專利名稱：含有vx-950的劑型及其給藥方案的制作方法
技術領域：
本發明涉及治療丙型肝炎病毒感染的方法。
背景技術：
丙型肝炎病毒(HCV)感染是亟待解決的人類醫學問題。HCV被認為是大多數非甲非乙型肝炎的原因，據估計全球人類血清流行率為3%[A. Alberti等人，"Natural History of Hepatitis C " , T. Hepatology, 31. , (Suppl.1)，pp. 17-24 (1999)]。僅在美國，近四百萬人已被感染[M. J. Alter 等人，"The Epidemiology of Viral Hepatitis in the United States " , Gastroenterol. Clin. North Am. ,23, pp. 437-455(1994)； M.J· Alter" Hepatitis C Virus Infection in the United States" , T. Hepatology, 31.，(Suppl.1)，pp. 88-91 (1999)]。
被HCV感染的人有20-25%可能能夠在急性感染后清除病毒，但是75_80%將發展為慢性丙型肝炎感染「前言，Frontiers inViral Hepatitis. Ed. RF Schinazi, J-P Sommadossi, and CM Rice. p. x1. Elsevier (2003)]。這通常導致復發性和進行性惡化的肝部炎癥，經常引起更加嚴重的疾病狀態，例如肝硬化和肝細胞癌[M.C.Kew，“!fepatitiS C and Hepatocellular Carcinoma”，FEMSMicrobiology Reviews, 14, pp. 211-220 (1994)；1. Saito等人,“Hepatitis C Virus Infection is Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma，，，Proc. Natl. Acad. ScL USA, 87，pp. 6547-6549 (1990)]。不幸地，削弱慢性HCV的進展還沒有廣泛有效的治療。
HCV基因組編碼3010-3033個氨基酸的聚蛋白[Q. L. Choo,等人，“Genetic Organization and Diversity of the Hepatitis C Virus，，，Proc. Natl. Acad. Sc1. USA, 88，pp. 2451-2455 (1991) ;N. Kato 等人，“Molecular Cloning of the Human Hepatitis C Virus Genome From Japanese Patients with Non_A，Non-B Hepatitis,，’Proc. Natl. Acad. Sc1. USA2 87，pp. 9524-9528 (1990) ；A. Takamizawa 等人，“Structure and Organization of the Hepatitis C Virus Genome Isolated From Human Carriers,，’ J. Virol. ,65, pp. 1105-1113(1991)]。HCV非結構性(NS)蛋白被假定為病毒復制提供必需的催化機理。NS蛋白起源于聚蛋白的蛋白水解性裂解[R. Bartenschlager等人，“Nonstructural Protein3of the Hepatitis C Virus Encodes a Serine-Type Proteinase Required for Cleavageat the NS3/4and NS4/5Junctions，，，J. Virol.， 67，pp.3835-3844 (1993) ；A.Grakoui 等人，“Characterization of the Hepatitis C Virus-Encoded Serine Proteinase :Determination of Proteinase-Dependent Polyprotein Cleavage Sites, ” J. Virol.，67，pp. 2832-2843 (1993) ；A. Grakoui 等人，“Expression and Identification of Hepatitis C Virus Polyprotein Cleavage Products, TViro1. ,67, pp. 1385-1395 (1993) ；L. Tomei 等人，“NS3is a serine protease required for processing of hepatitis C virus polyprotein，，，1. Virol., 67, pp. 4017-4026(1993)]。
HCV NS蛋白3(NS3)含有絲氨酸蛋白酶活性，這有助于加工大多數病毒酶，因而被視為病毒復制和感染性所必需的。已知黃熱病病毒NS3蛋白酶的突變降低病毒的感染性[Chambers, T. J.等人，“Evidence that the N-terminal Domain of Nonstructural Protein NS3From Yellow Fever Virus is a Serine Protease Responsible for Site-Specific Cleavages in the Viral Polyprotein，，，Proc. Natl. Acad. Sc1. U SA87, pp. 8898-8902 (1990)] o已經顯示NS3的前181個氨基酸(病毒聚蛋白的第1027-1207個殘基)含有NS3加工HCV聚蛋白的全部四個下游位點的絲氨酸蛋白酶結構域[C.Lin等人，“Hepatitis C Virus NS3Serine Proteinase :Trans_Cleavage Requirements and Processing Kinetics”，T. Virol. , 68, pp. 8147-8157 (1994)]。
HCV NS3絲氨酸蛋白酶及其有關輔因子NS4A有助于加工全部病毒酶，因而被視為病毒復制所必需的。這種加工似乎類似于由人免疫缺陷病毒天冬氨酰蛋白酶所進行的加工，該蛋白酶也參與病毒酶加工HIV蛋白酶抑制劑，這些抑制劑抑制病毒蛋白的加工，是有力的人用抗病毒劑，表明干擾這一階段的病毒生命周期可以獲得治療活性劑。所以，這是一個有吸引力的藥物發現目標。
目前沒有任何令人滿意的抗-HCV劑或治療。直到最近，唯一成熟的HCV疾病療法是干擾素治療。第一種獲得許可的HCV感染療法是用標準(非聚乙二醇化)干擾素ct治療。不過，干擾素具有顯著的副作用[M. A. Wlaker等人,“Hepatitis C Virus An Overview of Current Approaches and Progress,，，221，4，pp. 5] 8-29 (1999)； D. Moradpour 等人，“Current and Evolving Therapi es for Hepatitis C, ”Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. ,11，pp. 1199-1202 (1999) ；H. L. A. Janssen 等人 “Suicide Associated with Alfa-1nterferon Therapy for Chronic Viral Hepatitis,” J. Hepatol. ,21，pp. 241-243 (1994) ；P. F. Renault 等人，“Side Effects of Alpha Interferon, ^Seminars in Liver Disease, 9, pp. 273-277. (1989)],僅在一部分( 25%) 病例中誘導長期的緩解作用
。向治療方案加入利巴韋林略微增加響應率。最近引入干擾素的聚乙二醇化形式(PEG-1NTR0N和PEGASYS))，它們也與利巴韋林組合，導致僅為不太大的消退率提高和僅為部分的副作用減少。目前關心的標準是治療方案持續24-48周，依賴于預后因素，例如HCV基因型和療法初始響應的證明。而且，有效抗-HCV疫苗的前景仍然是不確定的。
因而，存在對于抗-HCV療法和適合于抗-HCV化合物的劑量方案的需求。
HCV和其他疾病與疾患都與肝臟損傷有關。也存在對于適合于治療肝臟損傷的療法和劑量方案的需求。發明內容
本發明提供了丙型肝炎病毒感染的治療。本發明因此提供了臨床丙型肝炎病毒感染后遺癥的預防。
本發明也提供肝臟損傷和肝臟炎癥的治療。
圖1A和圖1B描繪劑量水平的平均濃度時間曲線(實施例3)。
圖2A-2D描繪衍化藥動學參數。盒體內部的線條代表中值，盒體代表數值中間一半的限度(實施例3)。
圖3描繪在14日研究期間血漿中HCV RNA的濃度(IU/mL)(實施例5)。
圖4描繪在14日研究期間HCV RNA濃度(IU/mL)相對于基線的變化(實施例5)。
圖5描繪在14日研究期間HCV RNA濃度(IU/mL)相對于基線的變化，就750mg q8h 劑量組單個受試者而言(實施例5)。
圖 6描繪全部劑量組中的新蝶呤、ALT (丙氨酸氨基轉移酶)和HCV RNA+/-SEM。在圖6中使用下列符號對全部3個劑量組和安慰劑組都顯示了平均ALT水平土SEM(最高4 條線，用開放的符號表示)、平均血漿新蝶呤水平土SEM(中間4條線，用開放的符號表示) 和平均血漿HCV RNA負載土 SEM (下部4條線，用封閉的符號表示)相對于基線的變化。用 VX-950治療患者達14天。*450mg q8h組第12天平均ALT水平的瞬間增加是人為現象(丟失10份樣品中的5份，中值38U/L，范圍25-125U/L)(實施例5)。
