專利名稱：扎那米韋固體脂質納米粒的口服制劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及藥物新劑型領域，具體是指一種流感病毒神經氨酸酶(NA)抑制物-扎 那米韋的固體脂質納米粒及其制備方法。
背景技術：
流行性感冒(簡稱流感)是由流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病，嚴重危害 人類的健康和生命。僅在美國，每年因流感就診人數達2 2. 5千萬人次，死亡2萬，經濟 損失達30 50億美元。據Glaxoffellcome公司統計，每年用于治療流感的費用約為1. 2 億美元。可見，流感作為一種病毒性傳染病不僅嚴重威脅著公眾健康，而且給國家和社會帶 來了沉重的經濟負擔。近來Hmi新突變A型流感的出現，使人們深刻體會到研制抗流感藥 物的必要性和迫切性。
扎那米韋(Zanamivir)，是一個有效的流感病毒神經氨酸酶(NA)抑制物，改變流 感病毒在感染細胞內的聚集和釋放，用于流感的預防和治療，主要用于早期治療，對甲、乙 型流感病毒的NA有同樣的抑制效果。扎那米韋結構式如下圖所示。
扎那米韋分子結構圖
口服是最方便且最容易被患者接受的給藥方式，但是扎那米韋口服吸收差，目前 只能用于制備口腔干粉吸入劑型，局部作用在呼吸道及肺部。研究結果表明扎那米韋口 服吸收率僅2%，這是與藥物不易被組織吸收有關。由于藥物在20°C時水中的溶解度約為 18mg. πιΓ1，在人體內不代謝，全部以原藥形式經腎排出，因此可以推斷藥物的生物膜透過性 是影響其口服生物利用度的主要因素。為了解決使用干粉吸入劑型的不便，提高患者順應 性，研究一種新型口服給藥制劑具有非常重要的意義。
固體脂質納米粒(solid lipid nanoparticles, SLNs)是在20世紀90年代初期 繼乳劑、脂質體、聚合物納米粒之后發展起來的一種新型納米載系統，與傳統的藥物載體相 比，具有物理穩定性高、毒性低、避免藥物泄漏、能大規模生產等優點。SLNs作為藥物載體， 可提高藥物的生物利用度，防止敏感藥物的水解，且適合多種給藥途徑。SLN由于粒徑小，生 物毒性低，兼有控釋和長效制劑的優勢，長期以來成為口服和靜脈給藥制劑的研究熱點。近年來，納米載體促進藥物的消化道吸收屢見報道。研究發現，口服給藥時，微粒劑可透過小 腸上皮細胞，經過淋巴集結到達脾臟等淋巴系統器官，且粒度越小，吸收效果越好。粒徑小 于500nm的納米粒在胃腸道的淋巴集結中積累，并以完整結構通過淋巴結表面的M細胞，將 藥物釋放到大循環中去。文獻報道，有相當數量的SLN可在較短的時間內(0.5h)被消化道 直接吸收。目前，固體脂質納米粒用作水溶性小分子載體的研究較少，而且包封率低。
乳化溶劑揮發法是廣泛應用于制備固體脂質納米粒的方法。該法是將聚合物溶解 在有機溶劑中，再將藥物溶解或分散在聚合物溶液中，在水和乳化劑存在下形成穩定乳液， 經高壓乳勻或超聲后，經連續攪拌及一定溫度和壓力條件下蒸去溶劑即得水包油(0/W)納 米混懸液，這種方法適用于水性藥物。如需包裹水溶性藥物(如蛋白質及易消化藥物)，則 須制備成復乳(w/0/w)，即先將親水藥物和穩定劑溶解在水里。初乳液由水相分散在溶解有 聚合物的有機溶劑中形成，初乳再次被分散在含有沉淀劑的水相中，和單乳法一樣讓溶劑 揮發。復乳法主要解決水溶性藥物在乳化過程中快速地分散到外層水相中而影響包封率的 問題。
在此專利申報之前，國內外尚未有一種口服扎那米韋制劑上市或固體脂質納米粒 的研究。將扎那米韋制成固體脂質納米粒，可促進藥物的胃腸道吸收，改善生物利用度，并 提高患者的順應性。發明內容
本發明要解決的技術問題在于研究固體脂質納米粒作為水溶性小分子藥物的口 服給藥載體。針對藥物的理化性質和生物膜透過性，選擇合適的類脂材料和乳化劑，研究水 相與油相體積之間、藥物與類脂材料/乳化劑之間的最佳配比，增加水溶性藥物的包封率。
為解決上述問題，本發明的技術方案為一種扎那米韋固體脂質納米粒，其含有下 列組分內水相/油相/外水相的體積比為1 1 8 2 60;內水相的藥物濃度為1 20mg. πιΓ1 ；油相的脂質材料濃度為10 120mg. πιΓ1 ；油相的脂溶性乳化劑濃度為5 40mg. πιΓ1 ；外水相的水溶性乳化劑濃度為0. 1 5% ；凍干保護劑的量按脂質材料和脂溶性乳化 劑的總重量計，1份總重量加入0. 05-4份的凍干劑。
本發明所說的脂質材料是指在室溫下呈固態的類脂材料，如三酸甘油酯、 混合甘油酯、脂肪酸、類固醇、蠟、磷脂等。本發明脂質材料更優選單硬脂酸甘油酯 (glycerolmonostearate)0
本發明所說的乳化劑是具有乳化、穩定、分散作用的藥物輔料。本發明乳化劑由脂 溶性乳化劑及水溶性乳化劑組成。其中，常用的脂溶性乳化劑選自大豆軟磷脂、蛋黃軟磷 脂、合成磷脂中的一種或幾種。本發明脂溶性乳化劑更優選大豆磷脂(lecithin)。常用的 水溶性乳化劑選自普洛沙姆、吐溫80、芐澤、賣澤等。本發明水溶性乳化劑更優選普洛沙姆 188(poloxamer 188)。
本發明所說的凍干保護劑是右旋糖酐、單糖、雙糖或多糖組成。本發明凍干保護劑 更優選甘露醇(marmitol)。
本發明所述固體脂質納米粒可以是內水相/油相/外水相的體積比為1 1 8 2 60 ；扎那米韋濃度為1 20mg. πιΓ1 ；單硬脂酸甘油酯濃度為10 120mg. πιΓ1 ；大 豆磷脂濃度為5 40mg. ml—1 ；普洛沙姆188濃度為0. 1 5% ;1份總重量加入0. 05-4份的甘露醇為凍干劑。
本發明固體脂質納米粒的更為理想的配比是內水相/油相/外水相的體積比為 1 3 5 12 40 ；扎那米韋濃度為5 ISmg.mr1 ；單硬脂酸甘油酯濃度為30 120mg. πιΓ1 ；大豆磷脂濃度為10 40mg. ml—1 ；普洛沙姆188濃度為1 3 % ； 1份總重量加入0. 05-2 份的甘露醇為凍干劑。
