一種胡椒堿的藥物新用途
【專利摘要】本發明公開了一種胡椒堿在制備治療潰瘍的藥物中的應用。胡椒堿具有治療潰瘍的顯著作用，尤其是潰瘍性結腸炎，可一定程度緩解有潰瘍性結腸炎引起的血性腹瀉、腹痛、便血、體重減輕、嘔吐等癥狀，并能有效修復炎癥所致的結腸組織損傷。
【專利說明】一種胡椒堿的藥物新用途
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種胡椒堿的藥物新用途，具體地說是一種胡椒堿在制備治療潰瘍性結腸炎的藥物中的新應用。
【背景技術】
[0002]炎癥性腸病(inflammatory bowel disease, IBD),是一種慢性非特異性胃腸道炎癥性腸病，主要包括潰瘍性結腸炎(ulcerative colitis, UC)和克羅恩病(Crohn，sdisease, CD)。隨著人們飲食結構的改變和生活水平的提高，炎癥性腸病的發病率逐年提高。文獻表明美國每五個人中就有一個人炎癥性腸病，并且成上升趨勢。其中，潰瘍性結腸炎病因尚不十分清楚，臨床癥狀主要表現為血性腹瀉、腹痛、便血、體重減輕、里急后重、嘔吐等。由于潰瘍性結腸炎具有病變范圍廣泛、病情反復發作、治療效果欠佳、病情遷延不愈、癌變可能性大等特點，該病已被世界衛生組織確定為現代難治疾病。
[0003]目前，針對潰瘍性結腸炎，西醫主要采用氨基水楊酸、激素、免疫抑制劑等化學制劑或生物制劑進行治療。中醫學認為潰瘍性結腸炎活動期屬腸風、濕熱，故多用清熱、解毒藥劑，如白頭翁湯、葛根苓連湯加減；緩解期潰瘍性結腸炎屬脾虛下瀉，因而主張用健脾益胃方劑，如歸芪六君湯加減。
[0004]胡椒堿，分子式為C17H19N03 ;化學名稱為(E，E) _1-[5_ (1，3_苯并二氧戊環-5-基)_1_氧代-2,4-戍二烯基]-哌唳。白色晶體粉末。溶點130~133°C。溶于乙酸、苯、乙醇和氯仿，微溶于乙醚。主要提取自胡椒科植物，為胡椒科植物胡椒的干燥近成熟或成熟果實。集藥用和食用 為一體，藥源豐富，在國內外臨床應用和食用歷史久遠。其結構式如下:
[0005]
[0006]目前，國內外學者已經對其化學成分和藥理作用進行較深入的研究，證明胡椒堿具有抗氧化、免疫調節、抗腫瘤、提高藥物生物利用率等作用。也有研究表明，胡椒堿是一種廣譜抗驚厥藥，對小鼠實驗性電驚厥有良好的對抗作用，對戊四氮、印防己毒素、士的寧，以及腦室內注射筒箭毒堿、谷氨酸等引起的驚厥發作和聽源性發作，都有不同程度的對抗作用。對某些類型的癲癇病也有療效；胡椒堿對蠅類的毒性比除蟲菊高。
【發明內容】
[0007]為此，本發明提供了一種胡椒堿在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。
[0008]所述藥物以胡椒堿為活性成分。[0009]所述藥物的活性成分包括重量份比為70-90:10-30的胡椒堿和山茶油。
[0010]優選的，所述藥物的活性成分包括重量份比為80:20的胡椒堿和山茶油。
[0011]包含所述藥物的原料藥組成為:胡椒堿和青蒿素；所述胡椒堿與所述青蒿素的重量比為1:1_3。
[0012]進一步的，所述藥物的活性成分包括重量份比為1:2的胡椒堿和青蒿素。
[0013]進一步的，所述藥物的活性成分還包括山茶油。所述山茶油與所述胡椒堿的重量份比為10-30:70-90 ;優選的，所述山茶油與所述胡椒堿的重量份比為20:80。
[0014]所述按照選定的處方量將所述胡椒堿加入常規輔料按照常規工藝制成臨床上可接受的劑型。所述常規方法包括但不限于對所述胡椒堿進行簡單粉碎混合、加水煎煮提取或者醇提取等常規操作，所使用提取試劑的用量及提取次數并不影響胡椒堿的活性作用。
[0015]所述常規輔料包括但不限于填充劑、崩解劑、潤滑劑、粘合劑、矯味劑、助懸劑、防腐劑或基質中的一種或幾種的混合物。
[0016]所述填充劑包括但不限于淀粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖中的一種或多種的混合物；
[0017]所述崩解劑包括但不限于淀粉、交聯聚維酮、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉中的一種或 多種的混合物；
[0018]所述潤滑劑包括但不限于硬脂酸鎂、滑石粉、二氧化硅、十二烷基硫酸鈉中的一種或多種的混合物；