圖7描繪全部組的平均新蝶呤值+/-SEM。全部3個劑量組和安慰劑組在第7和14 天都進行平均血漿新蝶呤水平土SEM預處理。注意，平均新蝶呤的降低在750mg q8h劑量組中是最大的，具有最高的預處理值，然后在第14天具有最低的平均值。在750mg q8h劑量組中，與基線和安慰劑相比新蝶呤的降低在第14天變得顯著(*未成對雙尾T檢驗，**Mann Whitney檢驗)。Y = 7. 7nmol/L處的水平虛線代表ULN(實施例5)。
圖8、9和10描繪TRIF(TLR3銜接蛋白)被HCV NS3/4A蛋白酶的體外裂解受到 VX-950的抑制。
圖8(含有誘導IFN-β TRIF或TICAM-1的銜接頭的toll_ILl受體結構域)描繪 TRIF的圖示，顯示各種蛋白質結合結構域。TRIF被HCV NS3蛋白酶在Cys372裂解導致兩個片段Λ C340 和Λ Ν372 (由 Li 等人 2005，PNAS, 102，ρ2992-2997 修改)。
圖9描繪TRIF被HCV NS3蛋白酶裂解的動力學。將35S甲硫氨酸標記偶聯的TRIF 蛋白體外轉錄/轉譯產物(作為底物)與6yMtNS3蛋白酶溫育0-240分鐘的不同時間，繼之以SDS-PAGE。使凝膠暴露于磷成像計(phosphor imager)，以量化裂解產物。Λ N372裂解產物的量化在圖中被顯示為時間的函數。
圖10描繪NS3蛋白酶依賴性TRIF裂解和TRIF裂解被VX-950抑制。在有(圓環)或沒有(方塊) ο μ M VX-950的存在下，將35S甲硫氨酸標記偶聯的TRIF蛋白體外轉錄/轉譯產物(作為底物)與0-4 μ M遞增濃度的tNS3蛋白酶溫育，繼之以SDS-PAGE和暴露于磷成像計。在圖中顯示Λ Ν372裂解產物的量化。
圖11、12和13描繪病毒變體的適應性降低。
圖11描繪體外VX-950耐受性突變體的表型特征。與野生型蛋白酶相比，在體外酶反應(Ki)或者在2日復制子測定(IC5tl)中，由A156V/T突變所賦予的VX-950耐受性增加。在表格中顯示與野生型酶相比的突變體Kcat/Km比(由Lin等人2005，JBC, 280,P36784-36791 修改)。
圖12描繪與野生型(WT) NS3蛋白酶相比的HCV4A/B底物被A156V/T突變體裂解 將35S甲硫氨酸標記偶聯的與SEAP蛋白融合(之間為4A/B接合)的滅活HCV突變體蛋白酶體外轉錄/轉譯產物(作為底物)與不同量O. 008 μ M至6 μ M的野生型(WT)(方塊)或 A156V/T (三角和圓環)tNS3蛋白酶溫育，繼之以SDS-PAGE和暴露于磷成像計。在圖中顯示 Δ N372裂解產物的量化。
圖13描繪與野生型(WT)NS3蛋白酶相比的TRIF底物被A156V/T突變體裂解。將 35S甲硫氨酸標記偶聯的滅活TRIF體外轉錄/轉譯產物(作為底物)與不同量O. 008μΜ至 6μΜ的野生型(WT)(方塊)或A156V/T (三角和圓環)tNS3蛋白酶溫育，繼之以SDS-PAGE 和暴露于磷成像計。在圖中顯示Λ Ν372裂解產物的量化。
圖14描繪基線、第7天和第14天的平均HCV RNA、新蝶呤和ALT (實施例5)。
圖15和16描繪VX-950恢復Sendai病毒感染的Huh7細胞中IFNβ依賴性基因表達的數據。
圖15描繪用Sendai病毒刺激的Huh7細胞中IFN-β啟動子活性被HCV蛋白酶抑制。用在IFN-b啟動子的控制下表達熒光素酶基因的質粒與野生型(WT)或滅活突變體 (MT)蛋白酶共同轉染Huh7細胞，繼之以Sendai病毒(SeV)刺激。在該圖中顯示與Sendai 病毒未誘導的對照相比的熒光素酶基因的加倍活化。
圖16描繪用VX-950處理能夠克服HCV蛋白酶對Sendai病毒刺激的IFN- β啟動子活性的抑制效應。用在IFN-β啟動子的控制下表達熒光素酶基因的質粒和野生型(WT) 或滅活突變體(MT)蛋白酶共同轉染Huh7細胞。用DMSO(對照)或10 μ MVX-950處理這些細胞。用Sendai病毒(SeV)刺激細胞，感染后16小時測量熒光素酶活性。在該圖中顯示與Sendai病毒未誘導的對照相比的熒光素酶基因的加倍活化。
圖17描繪VX-950處理引起以前HCV療法無響應者(圖17Α)和未治療患者(圖 17Β)中HCV RNA降低的數據。顯示每種治療方案中患者的中值HCV RNA水平。利用Roche COBAS TaqMan HCV/HPS測定法測定血漿HCV RNA濃度。
發明詳細內容
本發明涉及給予VX-950的具體劑量和劑量方案。VX-950是一種競爭性、可逆性擬肽NS3/4A蛋白酶抑制劑，穩態結合常數(ki*)為7nM[W002/018369]。
已經以單一劑量在人類中測試了 VX-950，發現耐受性良好(實施例3)。不良事件的發生率或嚴重性沒有隨VX-950劑量而增加。沒有不良事件被認為是嚴重的(3級或4 級)。基線血液學實驗室數值或臨床化學參數沒有臨床上顯著的變化。任意受試者的體格檢查、生命體征或心電圖都沒有臨床上顯著的變化。
為測定VX-950的藥動學曲線而進行分析。數據描繪在圖1和圖2中。VX-950
綜合臨床前期和臨床數據，預測肝臟暴露于VX-950。聯合所預測的人肝臟暴露和 VX-950復制子測定與感染性病毒測定的結果(見下)，確定預計被良好耐受且產生治療益處的劑量。預測平均肝濃度值在所研究的劑量范圍內高達復制子測定IC9tl的57倍，高達復制子測定IC5tl的113倍。
這些結果表明，申請人的發明的劑量方案將使肝臟VX-950濃度基本上超過在非臨床研究中測定的IC5tl和IC9(I。
因此，本發明的一種實施方式提供了藥物組合物，包含
a) VX-950或其藥學上可接受的鹽
含量為約IOOmg至約1500mg ；
含量為約300mg至約1500mg ；
含量為約300mg至約1250mg ；
含量為約450mg ；
含量為約750mg ;或者
含量為約1250mg ;和
b)藥學上可接受的載體。
本發明也提供了治療方案，包括給予VX-950或其藥學上可接受的鹽
用量為約IOOmg至約1500mg ；
用量為約300mg至約1500mg ；
用量為約300mg至約1250mg ；
用量為約450mg;
用量為約750mg;或者
用量為約1250mg ;其中該用量每天給予一次、兩次或三次。根據本發明的治療方案旨在包括VX-950在一種或多種劑型中的給藥。
本發明的另一種實施方式提供治療或預防患者HCV感染的方法，包括對該患者給予VX-950或其藥學上可接受的鹽，用量為約300mg至約1500mg。
在某些實施方式中，VX-950的劑量為至少約300mg。在其他實施方式中，VX-950 的劑量為至少約450mg。在其他實施方式中，VX-950的劑量為至少約500mg。在其他實施方式中，VX-950的劑量為至少約750mg。在其他實施方式中，VX-950的劑量為至少約1250mg。 在其他實施方式中，VX-950的劑量為至少約1500mg。
在其他實施方式中，VX-950的劑量不多于約1500mg。在其他實施方式中，VX-950 的劑量不多于約1250mg。在其他實施方式中，VX-950的劑量不多于約750mg。在其他實施方式中，VX-950的劑量不多于約450mg。在其他實施方式中，VX-950的劑量不多于約500mg。 在其他實施方式中，VX-950的劑量不多于約300mg。
應當理解，可以組合這些下限和上限，以提供給予VX-950的優選劑量范圍。例如， 在一種實施方式中，VX-950或其藥學上可接受的鹽的量為約300mg至約1250mg。
在某些實施方式中，給予約450mg的VX-950。在其他實施方式中，給予約500mg的 VX-950。在其他實施方式中，給予約600mg的VX-950。在其他實施方式中，給予約750mg的 VX-950。在其他實施方式中，給予約IOOOmg的VX-950。在其他實施方式中，給予約1250mg 的 VX-950。
在任意這些實施方式中，每天一次給予VX-950。作為替代選擇，每天兩次給予 VX-950 ( BP BID ；ql2h)。作為替代選擇，每天三次給予VX_950(例如TID ；q8h)。可以與食物一起或者不與食物一起給予VX-950。
已經在人類中測試了 VX-950，發現有效抑制HCV復制。申請人已經證明，VX-950的給藥能夠實質性降低HCV RNA水平。重要地，申請人已經證明VX-950對感染有HCV的受試者給藥能夠抑制該病毒，以致病毒RNA變得用Roche COBAS TaqMan HCV/HPS分析(可從 Roche Molecular Diagnostics 獲得)不可測出。在 8 名接受每 8 小時(q8h)750mg VX-950 的受試者中，4名的HCV RNA水平低于量化限(LLQ30IU/mL)，這4名中有2名的HCV RNA水平低于檢測限(LLD10IU/mL)。
接受每8小時750mg VX-950的受試者在14日治療結束時達到大于41og1(l的 HCV-RNA中值減少(也就是10，000倍降低)。在14日治療結束時在其他兩個VX-950劑量組中都見到大于21og1(l的HCV-RNA中值減少。每名接受VX-950的受試者在治療前三天內都達到大于21og1Q的HCV-RNA減少，28名接受VX-950的受試者中有26名在治療前三 天內具有31og1QHCV-RNA減少。參見實施例5和圖3-5。
