多西他賽-油酸前藥及其納米結構脂質載體和應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于藥物制劑新輔料和新劑型領域，包括多西他賽-油酸前藥(DTX-OA)及 基于core-match機理包載的納米結構脂質載體(NLC)，以及其在口服給藥中的應用。
【背景技術】
[0002 ]多西他賽(DTX)是臨床應用廣泛的抗癌藥。但極低的水溶性導致市售制劑中含有 大量的吐溫80和乙醇作為增溶劑，易產生毒副作用，進而限制了其臨床應用。同時，注射給 藥不可避免的面臨諸多弊端，例如易發生感染，患者依從性低，副作用大等。與注射給藥相 比，口服給藥具有方便，經濟，患者有較高的順應性等特點。但由于多西他賽水溶性極低，滲 透性差，且本身為P-gp底物，導致多西他賽口服生物利用度很低。
[0003] 納米載體由于能夠提高抗癌藥物的療效并且減少藥物副作用而被廣泛用于靶向 藥物傳遞系統。其中，納米結構脂質載體作為新一代的脂質納米粒在口服藥物傳遞中備受 矚目，因其具有很好的生物相容性和穩定的緩控釋效果。但包載多西他賽的納米結構脂質 載體存在載藥量低的問題(5%，w/w)，限制了其臨床應用。根據core-match理論，當經過化 學修飾的藥物與納米載體含有相同的成分時，修飾后的藥物與載體之間會產生極高的親和 力，可以顯著提高納米載體的載藥量。因此，設計合成了多西他賽-油酸前藥，將其包載于含 有油酸(OA)作為液態脂質的納米結構脂質載體中（DTX-OA-NLC)，通過core-match機制提高 藥物的載藥量，并進一步提高多西他賽的口服生物利用度。
【發明內容】
[0004] 本發明的第一個目的旨在提供多西他賽-油酸前藥。
[0005] 本發明的第二個目的旨在提供基于core-match機理包載多西他賽-油酸前藥的納 米結構脂質載體的制備方法。
[0006] 本發明的第三個目的旨在提供基于core-match機理包載多西他賽-油酸前藥的納 米結構脂質載體在口服給藥中的應用。
[0007] 本發明通過以下技術方案實現上述目的：
[0008] 該多西他賽-油酸前藥以多西他賽為母藥，以酯鍵鏈接一分子油酸而形成前藥，是 一種穩定性好、功能性強的脂肪酸前藥。
[0009] 所述的多西他賽-油酸前藥的結構式如下：
[0010]
[0011]所述的多西他賽-油酸前藥，其特征在于，油酸與多西他賽側鏈2'位相連。其制備 過程如下：油酸（OA)溶于少量二氯甲烷中，在雙環己基碳酰亞胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶 (DMAP)催化作用下，N 2保護下冰浴2-3h，然后與多西他賽在25-30°CN2保護下反應24-36h，經 分離純化得到白色粉末狀前藥。反應式如下：
[0013] 所述的基于core-match機理的納米結構脂質載體可采用乳化超聲法制備，以單硬 脂酸甘油酯為固體脂質，以油酸為液體脂質，以多西他賽-油酸前藥為主藥，以泊洛沙姆188 (F 68)為表面活性劑，以賴氨酸橋連的聚乙二醇2000二維生素 E琥珀酸酯(PLV2qqq)為表面修 飾材料，其中，各組分間的重量百分組成為：1:〇.3~0.5:0.5~1.0:0.3~0.5:0.8~1.2(單 硬脂酸甘油酯：油酸:F 68: PLV2k : DTX-0A)，優選為：7:3:5:3:8。表面活性劑可以脫氧膽酸鈉 替代，表面修飾材料可以賴氨酸橋連的聚乙二醇5000二維生素 E琥珀酸酯(PLV5qqq)替代。
[0014] 制備工藝如下：將一定量的單硬脂酸甘油酯，油酸，多西他賽-油酸前藥，PLV2000 , 溶于適量乙醇中，加熱至70_80°C，磁力攪拌下使其溶解均勻。將F68溶于一定量水中，加熱至 70-80°C，磁力攪拌下使其溶解均勻。將上述乙醇溶液快速加入到水溶液中，70-80°C水浴下 保持磁力攪拌5-10min。將上述溶液超聲處理(200-400W，5-10min)，迅速冰浴冷卻，得到淡 藍色乳光液體制劑。
