專利名稱：：果糖脂質體注射劑及其新應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及果糖的一種注射劑，尤其是涉及果糖脂質體注射劑及其在治療糖尿病的藥物中的新應用。
背景技術：
：果糖(D-fructose)是一種左旋六碳糖，為葡萄糖的異構體，能量和體液補充劑。果糖比葡萄糖更易形成糖原，主要在肝臟通過果糖激酶代謝，易于代謝為果酸，迅速轉化為能量。藥動學資料表明，健康人持續輸入果糖可達穩態血藥濃度68毫摩爾/升，體內ATP和無機磷均下降到穩態水平，肝臟清除率為0.53毫升/克(肝重)/分鐘，細胞內代謝符合一級動力學過程。果糖藥理作用基本上與葡萄糖相同，具有直接供給熱能、補充體液及營養全身的功效。果糖靜脈給藥后在體內代謝卻比葡萄糖快，易被機體吸收利用，且不依賴胰島素，對血糖影響小，更適宜于糖尿病、肝病病人供給能量、補充體液。果糖用于燒傷術后感染等胰島素抵抗狀態下或不適宜使用葡萄糖時需補充水分或能源的患者的體液補充治療。目前，市場上銷售的產品是果糖注射液和注射用果糖無菌粉，均為采用普通的生產工藝制得。果糖注射液始終處于水溶液狀態，無論是在生產還是存儲過程中的振蕩及光照下都易于氧化分解，特別是高溫滅菌時更容易氧化和水解，導致患者出現蕁麻疹等輸液反應，不利于其廣泛長期使用。專利文獻CN1608674A公開了復方果糖注射液，包含果糖與無配伍禁忌的治療性藥物。專利文獻CN1650873A公開了由無菌粉配制的果糖注射液。專利文獻CN1602881A中介紹了一種注射用果糖的制備方法，由果糖和甘露醇組成，混合無菌分裝制得，同樣采用普通的配方和生產工藝，并沒有解決其穩定性問題。自20世紀60年代末Rahman等人首先將脂質體作為藥物載體應用以來，隨著科學技術的不斷進展，脂質體制備工藝逐步完善，脂質體作用機制進一步闡明，脂質體成為當前研究的熱門
技術領域：
。已經證明，脂質體適合體內降解、無毒性和無免疫原性，更為重要的是脂質體作為藥物載體不僅可以提高藥物的穩定性，還可以提高藥物治療指數、降低藥物毒性和減少藥物副作用。本發明人在現有技術的基礎上，經過長期認真的研究，意想不到地發現將屬于靶向給藥系統的新劑型脂質體應用于果糖注射制劑中，很好解決了果糖長期放置穩定性不好的問題，從而完成了本發明。
發明內容針對目前的果糖注射劑穩定性不好的問題，本發明的目的在于提供一種具有良好穩定性的果糖脂質體注射劑，通過逆相蒸發法用脂質體進行包裹，解決了上述存在的問題。雖然現有技術已經教導了脂質體可以用于提高活性成分的穩定性和生物利用度，但是現有技術并沒有明確教導果糖注射液可以制成脂質體包裹的果糖的注射液，并且通過3不同的脂質體原料制成具有期望效果的果糖脂質體注射液是需要付出創造性勞動的，非顯而易見的，具有創造性。本發明解決的技術方案如下一種果糖脂質體注射劑，包含重量份計的以下組分果糖l份大豆卵磷脂3-20份膽固醇0.5-8份泊洛沙姆1880.3-10份滲透壓調節劑0-5份藥學上可接受的緩沖溶液1-5份作為本發明的一優選實施方案，包含重量份計的以下組分果糖l份大豆卵磷脂4-12份膽固醇0.8-5份泊洛沙姆1880.5-3份滲透壓調節劑0-1.5份藥學上可接受的緩沖溶液2-4份滲透壓調節劑為調節藥液和血漿具有相同滲透壓的溶液，50ml以上輸液制劑中的滲透壓應為等滲或偏高滲，不會引起血象的任何異常變化。常用的滲透壓調節劑有氯化鈉、葡萄糖、甘油、丙二醇、山梨醇、木糖醇、氯化鉀、乳酸鈉、氨基酸類、右旋糖酐、明膠、聚維酮類、淀粉衍生物等。本發明中的滲透壓調節劑選自氯化鈉、葡萄糖、山梨醇、木糖醇、甘油、丙二醇中的一種或幾種，優選為氯化鈉和葡萄糖。上述果糖脂質體注射劑中，緩沖溶液選自pH為5.0-6.0的磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液中的一種或幾種，優選為醋酸-醋酸鈉緩沖液、磷酸二氫鉀_磷酸氫二鉀緩沖液和枸櫞酸_枸櫞酸鈉緩沖液。上述果糖脂質體注射劑還可加入1-40份優選為8-12重量份的凍干支持劑制成凍干制劑，所述凍干支持劑選自甘露醇、葡萄糖、海藻糖、乳糖、蔗糖、山梨醇、氯化鈉、甘氨酸中的一種或多種，優選為重量比為3:1的甘露醇和甘氨酸的組合。