專利名稱：硫酸長春新堿脂質體藥物及其制備工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種抗癌藥物及其制備工藝。
背景技術：
硫酸長春新堿(Vincristine Sulfate，VCR)為細胞周期特異性藥物，主要作用于M期，VCR可與微管蛋白特異性結合，抑制微管聚合，紡錘體不能形成，終止細胞核分裂，對動物腫瘤療效超過長春堿。VCR目前主要用于各種類型急性白血病(尤其是急性淋巴細胞白血病療效突出)和惡性淋巴瘤的治療；此外，對絨毛上皮癌、乳腺癌、小細胞肺癌、腎母細胞瘤、神經母細胞瘤、尤文氏瘤、腦瘤、平滑肌瘤及子宮癌等也有一定療效。作為腫瘤的一線治療藥物，VCR可與其它抗腫瘤藥物聯合使用。因此，硫酸長春新堿在臨床上應用廣泛。
硫酸長春新堿在臨床上使用的不良反應有神經系統毒性、骨髓抑制和胃腸道反應，此外，VCR在體內有效的血藥濃度維持較短，腫瘤部位的藥物濃度低。同時由于硫酸長春新堿在生理PH下溶解性低、對膜的通透性又高，現有技術中尚無良策解決上述技術問題。
技術內容本發明的首先解決的技術課題是提供一種即能保持硫酸長春新堿的抗癌藥性又能有效降低其毒副作用，并且使藥物在體內有效的血藥濃度維持較長時間的硫酸長春新堿脂質體藥物。
上述目的是通過以下技術方案實現的一種硫酸長春新堿脂質體藥物，其特征在于該藥物是由硫酸長春新堿的穩定制劑與大單層脂質體混合，所述的硫酸長春新堿的穩定制劑與大單層脂質體的重量比為1∶5～100，混合液中加入用于調節混合液PH的堿性溶液。
所述的硫酸長春新堿的穩定制劑為含量為1mg/ml的硫酸長春新堿溶液，PH3～6。
所述的堿性溶液可以選擇磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉及同類的堿溶液。
所述的大單層脂質體是由磷脂和膽固醇及少量的帶電荷脂質組成的粒徑在100nm左右的脂質體乳濁液。
所述的大單層脂質體是由飽和的磷脂是羥化的大豆磷脂、羥化的卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿和二棕櫚酰磷脂酰膽堿等相變溫度高的脂質。
所述的帶電荷脂質是二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、卵磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰絲氨酸等。
本發明的再一個目的是提供上述硫酸長春新堿脂質體藥物的工藝，該工藝包括以下步驟(1)制備穩定的硫酸長春新堿制劑；(2)制備穩定的大單層脂質體；(3)制備堿性溶液；(4)將上述(1)、(2)步驟中制的硫酸長春新堿制劑和大單層脂質體混合，在20℃～70℃的水浴中加入(3)制得的堿性溶液后保溫若干分鐘，即得硫酸長春新堿脂質體藥物。
所述的硫酸長春新堿的穩定制劑為含量為1mg/ml的硫酸長春新堿溶液，PH3～6，所述的大單層脂質體是由磷脂和膽固醇及少量的帶電荷脂質組成的粒徑在100nm左右的脂質體乳濁液，采用飽和的脂質體應選擇在55℃～65℃的水浴中或采用非飽和的脂質體應選擇在20℃～55℃的水浴中加入所制得的堿性溶液調PH7.0～7.6后保溫10分鐘，得到包封率在90％以上的硫酸長春新堿脂質體藥物。
所述的作為大單層脂質體的飽和的磷脂是羥化的大豆磷脂、羥化的卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿和二棕櫚酰磷脂酰膽堿等相變溫度高的脂質。
所述的帶電荷脂質是二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、卵磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰絲氨酸等。
由上述技術方案制備的硫酸長春新堿脂質體藥物，藥物制劑穩定，其包封率為90～100％，回收率98～103％，無藥物滲漏現象，體外突釋率低，可用于腫瘤的臨床治療，具體的制備方法簡單可靠，并且有利于工業化生產。
具體實施例方式
以下結合具體的制備方法對本發明作詳細的說明。
1、制備穩定的硫酸長春新堿制劑將硫酸長春新堿5克溶于5升、5mM PH3.5～5.0的乙酸鈉緩沖液(含10％甘露醇)中，除菌分裝成1mg/ml/瓶。
2、制備穩定的大單層脂質體將注射用羥化的大豆磷脂69.1克、膽固醇24.41克和二硬脂酰甘油6.49克溶于熱的無水乙醇中，將脂質溶液注入到1000mL預熱到60℃的檸檬酸緩沖液(300mM、pH3.8～4.2)，用高速攪拌機在60℃下混合分散30分鐘，將預分散乳液在減壓下除取乙醇。在補充蒸發的水分后，通過孔徑為8um的濾器過濾并轉移到M-110EH Microfluidizer Processor中，在5000、10000、15000psi的壓力下各一次制得粒徑在90～120nm左右的脂質體乳液，經0.15um過濾除菌、充氮氣分裝成0.2ml/瓶。
3、制備磷酸氫二鈉溶液將無水磷酸氫二鈉71克溶于5000mL注射用水中，除菌分裝成5ml/瓶。
