創傷覆蓋材料的制作方法

專利名稱：創傷覆蓋材料的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種創傷覆蓋材料，其包含凝血酶、血纖蛋白原和生物可吸收的支持材料，和可容易地通過其自身的粘著特性粘附在由外傷、外 科手術、燒傷等所致的皮膚缺陷區域，從而保護和修復創面。
背景技術：
當在手術、外傷等之后發生皮膚缺陷時，覆蓋和保護創面的材料是必需的。可使用紗布或脫脂棉作為臨時的措施。然而，紗布或脫脂棉的問題是，當將它們剝離時可破壞創面而導致再次流血。近年來，各種創傷覆蓋材料得以開發。例如，已開發出由例如聚氨酯構成的薄膜和稱作水膠體敷料的創傷覆蓋材料(例如專利文獻I)。然而，這些材料不通過在創傷區域中自身再生積極地支持治愈，而是基本上主要以維持濕潤環境為目標。因此，它們主要地依賴自身再生的能力，因此不預期促進創傷區域的治愈。此外，由于它們的高閉塞特性，它們有時可保留患部的滲出物從而延遲治愈。在大范圍且至真皮深部的皮膚中全厚度皮膚創傷(包括為治療嚴重燒傷移走壞死組織的外科手術后的創傷)的情況下，不預期自發再生治愈，使所述組織的移植成為必要。為此目的，迄今進行皮膚的自體移植或異體移植。然而，在皮膚自體移植的情況下，在為移植而移除皮膚的區域新產生皮膚組織缺陷，從而又使缺陷區域的皮膚再生成為必要。此夕卜，皮膚的自體移植存在的限制是，鑒于整形外科其需要高技術處理、其優選適用于全身狀態好的患者和其不能用于緊急情況。另一方面，在皮膚異體移植的情況下，移植后一周至十天剝離皮膚，因此這僅僅是臨時覆蓋措施，從而以使從患者移植皮膚成為必要。近年來，對于缺陷皮膚的再生，進行單獨表皮細胞培養以再生表皮層(培養表皮)或向活體移植膠原海綿(collagen sponge)以再生真皮樣組織(人工真皮)(例如非專利文獻I和2)。然而,培養表皮有時可導致問題,例如由于培養表皮不含真皮,在至真皮深度的嚴重缺陷皮膚情況下的生著(take)率低，和甚至在生著發生的情況下，在創傷閉合后仍存在不均勻，創傷收縮的過度促進導致疤痕攣縮、疼痛折磨等。在人工真皮的情況下，也存在生著率低的問題，因為在表皮下移植動物衍生膠原，由此誘導對該物質的免疫反應和高傳染性。而且，部分人工真皮可能需要繁瑣的預處理，例如在施用前在鹽水中反復浸潰和洗滌。為了提高生著率，已開發出一種方法，其中使培養真皮遍布膠原凝膠或膠原海綿并在其上覆蓋表皮細胞以構造皮膚樣結構，將其移植(例如專利文獻2)。然而，該方法也有問題，因為在含培養細胞的人工皮膚中使用活細胞，故需要繁瑣的步驟以分離細胞，且細胞的轉移和貯存是困難的。而且，為培養皮膚將花費長達數周的時間。因此，在獲得足以覆蓋創面的量的人工皮膚時，創面(尤其燒傷)有時已受感染折磨，致使人工皮膚的移植和生著困難。另外，當前使用的創傷覆蓋材料和人工皮膚基本上缺少粘著性，因此有時取決于創傷的部位和形狀在施用時可導致問題。當它們與輔助固定材料例如橡皮膏和薄膜材料一起使用時，用于施用固定材料的空間成為必要，從而使其不方便用于眼瞼或嘴唇。當它們與縫合一起使用時，具有厚度的海綿的目前劑型使其用于復雜形狀的創面困難。皮膚外傷主要發生在手指、四肢和面部，其都具有復雜的立體結構。因此，目前使用的創傷覆蓋材料或人工皮膚是否可按照創面形狀保護創面是個大問題。專利t 獻I :日本專利公開第9-262249號專利文獻2 :日本專利公開第6-292568號非專利文獻I Ichiro Ono等，Japan Surgical Society (日本外科手術協會)，100(9) =522-529,1999非專利文獻2 Kazuya Matsuda 等，Burns (燒傷學)，17 (2) :29-35,1991 發明公開(本發明要解決的技術問題)為了解決上述問題，一種措施是開發創傷覆蓋材料，該材料能夠在創傷產生后盡可能迅速地施用，有自身粘著性，容易地適合于通過彈性和柔性緊密地粘著在皮膚缺陷區域以保護創面，和能夠以快且好的方式重建皮膚缺陷組織同時緩解疤痕攣縮和疼痛。(解決問題的方法)考慮到上述各種問題，本發明人進行了大量研究且結果發現，包含凝血酶和血纖蛋白原作為有效成分和生物可吸收的支持材料作為基質的創傷覆蓋材料發揮非常優異的效果，從而完成本發明。具體地，本發明涵蓋以下實施方案。