本發明要解決的技術問題還涉及上述固體脂質納米粒的制備方法，包括其凍干制 劑。本發明所用的制備方法是w/0/w復乳化溶劑揮發法，將不同濃度的藥物溶液為內水相 (inner aqueous phase)加入到油相(oil phase)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉 碎機中超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到普洛沙姆溶液的外水相(outeraqueous phase)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中超聲后形成W/0/W復乳。將制得的復 乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌5h揮盡有機溶劑，得納米混懸液。同時，納 米混懸液中，加入甘露醇為凍干保護劑，設置擱板溫度為-30°C，真空度0. Imbar,經_70°C 冰箱預凍后，置于凍干機隔板上，冷凍干燥38h，制得凍干粉。
本發明以脂質為載體材料，以乳化劑為穩定劑，采用復乳化溶劑揮發法，使水溶 性藥物包載于脂質納米粒中。所述扎那米韋固體脂質納米粒，其特征在于納米粒粒徑在 150 500nm之間，包封率在30%以上，釋放度在80%以上。本發明所得納米粒可制成混懸 液、凍干粉或其它口服固體制劑。
具體實施方式
將扎那米韋固體脂質納米粒通過以下實施例進一步說明本發明的技術方案，但本 發明的保護范圍，不局限于此。
實施例1 空白納米粒的制備
取0. 2ml蒸餾水(內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉 碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到普洛沙姆188溶液(1. 6% w/v，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超聲后形成W/0/W復 乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm，攪拌證揮盡有機溶劑，得納米 混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充 分混合均勻后，得到均一的油相。納米混懸液加入5%甘露醇為凍干保護劑，設置擱板溫度 為-30°C，真空度0. Imbar,經_70°C冰箱預凍后，置于凍干機隔板上，冷凍干燥38h，制得凍 干粉。
實施例2 空白納米粒的制備
取0. 2ml蒸餾水(內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉 碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到8ml普洛沙姆188溶液(1. 6% w/v，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超聲后形成W/0/W復 乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡有機溶劑，得納米混 懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充分混 合均勻后，得到均一的油相。
實施例3 空白納米粒的制備
取0. 2ml蒸餾水(內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉5碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到12ml普洛沙姆188溶液(1. 6% w/v，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超聲后形成W/0/W復 乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm，攪拌證揮盡有機溶劑，得納米 混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充分 混合均勻后，得到均一的油相。
實施例4 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(Img -πιΓ1,內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散后， 置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到普洛沙姆 188溶液(1. 6% w/v，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超聲 后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡有 機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二 氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例5 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(Img -πιΓ1,內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散后， 置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到8ml普洛沙姆 188溶液(1. 