證明用VX-950治療的患者中血漿病毒負載迅速衰減。另外，證明在服藥結束后緩慢恢復至基線HCV RNA水平。具體而言，在治療結束后恢復至HCV RNA基線水平的速率低于剛處理時的HCV RNA衰減速率。這些結果以及達到不可檢測的HCV RNA水平一起表明 VX-950作為單一療法的有效性。
因此，本發明提供了治療被HCV感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950或其藥學上可接受的鹽，用量為a)約450mg,每天3次,每8小時一次；b)約750mg,每天3 次，每8小時一次；c)約1250mg,每天2次,每12小時一次；或者d)約1250mg,每天3次, 每8小時一次。
在其他實施方式中，本發明提供了對被HCV感染的患者給予VX-950的方法，以致患者中HCV RNA的水平在治療后比治療前低至少約21og(優選至少約41og)。在另一種實施方式中，本發明提供了對被HCV感染的患者給予VX-950的方法，以致患者中病毒RNA的水平降低至不可檢測的水平，并且保持不可檢測的水平直至達到“持續的病毒響應”。正如目前所定義的，“持續的病毒響應”意味著在完成服藥后24周，病毒RNA水平仍然是不可檢測的。
不受理論所局限,認為米用每8小時750mg VX950的本發明方法是優選的，因為該方法導致較高的低谷水平。低谷水平是臨近下一劑量之前血漿中藥物下降到的濃度(也就是兩次劑量之間的最低濃度)。特別是在病毒疾病中，重要的是維持藥物水平在某一濃度以上，以維持適當的病毒復制抑制作用。有利地，申請人已經發現有一種方案在所測試的方案中引起最高的低谷水平，即每8小時給予750mgVX-950。
因此，在優選的實施方式中，本發明提供一種方法，包括對患者給予VX-950或其藥學上可接受的鹽,用量為約750mg，每天3次，每8小時一次。
正如將被認識的，靈活的服藥安排是有利的。因此，在本發明的另一種實施方式中，給藥為每天3次，但是不是每8小時一次，可選地與膳食一起。在某些實施方式中，與食物一起給予VX-950。
本發明也提供在需要時向人體提供VX-950的方法，包括對該人給予口服劑量的包含VX-950的組合物，其中所述劑量在給藥后對所述人體提供至少約750ng/mL的VX-950 平均血漿濃度(Cavg)。在某些實施方式中，(Cavg)為約1000ng/mL或約1250ng/mL。在某些實施方式中，所述劑量本質上含有750mg VX-950。在這些實施方式中，在給藥后前3小時內獲得/達到(Cavg)，優選地在給藥后2小時、更優選I小時。在這些實施方式的優選方式中，(Cavg)維持達約24小時，優選達12周。
在某些實施方式中，本發明提供了治療患者HCV感染的方法，該方法歷經24小時給予至少一種包含VX-950的劑型，其中給予該劑型以維持最低約750ng/mL的低谷血漿 VX-950水平達24小時。
在這種實施方式的某些方式中，給予該劑型以維持最低約800ng/mL、優選約 900ng/mL的低谷血漿VX-950水平達24小時，更優選約1000ng/mL達24小時。
在某些優選的實施方式中，獲得治療上有效的血漿濃度，并且維持某一低谷水平。 這些方法特別可用于通過給予VX-950制劑治療患有HCV感染的人，其中維持最低約750、 800、900或1000ng/mL的低谷VX-950血漿水平達24小時。不受理論所局限，認為本發明不需要高于約1500ng/mL的低谷水平。因此，約750、800、900、1000ng/mL至約1500ng/mL(特別是I000至約I500)的低谷水平落入本發明的范圍。
也提供了遞送VX-950至人體的劑型，其中該劑型包含VX-950，所述劑型在24小時內給藥至 少一次時維持至少約750ng/mL、800ng/mL、900ng/mL或1000ng/mL達24小時至約 1500ng/mL(特別是1000ng/mL至約1500ng/mL)達24小時的低谷血漿VX-950水平。
理想地，當本發明的方法牽涉治療被HCV感染的患者時，該方法牽涉相對迅速地達到治療上有效的VX-950血漿濃度，然后維持低谷水平，以致達到有效的治療響應。有效的治療響應優選地是如下一種或兩種a)達到持續的病毒響應；和《達到不可檢測的血漿 HCV RNA達至少12周(12周或以上)。本文所用的HCV RNA“不可檢測”意味著HCV RNA的含量低于10IU/mL，根據目前商業上可獲得的分析法測定，優選地根據Roche COBAS TaqMan HCV/HPS分析法測定。
通過對患者給予負載劑量，可以獲得相對迅速的血漿濃度下降。在一種實施方式中，負載劑量為約1250mg VX-950。
在本發明的某些劑型中，該劑型(不是用于給予負載劑量的劑型)含有約750mg VX-950,每24小時給予三次該劑型。
在某些實施方式中，VX-950治療周期短于目前的護理標準。
在某些實施方式中，根據本發明的方法牽涉被基因型I丙型肝炎病毒感染的患者的治療。基因型IHCV感染是最難以治療的HCV毒株，在美國是最普遍的毒株。
申請人也已經證明，VX-950的給藥體內降低新蝶呤和ALT水平(圖6、圖7和圖 14)。在VX-950給藥后也降低AST (天冬氨酸氨基轉移酶)的水平。ALT是存在于肝細胞中的酶；當肝細胞受損或發炎時，ALT從細胞漏到血液中。血液ALT水平可用作肝臟炎癥或損傷的標志° 參見 Tatyana Yashina & J. Sanders SevalI, " Hepatitis C Virus" in Use and Interpretation of Laboratory Tests in GastroenteroloRY,James B. Peter, ed. , p.127, (1998);和 Andres T.Blei, " Liver and Biliary Tract" in Laboratory Medicine, D. A. Noe and Robert C. Rock, eds. , ch. 19，p.363 (1994)。
新蝶呤出-d-赤型-三羥丙基蝶啶)是在鳥苷三磷酸(GTP)代謝期間產生的蝶啶衍生物。新蝶呤主要是在被干擾素Y或干擾素α活化之后由單核細胞和巨噬細胞產生的， 是炎癥的標志。在慢性HCV感染中新蝶呤水平經常升高(Quiroga，等人Dig Dis Scil994 ； 39(11) =2485-96)。預測健康個體中的血漿新蝶呤水平在3.1與7. 7nmol/L之間。
因此，申請人確定血清新蝶呤濃度的變化作為(HCV)NS3 ·4Α蛋白酶抑制劑給藥期間單核細胞/巨噬細胞活性的標志。正如本文所描述的，在34名被HCV基因型I感染的患者中，在隨機化、雙盲、安慰劑對照的多劑量研究中，給予VX-950達14天(表I)。患者接受 VX-950450mg q8h (η = 10)、750mg q8h (n = 8)、1250mg ql2h (n = 10)或安慰劑(η = 6)。在預處理時、第7和14天和后續第10天，借助定量競爭性ELISA( EUTESTk Neopterin, Brahms, Hennigsdorf, Germany)測量血清新蝶呤濃度。檢測下限(LLD)為2nmol/L。在研究期間的頻繁間隔，借助實時PCR(CC)BASiilTaqMan HCV Test ;線性動態范圍3. OxlO1至 2.OxlO8HCV RNA IU/ml ;LLD 為 10HCV RNA IU/ml ；Roche Diagnostics，Branchburg，NJ)評估 HCVRNA。
在VX-950給藥期間，全部劑量組中每名患者都證明病毒負載有>2-log1(l的下降(表2)。在750mg q8h劑量組中，平均HCVRNA在第3天下降3. 61og1(l，在第14天下降 4. 31og10O在450mg q8h和1250mg ql2h劑量組中，在第3天至第7天見到最大效應，繼之以在第7天與第14天之間平均病毒負載增加。后續期間全部劑量組的平均病毒負載都增加。有利地，未接受過HCV治療和預先經過治療的患者都受益于本發明的方法。正如圖17A 和圖17B所描繪的，經過在先治療的患者和未接受過治療的患者都響應于VX-950。為了避免疑問，可以按照本發明方法治療的患者包括其中HCV治療尚未嘗試過或者已經失敗的那些，包括無響應的、反彈的、復發的和新發病的患者。
在23/34名患者中基線新蝶呤升高(平均9. 33nmol/L ;正常上限(ULN) 7. 7nmol/ I)。在750mg劑量組中，與基線和安慰劑相比的新蝶呤降低在第14天變得顯著(750mg q8h 劑量組基線 V 第 14 天 10. 48±0. 84nmol/L v7. 32±0· 48nmol/L P = O. 0104,Mannffhitney 檢驗；750mg q8h 劑量組 v 安慰劑第 14 天 7. 32±0. 48nmol/L v9. 81 ±1. 36nmol/L P = 0.0036，未成對雙尾T檢驗)。僅在750mg q8h劑量組中，第14天的平均新蝶呤水平在正常值內(圖7和圖14)。在450mg q8h劑量組和1250mg ql2h劑量組中，平均新蝶呤水平的降低更小(圖6、7和14)。平均新蝶呤水平在安慰劑組中沒有變化(圖6和圖7)。在后續期間，全部劑量組的平均新蝶呤水平都增加。
在全部組中，平均ALT水平在基線時升高，在服藥期間都降低(圖6)。在后續期間，全部劑量組的平均ALT水平都增加，恢復至基線。
盡管第7天后450mg劑量組和1250mg劑量組的HCV RNA增加，不過新蝶呤、尤其 ALT繼續降低。平均新蝶呤濃度變化與VX-950服藥期間HCV RNA和ALT水平衰減有相互關系。平均新蝶呤濃度的最大衰減出現在750mgq8h劑量組第14天。該劑量組第14天的 HCV RNA也有最大減少。450mg q8h和1250mg ql2h劑量組在第7天后，ALT和新蝶呤水平降低，而HCV RNA水平增加。這些數據提示HCV復制被VX-950抑制導致與病毒感染有關的 系統炎性活性的明顯衰減。