0020](I) 一種創傷覆蓋材料，其包含作為有效成分的凝血酶和血纖蛋白原以及作為基質的生物可吸收的支持材料。(2)⑴的創傷覆蓋材料，其中所述創傷覆蓋材料由以下任一種構成(i)保持凝血酶的生物可吸收的支持材料，和血纖蛋白原；或(ii)保持凝血酶的生物可吸收的支持材料，和保持血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料；或(iii)凝血酶、血纖蛋白原和生物可吸收的支持材料；其中凝血酶和血纖蛋白原在其即將使用之前相互分離。(3)⑴或⑵的創傷覆蓋材料，其中所述生物可吸收的支持材料是由選自聚乙醇酸、聚乳酸以及乙醇酸和乳酸的共聚物的材料構成。(4) (1)-(3)中任一項的創傷覆蓋材料，其中將所述生物可吸收的支持材料加工為非織造布。(5) (1)-(4)中任一項的創傷覆蓋材料，其中所述生物可吸收的支持材料是由聚乙醇酸材料構成的非織造布。(6) (1)-(5)中任一項的創傷覆蓋材料，其中所述創傷覆蓋材料包含至少一種選自以下的添加劑凝血因子XIII、蛋白酶抑制劑、氯化鈣、清蛋白、氯化鈉、檸檬酸鈉或非離子洗滌劑。(7) (1)-(6)中任一項的創傷覆蓋材料，其中所述創傷覆蓋材料任選包含用于保濕的覆蓋材料。(8) (7)的創傷覆蓋材料，其中所述用于保濕的覆蓋材料由硅或聚氨酯構成。
(9) (1)-(8)中任一項的創傷覆蓋材料，其中所述創傷覆蓋材料可修復因外傷、夕卜科手術或燒傷所致的皮膚缺陷區域。(10) 一種創傷覆蓋材料試劑盒，所述試劑盒包括保持凝血酶作為有效成分的生物可吸收的支持材料和含有血纖蛋白原作為有效成分的容器。(Il)(IO)的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由選自聚乙醇酸、聚乳酸以及乙醇酸和乳酸的共聚物的材料構成。(12) (10)或(11)的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述生物可吸收的支持材料加
工為非織造布。(13) (10)-(12)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由聚乙醇酸材料構成的非織造布。(14) (10)-(13)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料包含至 少一種選自以下的添加劑凝血因子XIII、蛋白酶抑制劑、氯化鈣、清蛋白、氯化鈉、檸檬酸鈉或者非尚子洗漆劑。(15) (10)-(14)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述氯化鈣作為用于凝血酶的添加劑加入保持凝血酶的生物可吸收的支持材料中。(16) (10)-(14)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述凝血因子XIII包含在含有血纖蛋白原的容器中。(17) (10)-(16)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料通過包括以下步驟的方法制備將生物可吸收的支持材料浸潰到含有凝血酶的溶液中的步驟和凍干通過所述步驟獲得的支持材料的步驟。(18) (10)-(17)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料任選包含用于保濕的覆蓋材料。(19) (18)的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述用于保濕的覆蓋材料由硅或者聚氨酯構成。(20) (10)-(19)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料可修復因外傷、外科手術或燒傷所致的皮膚缺陷區域。(21) 一種創傷覆蓋材料試劑盒，所述試劑盒包括保持凝血酶作為有效成分的生物可吸收的支持材料和保持血纖蛋白原作為有效成分的生物可吸收的支持材料。(22)(21)的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由選自聚乙醇酸、聚乳酸以及乙醇酸和乳酸的共聚物的材料構成。(23) (21)或(22)的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述生物可吸收的支持材料加工為非織造布。(24) (21)-(23)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由聚乙醇酸材料構成的非織造布。(25) (21)-(24)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料包含至少一種選自以下的添加劑凝血因子XIII、蛋白酶抑制劑、氯化鈣、清蛋白、氯化鈉、檸檬酸鈉或非尚子洗漆劑。(26) (21)-(25)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述氯化鈣作為用于凝血酶的添加劑加入保持凝血酶的生物可吸收的支持材料中。