[0015] 本發明具有以下有益效果:制備的多西他賽-油酸前藥穩定性好，在大鼠血漿中相 對于多西他賽有更高的穩定性。制備的基于core-match機理的納米結構脂質載體粒徑較小 且均一(90nm)，載藥量高(23%，w/w)，物理穩定性好，體外腸灌流試驗和體內藥動學試驗證 實基于core-match機理包載多西他賽-油酸前藥的納米結構脂質載體能顯著提高多西他賽 的口服生物利用度。
【附圖說明】
[0016] 圖1為本發明實施例1的多西他賽-油酸前藥的1HNMR譜圖。
[0017] 圖2為本發明實施例1的多西他賽-油酸前藥的高分辨質譜譜圖。
[0018]圖3為本發明實施例1的多西他賽-油酸前藥的FT-IR譜圖。
[0019 ]圖4為本發明實施例1的多西他賽-油酸前藥與多西他賽在大鼠血漿中的穩定性對 比圖。
[0020] 圖5為本發明實施例3的納米結構脂質載體的透射電子顯微鏡圖。A:多西他賽-油 酸納米結構脂質載體;B:多西他賽納米結構脂質載體。
[0021] 圖6為本發明實施例3的納米結構脂質載體在不同模擬介質中的膠體穩定性。A:多 西他賽-油酸納米結構脂質載體;B:多西他賽納米結構脂質載體。
[0022]圖7為本發明實施例3的納米結構脂質載體在不同模擬介質中的體外釋放實驗。 [0023]圖8為本發明實施例3的納米結構脂質載體的原位單向腸灌流的吸收速率常數 (Ka)圖。
[0024]圖9為本發明實施例3的納米結構脂質載體的原位單向腸灌流的表觀吸收系數 (Papip)圖。
[0025] 圖10為本發明實施例3的包載香豆素 -6的納米結構脂質載體的大鼠腸道吸收分布 圖。
[0026] 圖11為本發明實施例3的包載DiR的納米結構脂質載體的小鼠腸道吸收分布圖。
[0027] 圖12為本發明實施例3的包載多西他賽-油酸前藥的納米結構脂質載體大鼠腸道 攝取機制圖。
[0028] 圖13為本發明實施例3包載香豆素 -6的納米結構脂質載體的MDCK細胞攝取圖。 [0029]圖14為本發明實施例3的納米結構脂質載體口服給藥藥時曲線圖。
【具體實施方式】
[0030] 下面通過實施例的方式進一步說明本發明，但并不因此將發明限制在所述的實施 例范圍之中。
[0031] 實施例1
[0032]多西他賽-油酸前藥的合成。
[0033] 油酸（OA)溶于少量二氯甲烷中，在雙環己基碳酰亞胺（DCC)和4-二甲氨基吡啶 (DMAP)催化作用下，N2保護下冰浴2h，然后與多西他賽在25°CN2保護下反應24h，經分離純化 得到白色粉末狀前藥。反應式如下：
[0034]
[0035] 采用核磁共振測定1H-NMR氫譜來確定實施例1中前藥的結構，選用的溶劑為CDCl3, 結果如圖 1。1 · 158ppm，1 · 783ppm，5 · 229ppm，8 · 13Ippm為多西他賽H7, -9,，，H2q，H25,29的特征 峰。0·886ppm，1·271ppm，1·290ppm，1·334ppm，1·657ppm，2·041ppm，2·372ppm，5·368ppm為 油酸-CH 3，CH3-(CH2)5-CH2-，CH 3-(CH2)5_CH2-，-CH2-(CH2) 3-CH2-，-CH2-CH2CH2CO-，-CH 2CH2CO-，-CH2CH=CHCH2-，-CH 2CO-和-CH=CH-的特征峰。
[0036] 采用FT-IR圖譜來確定實施例1中前藥相對于母藥在化學基團上的變化，結果如圖 2。2978 · 00cm-1 和2939 · 43cm-1 為多西他賽結構中-CH3