VX-950也改善動物模型的ALT水平升高(參見W02005/025517)。具體而言，SCID 小鼠中WT-HCV蛋白酶-SEAP的表達導致ALT水平升高，這能夠用VX-950治療而改善。SCID 小鼠中單獨WT-HCV蛋白酶的表達也導致時間和劑量依賴性的ALT水平升高。
因此，本發明的另一種實施方式提供治療或預防HCV陽性或HCV陰性患者一種或多種如下疾病的方法肝臟損傷、肝臟炎癥、皮脂腺病、脂肪肝、NAFLD、NASH、酒精性皮脂腺病和Reye氏綜合征。本發明也提供HCV陽性或陰性患者的肝臟保護方法。
申請人已經證明，VX-950體外阻滯免疫規避。
VX-950恢復Sendai病毒感染的Huh7細胞中的IFN β依賴性基因表達。在WT HCVpro的存在下，IFN^啟動子活性響應于Sendai病毒刺激而降低。VX-950克服WT HCVpro 介導的IFNP啟動子活化抑制作用(圖15和圖16)。
此外，已知NS3/4A在先天防御的規避中有牽連，例如借助TRIF-依賴性機理(以及病毒聚蛋白加工)。這種免疫規避引起病毒持續存留。因此，需要抑制病毒聚蛋白加工和先天防御規避的化合物。有利地，已經顯示VX-950兼而有之。更具體的說，VX-950體外抑制TRIF的裂解，它是TLR3銜接蛋白(圖8-10)。
不受理論所局限，模型建造提示了 VX-950抑制TRIF被NS3蛋白酶裂解。TRIF與 NS3蛋白酶活性位點的非啟動側結合。與TRIF相同，VX-950也與活性位點的非啟動側結合，并且阻滯TRIF裂解。
另夕卜，申請人已經顯示，VX-950病毒變體A156T和A156V減少裂解TRIF或4A/4B 的倉泛力(C.Lin 等人 “In Vitro Studies of Cross-resistance Mutations Against two Hepatitis C Virus Serine Protease Inhibitors VX_950and BILN2061”，J. Biol. Chem.， Augusts, 2005)。因為這些病毒變體不太適宜，它們對于病毒聚蛋白加工和病毒持續存留都是無效的。不受理論所局限，這涉及A156V的空間位阻，影響了與4A/4B&TRIF底物的結合 (圖 11-13)。
這表明，VX-950既充當直接的抗病毒劑，也充當免疫規避的抑制劑。因此，本發明也提供抑制HCV蛋白酶介導 的宿主防御規避的方法。
這些結果與本文公開的體內數據一起揭示了 VX-950作為單一療法的有效性。
在單一劑型或者一個以上劑型中給予根據本發明的VX-950的量。如果在分開的劑型中，大約同時給予每種劑型。為了避免疑問，服藥方案要求每天服用一次以上，一丸或多丸，或者可以每天每次給予劑量(例如I丸，每天三次，或者3丸，每天三次)。本發明的最多實施方式將采用每劑至少2丸。
VX-950可以含有一個或多個不對稱碳原子，因而可以存在外消旋物和外消旋混合物、單一對映體、非對映體混合物和單個的非對映體。這些化合物的全部這類異構形式都明確地包括在本發明中。每個立體碳可以是R或S構型。VX-950N-丙基側鏈的D-與L-異構體明確地包括在本發明內。本發明的優選實施方式采用VX-950。
正如將為技術人員所認識到的，如果本發明化合物用于預防性治療患者，并且該患者變得被丙型肝炎病毒感染，那么該方法可以治療該感染。因此，本發明的一種實施方式提供了治療或預防患者丙型肝炎感染的方法。
除了治療被丙型肝炎感染的患者以外，本發明的方法可以用于預防患者變得被丙型肝炎感染。因此，本發明的一種實施方式提供預防患者丙型肝炎病毒感染的方法，包括對該患者給予根據本發明的組合物或劑型。
本發明的方法也可以牽涉另一種組分的給藥，該組分包含附加成分，選自免疫調控劑；抗病毒劑；HCV蛋白酶抑制劑(除VX-950以外)；HCV生命周期中另一靶(除NS3/4A蛋白酶以外)的抑制劑；內部核糖體進入的抑制劑；廣譜病毒抑制劑；或者細胞色素P-450 抑制劑；或者它們的組合。附加成分也選自病毒細胞進入的抑制劑。
因此，在另一種實施方式中，本發明提供包含給予VX-950和另一種抗病毒劑、 優選抗-HCV劑的方法。這類抗病毒劑包括但不限于免疫調控劑，例如α-、β_與Y-干擾素或胸腺素、聚乙二醇化干擾素-α化合物和胸腺素；其他抗病毒劑，例如利巴韋林、金剛烷胺和特比夫定；其他丙型肝炎蛋白酶抑制劑(NS2-NS3抑制劑和NS3/NS4A抑制劑)； HCV生命周期中其他靶的抑制劑，包括螺旋酶、聚合酶和金屬蛋白酶抑制劑；內部核糖體進入的抑制劑；廣譜病毒抑制劑，例如MPDH抑制劑(例如美國專利5，807，876,6, 498，178、 6，344，465、6，054, 472、TO97/40028、W098/4038U W000/56331 的化合物和麥考酚酸及其衍生物，包括但不限于VX-497、VX-148和/或VX-944);或者任意上述的組合。
其他成分(例如非免疫調控或免疫調控化合物)可以與本發明化合物聯合使用， 包括但不限于在W002/18369中指定的那些，結合在此作為參考(例如參見273頁9_22行和274頁4行至276頁11行，這些公開內容具體結合在此作為參考)。
其他成分包括在各種已公布的美國專利申請中描述的那些。這些出版物提供附加的化合物和方法教導，能夠與VX-950聯合用在本發明的方法中，特別是用于治療肝炎。任意這樣的方法和組合物都可以與本發明的方法和組合物聯合使用。為簡便起見，用公開號指代這些出版物的公開內容，但是應當注意化合物的確切公開具體結合在此作為參考。示范性這類出版物包括美國專利公報No. 20040058982 ;美國專利公報 No. 20050192212 ;美國專利公報No. 20050080005 ;美國專利公報No. 20050062522 ;美國專利公報No. 20050020503 ;美國專利公報No. 20040229818 ;美國專利公報No. 20040229817 ； 美國專利公報No. 20040224900 ;美國專利公報No. 20040186125 ;美國專利公報 No. 20040171626 ;美國專利公報No. 20040110747 ;美國專利公報No. 20040072788 ;美國專利公報No. 20040067901 ;美國專利公報No. 20030191067 ;美國專利公報No. 20030187018 ； 美國專利公報No. 20030186895 ;美國專利公報No. 20030181363 ;美國專利公報 No . 20020147160 ;美國專利公報No. 20040082574 ;美國專利公報No. 20050192212 ;美國專利公報No. 20050187192 ;美國專利公報No. 20050187165 ;美國專利公報No. 20050049220 ； 和美國專利公報No. US2005/0222236。
其他成分包括但不限于Albuferon (白蛋白-干擾素α ),來自Human Genome Sciences ；PEG-1NTRON* (peg干擾素 a -2b,來自 Schering Corporation, Kenilworth, NJ) ； INTRON-A ( VlRAFFRONl·#.、干擾素 a -2b,來自 Schering Corporation, Kenilworth, NJ);利巴韋林(l-β -D-呋喃核糖基-1Η_1，2，4_三唑-3-酰胺，來自 ICN Pharmaceuticals, Inc. , Costa Mesa, CA ;參見 Merck Index, entry8365, Twelfth Edition) ； REBETROL (Schering Corporation, Kenilworth, NJ) ； COPEGUS (Hoffmann-La Roche, Nutley, NJ) ;PEGASYS (peg 干擾素 a-2a,來自 Hoffmann-La Roche, Nutley, NJ) ； ROFRRON (重組干擾素 ct _2a,來自 Hoffmann-La Roche, Nutley,NJ) ； BEREFOR (干擾素 α 2,來自 Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc. , Ridgefield, CT) ;SUMIF.ERON (天然 α 干擾素的純化摻合物，例如 Sumiferon， 來自 Sumitomo, Japan) ； WELLFERON (干擾素 α nl,來自 Glaxo Wellcome Ltd., GreatBritain) ; Al .FF.RO\ !]!(天然 ct 干擾素的混合物，由 InterferonSciences 制造，來自Purdue Frederick Co. , CT) ; α -干擾素；天然α干擾素2a ;天然α干擾素2b;聚乙二醇化α干擾素2a或2b;同義α干擾素(Amgen, Inc. , Newbury Park, CA) ； R FBFTRON! ' (Schering Plough，干擾素-α 2B+利巴韋林)；聚乙二醇化干擾素 a (Reddy, K. R.等人"Efficacy and Safety of Pegylated (40-kd) Interferonalpha~2a Compared with Interferon alpha_2a in NoncirrhoticPatients with Chronic Hepatitis C (Hepatology, 33, pp. 433-438 (2001)；同義干擾素(INFERGEN ) (Kao， J.H·，等人，"Efficacy of Consensus Interferon in the Treatment of Chronic Hepatitis " J. Gastroenterol. Hepatol. 