(27) (21)-(25)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述非離子洗滌劑包含在保持血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料中。(28) (21)-(27)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述保持凝血酶的生物可吸收的支持材料或所述保持血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料通過包括以下步驟的方法制備將生物可吸收的支持材料浸潰到含有凝血酶或血纖蛋白原的溶液中的步驟和凍干通過所述步驟獲得的支持材料的步驟。(29) (21)-(28)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料任選包含用于保濕的覆蓋材料。(30) (29)的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述用于保濕的覆蓋材料由硅或聚氨酯構成。(31) (21)-(30)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料可修復 因外傷、外科手術或燒傷所致的皮膚缺陷區域。(32) 一種創傷覆蓋材料試劑盒，所述試劑盒包括含有凝血酶作為有效成分的容器、含有血纖蛋白原作為有效成分的容器和生物可吸收的支持材料。(33) (32)的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料由選自聚乙醇酸、聚乳酸以及乙醇酸和乳酸的共聚物的材料構成。(34) (32)或(33)的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述生物可吸收的支持材料加工為非織造布。(35) (32)-(34)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由聚乙醇酸材料構成的非織造布。(36) (32)-(35)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料包含至少一種選自以下的添加劑凝血因子XIII、蛋白酶抑制劑、氯化鈣、清蛋白、氯化鈉、檸檬酸鈉或非尚子洗漆劑。(37) (32)-(36)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述氯化鈣作為用于凝血酶的添加劑加入含有凝血酶的容器中。(38) (32)-(36)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述凝血因子XIII包含在含有血纖蛋白原的容器中。(39) (32)-(38)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料任選包含用于保濕的覆蓋材料。(40) (39)的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述用于保濕的覆蓋材料由硅或聚氨酯構成。(41) (32)-(40)中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料可修復因外傷、外科手術或者燒傷所致的皮膚缺陷區域。(發明效果)已顯示，本發明的創傷覆蓋材料具有以下特性并因此可能是理想的創傷覆蓋材料。 因為培養和預處理(使用鹽水反復浸潰和洗滌)不是必要的，其可在創傷產生后盡可能快速地施用； 其由于血纖蛋白形成可通過自身的粘著性施用，因此可不需要縫合；
具有彈性和柔性，其可與復雜形狀的創面緊密地連接； 由于粘著和封閉作用，可抑制滲出物的貯存和減輕疼痛； 因為可通過封閉作用抑制流血，其可有利地用于伴隨流血的新鮮外傷； 通過凝血酶促進細胞生長的活性，其可促進包含表皮的缺陷組織重建以及肉芽組織形成； 在施用于創面之后，其可使以適當強度形成肉芽組織的空間安全、可抑制創傷收縮以及可減少疤痕攣縮； 在沒有覆蓋用于保濕的覆蓋材料的情況下，其可充當創傷覆蓋材料以保護創面并在治愈之后被自然剝離；在任選覆蓋用于保濕的覆蓋材料以提供濕潤環境的情況下，其可充當人工皮膚，其中除了用于保濕的覆蓋材料之外的剩余部分充當細胞生長的支架以被自身組織代替；和 其安全性優異。附圖