[0019]所述助懸劑包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素中的一種或多種的混合物；
[0020]所述粘合劑包括但不限于淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素中的一種或多種的混合物；
[0021]所述矯味劑包括但不限于甜味劑和/或香精；所述甜味劑為糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素中的一種或多種的混合物；
[0022]所述防腐劑包括但不限于尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鹽中的一種或多種的混合物；
[0023]所述基質包括PEG、蟲蠟中的一種或兩者的混合物。
[0024]需要說明的是，所述常規輔料包括但不限于上述列舉的范圍，本領域技術人員可根據實際情況做適應性的選擇及調整。
[0025]本發明還公開了上述藥物在制備治療潰瘍性結腸炎的藥物中的用途。
[0026]本發明所述方案以胡椒堿作為制備治療潰瘍性結腸炎藥物的活性成分，探討并驗證了胡椒堿可一定程度緩解有潰瘍性結腸炎引起的血性腹瀉、腹痛、便血、體重減輕、嘔吐等癥狀，在治療潰瘍性結腸炎上具有顯著的效果。且所述藥物單位制劑中含胡椒堿的量按照日服用制劑量為200mg/天計算，可有效緩解并治療潰瘍性結腸炎。所述的單位制劑是指膠囊劑型的每粒膠囊、片劑為每片制劑、注射劑IOml/支或顆粒劑的25g/袋。
[0027]本發明所述用于治療潰瘍性結腸炎藥物，以胡椒堿和青蒿素的混合物為活性成分，借助于二者的協同作用，治療潰瘍性結腸炎的效果更佳。
[0028]下述實驗例證明本發明所述方案的技術效果。
[0029]實驗例[0030]I 材料
[0031]1.1 材料
[0032]胡椒堿(純度>98%)購自中國藥品生物制品檢定所；
[0033]Dextran sodium sulfate (DSS)(MW 36 - 50KDa, MP Biomedical LLC, Solon, OH)；pregnenolone 16a_carbonitriIe (PCN)購自 Sigma 公司；
[0034]RNApur超純總RNA快速提取試劑盒(博邁德生物)；
[0035]TransScriptTM One-Step RT-PCR SuperMix(北京全式金生物技術有限公司)；
[0036]Fast SYBRiGreen Master Mix(Applied Biosystems)；
[0037]注射用山茶油由軍科院二所七室購買；
[0038]其他試劑均為市售分析純。
[0039]1.2主要儀器
[0040]PCR 儀:GeneAmp PCR System 2400 (PE Applied Biosystem)；
[0041]制冰機(ManitowocQM20)；
[0042]超低溫冰箱(SanyoMDF-U53V)；
[0043]電子精密天平(德國`Sartorius BS110S)；
[0044]純水器(美國MILLIP0RE Simplicity)；
[0045]酶標儀(PerkinElmerVictorX)；
[0046]旋渦振蕩器(浙江樂成電器廠XH-89型)；
[0047]倒置顯微鏡(日本Nikon 120型)；
[0048]StepOne PlusTM Real Time PCR(Applied Biosystems)。
[0049]1.3藥品配制
[0050]I) 4% (wt/vol) DSS 溶于蒸餾水；
[0051]2) PCN (42mg/kg):取 PCN 151.2mg 溶于 36ml 山茶油；
[0052]3)胡椒堿:(劑量)
[0053](I)低劑量(10mg/kg):28.55胡椒堿溶于36ml山茶油；
[0054](2)中劑量(25mg/kg):71.38mg胡椒堿溶于36ml山茶油；
[0055](3)高劑量(50mg/kg):142.67mg胡椒堿溶于36ml山茶油；
[0056]2實驗方法
[0057]2.1動物分組及給藥
