專利名稱：一種從黃蟬中提取總內酯的方法
技術領域：
本發明屬于生物技術領域，特別涉及一種從黃蟬中提取總內酯的方法。
背景技術：
黃蟬為夾竹桃科黃蟬屬植物，產于熱帶美洲，原產于巴西。藥材主產于福建、廣西。該物種為中國植物圖譜數據庫收錄的有毒植物，其毒性為植株乳汁有毒，人畜中毒，癥狀表現為心跳加快，循環系統和呼吸系統障礙，妊娠動物食之會流產。常用于癬疥、滅孑孓。現代醫學研究發現，黃蟬藥材中含有大量內酯成分如黃蟬花辛、雞蛋花素、黃蟬花定和黃蟬花素等，具有細胞毒活性，對有抗淋巴細胞白血病P388和人體鼻咽癌(KB)細胞活性。
通過文獻檢索，從黃蟬中提取總內酯的方法，一般采用有機試劑提取。如kupchan等以軟枝黃蟬的根為原料，采用乙醇提取分離出黃蟬花辛、黃蟬花定和黃蟬花素等成分。如上所述，傳統提取分離方法存在技術缺陷是分離過程復雜繁瑣，使用有機試劑種類多，收率低，環境污染嚴重等。超臨界二氧化碳萃取原理是在超臨界狀態下，將超臨界二氧化碳與待分離的物質接觸，使其有選擇性地把極性大小、沸點高低和分子量大小的成分依次萃取出來。由于全過程不用有機溶劑，因此萃取物絕無殘留溶媒，同時也防止了提取過程對人體的毒害和對環境的污染，而且二氧化碳價格便宜，容易取得，且在生產過程中循環使用。
發明內容
本發明的目的是解決現有技術的不足和缺陷，提供一種超臨界二氧化碳萃取法從黃蟬中提取總內酯的方法。為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案以黃蟬全草為原料，干燥后，粉碎20^80目，加入萃取釜，設置溫度為3(T50°C、壓力為2(T30MPa，通入液態二氧化碳和夾帶劑進行超臨界萃取，在溫度5(T60°C、壓力5 10MPa解析萃取物，所得萃取物用石油醚洗滌數次，再用熱水分散后加入大孔樹脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脫，收集洗脫減壓濃縮結晶，結晶物再用乙醇溶液重結晶即得。所述的夾帶劑可選乙醇、甲醇、丙酮、氯仿或乙醚中的一種，用量為原料量的1-3倍。所述的大孔樹脂型號可選D101、AB-8、HPD100或ADS-21中的一種。所述的乙醇溶液梯度洗脫為先用3 7倍柱體積10-40%乙醇溶液洗脫雜質，再用4^8倍柱體積60-80%乙醇溶液洗脫有效成分。本發明的積極效果是方法采用超臨界二氧化碳方法萃取和大孔樹脂方法純化，效率高、低排放，而且操作步驟簡單，洗脫溶劑單一，易于工業化生產。
具體實施例方式
實施例I:黃蟬全草原料干燥后，粉碎40目，取Ig加入萃取釜中，設定萃取釜參數萃取溫度30°C、壓力為20MPa，通入液態CO2，流速為20L/h，達到上述參數后，通入90%乙醇溶液做夾帶劑，動態萃取3h，在溫度60°C、壓力6MPa從分離釜中解析，得萃取物45g。所得萃取物用石油醚洗滌3次，再用熱水分散加入DlOl大孔樹脂(樹脂量80ml)柱中吸附，先用300ml30%乙醇溶液洗脫雜質，再用400ml80%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液減壓濃縮，約200ml放置結晶，結晶物用90%乙醇溶液溶解重結晶，得總內酯14g。實施例2:
黃蟬全草原料干燥后，粉碎60目，取Ig加入萃取釜中，設定萃取釜參數萃取溫度40°C、壓力為25MPa，通入液態CO2，流速為25L/h，達到上述參數后，通入99%甲醇溶液做夾帶劑，動態萃取3h，在溫度50°C、壓力SMPa從分離釜中解析，得萃取物53g。所得萃取物用石油醚洗滌3次，再用熱水分散加入AB-8大孔樹脂(樹脂量100ml)柱中吸附，先用400ml20%乙醇溶液洗脫雜質，再用400ml70%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液減壓濃縮，約200ml 放置結晶，結晶物用95%乙醇溶液溶解重結晶，得總內酯16g。
實施例3
黃蟬全草原料干燥后，粉碎80目，取Ig加入萃取釜中，設定萃取釜參數萃取溫度50°C、壓力為30MPa，通入液態C02，流速為20L/h，達到上述參數后，通入氯仿溶液做夾帶劑，動態萃取3h，在溫度55°C、壓力9MPa從分離釜中解析，得萃取物35g。所得萃取物用石油醚洗滌3次，再用熱水分散加入ADS-21大孔樹脂(樹脂量100ml)柱中吸附，先用500ml30%乙醇溶液洗脫雜質，再用500ml70%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液減壓濃縮，約250ml放置結晶，結晶物用99%乙醇溶液溶解重結晶，得總內酯12g。
權利要求
1.一種從黃蟬中提取總內酯的方法，其特征在于以黃蟬全草為原料，干燥后，粉碎20^80目，加入萃取釜，設置溫度為3(T50°C、壓力為2(T30MPa，通入液態二氧化碳和夾帶劑進行超臨界萃取，在溫度5(T60°C、壓力5 10MPa解析萃取物，所得萃取物用石油醚洗滌數次，再用熱水分散后加入大孔樹脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脫，收集洗脫減壓濃縮結晶，結晶物再用乙醇溶液重結晶即得。
2.根據權利要求I所述的從黃蟬中提取總內酯的方法，其特征在于所述的夾帶劑可選乙醇、甲醇、丙酮、氯仿或乙醚中的一種，用量為原料量的1-3倍。
3.根據權利要求I所述的從黃蟬中提取總內酯的方法，其特征在于所述的大孔樹脂型號可選 D101、AB-8、HPD100 或 ADS-21 中的一種。
4.根據權利要求I所述的從黃蟬中提取總內酯的方法，其特征在于所述的乙醇溶液梯度洗脫為先用3 7倍柱體積10-40%乙醇溶液洗脫雜質，再用4、倍柱體積60-80%乙醇溶液洗脫有效成分。
全文摘要
本發明公開了一種從黃蟬中提取總內酯的方法。方法是以黃蟬全草為原料，干燥后，粉碎20~80目，加入萃取釜，設置溫度為30~50℃、壓力為20~30MPa，通入液態二氧化碳和夾帶劑進行超臨界萃取，在溫度50~60℃、壓力5~10MPa解析萃取物，所得萃取物用石油醚洗滌數次，再用熱水分散后加入大孔樹脂中吸附，乙醇溶液梯度洗脫，收集洗脫減壓濃縮結晶，結晶物再用乙醇溶液重結晶即得。本方法具有提取效率高及工藝步驟操作簡便的優點，適合工業化生產。
文檔編號A61P35/00GK102824384SQ20121034483
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月18日 優先權日2012年9月18日
發明者劉東鋒 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司