簡述圖I是在施用本發明的創傷覆蓋材料之后第10天的組織病理學照片。圖2是在施用本發明的創傷覆蓋材料之后，在通過覆蓋用于保濕的覆蓋材料帶入濕潤環境之后第3周的組織病理學照片。實施發明的最佳方式本發明涉及一種創傷覆蓋材料，其包含作為有效成分的凝血酶和血纖蛋白原以及作為基質的生物可吸收的支持材料。創傷覆蓋材料可任選包含用于保濕的覆蓋材料。本發明使用的生物可吸收的支持材料可以是任何生物可吸收的合成纖維。本文使用的生物可吸收的合成纖維指這樣的合成纖維，其不太可能作為外來物質在活體中誘導炎癥且可在活體內隨時間被吸收和/或降解。生物可吸收的支持材料優選具有適當的柔性和彈性以確保其可確實覆蓋任何形狀的任何缺陷區域。生物可吸收的支持材料可優選被加工為非織造布。可例如根據日本專利公開第18579/1993號所述方法，通過將生物可吸收的支持材料制成機織織物或針織物，然后針刺以得到非織造布，來制備非織造布。例如，可形成這樣的非織造布的合成纖維包括聚乙醇酸、聚乳酸或乙醇酸與乳酸的共聚物等，可將其加工為非織造布之后使用。其中，通過加工為非織造布從聚乙醇酸制備的生物可吸收的合成非織造布是最優選的用于本發明目的的材料。生物可吸收的支持材料可為任何形狀，但鑒于對皮膚缺陷區域的通用性，優選薄片形狀。除作為有效成分的凝血酶和血纖蛋白原之外，也可加入藥學上可接受的穩定劑和添加劑。這樣的穩定劑和添加劑的實例包括，例如凝血因子XIII、蛋白酶抑制劑、氯化鈣、清蛋白、氯化鈉、檸檬酸鈉、非離子洗滌劑、甘露醇等。凝血酶、血纖蛋白原和凝血因子XIII可優選源自人血液或通過基因工程得到。本發明的創傷覆蓋材料可以是任何劑型，只要作為有效成分的凝血酶和血纖蛋白原最終包含在生物可吸收的支持材料中即可。但是，鑒于在手術環境下易于處理，維持柔性的事先保持凝血酶和/或血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料，從其易于處理以及組織封閉功效角度來看是優選實施方案之一。在生物可吸收的支持材料事先保持凝血酶和血纖蛋白原兩者的情況下，生物可吸收的支持材料應在以下條件下保持各凝血酶和血纖蛋白原，所述條件使得，組分彼此分離或將粉末形式的各組分懸浮在有機溶劑中并將各懸浮液噴涂在非織造布上，從而凝血酶和血纖蛋白原都可不互相反應以產生穩定化血纖蛋白。本發明的試劑盒可包含以下任一項(A)保持凝血酶加血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料；或 (B)保持凝血酶的生物可吸收的支持材料和保持血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料；或(C)生物可吸收的支持材料、凝血酶和血纖蛋白原；其中可任選將上述穩定劑和添加劑加入(A)-(C)中任一項。即，本發明的試劑盒可包括以下實施方案生物可吸收的支持材料只保持凝血酶的實施方案(A)、生物可吸收的支持材料保持凝血酶和血纖蛋白原兩者的實施方案(B)和生物可吸收的支持材料既不保持凝血酶也不保持血纖蛋白原的實施方案(C)。為在(A)的情況下使用，在將血纖蛋白原施用于創面之后，覆蓋保持凝血酶的生物可吸收的支持材料(以下稱為“保持凝血酶的支持材料”)，或備選地，通過噴涂或通過浸潰將血纖蛋白原施用于保持凝血酶的支持材料。所述保持凝血酶的支持材料可通過以下步驟制備(1)將凝血酶溶解于鹽水或緩沖液中和任選視情況將作為添加劑的氯化鈣加入所得凝血酶溶液中，和(2)將支持材料浸潰到所述凝血酶溶液中，隨后在_80°C冷凍2小時和凍干。保持在保持凝血酶的支持材料上的凝血酶的量可優選為20-100U/cm2。為在(B)的情況下使用，將保持血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料(以下稱為“保持血纖蛋白原的支持材料”)和保持凝血酶的支持材料互相覆蓋，和將蒸餾水逐滴加入放置在上部的保持血纖蛋白原的支持材料中，將保持血纖蛋白原的支持材料表面施用于患部。所述保持血纖蛋白原的支持材料可通過以下步驟制備(I)將血纖蛋白原溶解于鹽水或緩沖液中和任選視情況將作為添加劑的非離子洗滌劑加入所得血纖蛋白原溶液中，和