6% w/v，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超聲 后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡有 機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二 氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例6 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(Img -πιΓ1,內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散后， 置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到12ml普洛沙姆 188溶液(1. 6% w/v，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超聲 后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡有 機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二 氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例7 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(5mg -πιΓ1,內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散后， 置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到普洛沙姆 188溶液(1. 6% w/v，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超聲 后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm，攪拌證揮盡有 機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二 氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例8 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(5mg -πιΓ1,內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散后， 置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到8ml普洛沙姆 188溶液(1. 6% w/v，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超聲 后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡有 機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例9 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(5mg -πιΓ1,內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散后， 置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到12ml普洛沙姆 188溶液(1. 6% w/v，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超聲 后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡有 機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二 氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例10 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(IOmg · ml—1，內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散 后，置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到普洛沙 姆188溶液(1.6% 八，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超 聲后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡 有機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。所得納米混懸液中，加入5%甘露醇為凍干 保護劑，設置擱板溫度為-30°C，真空度0. lmbar，經-70°C冰箱預凍后，置于凍干機隔板上， 冷凍干燥38h，制得凍干粉。
實施例11 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(IOmg · ml—1，內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散 后，置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到8ml普洛沙 姆188溶液(1.6% 八，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超 聲后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡 有機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例12 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(IOmg · ml—1，內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散 后，置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到12ml普洛沙 姆188溶液(1.6% 八，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超 聲后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡 有機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例13 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(15mg · ml—1，內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散 后，置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到普洛沙 姆188溶液(1.6% 八，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超 聲后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡 有機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例14 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(15mg · ml—1，內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散 后，置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到8ml普洛沙 姆188溶液(1.6% 八，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超 聲后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡 有機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例15 載藥納米粒的制備
取0. 2ml扎那米韋溶液(15mg · ml—1，內水相)加入到Iml油相中，經分散機分散 后，置于超聲細胞粉碎機中200w、60s超聲后形成W/0初乳。然后將初乳加入到12ml普洛沙 姆188溶液(1.6% 八，外水相)中，經分散機分散后，置于超聲細胞粉碎機中200w、30s超 聲后形成W/0/W復乳。將制得的復乳，在25°C下，置于磁力攪拌器上，700rpm,攪拌證揮盡 有機溶劑，得納米混懸液。油相則是將120mg單硬脂酸甘油酯和40mg大豆磷脂熔融于Iml 二氯甲烷中，充分混合均勻后，得到均一的油相。
實施例16 粒徑和表面電位測定
為考察內水相的藥物濃度及外水相體積對SLNs粒徑及表面電位的影響，取實施 例1 15的SLNs混懸液適量，用蒸餾水稀釋5倍，用激光粒度分析儀(HPP 5001，英國馬爾 文公司)測定其粒徑和表面電位。粒度及表面電位測定的結果見表1、表2。
表1不同處方SLNs混懸液的粒徑(nm)
內水相的藥物濃度(mg.mr1)外水相體積(ml)-01510154189.8174.7271.5183.9352.3(實施例1)(實施例4)(實施例7)(實施例10)(實施例13)8209.9217.4318.5227.1284.4(實施例2)(實施例5)(實施例8)(實施例11)(實施例14)12450.618132596234.8317.4(實施例3)(實施例6)(實施例9)(實施例12)(實施例15)
表2不同處方SLNs混懸液的表面電位(mV)
權利要求
1.一種固體脂質納米粒，其含有下列組分內水相/油相/外水相的體積比為1 3 5 12 40 ；內水相的藥物濃度為5 18mg. ml—1 ；油相的脂質材料濃度為30 120mg. πιΓ1 ；油相的脂溶性乳化劑濃度為10 40mg. πιΓ1 ；外水相的水溶性乳化劑濃度為1 3% ； 凍干保護劑的量按脂質材料和脂溶性乳化劑的總重量計，1份總重量加入0. 05-2份的凍干 劑。
2.如權利要求1所述的固體脂質納米粒，其特征在于該脂質材料為單硬脂酸甘油酯。
3.如權利要求1所述的固體脂質納米粒，其特征在于該脂溶性乳化劑為大豆磷脂。
4.如權利要求1所述的固體脂質納米粒，其特征在于該水溶性乳化劑為普洛沙姆188。
5.如權利要求1所述的固體脂質納米粒，其特征在于該凍干保護劑為甘露醇。
6.如權利要求1所述的固體脂質納米粒，其特征在于其劑型為混懸劑、凍干粉或其它 口服固體制劑。
7.如權利要求1 6任一項所述的固體脂質納米粒的制備方法是W/0/W復乳化溶劑 揮發法，其包括以下過程。將內水相(藥物溶液)加入到油相中，經分散超聲后形成W/0初 乳。然后將初乳加入到外水相(普洛沙姆188溶液)中，經分散超后形成W/0/W復乳。將 制得的復乳，攪拌揮盡有機溶劑，得納米混懸液。同時，納米混懸液中，加入凍干保護劑，冷 凍干燥，制得凍干粉。
全文摘要
本發明是一種扎那米韋固體脂質納米粒的口服制劑及其制備方法。將不同濃度的藥物溶液作為內水相，單硬脂酸甘油酯/大豆磷脂混合物熔融于二氯甲烷中作為油相，普洛沙姆188溶液作為外水相，采用W/O/W復乳化溶劑揮發法制備固體脂質納米粒混懸液或凍干制劑。本方法可制得粒徑在150～500nm之間，表面電位在-45～-55mV之間，包封率在30％以上，釋放度在80％以上，形態圓整的固體脂質納米粒。本發明方法可靠，操作簡便，制得的固體脂質納米粒可促進藥物的口服吸收，改善生物利用度，并提高患者的順應性。
文檔編號A61K31/351GK102028655SQ201010590798
公開日2011年4月27日 申請日期2010年12月16日 優先權日2010年12月16日
發明者崔京浩, 曹青日 申請人:蘇州大學