本發明還提供了一種果糖脂質體注射劑的制備方法，制備步驟為(1)將配方量的大豆卵磷脂、膽固醇和泊洛沙姆188溶于適量的有機溶劑中；(2)將配方量的果糖和滲透壓調節劑溶于適量的水中；(3)將二者混合，攪拌，形成W/0型乳劑，加熱攪拌蒸發，當混合物達到粘稠狀態時，再加入緩沖鹽溶液，繼續加熱攪拌蒸發除去殘留有機溶劑，超聲，轉移至高速勻質攪拌機中，攪拌勻質，得混懸液；(4)將上述混懸液過濾，分裝，滅菌，得果糖脂質體注射液；或者將配方量的凍干支持劑溶于適量的水中，加入上述混懸液中，攪拌混勻，過濾，冷凍干燥，得果糖脂質體凍干劑。上述所述的制備方法，有機溶劑選自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、異丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一種或幾種，優選為體積比為1:2乙醇和乙醚的混合溶劑；4有機溶劑的量優選為大豆卵磷脂、膽固醇和泊洛沙姆188重量總和的6-10倍體積。上述所述的制備方法，步驟(2)中溶解果糖和滲透壓調節劑的水量優選是二者重量總和的5-20倍體積。上述所述的制備方法，步驟(3)中二者混合后攪拌20-30min，轉速300-500r/min;超聲10-20min，高速勻質攪拌機中高速攪拌10-20min，轉速12000-15000r/min。作為優選，本發明提供的果糖脂質體注射劑的制備方法，包括如下步驟(1)將配方量的大豆卵磷脂、膽固醇和泊洛沙姆188溶于三者重量總和的6-10倍體積的有機溶劑中；(2)將配方量的果糖和滲透壓調節劑溶于二者重量總和的5-20倍體積的水中；(3)將二者混合，攪拌20-30min，轉速300-500r/min，形成W/0型乳劑，加熱攪拌蒸發，當混合物達到粘稠狀態時，再加入pH為5.0-6.0的緩沖鹽溶液，繼續加熱攪拌蒸發除去殘留有機溶劑，超聲10-20min，轉移至高速勻質攪拌機中，攪拌勻質10-20min，轉速12000-15000r/min，得混懸液；(4)將上述混懸液過濾，分裝，滅菌，得果糖脂質體注射液；或者將8-12重量份的凍干支持劑溶于其重量的5-20倍體積的水中，加入上述混懸液中，攪拌混勻，過濾，冷凍干燥，得果糖脂質體凍干劑。本發明提供的果糖脂質體注射劑，進行穩定性試驗考察，在高溫4(TC、相對濕度75%±5%條件下加速試驗6個月，各項檢測指標沒有明顯變化；在高溫25t:、相對濕度60%±10%條件下長期試驗18個月，各項檢測指標沒有明顯變化。由于果糖注射液對于糖尿病并高血壓、手術、創傷后的患者的血糖、血壓的影響較傳統的葡萄糖注射液或生理鹽水的影響相對較小，因此常與其他注射藥品配伍使用，但是由于果糖注射液自身特點，濃度大，體積小，存在多種配伍禁忌，不利于果糖注射的廣泛使用。本發明的果糖脂質體注射液濃度較小，可以擴大體積到500ml，提高了果糖注射液作為稀釋劑的使用范圍，有利于臨床的廣泛使用。本發明的目的在于還提供一種果糖注射劑在制備治療糖尿病的藥物中的應用。本發明提供的果糖脂質體制劑，進行急性毒性試驗、異常毒性試驗和熱源檢查，均符合規定，安全性得到證明。本發明提供的果糖脂質體注射劑，與現有技術相比，具有意想不到的效果，主要優點如下(1)果糖被包裹于脂質體內，解決了穩定性不好的問題，保證了產品質量；(2)藥物載體脂質體體內降解、無毒性和無免疫原性，而且可以提高藥物治療指數、降低藥物毒性和減少藥物副作用；(3)采用常規的工藝設備，可工業規模、高效率生產，產品質量穩定，是一種獨特和普遍適用的，低成本的工業化制備方法。具體實施例方式以下通過實施例進一步說明本發明，但不應理解為對本發明的限制。實施例1果糖脂質體注射液的制備配方果糖大豆卵磷脂膽固醇泊洛沙姆188氯化鈉12.5g75g37.5g22.5g2.25gpH值5.3醋酸-醋酸鈉緩沖液50g制備工藝(1)將75g大豆卵磷脂、37.5g膽固醇、22.5g泊洛沙姆188溶于850ml體積比為1:2的乙醇和乙醚混合溶劑中；(2)將果糖12.5g和氯化鈉2.25g溶于250ml水中；(3)將二者混合，攪拌20min，轉速300r/min，形成W/0型乳劑，加熱攪拌蒸發，當混合物達到粘稠狀態時，再加入50gpH5.3醋酸-醋酸鈉緩沖液，繼續加熱攪拌蒸發除去殘留的乙醇和乙醚混合溶劑，超聲20min，轉移至高速勻質攪拌機中，攪拌勻質攪拌勻質10min，轉速15000r/min，，得混懸液；(4)將上述混懸液過濾，分裝，滅菌，得果糖脂質體注射液。