(2)將支持材料浸潰到所述血纖蛋白原溶液中，隨后在_80°C冷凍2小時和凍干。保持在保持血纖蛋白原的支持材料上的血纖蛋白原的量可為0. 5-5mg/cm2，此濃度范圍的血纖蛋白原可發揮止血活性，和優選l_4mg/cm2。為在(C)的情況下使用，在將按照制備市售血纖蛋白封閉劑(例如Bolheal，由Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute 制備)的方法制備的血纖蛋白原施用于創面之后，施用浸潰到凝血酶溶液中的生物可吸收的支持材料，或備選地，通過噴霧將凝血酶和血纖蛋白原各自的溶液同時施用于支持材料。在(A)-(C)的任一情況下，可將凝血因子XIII或蛋白酶抑制劑加入包含血纖蛋白原的溶液中。當施用于創面時，本發明的創傷覆蓋材料可粘著到創面和保護創面，并在治愈后可被自然剝離。在患部處于濕潤條件的情況下，創傷覆蓋材料可作為人工皮膚充當細胞生長的支架以被自身組織代替。在創傷到達皮膚深層或在大范圍內展開的情況下，或在患部不在濕潤條件下的情況下，可優選使用用于保濕的覆蓋材料，將其覆蓋于上述創傷覆蓋材料。因而，可在濕潤環境下保持創面，使得除了用于保濕的覆蓋材料外的剩余部分可作為細胞生長的支架以被自身組織代替。本文使用的用于保濕的覆蓋材料可以是任何材料，只要其可充分保濕和對細胞無毒，且優選包括硅膜、聚氨酯膜等。根據本發明獲得的創傷覆蓋材料，由于其高粘著性、適當的強度、柔性和彈性，可粘著在任何形狀的皮膚缺陷區域上以減輕疤痕攣縮和疼痛。另外，因為其中使用的每種材料對活體是安全的，因此其可放心地在臨床上使用。通過以下實施例更詳細地解釋本發明，但不應視為將本發明限制于實施例。實施例制備實施例I :保持凝血酶的支持材料的制備將市售組織封閉劑試劑盒Bolheal, Juridical Foundation TheChemo-Sero-Therapeutic Research Institute中包含的凝血酶溶解在試劑盒所附的溶解液中以制備1875U/mL凝血酶的凝血酶溶液。使用該1875U/mL凝血酶的凝血酶溶液，制備包含終濃度為1%甘油、3%海藻糖、0. 18M組氨酸、40mM氯化鈣和0. 1%吐溫80的凝血酶溶液(pH 6. 0)。將凝血酶溶液(2. 5mL)均勻浸透由聚乙醇酸構成的生物可吸收的合成非織造布(Neoveil, Gunze Limited, 5X IOcm,厚度0. 15mm)。在冷凍和凍干持續24小時之后,將該樣品作為保持凝血酶的支持材料的樣品(在93. 8U/cm2下保持凝血酶)使用。制備實施例2 :保持血纖蛋白原的支持材料的制備使用包含在市售組織封閉劑試劑盒Bolheal, Juridical Foundation TheChemo-Sero-Therapeutic Research Institute中的血纖蛋白原，制備8%的血纖蛋白原溶液，其包含作為非離子洗滌劑的吐溫80(0. 1% )、清蛋白(1.0% )、NaCl (1.75% )、檸檬酸三鈉(I. 2 %)、甘氨酸(1.5%)和D-甘露醇(4.0%)。將各血纖蛋白原溶液(2. 5mL)均勻浸透由聚乙醇酸構成的生物可吸收的合成非織造布(Neoveil,Gunze Limited, 5X IOcm,厚度0. 15mm)。在冷凍和凍干持續24小時之后，將該樣品作為保持血纖蛋白原的支持材料的樣品(在4mg/cm2下保持血纖蛋白原)使用。實施例I :在豚鼠缺陷皮膚模型中評價抑制疤痕攣縮效果的測試(I)實驗方法
使用氯胺酮(DAIICHISANKYO COMPANY，UMITED)、安定(Takeda PharmaceuticalCompany Limited)對豚鼠(雄性、Hartley、5周齡、Japan SLC, Inc.)進行麻醉誘導，并通過面罩吸入異氟烷(Merck)持續麻醉。在背部的皮膚產生若干I. 5cm見方的全厚度皮膚創傷，并按下文各組中指明的進行處理。對組I和組3，測量施用需要的時間。在處理之后第5天、第8天、第10天、第2周和第3周，拍攝創傷部位的照片并通過圖像分析獲得創傷面積。此外，在處理之后第5天、第10天、第2周、第3周和第6周，通過安樂死處死每4只動物并對處理部位取樣用于組織病理學。(2)分組級1:創傷覆蓋材料(本發明)在將血纖蛋白原溶液(Bolheal (注冊商標)，Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute)擦入創傷部位之后，在那里施用生物可吸收的合成非織造布(Neoveil (注冊商標)，Gunze Limited),在非織造布上噴涂血纖蛋白原溶液和凝血酶溶液(Bolheal (注冊商標)，JuridicalFoundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute)。級I :無處理(陰性對照)不進行處理以使其成為開放的創傷。