4、硫酸長春新堿脂質體的制備將制得的硫酸長春新堿制劑和大單層脂質體混合，在55℃～65℃的水浴中加入磷酸氫二鈉溶液保溫10分鐘，冷卻至室溫，即得到包-3-封率在90％以上的硫酸長春新堿脂質體。硫酸長春新堿脂質體用生理鹽水或葡萄糖注射液稀釋后靜脈給藥。
硫酸長春新堿脂質體的包封率按如下方法測定精密吸取硫酸長春新堿脂質體乳濁液1mL上樣于Sephadex G-50(10×40)凝膠柱，用PH7.0、5mM磷酸緩沖液洗脫、280nm檢測，收集硫酸長春新堿脂質體峰10ml。HPLC測定硫酸長春新堿含量。
表一不同批號硫酸長春新堿脂質體包封率和平均粒徑批號 包封率(％) 平均粒徑(nm)021016 98.6 120021225 95.8 100030110 94.9 110硫酸長春新堿脂質體外突釋率的測定精密吸取硫酸長春新堿脂質體乳濁液100mL置于透析袋，將透析袋放入100Ml PBS溶液中，37℃攪拌30分鐘，HPLC測定透析液中的硫酸長春新堿含量。
表二不同批號硫酸長春新堿脂質體突釋率批號 突釋率(％)021016 5.53021225 5.46030110 5.61由上述實驗測得的結果可以看出，硫酸長春新堿脂質體的包封率高，一般達到90％～100％，突釋率較低，一般只有5％～6％，無藥物滲漏現象。
權利要求
1.一種硫酸長春新堿脂質體藥物，其特征在于該藥物是由硫酸長春新堿的穩定制劑與大單層脂質體混合，所述的硫酸長春新堿的穩定制劑與大單層脂質體的重量比為1∶5～100，混合液中加入用于調節混合液PH的堿性溶液。
2.根據權利要求1上所述的硫酸長春新堿脂質體藥物，其特征在于所述的硫酸長春新堿的穩定制劑為含量為1mg/ml的硫酸長春新堿溶液，PH3～6。
3.根據權利要求1所述的硫酸長春新堿脂質體藥物，其特征在于所述的堿性溶液可以選擇磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉及同類的堿溶液。
4.根據權利要求1所述的硫酸長春新堿脂質體藥物，其特征在于所述的大單層脂質體是由磷脂和膽固醇及少量的帶電荷脂質組成的粒徑在100nm左右的脂質體乳濁液。
5.根據權利要求3所述的硫酸長春新堿脂質體藥物，其特征在于所述的大單層脂質體是由飽和的磷脂是羥化的大豆磷脂、羥化的卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿和二棕櫚酰磷脂酰膽堿等相變溫度高的脂質。
6.根據權利要求3所述的硫酸長春新堿脂質體藥物，其特征在于所述的帶電荷脂質是二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、卵磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰絲氨酸等。
7.一種用于制備權利要求1所述的硫酸長春新堿脂質體藥物的工藝，該工藝包括以下步驟(1)制備穩定的硫酸長春新堿制劑；(2)制備穩定的大單層脂質體；(3)制備堿性溶液；(4)將上述(1)、(2)步驟中制的硫酸長春新堿制劑和大單層脂質體混合，在20℃～70℃的水浴中加入(3)制得的堿性溶液后保溫若干分鐘，即得硫酸長春新堿脂質體藥物。
8.根據權利要求7所述的硫酸長春新堿脂質體藥物的制備工藝，其特征在于所述的硫酸長春新堿的穩定制劑為含量為1mg/ml的硫酸長春新堿溶液，PH3～6，所述的大單層脂質體是由磷脂和膽固醇及少量的帶電荷脂質組成的粒徑在100nm左右的脂質體乳濁液，采用飽和的脂質體應選擇在55℃～65℃的水浴中或采用非飽和的脂質體應選擇在20℃～55℃的水浴中加入所制得的堿性溶液調PH7.0～7.6后保溫10分鐘，得到包封率在90％以上的硫酸長春新堿脂質體藥物。
9.根據權利要求8所述的硫酸長春新堿脂質體藥物的制備工藝，其特征在于所述的作為大單層脂質體的飽和的磷脂是羥化的大豆磷脂、羥化的卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿和二棕櫚酰磷脂酰膽堿等相變溫度高的脂質。
10.根據權利要求8所述的硫酸長春新堿脂質體藥物的制備工藝，其特征在于所述的帶電荷脂質是二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油、卵磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰絲氨酸等。
全文摘要
本發明涉及一種抗癌的硫酸長春新堿脂質體藥物及其制備工藝，本發明公開的藥物是由硫酸長春新堿的穩定制劑與大單層脂質體按重量比為1∶5～100混合，混合液中加入用于調節混合液pH的堿性溶液；工藝包括制備穩定的硫酸長春新堿制劑、穩定的大單層脂質體及堿性溶液，在20℃～70℃的水浴中加入制的堿性溶液后保溫若干分鐘，藥物制劑穩定，其包封率為90～100％，回收率98～103％，無藥物滲漏現象，體外突釋率低，可用于腫瘤的臨床治療，具體的制備方法簡單可靠，并且有利于工業化生產。
文檔編號A61K9/127GK1541649SQ0311336
公開日2004年11月3日 申請日期2003年4月30日 優先權日2003年4月30日
發明者宋禮華, 戎隆富, 王榮海 申請人:安徽安科生物工程股份有限公司