15，pp. 1418-1423 (2000);類成淋巴細胞性或 “天然”干擾素；干擾素 τ (Clayette，P.等人，"IFN-tau，A New Interferon Type I with Antiretroviral activity " Pathol. Biol. (Paris)47，pp. 553-559(1999)；白介素-2 (Davis，G. L 等人， "Future Options for the Management of HepatitisC." Seminars in LiverDisease，19，pp. 103-112(1999); 白介素-6 (Davis 等人 "Future Options for the Management of Hepatitis C. " Seminarsin LiverDiseasel9，pp. 103-112 (1999);白介素-12 (Davis，G. L 等人， "Future Options forthe Management of Hepatitis C. " Seminars in Liver Disease, 19，pp. 103-112(1999);和增強I型輔助T細胞應答形成的化合物(Davis等人，"Future Options for the Management of Hepatitis C. " Seminars in Liver Diseas e, 19，pp. 103-112(1999))。也包括剌激細胞中干擾素合成的化合物(Tazulakhova，E. B.等人，"Russian Experience in Screening， analysis, and Clinical Application of Novel Interferon Inducers" J.1nterferon Cytokine Res.，21pp. 65-73)，包括但不限于雙鏈RNA，單獨或者與妥布霉素的組合，和Imiquimod (3M Pharmaceuticals ；Sauder,D.N. " Immunomodulatory and Pharmacologic Properties of Imiquimod" J. Am. Acad. Dermatol. ’ 43pp. S6_lI (2000)。另見 W002/18369，特別是 272 頁 15 行至 273 頁 8 行，其公開內容具體結合在此作為參考。
正如技術人員所認可的，VX-950優選地是口服給藥的。干擾素通常不是口服給藥的，不過口服給藥形式正在開發中。盡管如此，本文不把本發明的方法或組合限于任意具體的劑型或方案。因而，根據本發明的組合的每種組分可以是分開、一起或者以其任意組合給藥的。正如技術人員所認可的，干擾素的劑量通常是以IU測量的(例如約4百萬IU至約 12百萬IU)。干擾素也可以按微克計。例如，Peg-1ntron的標準劑量為1. 0-1. 5μ g/kg/ wk，Pegasys 為 180 μ g/wk。
與本發明結合使用的細胞色素P450單氧合酶(CYP)抑制劑被預期抑制VX-950的代謝。因此，細胞色素P450單氧合酶抑制劑將是以有效抑制VX-950代謝的量。因此，給予一定量CYP抑制劑與在沒有CYP抑制劑存在下的VX-950相比，增加VX-950的生物利用度或暴露。CYP抑制劑包括但不限于利托那韋(W094/14436)、酮康唑、醋竹桃霉素、4-甲基吡唑、 環孢菌素、氯美噻唑、西咪替丁、伊曲康唑、氟康唑、咪康唑、氟伏沙明、氟西汀、奈法唑酮、舍曲林、因迪那韋、奈非那韋、amprenavir、fosamprenavir、沙奎那韋、洛匹那韋、德拉夫定、紅霉素、VX-944和VX-497。優選的CYP抑制劑包括利托那韋、酮康唑、醋竹桃霉素、4-甲基吡唑、環孢菌素和氯美噻唑。
測量化合物抑制細胞色素P450單氧合酶活性的能力的方法是已知的(參見US6, 037, 157and Yun,等人Drug Metabolism & Disposition, vol. 21, pp. 403-407 (1993))。 評價VX-950與CYP抑制劑共同給藥對受試者的影響的方法也是已知的(US2004/0028755)。 任意這類方法都能夠與本發明結合使用，以測定組合的藥動學影響。
本發明的一種實施方式提供給予CYP3A4抑制劑和VX-950的方法。
本文的方法可以牽涉如下成分的給藥或共同給藥a)VX_950與另一種成分的組合；或者b)VX-950，在一種以上劑型中的。共同給藥包括在相同的劑型中或者在不同的劑型中給予每種抑制劑。當在不同的劑型中給藥時，可以在不同的時間給予抑制劑，包括與其他劑型的給藥大約同時或者附近任意時間。分開的劑型可以按任意順序給藥。也就是說， 任意劑型可以在其他劑型之前、一起或之后給藥。
VX-950和任意附加成分可以配制在分開的劑型中。作為替代選擇，為了降低對患者給予劑型的次數，VX-950和任意附加成分可以以任意組合配制在一起。任意分開的劑型可以在相同時間或不同時間給藥。應當理解，劑型應當在這樣一定時間階段內給藥，以便生物效應是有利的。
按照本發明的方案和劑型，VX-950的含量有效降低樣品或患者中的病毒負載，其中所述病毒編碼病毒生命周期所必需的NS3/4A絲氨酸蛋白酶(或者含量有效實施本發明的方法)，和藥學上可接受的載體。作為替代選擇，本發明的組合物包含如本文所述的附加成分。每種組分可以存在于單個的組合物、組合的組合物或者單一的組合物中。
如果在這些組合物中采用化合物的藥學上可接受的鹽，這些鹽優選地是從無機或有機酸和堿衍生的。這類酸鹽包括如下乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、 苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、撲酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒 石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和i^一烷酸鹽。堿鹽包括銨鹽；堿金屬鹽，例如鈉和鉀鹽；堿土金屬鹽，例如鈣和鎂鹽；有機堿的鹽，例如二環己胺鹽、N-甲基-D-葡糖胺鹽；和氨基酸的鹽，例如精氨酸、賴氨酸的鹽等。
而且，堿性含氮基團可以被一些試劑季銨化，例如低級烷基鹵化物，例如甲基、乙基、丙基和丁基的氣化物、漠化物和鵬化物；_■燒基硫酸酷，例如_■甲基、_■乙基、_■丁基和二戊基的硫酸酯；長鏈鹵化物，例如癸基、月桂基、肉豆蘧基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基鹵化物，例如芐基和苯乙基的溴化物等。由此得到水或油可溶性或可分散性產物。
用在本發明聯合物和方法中的化合物還可以通過添加適當的官能團加以修飾，以增強選擇性生物學性質。這類修飾是本領域已知的，包括增加進入給定生物系統(例如血液、淋巴系統、中樞神經系統)的生物滲透性、增加口服生物利用度、增加溶解度以便注射給藥、改變代謝和改變排泄速率。
可以用在這些組合物中的藥學上可接受的載體包括但不限于離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、緩沖物質(例如磷酸鹽、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀)、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質(例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠體二氧化硅、三硅酸鎂)、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素類物質、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。
按照優選的實施方式，本發明的組合物被配制成對哺乳動物、確切為人類給藥的形式。
本發明的這類藥物組合物(以及用在本發明方法、組合、藥盒和包裝中的組合物) 可以被口服、腸胃外、通過吸入噴霧、局部、直腸、鼻、頰、陰道或經由植入藥庫給藥。本文所用的術語“腸胃外”包括皮下、靜脈內、肌內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、肝內、傷口內與顱內注射或輸注技術。優選地，組合物是口服或靜脈內給藥的。更優選地，組合物是口服給藥的。
本發明聯合物的無菌可注射形式可以是水性或油性混懸劑。這些混懸劑可以按照本領域已知的技術、利用適合的分散或潤濕劑和懸浮劑加以配制。無菌的可注射制劑還可以是在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液劑或混懸劑，例如在1， 3- 丁二醇中的溶液。可以采用的可接受的載體和溶劑有水、林格氏溶液和等滲的氯化鈉溶液。另外，無菌的不揮發油也經常被用作溶劑或懸浮介質。為此，可以采用任何溫和的不揮發油，包括合成的單-或二-甘油酯。脂肪酸、例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制備注射劑，它們是天然的藥學上可接受的油，例如橄欖油或蓖麻油，尤其是它們的聚氧乙基化形式。這些油溶液劑或混懸劑還可以含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，例如羧甲基纖維素或相似的分散劑，它們普遍用于配制藥學上可接受的劑型，包括乳劑和混懸劑。出于制劑的目的， 還可以使用其他常用的表面活性劑，例如吐溫類、司盤類，和其他乳化劑或生物利用度增強劑，它們普遍用在藥學上可接受的固體、液體或其他劑型的制造中。