組3 Terudermis :Terudermis (注冊商標；Terumo), 一種用于真皮缺陷的移植物，將其施用于創傷部位并使用尼龍線通過單結縫合來縫合。(3)結果⑴施用時間Terudermis的施用所需的時間是368. 0±27. 2秒(平均值n = 8)，而創傷覆蓋材料的施用所需時間是44. 2±6. I秒(平均值n = 9)。因為創傷覆蓋材料具有自身粘著性，不需要縫合，因此其可在比Terudermis更短的時間(約1/9)內施用。(ii)創面的面積創傷覆蓋材料的創傷面積的保留率是95.5±5. 75% (n = 6)，而無處理是73. 6±16. 21% (n = 5)，以及 Terudermis 是 73. I ±18. 02% (n = 5)。這樣，在處理后第 8天，創傷覆蓋材料與無處理和Terudermis相比,抑制創傷收縮。 (iii)組織病理學檢查〈組之間的比較〉對創傷覆蓋材料，在第5天，水腫以及痂下血液和滲出物保留比無處理和Terudermis的輕。在第10天,每組的創傷后凹下的區域充滿肉芽組織,但創傷覆蓋材料與無處理和Terudermis相比，將原始膠原層之間的距離保留的最好(圖I)。在第5天觀察到的差別可歸因于本發明的創傷覆蓋材料的封閉作用，其抑制血液和滲出物的保留。因為保留的物質可引起疼痛或延緩修復，因此這些的減少將是所期望的。在第10天觀察到的差別可歸因于施用后本發明的創傷覆蓋材料的適當強度，其確保形成肉芽組織的空間并抑制創傷收縮，因而保持原始膠原層之間的距離。因此，可期望通過使用創傷覆蓋材料減少疤痕攣縮和疼痛。<通過創傷覆蓋材料隨時間推移的治愈>第5天在創傷覆蓋材料下是一薄層滲出物，在其下觀察到纖維質牛成和從周邊區域開始的上皮(部分)再生。第10天:剝離創傷覆蓋材料。從周邊區域再生上皮和在上皮下觀察到新血管形成和肉芽組織形成。第2周:上皮再生是顯著的，并在部分情況下觀察到完全覆蓋。第3周:觀察到上皮的完全覆蓋。在肉芽組織中觀察到膠原，真皮和皮下組織的修復進展。藍且J里:幾乎恢復真皮中膠原的連續性。并且，幾乎修復皮膚附屬物。像這樣，在使用本發明的創傷覆蓋材料治愈的過程中沒有觀察到過度的炎癥等，且上皮和真皮層快速重建。實施例2 :在濕潤條件下用自身組織代替的過程中的組織病理學觀察豚鼠缺陷皮膚模型(I)實驗方法使用氯胺酮(DAIICHISANKYO COMPANY，UMITED)、安定(Takeda PharmaceuticalCompany Limited)對豚鼠(雄性、Hartley、5 周齡、Japan SLC, Inc.)進行麻醉誘導(introductory anesthesia),然后通過面罩吸入異氟燒(Merck)繼續麻醉。在背部的皮膚產生若干I. 5cm見方的全厚度皮膚創傷，并按下文各組中指明的進行處理。在處理后第8天、第2周和第3周，通過安樂死處死動物并對處理部位取樣用于組織病理學。(2)分組組I :創傷覆蓋材料在將血纖蛋白原溶液(Bolheal (注冊商標)，JuridicalFoundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute)擦入創傷部位之后，在那里施用生物可吸收的合成非織造布(Neoveil (注冊商標)，Gunze Limited),在其上噴涂血纖蛋白原溶液和凝血酶溶液(Bolheal (注冊商標)，Juridical Foundation TheChemo-Sero-Therapeutic Research Institute),進一步用用于保濕的覆蓋材料覆蓋。(3)組織病理學檢查第8天創傷后凹下區域充滿肉芽組織，并觀察到從周邊區域開始的上皮再生。第2周:上皮再生是顯著的且在部分情況下觀察到完全覆蓋。
第3周使用創傷覆蓋材料的生物可吸收的非織造布和血纖蛋白凝塊作為支架，觀察到結締組織增生和新血管形成，并且創傷覆蓋材料被自身組織所代替(圖2)。這揭示了在濕潤條件下，創傷覆蓋材料在創傷治愈后沒有被自然剝離，而是被自身組織代替。工業適用性本發明的創傷覆蓋材料通過自身的粘著性可容易地粘著在皮膚缺陷區域以保護創面。另外，本發明的創傷覆蓋材料由于減輕疤痕攣縮和疼痛，可通過其生物相容性和對組織的積極修復以快且好的方式重建皮膚缺陷組織。因此，本發明的創傷覆蓋材料可作為創傷覆蓋材料或人工皮膚施用于由創傷、外科手術或燒傷引起的皮膚缺陷區域。
權利要求
1.一種創傷覆蓋材料，所述創傷覆蓋材料包含作為有效成分的凝血酶和血纖蛋白原以及作為基質的生物可吸收的支持材料。
