
6.根據權利要求3所述的獸用混懸液，其特征在于所述潤濕劑選自吐溫-80、司 盤-60、司盤-80和環氧乙烯-40-氫化蓖麻油中的一種或兩種；潤濕劑含量為0. 2-1. 3% (ml/IOOmL)。
7.根據權利要求3所述的獸用混懸液，其特征在于所述抗氧劑選自維生素E、硫脲、 叔丁基羥基茴香醚、偏重亞硫酸鈉和沒食子酸丙脂中的一種或兩種；抗氧劑含量0.01-1% (g/IOOmL)。
8.根據權利要求3所述的獸用混懸液，其特征在于所述防腐劑選自苯甲醇、尼泊金甲 酯和尼泊金丙酯中的一種或兩種；防腐劑含量0. 005-1% (g/100mL)。
9.根據權利要求1至8任一所述的獸用混懸液，其特征在于所述獸用混懸液中各 成分的含量為阿莫西林5-30%，硫酸粘菌素0. 25-3%，潑尼松龍0.01-0. 1%，助懸劑 0. 2-1. 5 %，潤濕劑 0. 2-1. 3 % (ml/IOOmL)，抗氧劑 0. 02-0. 2 %，防腐劑 0. 05-0. 5 %，其余 為分散媒；優選阿莫西林10-20%，硫酸粘菌素1-2. 5%,0. 02-0. 05%，助懸劑0. 1-2%，潤 濕劑0. 2-2%，抗氧劑0. 01-1%,防腐劑0. 005-1 %，其余為分散媒；除標注外，％含義為 g/100mL。
10.一種制備權利要求1至9任一所述含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混 懸液的方法，包括以下步驟1)取助懸劑、抗氧化劑和防腐劑溶于或分散于熱分散媒中，得到A液；2)取配方量40-80%(V/V)的分散媒倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A 液，待全部加入完全，邊攪拌邊加入潤濕劑；3)待全部輔料加入完全，依次加入阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍，然后采用循環研 磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；4)檢查顆粒細度，符合要求后停止研磨，加分散媒至配方量，混勻，灌裝，密封，滅菌，得 到含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液。
全文摘要
本發明公開了一種含阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液及其制備方法。該獸用混懸液是以阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍為有效成分的獸用混懸液。其制備方法包括以下步驟1)取助懸劑、抗氧化劑和防腐劑溶于或分散于熱分散媒中，得到A液；2)取配方量40-80％的分散媒倒入膠體磨中，啟動膠體磨，然后緩緩加入上述A液，待全部加入完全，邊攪拌邊加入潤濕劑；3)待全部輔料加入完全，依次加入阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍，然后采用循環研磨和非循環研磨相交替的方式進行研磨；4)檢查顆粒細度，符合要求后停止研磨，加分散媒至配方量，混勻，灌裝，密封，滅菌，得到含有阿莫西林、硫酸粘菌素和潑尼松龍的獸用混懸液。
文檔編號A61K31/43GK101953784SQ200910088998
公開日2011年1月26日 申請日期2009年7月16日 優先權日2009年7月16日
發明者何家康, 張朝明, 李蘭, 湯樹生, 沈建忠, 肖希龍 申請人:中國農業大學;北京中農大動物保健品技術研究院