黃芪甲苷的新用途
【專利摘要】本發明提供了一種黃芪甲苷的新用途，具體提供了黃芪甲苷在制備治療膿毒癥的藥物中的應用。
【專利說明】黃芪甲苷的新用途
[0001]【技術領域】
[0002]本發明涉及黃芪甲苷的一種新用途，具體涉及黃芪甲苷在制備治療膿毒癥的藥物中的應用。
【背景技術】
[0003]膿毒癥(sepsis)，即膿毒血癥。是一種由感染引起的臨床綜合征。化膿性病原菌侵入血流并在其中大量的繁殖，并隨血流向全身擴散，在組織器官引起的新的多發性化膿性病灶。膿毒癥常伴有下列征象:體溫高于或低于正常，白細胞增多或減少、心動過速、呼吸急促或每分鐘通氣量異常升高，如臨床上出現其中兩項或兩項以上癥狀，即可診斷膿毒血癥；當伴發器官功能衰竭，即稱為重癥膿毒血癥(severe sepsis)。美國每年有50萬名膿毒血癥患者,存活率僅55%~65%。膿毒癥是嚴重創傷、燒傷、休克、大手術后常見的并發癥，也是外科危重患者重要的死亡原因之一。
[0004]黃芪甲苷是從中藥黃芪中提取獲得的一種活性成分，文獻報道黃芪甲苷對大鼠心肌缺血的保護作用與拮抗鈣通道有關，同時黃芪甲苷對大鼠局部腦缺血損傷也有顯著的保護作用。但連翹酯苷B治療腎纖維化的藥理作用未見報道，基于此，本發明人提供了黃芪甲苷治療膿毒癥的藥物用途。
【發明內容】
[0005]本發明提供了黃芪甲苷在制備治療膿毒癥的藥物中的應用。
[0006]本發明提供的藥物在用于預防膿毒癥時，其注射時使用劑量范圍是25 mg~1000mg,優選 25 ~500 mg。
`[0007]本發明還提供了由黃芪甲苷和藥學上可接受的載體或輔料組成的藥物組合物，該組合物可以以藥學常規方法制備成注射液、凍干粉針。
[0008]本發明提供的黃芪甲苷可以采用文獻報道的方法制備，優選采用如下方法:取黃芪的干燥根粉碎，過篩，加水回流提取，提取液過濾，濾液加到已經前處理的DM-130大孔樹脂上樣，用0.1 % NaOH洗滌，然后用30%乙醇洗滌，80%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，加水溶解，水飽和正丁醇萃取，合并萃取液，用2% NaOH溶液洗滌，回收正丁醇后干燥，得黃芪總皂苷。用2% NaOH水溶液溶解，經溫度60°C水浴水解，冷卻取沉淀加甲醇回流加熱溶解，冷卻，析出白色結晶，干燥，即得黃芪甲苷。
[0009]本發明人通過下列試驗證實了黃芪甲苷在治療膿毒癥中的應用，但作用不限于此。
【具體實施方式】
[0010]實施例1黃芪甲苷的制備
取黃芪的干燥根50Kg粉碎，過20目篩，加10倍水回流提取3次，每次I小時，提取液過濾，濾液加到已經前處理的DM-130大孔樹脂，上樣完畢后，用蒸餾水洗至流出液無色，再用0.1 % NaOH洗滌5個柱體積，然后用30%乙醇洗滌8個柱體積，80%乙醇洗脫，收集洗脫液至流出液無色為止，回收乙醇后加水溶解，水溶液用水飽和正丁醇萃取3次，合并萃取液，用2% NaOH溶液洗滌2次，再用水洗滌2次，回收正丁醇后干燥，得黃芪總皂苷。將上述總阜苷用2% NaOH水溶液溶解,經溫度60°C水浴水解3h,可見白色沉淀析出，自然冷卻后過濾，取沉淀加30倍量甲醇回流加熱溶解，趁熱過濾，濾液自然冷卻，析出白色結晶，干燥，測定其中黃芪甲苷含量為93%。
[0011]實施例2黃芪甲苷的制備
取黃芪的干燥根50Kg粉碎，過20目篩，加10倍水回流提取3次，每次I小時，提取液過濾，濾液加到已經前處理的DM-130大孔樹脂，上樣完畢后，用蒸餾水洗至流出液無色，再用