2.權利要求I的創傷覆蓋材料，其中所述創傷覆蓋材料由以下任一種構成 (1)保持凝血酶的生物可吸收的支持材料和血纖蛋白原；或 (2)保持凝血酶的生物可吸收的支持材料和保持血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料；或 (3)凝血酶、血纖蛋白原和生物可吸收的支持材料； 其中凝血酶和血纖蛋白原在其即將使用之前相互分離。
3.權利要求I或2的創傷覆蓋材料，其中所述生物可吸收的支持材料是由選自聚乙醇酸、聚乳酸以及乙醇酸和乳酸的共聚物的材料構成。
4.權利要求1-3中任一項的創傷覆蓋材料，其中將所述生物可吸收的支持材料加工為非織造布。
5.權利要求1-4中任一項的創傷覆蓋材料，其中所述生物可吸收的支持材料是由聚乙醇酸材料構成的非織造布。
6.權利要求1-5中任一項的創傷覆蓋材料，其中所述創傷覆蓋材料包含至少一種選自以下的添加劑凝血因子XIII、蛋白酶抑制劑、氯化鈣、清蛋白、氯化鈉、檸檬酸鈉或非離子洗滌劑。
7.權利要求1-6中任一項的創傷覆蓋材料，其中所述創傷覆蓋材料任選包含用于保濕的覆蓋材料。
8.權利要求7的創傷覆蓋材料，其中所述用于保濕的覆蓋材料是由硅或聚氨酯構成。
9.權利要求1-8中任一項的創傷覆蓋材料，其中所述創傷覆蓋材料可修復因外傷、夕卜科手術或燒傷所致的皮膚缺陷區域。
10.一種創傷覆蓋材料試劑盒，所述試劑盒包括保持凝血酶作為有效成分的生物可吸收的支持材料和含有血纖蛋白原作為有效成分的容器。
11.權利要求10的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由選自聚乙醇酸、聚乳酸以及乙醇酸和乳酸的共聚物的材料構成。
12.權利要求10或11的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述生物可吸收的支持材料加工為非織造布。
13.權利要求10-12中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由聚乙醇酸材料構成的非織造布。
14.權利要求10-13中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料包含至少一種選自以下的添加劑凝血因子XIII、蛋白酶抑制劑、氯化鈣、清蛋白、氯化鈉、檸檬酸鈉或非尚子洗漆劑。
15.權利要求10-14中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述氯化鈣作為用于凝血酶的添加劑加入保持凝血酶的生物可吸收的支持材料中。
16.權利要求10-14中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述凝血因子XIII包含在含有血纖蛋白原的容器中。
17.權利要求10-16中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料通過包括以下步驟的方法制備將生物可吸收的支持材料浸潰到含有凝血酶的溶液中的步驟和凍干通過所述步驟獲得的支持材料的步驟。
18.權利要求10-17中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料任選包含用于保濕的覆蓋材料。
19.權利要求18的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述用于保濕的覆蓋材料由硅或聚氨酯構成。
20.權利要求10-19中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料可修復因外傷、外科手術或燒傷所致的皮膚缺陷區域。
21.一種創傷覆蓋材料試劑盒，所述試劑盒包括保持凝血酶作為有效成分的生物可吸收的支持材料和保持血纖蛋白原作為有效成分的生物可吸收的支持材料。
22.權利要求21的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由選自聚乙醇酸、聚乳酸以及乙醇酸和乳酸的共聚物的材料構成。
23.權利要求21或22的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述生物可吸收的支持材料加工為非織造布。
24.權利要求21-23中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由聚乙醇酸材料構成的非織造布。
25.權利要求21-24中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料包含至少一種選自以下的添加劑凝血因子XIII、蛋白酶抑制劑、氯化鈣、清蛋白、氯化鈉、檸檬酸鈉或非尚子洗漆劑。