在包含VX-950和附加成分的本發明聯合物中，VX-950和附加成分應當以約10至 100%之間的劑量水平存在，劑量更優選在約10至80%之間，在正常情況下在單一療法方案中給藥。
本發明藥物組合物可以按任意口服可接受的劑型口服給藥，包括但不限于膠囊劑、片劑、丸劑、粉劑 、顆粒劑、水性混懸劑或溶液劑。在口用片劑的情況下，常用的載體包括乳糖和玉米淀粉。通常還加入潤滑劑，例如硬脂酸鎂。就按膠囊劑型口服給藥而言，有用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。當口用需要水性混懸劑時，活性成分是與乳化和懸浮劑聯用的。如果需要的話，還可以加入某些甜味劑、調味劑或著色劑。可接受的液體劑型包括乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑和酏劑。
作為替代選擇，本發明藥物組合物可以按栓劑形式直腸給藥。它們可以這樣制備， 將藥物與適合的無刺激性賦形劑混合，所述賦形劑在室溫下是固體，但是在直腸溫度下是液體，因此將在直腸內融化，釋放藥物。這類材料包括可可脂、蜂蠟和聚乙二醇。
本發明的藥物組合物也可以被局部給藥，尤其當治療靶包括容易為局部用藥接近的區域或器官時，包括眼、皮膚或下部腸道的疾病。適合的局部制劑容易根據每種這些區域或器官加以制備。
正如本領域公認的，藥物組合物也可以以脂質體形式給藥。
申請人已經證明，VX-950是口服生物可利用的。因此，優選的本發明藥物組合物被配制成口服給藥。
就CYP抑制劑而言，典型的劑量水平將在約O. 001至約200mg/kg體重每天之間。更典型的劑量水平將在約O.1至約50mg/kg或者約1.1至約25mg/kg每天之間。
就優選的利托那韋劑型而言，參見美國專利6，037，157和其中引用的文獻美國專利 5，484，801、美國申請 08/402，690 和國際申請 W095/07696 和 W095/09614。
與本發明聯合給藥可以用作慢性或急性療法。可以與載體材料組合形成單一劑型的活性成分的量將因所治療的宿主和特定的給藥模式而異。典型的制劑將含有約5%至約 95%活性化合物(w/w)。優選地，這類制劑含有約20%至約80%活性化合物。
如果必要的話，一旦患者的條件有所改善，可以給以本發明化合物、組合物或組合的維持劑量。隨后，可以根據癥狀減少給藥的劑量或頻率或者劑量與頻率至已改善的條件得以保留的水平，當癥狀已經減輕至所需水平，應當停止治療。不過，一旦疾病癥狀有任何復發，患者可能需要在長期基礎上接受間歇性治療。
也應當理解，任何特定患者的具體劑量和治療方案將依賴于多種因素，包括所采用的具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時間、排泄速率、藥物組合、主治醫師的判斷和所治療的特定疾病的嚴重性、在先治療史、伴發疾病或伴隨藥物治療、基線病毒負載、種族、疾病持續時間、肝功能狀態和肝纖維化/硬化的程度、和治療的目標(消除循環中的病毒遷移或者病毒根除)。活性成分的量也將依賴于特定的所述化合物和組合物中附加抗病毒劑的存在與否與屬性。
按照另一種實施方式，本發明提供治療被病毒感染的患者的方法，該病毒是以病毒性編碼的NS3/4A絲氨酸蛋白酶為特征的，該蛋白酶是病毒生命周期所必需的，該方法對所述患者給以藥學上可接受的本發明聯合物。優選地，本發明的方法用于治療患有HCV感染的患者。這類治療可以完全根除病毒感染或者減少其嚴重性。優選地，該患者是哺乳動物。更優選地，該患者是人類。
本文劑量優選地用于體內。盡管如此，不打算限制為任意目的而使用這些VX-950 的量。在另一種實施方式中，本發明提供預處理打算對患者施用的生物物質的方法，包括使所述生物物質與藥學上可接受的包含本發明化合物的組合物接觸的步驟。這類生物物質包括但不限于血液及其組分，例如血漿、血小板、血細胞亞群等；器官，例如腎、肝、心、肺等； 精子和卵子；骨髓及其組分；和其他所要輸注給患者的流體，例如鹽水、葡萄糖等。
本發明也提供制備組合物的方法，該組合物包含VX-950或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體、助劑或賦形劑，該方法包括合并VX-950或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體、助劑或賦形劑的步驟，其中該組合物中VX-950的劑量符合本發明的任意實施方式。本發明的替代實施方式提供這樣一種方法，其中該組合物包含一種或多種本文所述附加成分。
本發明也提供治療方案，包含VX-950或其藥學上可接受的鹽，劑量是如本文所公開的。在本發明的替代實施方式中，該治療方案進一步包含一種或多種本文所述附加成分。
也可以在“患者包”中對患者開出藥物組合物，在單一的包裝中含有全部療程，通常為泡眼包。患者包具有優于傳統處方的優點，其中藥師從大量供應中分配患者的藥物供應，優點是患者總是使用在患者包中所含有的包裝插件，在正常情況下傳統處方會遺失。包括包裝插件已經顯示提高患者對醫師指導的順應性。
將被理解的是，本發明聯合借助單一患者包或者每種制劑的患者包給藥，在包裝插件內含有關于患者正確使用本發明的說明書是本發明可取的附加特征。
本發明的另一方面是一種包裝，至少包含VX_950(劑量符合本發明)和含有本發明聯合使用指導的信息插件。本發明的任意組合物、劑型、治療方案或其他實施方式都可以呈遞在藥物包裝中。在本發明的替代實施方式中，藥物包裝進一步包含一種或多種本文所述附加成分。附加成分可以在相同包裝或分開的包裝中提供。
本發明的另一方面牽涉帶包裝的患者用藥盒，用在HCV感染的治療或HCV感染的預防中(或者用在本發明的另一種方法中)，包含每種藥物組分的單一或大量藥物制劑； 在貯存期間和給藥之前容納藥物制劑的容器；和以有效治療或預防HCV感染的方式進行藥物給藥的說明書。
因此，本發明提供藥盒，用于VX_950(和可選的附加成分)劑量的同時或先后給藥。通常，這樣一種藥盒將包含每種化合物和可選的附加成分在藥學上可接受的載體(和在一種或大量藥物制劑)中的組合物，和關于同時或先后給藥的書面說明。
在另一種實施方式中，提供了帶包裝的藥盒，它含有一種或多種自我給藥用劑型； 在貯存期間和使用之前容納該劑型的容器裝置，優選為密封的；和關于對患者進行藥物給藥的說明書。說明書通常將是包裝插件、標簽和/或藥盒的其他組分上的書面說明，劑型是如本文所述的。每種劑型可以被單獨容納，為金屬箔-塑料層片，每種劑型彼此隔離在單個的小池或小泡中，或者劑型可以被容納在單一的容器中，例如塑料瓶。本發明藥盒通常也將包括包裝單個藥盒組分的裝置，所述組分也就是劑型、容器裝置和書面使用說明。這類包裝裝置可以采取紙板或紙盒、塑料或箔袋等形式。
根據本發明的藥盒能夠實現本發明的任意方面，例如任意組合物、劑型、治療方案或藥物包裝。
根據本發明的包裝和藥盒可選地包含大量組合物或劑型。因此，在本發明內將包括含有一種組合物或一種以上組合物的包裝和藥盒。
盡管下文描繪和描述某些示范性實施方式，不過將領會到，使用本領域普 通技術人員一般可以獲得的適當原料，可以按照上文一般描述的方法制備本發明的化合物。
全部所引用的文獻都結合在此作為參考。
本發明還涉及以下項
1.治療方案，包括給予VX-950或其藥學上可接受的鹽
用量為約IOOmg至約1500mg ；
用量為約300mg至約1500mg ；
用量為約300mg至約1250mg ；
用量為約450mg ；
用量為約750mg;或者
用量為約1250mg ;其中該用量每天給予一次、兩次或三次。
2.根據項I的治療方案，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為
約 300mg 至約 1500mg ；
約 300mg 至約 1250mg ；
約 450mg ；
約750mg ;或者
約1250mg ;其中該用量每天給予一次、兩次或三次。
3.治療或預防患者丙型肝炎病毒感染的方法，包括對該患者給予VX-950或其藥學上可接受的鹽，用量為約IOOmg至約1500mg。
4.根據項3的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約300mg至約 1500mgo
5.根據項4的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約300mg至約 1250mgo
6.根據項5的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約450mg。
7.根據項5的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約750mg。
8.根據項5的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約1250mg。
9.根據項3-8任意一項的方法，其中該VX-950的量每天給予一次。
10.根據項3-8任意一項的方法，其中該VX-950的量每天給予兩次。
11.根據項3-8任意一項的方法，其中該VX-950的量每天給藥三次。
12.根據項3-11任意一項的方法，其中所述方法包括給予附加成分，選自免疫調控劑；抗病毒劑；另一種HCVNS3/4A蛋白酶抑制劑；HCV生命周期中除NS3/4A蛋白酶以外的靶的抑制劑；內部核糖體進入的抑制劑；廣譜病毒抑制劑；另一種細胞色素P-450抑制劑； 病毒細胞進入的抑制劑；或者它們的組合。