對比例1果糖脂質體注射液的制備(比較加入的脂質體原料成分不同)配方果糖12.5g蛋黃卵磷脂75g膽固醇37.5g吐溫8022.5g氯化鈉2.25gpH值5.3醋酸-醋酸鈉緩沖液50g制備方法同實施例l，加入本發明優選范圍之外的組分，制得果糖脂質體注射液。實施例2果糖脂質體注射液的制備配方果糖25g大豆卵磷脂100g膽固醇20g泊洛沙姆18812.5g葡萄糖25gpH值5.5磷酸二氫鉀_磷酸氫二鉀緩沖液50g制備工藝(1)將100g大豆卵磷脂、20g膽固醇、12.5g泊洛沙姆188溶于1000ml體積比為1:2的乙醇和乙醚混合溶劑中；(2)將果糖25g和葡萄糖25g溶于500ml水中；(3)將二者混合，攪拌30min，轉速500r/min，形成W/0型乳劑，加熱攪拌蒸發，當混合物達到粘稠狀態時，再加入50gpH值5.5磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液，繼續加熱攪拌蒸發除去殘留的乙醇和乙醚混合溶劑，超聲10min，轉移至高速勻質攪拌機中，攪拌勻質20min，轉速12000r/min，得混懸液；(4)將上述混懸液過濾，分裝，滅菌，得果糖脂質體注射液。對比例2果糖脂質體注射液的制備(比較加入的組分的含配方果糖25g大豆卵磷脂90g膽固醇泊洛沙姆188注射液t不同)pH值5.5磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液制備方法同實施例2，加入本發明組分優選含〗18g12g25g50g范圍之外的組合，制得果糖脂質體實施例3果糖脂質體注射液的制備配方果糖50g大豆卵磷脂600g膽固醇250g泊洛沙姆188150g氯化鈉4.5gpH值5.6枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液100g制備工藝(1)將600g大豆卵磷脂、250g膽固醇、150g泊洛沙姆188溶于6000ml體積比為1:2的乙醇和乙醚混合溶劑中；(2)將果糖50g和氯化鈉4.5g溶于500ml水中；(3)將二者混合，攪拌20min，轉速400r/min，形成W/0型乳劑，加熱攪拌蒸發，當混合物達到粘稠狀態時，再加入100gpH值5.6枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液，繼續加熱攪拌蒸發除去殘留的乙醇和乙醚混合溶劑，超聲20min，轉移至高速勻質攪拌機中，攪拌勻質lOmin，轉速13000r/min，得混懸液；(4)將上述混懸液過濾，分裝，滅菌，得果糖脂質體注射液。實施例4果糖脂質體凍干劑的制備配方果糖12.5g大豆卵磷脂150g膽固醇10g泊洛沙姆18837.5g甘露醇120g甘氨酸40gpH值5.5磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液50g制備工藝(1)將150g大豆卵磷脂、10g膽固醇、37.5g泊洛沙姆188溶于2000ml體積比為1:2的乙醇和乙醚混合溶劑中；(2)將果糖12.5g溶于200ml水中;(3)將二者混合，攪拌30min，轉速300r/min，形成W/0型乳劑，加熱攪拌蒸發，當混合物達到粘稠狀態時，再加入50gpH值5.4磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液，繼續加熱攪拌蒸發除去殘留的乙醇和乙醚混合溶劑，超聲10min，轉移至高速勻質攪拌機中，攪拌勻質20min，轉速15000r/min，得混懸液；(4)將120g甘露醇和40g甘氨酸溶于1200ml水，加入上述混懸液中，攪拌混勻，過濾，冷凍干燥，得果糖脂質體凍干劑。實施例5果糖脂質體凍干劑的制備配方果糖25g大豆卵磷脂100g膽固醇125g泊洛沙姆18812.5g甘露醇225g甘氨酸75gpH值5.5磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液100g制備工藝實施例4，得果糖脂質體凍干劑。