26.權利要求21-25中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述氯化鈣作為用于凝血酶的添加劑加入保持凝血酶的生物可吸收的支持材料中。
27.權利要求21-25中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述非離子洗滌劑包含在保持血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料中。
28.權利要求21-27中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述保持凝血酶的生物可吸收的支持材料或所述保持血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料通過包括以下步驟的方法制備將生物可吸收的支持材料浸潰到含有凝血酶或血纖蛋白原的溶液中的步驟和凍干通過所述步驟獲得的支持材料的步驟。
29.權利要求21-28中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料任選包含用于保濕的覆蓋材料。
30.權利要求29的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述用于保濕的覆蓋材料由硅或聚氨酯構成。
31.權利要求21-30中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料可修復因外傷、外科手術或燒傷所致的皮膚缺陷區域。
32.—種創傷覆蓋材料試劑盒，所述試劑盒包括含有凝血酶作為有效成分的容器、含有血纖蛋白原作為有效成分的容器和生物可吸收的支持材料。
33.權利要求32的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料由選自聚乙醇酸、聚乳酸以及乙醇酸和乳酸的共聚物的材料構成。
34.權利要求32或33的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述生物可吸收的支持材料加工為非織造布。
35.權利要求32-34中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述生物可吸收的支持材料是由聚乙醇酸材料構成的非織造布。
36.權利要求32-35中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料包含至少一種選自以下的添加劑凝血因子XIII、蛋白酶抑制劑、氯化鈣、清蛋白、氯化鈉、檸檬酸鈉或非尚子洗漆劑。
37.權利要求32-36中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中將所述氯化鈣作為用于凝血酶的添加劑加入含有凝血酶的容器中。
38.權利要求32-36中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述凝血因子XIII包含在含有血纖蛋白原的容器中。
39.權利要求32-38中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料任選包含用于保濕的覆蓋材料。
40.權利要求39的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述用于保濕的覆蓋材料由硅或聚氨酯構成。
41.權利要求32-40中任一項的創傷覆蓋材料試劑盒，其中所述創傷覆蓋材料可修復因外傷、外科手術或燒傷所致的皮膚缺陷區域。
全文摘要
本發明提供一種新的創傷覆蓋材料，其保護和修復由手術、外傷、燒傷等所致的創傷區域。本發明涉及一種創傷覆蓋材料，其包含凝血酶、血纖蛋白原和生物可吸收的支持材料。創傷覆蓋材料可進一步覆蓋有用于保濕的覆蓋材料。創傷覆蓋材料可由以下任一種的試劑盒構成(1)保持凝血酶的生物可吸收的支持材料和血纖蛋白原；或(2)保持凝血酶的生物可吸收的支持材料和保持血纖蛋白原的生物可吸收的支持材料；或(3)凝血酶、血纖蛋白原和生物可吸收的支持材料。此外，各試劑盒可與用于保濕的覆蓋材料組合。
文檔編號A61K9/70GK102802682SQ201080036219
公開日2012年11月28日 申請日期2010年6月11日 優先權日2009年6月11日
發明者安里亮, 新屋希子, 石澤由希, 原野里美 申請人:一般財團法人化學及血清療法研究所