13.根據項12的方法，其中所述免疫調控劑是α-、β_或Y-干擾素或者胸腺素； 抗病毒劑是利巴韋林、金剛烷胺或特比夫定；或者HCV生命周期中另一種靶的抑制劑是HCV 螺旋酶、聚合酶或金屬蛋白酶的抑制劑。
14.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量為約750mg，每天3次，每8小時一次。
15.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量有效地將血漿中丙型肝炎病毒RNA降低至少約21og1Q。
16.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量有效地將血漿中丙型肝炎病毒RNA降低至少約41og1(l。
17.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量有效地減少血漿中丙型肝炎病毒RNA至不可檢測的水平。
18.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量有效地實現持續的病毒響應。
19.根據項3-17任意一項的方法，其中該患者被基因型I丙型肝炎病毒感染。
20.治療患者肝臟損傷、肝臟炎癥、皮脂腺病、脂肪肝、NAFLD、NASH、酒精性皮脂腺病或Reye氏綜合征的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量為約1350mg每天(例如約 450mg q8h)、約2250mg每天(例如約750mg q8h)或者約2500mg每天(例如約ql2h)的 VX-950。
21.患者的肝臟保護方法，包括對該患者給予VX-950，其用量為約1350mg每天 (例如約450mg q8h)、約2250mg每天(例如約750mg q8h)或者約2500mg每天(例如約 ql2h)的 VX-950。
22.降低患者ALT水平的方法，包括對該患者給予VX-950。
23.使ALT水平升高的患者的ALT水平正常化的方法，包 括對該患者給予VX-950。
24.根據項22或項23的方法，其中對患者給予VX-950的量為約1350mg每天(例如約450mg q8h)、約2250mg每天(例如約750mg q8h)或者約2500mg每天(例如約ql2h) 的 VX-950。0180]25.項20-24任意一項的方法，其中該患者被HCV感染。0181]26.項20-24任意一項的方法，其中該患者不被HCV感染。0182]27.為有此需要的人提供VX-950的方法，該方法包括對該人給予包含VX-950的劑型，其中該劑型在給藥后為該人提供至少約750ng/mL的VX-950平均血漿濃度(Cavg)。27的方法，其中給藥后的VX-950平均血漿濃度(Cavg)為約750ng/mL28的方法，其中給藥后的VX-950平均血漿濃度(Cavg)為約IOOOng/27-29任意一項的方法，其中該Cavg是在給藥后3小時內獲得/達到 30的方法，其中該Cavg是在給藥后2小時內獲得/達到的。31的方法，其中該Cavg是在給藥后I小時內獲得/達到的。27-32任意一項的方法，進一步包括維持最低750ng/mL至約1500ng/ mL的低谷血漿VX-950水平達24小時。0189]34.治療患有HCV感染的人的方法，包括對該人給予至少一種包含VX-950的劑型達24小時，其中給予該劑型以維持最低750ng/mL至約1500ng/mL的低谷血漿VX-950水平達24小時。0190]35.根據項33或項34的方法，其中給予該劑型以維持最低約750ng/mL的低谷血漿VX-950水平達24小時。0191]36.根據項33或項34的方法，其中給予該劑型以維持最低約1000ng/mL的低谷血漿VX-950水平達24小時。37.根據項27-36任意一項的方法，其中該劑型中VX-950的含量為約750mg。38.根據項37的方法，其中該劑型每天給藥三次。39.根據項27-38任意一項的方法，其中Caw和低谷水平之一或之二維持達約12
28.根據項至約1250ng/mL。
29.根據項Π Τ, η
30.根據項的。
31.根據項
32.根據項
33.根據項0192]0193]0194]周。0195]0196]0197]0198]0199]40.根據項3-39任意一項的方法，進一步包括給予干擾素的步驟。41.根據項40的方法，其中該干擾素是聚乙二醇化干擾素。42.根據項40或項41的方法，其中該干擾素的給藥量為約180μg/ml<43.根據項40-42任意一項的方法，進一步包括給予利巴韋林的步驟。44.本發明的方法，其中按本文實施例6所公開的內容配制VX-950。
具體實施方式
0200]為了更加充分地理解本發明，提供下列制備和試驗實施例。這些實施例僅供闡述， 不以任何方式被解釋為限制發明的范圍。0201]實施例1
HCV復制子細胞測定方案
將含有丙型肝炎病毒(HCV)復制子的細胞供養在含有10%胎牛血清(FBS)、 O. 25mg/ml G418與適當添加物的DMEM(培養基A)中。
第I天，將復制子單細胞層用胰蛋白酶EDTA混合物處理，除去，然后將培養基A 稀釋至最終濃度為100，000細胞/ml。將含有10，000細胞的100 μ I平板接種在96孔組織培養平板的每孔內，在37 °C組織培養恒溫箱內培養過夜。
第2天，將化合物(于100%DMS0)系列稀釋在含有2%FBS、0. 5%DMS0與適當添加物的DMEM(培養基B)中。在全部系列稀釋液中，DMSO的最終濃度保持在0.5%。
除去復制子單細胞層上的培養基，然后加入含有各種濃度化合物的培養基B。向其他孔加入沒有任何化合物的培養基B，作為沒有化合物的對照。
在37°C組織培養恒溫箱內，將細胞與化合物或O. 5%DMS0在培養基B中溫育48小時。在48小時溫育期結束時，除去培養基，將復制子單細胞層用PBS洗滌一次，在RNA提取之前貯存在-80°C下。
使含有經過處理的復制子單細胞層的培養平板融化，向每孔中的細胞加入固定量的另一種RNA病毒，例如牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)。立即向細胞加入RNA提取試劑(例如來自RNeasy試劑盒的試劑)，以避免RNA的降解。按照廠商的指導提取總RNA，并略加修飾以提高提取效率和一致性。最后，洗脫總的細胞RNA，包括HCV復制子RNA，貯存在_80°C下 直至進一步加工。
利用兩套特異性引物和探針，建立Taqman實時RT-PCR量化測定法。一套用于HCV， 另一套用于BVDV。向PCR反應物加入來自經過處理的HCV復制子細胞的總RNA提取物，在同一 PCR孔內量化HCV和BVDV的RNA。基于每孔中的BVDV RNA水平標記實驗性失敗并排除在外。按照在同一 PCR平板中得到的標準曲線計算每孔中的HCV RNA水平。計算由化合物處理所帶來的HCV RNA水平抑制或降低的百分率，使用DMSO或沒有化合物的對照作為 0%抑制。從任意給定化合物的滴定曲線計算IC5tl (觀察到HCV RNA水平被抑制50%時的濃度)。
VX-950在復制子測定法中證明有顯著的活性。顯示VX-950具有240ng/ml的IC5tl 和 476ng/ml 的 IC9tl。
實施例2
HCV Ki測定方案
用于分離5AB底物和產物的HPLC Microbore法
底物NH2-Glu-Asp-Val-Val_(a )Abu-Cys-Ser-Met-Ser-Tyr-COOH
在DMSO w/0. 2M DTT中制備20mM5AB儲備溶液(或者你選擇的濃度)。以等分試樣貯存在_20°C下。
緩沖液50mMHEPES, ρΗ7· 8 ；20% 甘油；IOOmM NaCl。
總測定體積為100 μ L0
Xl (μ I)測定中的濃度緩沖液86. 5見上5mM KK4AO. 525μΜIM DTTO. 55mMDMSO或抑制劑2. 52. 5%ν/V50 μ M tNS3O. 0525ηΜ25O μ M5ABGZ^S)2025μΜ
將緩沖液與KK4A、DTT和tNS3合并；將78 μ I該溶液分配在96孔平板的每孔內， 在30°C下溫育 5-10分鐘。
向每孔加入2. 5 μ I適當濃度的供試化合物的DMSO溶液(單獨的DMSO供對照)，在室溫下溫育15分鐘。
加入20 μ 1250Mm5AB底物引發反應(25 μ M濃度等于或略低于5AB的Km)。
在30°C下溫育20分鐘。
加入25 μ 110%TFA終止反應。
將120 μ I等分試樣轉移至HPLC小瓶。
借助下列方法從底物和ΚΚ4Α中分離SMSY產物
Microbore 分離法
儀器使用=AgilentllOO
脫氣器G1322A
二元泵 G1312A
自動進樣器G1313A
柱恒溫室G1316A
二極管矩陣檢測器G1315A
柱子
Phenomenex Jupiter ；5 微米 C18 ；300 埃；150x2mm ;P/000F-4053_B0
柱恒溫40°C
注射體積100 μ I
溶劑A = HPLC 級水 +0. 1%TFA
溶劑B = HPLC 級乙腈 +0. 1%TFA
時間(miη)%Β流速(ml/min)最大壓力O5O. 24001260O. 240013100O. 240016100O. 2400175O. 2400
終止時間17min
運行后時間10min。
實施例3
在隨機化、雙盲、安慰劑對照的單一劑量按比例上升研究中檢測VX-950。登記25 名健康男性志愿者。每名受試者接受多次單一劑量的VX-950 (間隔至少7天)、遞增劑量水平的3劑VX-950和I劑安慰劑。