實施例6穩定性考察將以上各實施例及其對比例制備的產品與上市的果糖注射液(江蘇正大豐海制藥有限公司生產，批號07121965-4)和注射用果糖(海南中化聯合制藥工業有限公司生產，批號200811072)進行加速6月和長期18月的穩定性考察，結果如下表lO天結果'^澄明度含量(％)~~買施例1無色澄明液體對比例1無色澄明液體實施例2無色澄明液體對比例2無色澄明液體實施例3無色澄明液體實施例4白色塊狀物實施例5白色塊狀物上市粉針白色粉末上市注船夜無色澄明液體表2加速6月試驗結果999999999定定定定定定定定定見見見,見見見見見丸丸丸丸丸丸4^丸丸合合合合合合合合合守守守守守守守守守8<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由以上結果發現加速3月、6月，長期12月、18月時對比例制備的產品和上市的果糖注射液、注射用果糖澄明度不符合規定，pH值下降較大，含量降低明顯；而本發明制備的樣品外觀性狀沒有明顯變化，澄明度、pH值、含量也沒有明顯的變化。說明本發明制備的樣品長期貯存質量穩定性更好。權利要求一種果糖脂質體注射劑，其特征在于包含重量份計的以下組分果糖1份大豆卵磷脂3-20份膽固醇0.5-8份泊洛沙姆1880.3-10份滲透壓調節劑0-5份藥學上可接受的緩沖溶液1-5份2.根據權利要求1的果糖脂質體注射劑，其特征在于包含重量份計的以下各組分藥學上可接受的緩沖溶液2-4份。3.根據權利要求1和2任一項所述的果糖脂質體注射劑，其特征在于滲透壓調節劑選自氯化鈉、葡萄糖、山梨醇、木糖醇、甘油、丙二醇中的一種或幾種。4.根據權利要求1和2任一項所述的果糖脂質體注射劑，其特征在于藥學上可接受的緩沖溶液選自pH為5.0-6.0的磷酸鹽緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液中的一種或幾種。5.根據權利要求1和2任一項所述的果糖脂質體注射劑，其特征在于組分還可包括凍干支持劑，重量份數為l-40份，選自甘露醇、葡萄糖、海藻糖、乳糖、蔗糖、山梨醇、氯化鈉、甘氨酸中的一種或多種。6.根據權利要求5所述的果糖脂質體注射劑，其特征在于凍干支持劑選自甘露醇和甘氨酸的混合物，二者的重量比為3:1。7.—種制備權利要求1-6所述的果糖脂質體注射劑的方法，其制備步驟包括(1)將配方量的大豆卵磷脂、膽固醇和泊洛沙姆188溶于適量的有機溶劑中；(2)將配方量的果糖和滲透壓調節劑溶于適量的水中；(3)將二者混合，攪拌，形成W/0型乳劑，加熱攪拌蒸發，當混合物達到粘稠狀態時，再加入適量緩沖鹽溶液水相，繼續加熱攪拌蒸發除去殘留有機溶劑，超聲，轉移至高速勻質攪拌機中，攪拌勻質，得混懸液；(4)將上述混懸液過濾，分裝，滅菌，得果糖脂質體注射液；或者將配方量的凍干支持劑溶于適量的水中，加入上述混懸液中，攪拌混勻，過濾，冷凍干燥，得果糖脂質體凍干劑。8.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于有機溶劑選自氯仿、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、異丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己烷中的一種或幾種。9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于有機溶劑選自乙醇和乙醚的混合溶劑，二者體積比為l:2。10.權利要求1-9所述的果糖注射劑在制備治療糖尿病的藥物中的應用。大豆卵磷脂膽固醇4-12份0.8-5份0.5-3份0-1.5份泊洛沙姆188滲透壓調節劑全文摘要本發明公開了一種果糖脂質體注射劑及其新應用，所述果糖脂質體注射劑包含果糖1份、大豆卵磷脂3-20份、膽固醇0.5-8份、泊洛沙姆1880.3-10份、滲透壓調節劑0-5份、藥學上可接受的緩沖溶液1-5份。文檔編號A61K9/19GK101721365SQ20091023031公開日2010年6月9日申請日期2009年11月10日優先權日2009年11月10日發明者陶靈剛申請人:陶靈剛