0.2% NaOH洗滌4個柱體積，然后用40 %乙醇洗滌8個柱體積，75%乙醇洗脫，收集洗脫液至流出液無色為止，回收乙醇后加水溶解，水溶液用水飽和正丁醇萃取3次，合并萃取液，用2% NaOH溶液洗滌2次，再用水洗滌2次，回收正丁醇后干燥，得黃芪總皂苷。將上述總阜苷用3% NaOH水溶液溶解,經溫度70°C水浴水解2h,可見白色沉淀析出，自然冷卻后過濾，取沉淀加30倍量甲醇回流加熱溶解，趁熱過濾，濾液自然冷卻，析出白色結晶，干燥，測定其中黃芪甲苷含量為95%。
[0012]實施例3黃芪甲苷凍干粉針的制備
取黃芪甲苷10g，加IOg羥丙基β-環糊精，加注射用水2000 ml，加甘露醇10g，攪拌溶解，超濾，得到無熱源的澄清液，灌入10 ml西林瓶中，2ml/只，按凍干粉針工藝凍干，制成每支含黃芪甲苷10 mg的凍干粉針。
[0013]實驗I黃芪甲苷對盲腸結扎穿孔導致的膿毒癥大鼠的影響 1.1藥品與試劑·
黃芪甲苷按制備例I制備
鱟試劑試劑盒(福建省福州新北生化工業有限公司)
High-mobility group-box I protein (HMGBl), TNF- α , IL-6 ELISA 試劑盒(上海西唐生物技術公司)
髓樣細胞觸發受體(TREM-1) ELISA試劑盒(上海滬峰生物科技有限公司)
實驗動物:SPF級Sprague Dawley大鼠，雄性，體重150 g-200 g。
[0014]1.2實驗方法與結果
1.2.1盲腸結扎穿孔(CLP)大鼠的制備
手術當天清晨大鼠禁食，乙醚麻醉后取仰臥位，75%乙醇消毒腹部，沿腹白線中段作一長1.5 cm的切口，剪開皮膚和肌層，探查腹腔分離盲腸；I號絲線距盲端I cm處(回盲瓣遠端)結扎，16號穿刺針在結扎處遠端貫穿盲腸3次(呈三角形)，針孔間距約3 mm，并擠出少許內容物；盲腸回納腹腔，逐層縫合關閉腹腔。
[0015]1.2.2分組給藥
CLP大鼠60只，隨機分為6組，即模型組、黃芪甲苷靜脈注射2.5 mg/kg、5 mg/kg,25mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg,另外取10只正常大鼠作為對照組。CLP手術I小時各組給予相應藥物。CLP手術20小時取血，測定血清HMGB 1、TNF-a、IL_6、內毒素。血清HMGB、TNF_a、IL-6測定使用ELISA試劑盒，血清內毒使用素鱟試劑試劑盒測定。
[0016]1.2.3實驗結果黃苗甲苷靜脈注射2.5 mg/kg、5 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg組明顯降低膿毒癥大鼠血清HMGB1、TNF-α、IL-6、內毒素、TREM-1水平(p〈0.05或p〈0.01)。黃芪甲苷靜脈注射50 mg/kg組降低膿毒癥大鼠血清HMGBl、TNF- α、IL-6、內毒素、TREM-1水平與黃芪甲苷靜脈注射100 mg/kg組比較無顯著性差異。
[0017]表1黃芪甲苷靜脈注射對盲腸結扎穿孔導致的膿毒癥大鼠的影響(n=10)
【權利要求】
1.黃芪甲苷在制備治療膿毒癥的藥物中的應用。
2.根據權利要求1所述的應用，其注射時給藥劑量范圍為25-1000mg。
3.根據權利要求2所述的應用，其注射給藥劑量范圍為25-500mg。
4.一種以黃芪甲苷為·活性成分的用于治療膿毒癥的藥物組合物。
【文檔編號】A61P29/00GK103845353SQ201210494225
【公開日】2014年6月11日 申請日期:2012年11月28日 優先權日:2012年11月28日
【發明者】畢玉軒 申請人:青島百草匯中草藥研究所