評價25mg至1250mg劑量。采用按比例上升的劑量方案，這樣聯合的劑量加倍和改性斐波納契在低劑量范圍內是進取性的，在高劑量范圍內是保守性的。
VX-950在全部劑量水平下都是被良好耐受的，在研究期間沒有報告嚴重的不良事件。不良事件似乎沒有因增加劑量水平而增加。
利用統計瞬間法進行藥動學分析。圖1A和圖1B闡述平均濃度-時間曲線。在圖 2A-2D中描繪所選擇的衍生藥動學參數。藥動學分析顯示,VX-950被吸收的中值tmax為3 小時。小于2%的VX-950在尿中無變化地被消除，表明該藥物主要經由代謝途徑消除。
實施例4感染性病毒測定法在感染性病毒測定法中，證明VX-950的IC5tl為196ng/ml。 實施例5在24名健康受試者和34名丙型肝炎陽性受試者的隨機化、安慰劑對照、多劑量、 盲法、劑量按比例上升研究中檢查VX-950。
將健康受試者分為3組，每組8名受試者。每組中6名受試者接受VX-950，2名受試者接受安慰劑。健康受試者服用450mg、750mg或1250mgq8h VX-950達連續5天。健康受試者的年齡在18-65歲(含)之間，乙型肝炎、丙型肝炎和HIV陰性。男性的體重指數為 18. 5-29. Okg/m2 (含)。女性的體重指數為 18. 5-32. 5kg/m2 (含)。
將丙型肝炎(基因型I)陽性受試者分為3組，每組12名。每組中，10名受試者接受VX-950，2名受試者接受安慰劑；在75011^ q8h組中，2名受試者在服藥之前撤出，因此 8名受試者接受VX-950，2名接受安慰劑。HCV陽性受試者服用VX_950450mg或750mg q8h 或者1250mg ql2h達連續14天。
VX-950在全部劑量水平下被良好耐受，在研究期間沒有報告嚴重的不良事件；報告有輕微和中等的不良事件。全部受試者都完成了研究。
在HCV陽性受試者中，安慰劑、450mg q8h、750mg q8h和1250mg ql2h組中未接受過治療的受試者百分比分別為33. 2%、10%、12· 5%和30%。
權利要求
1.治療方案，包括給予VX-950或其藥學上可接受的鹽 用量為約IOOmg至約1500mg ； 用量為約300mg至約1500mg ； 用量為約300mg至約1250mg ； 用量為約450mg; 用量為約750mg;或者 用量為約1250mg ;其中該用量每天給予一次、兩次或三次。
2.根據權利要求1的治療方案，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約 300mg 至約 1500mg ；約 300mg 至約 1250mg ；約 450mg ； 約750mg ;或者 約1250mg ;其中該用量每天給予一次、兩次或三次。
3.治療或預防患者丙型肝炎病毒感染的方法，包括對該患者給予VX-950或其藥學上可接受的鹽，用量為約IOOmg至約1500mg。
4.根據權利要求3的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約300mg至約1500mgo
5.根據權利要求4的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約300mg至約1250mgo
6.根據權利要求5的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約450mg。
7.根據權利要求5的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約750mg。
8.根據權利要求5的方法，其中VX-950或其藥學上可接受的鹽的用量為約1250mg。
9.根據權利要求3-8任意一項的方法，其中該VX-950的量每天給予一次。
10.根據權利要求3-8任意一項的方法，其中該VX-950的量每天給予兩次。
11.根據權利要求3-8任意一項的方法，其中該VX-950的量每天給藥三次。
12.根據權利要求3-11任意一項的方法，其中所述方法包括給予附加成分，選自免疫調控劑；抗病毒劑；另一種HCVNS3/4A蛋白酶抑制劑；HCV生命周期中除NS3/4A蛋白酶以外的靶的抑制劑；內部核糖體進入的抑制劑；廣譜病毒抑制劑；另一種細胞色素P-450抑制劑；病毒細胞進入的抑制劑；或者它們的組合。
13.根據權利要求12的方法，其中所述免疫調控劑是α-、β_或Y-干擾素或者胸腺素；抗病毒劑是利巴韋林、金剛烷胺或特比夫定；或者HCV生命周期中另一種靶的抑制劑是HCV螺旋酶、聚合酶或金屬蛋白酶的抑制劑。
14.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量為約750mg,每天3次,每8小時一次。
15.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量有效地將血漿中丙型肝炎病毒RNA降低至少約21og1(l。
16.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量有效 地將血漿中丙型肝炎病毒RNA降低至少約41og1(l。
17.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量有效地減少血漿中丙型肝炎病毒RNA至不可檢測的水平。
18.治療被丙型肝炎病毒感染的患者的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量有效地實現持續的病毒響應。
19.根據權利要求3-17任意一項的方法，其中該患者被基因型I丙型肝炎病毒感染。
20.治療患者肝臟損傷、肝臟炎癥、皮脂腺病、脂肪肝、NAFLD,NASH、酒精性皮脂腺病或Reye氏綜合征的方法，包括對該患者給予VX-950，其用量為約1350mg每天(例如約450mgq8h)、約2250mg每天(例如約750mg q8h)或者約2500mg每天(例如約ql2h)的VX-950。
21.患者的肝臟保護方法，包括對該患者給予VX-950，其用量為約1350mg每天(例如約450mg q8h)、約2250mg每天(例如約750mg q8h)或者約2500mg每天(例如約ql2h)的VX-950。
22.降低患者ALT水平的方法，包括對該患者給予VX-950。
23.使ALT水平升高的患者的ALT水平正常化的方法，包括對該患者給予VX-950。
24.根據權利要求22或權利要求23的方法，其中對患者給予VX-950的量為約1350mg每天(例如約450mg q8h)、約2250mg每天(例如約750mgq8h)或者約2500mg每天(例如約 ql2h)的 VX-950。
25.權利要求20-24任意一項的方法，其中該患者被HCV感染。
26.權利要求20-24任意一項的方法，其中該患者不被HCV感染。
27.為有此需要的人提供VX-950的方法，該方法包括對該人給予包含VX-950的劑型，其中該劑型在給藥后為該人提供至少約750ng/mL的VX-950平均血漿濃度(Cavg)。
28.根據權利要求27的方法，其中給藥后的VX-950平均血漿濃度(Cavg)為約750ng/mL 至約 1250ng/mL。
29.根據權利要求28的方法，其中給藥后的VX-950平均血漿濃度(Cavg)為約IOOOng/Π Τ, η
30.根據權利要求27-29任意一項的方法，其中該Cavg是在給藥后3小時內獲得/達到的。
31.根據權利要求30的方法，其中該Cavg是在給藥后2小時內獲得/達到的。
32.根據權利要求31的方法，其中該Cavg是在給藥后I小時內獲得/達到的。
33.根據權利要求27-32任意一項的方法，進一步包括維持最低750ng/mL至約1500ng/mL的低谷血漿VX-950水平達24小時。
34.治療患有HCV感染的人的方法，包括對該人給予至少一種包含VX-950的劑型達24小時，其中給予該劑型以維持最低750ng/mL至約1500ng/mL的低谷血漿VX-950水平達24小時。
35.根據權利要求33或權利要求34的方法，其中給予該劑型以維持最低約750ng/mL的低谷血漿VX-950水平達24小時。
36.根據權利要求33或權利要求34的方法，其中給予該劑型以維持最低約1000ng/mL的低谷血漿VX-950水平達24小時。
37.根據權利要求27-36任意一項的方法，其中該劑型中VX-950的含量為約750mg。
38.根據權利要求37的方法，其中該劑型每天給藥三次。
39.根據權利要求27-38任意一項的方法，其中Cavg和低谷水平之一或之二維持達約12周。
40.根據權利要求3-39任意一項的方法，進一步包括給予干擾素的步驟。
41.根據權利要求40的方法，其中該干擾素是聚乙二醇化干擾素。
42.根據權利要求40或權利要求41的方法，其中該干擾素的給藥量為約180yg/ml。
43.根據權利要求40-42任意一項的方法，進一步包括給予利巴韋林的步驟。
44.本發明的方法，其中按本文實施例6所公開的內容配制VX-950。
全文摘要
本發明涉及治療或預防患者丙型肝炎感染的抗病毒療法和組合物，還涉及本文公開的其他方法。本發明也涉及包含組合物和劑型的藥盒和藥物包裝。本發明也涉及制備這些組合物、劑型、藥盒和包裝的方法。
文檔編號A61P31/14GK102988365SQ201210413609
公開日2013年3月27日 申請日期2005年10月31日 優先權日2004年10月29日
發明者褚惠美, E.埃特, L.麥克奈爾, J.阿拉姆 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司