[0058]雄性C57BL/6J小鼠，體重20 — 25g，(由軍事醫學科學院實驗動物中心提供)，在溫度(23±2°C)，濕度(55±10%)環境中晝夜交替，自由覓食。60只小鼠隨機分組，每組10只，分為空白組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組和陽性藥組(PCN)，均為腹腔注射。所有小鼠預給藥3天，空白組給予同等劑量的山茶油，從第4天開始，模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組和陽性藥組自由飲用含有4%DSS，直到第10天，同時給予相應的胡椒堿或者PCN。監測大鼠體重變化,大便性狀及便血情況,并根據Murano標準對大鼠疾病活動指數(DAI)進行評估。動物處死前12h禁食不禁水。取各組小鼠肺、心、肝、腎、胃、脾、十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結腸，保存于超低溫-80°C冰箱中，結腸一部分于10%中性緩沖福爾馬林固定備用，用于病理切片的制備及HE染色，另一部分測量其長度。2.2統計分析
[0059]所有數據重復三次，收集數據進行統計學分析。實驗數據用均數土標準差(X±S)表示，采用SAS統計學軟件，兩組間比較采用t-檢驗，P〈0.05為差異有統計學意義。
[0060]3實驗結果
[0061]3.1胡椒堿對DSS處理的小鼠潰瘍性結腸炎保護機制
[0062]3.1.1DSS處理的小鼠潰瘍性結腸炎的臨床評分
[0063]60只小鼠隨機分組，每組10只，分為空白組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組和陽性藥組(PCN)，均為腹腔注射。所有小鼠預給藥3天，空白組給予同等劑量的山茶油，從第4天開始，模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組和陽性藥組自由飲用含有4%DSS，直到第10天，同時給予相應的胡椒堿或者PCN (如表1所示)。監測大鼠體重變化，大便性狀及便血情況，并根據Murano標準對大鼠疾病活動指數(DAI)進行評估。如圖所示,模型組的小鼠體重變化，腹瀉和便血情況都比其他組小鼠嚴重，而低劑量、中劑量和高劑量組的小鼠的體重變化，腹瀉和便血情況依次減輕(如圖1-A、1-B、1-C所示)。模型組的小鼠的結腸長度比其他組要短(如圖1-D所示)。從結腸的外形可以看出，模型組的結腸充血，變紅，而低劑量、中劑量和高劑量組的結腸充血情況依次減輕，而陽性藥的結腸表面幾乎沒有充血(如圖1-E所示)。
[0064]表1
[0065]
【權利要求】
1.一種胡椒堿在制備治療潰瘍性結腸炎藥物中的應用。
2.一種用于治療潰瘍性結腸炎的藥物，其特征在于，所述藥物以胡椒堿為活性成分。
3.根據權利要求2所述的用于治療潰瘍性結腸炎的藥物，其特征在于，所述藥物的活性成分包括重量份比為70-90:10-30的胡椒堿和山茶油。
4.根據權利要求3所述的用于治療潰瘍性結腸炎的藥物，其特征在于，所述藥物的活性成分包括重量份比為80:20的胡椒堿和山茶油。
5.根據權利要求2所述的用于治療潰瘍性結腸炎的藥物，其特征在于，所述藥物的活性成分包括重量份比為1:1-3的胡椒堿和青蒿素。
6.根據權利要求5所述的用于治療潰瘍性結腸炎的藥物，其特征在于，所述藥物的活性成分包括重量份比為1:2的胡椒堿和青蒿素。
7.根據權利要求5或6所述的用于治療潰瘍性結腸炎的藥物，其特征在于，所述藥物的活性成分還包括山茶油。
8.根據權利要求2-7任一所述的用于治療潰瘍性結腸炎的藥物，其特征在于，所述藥物單位制劑中含胡椒堿的量按照日服用制劑量為200mg/天計算。
9.一種制備權利要求2-8任一所述的藥物的方法,其特征在于,按照選定的處方量取各原料組分，加入常規輔料按照常規工藝制成臨床上可接受的劑型。
10.權利要求2-8任一 所述的藥物在制備治療潰瘍性結腸炎的藥物中的用途。
【文檔編號】A61K31/366GK103690537SQ201310693040
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月17日 優先權日:2013年12月17日
【發明者】高月, 王宇光, 胡東華, 陸倍倍, 肖成榮, 譚洪玲, 馬增春, 梁乾德, 湯響林 申請人:中國人民解放軍軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所