艷山姜揮發油滴丸及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種艷山姜揮發油滴丸及其制備方法。本發明包括艷山姜揮發油、混合基質和助溶劑；艷山姜揮發油與混合基質的質量比為1:2～8，混合基質是由聚乙二醇6000或聚乙二醇6000、聚乙二醇4000以1-7::1-6的質量比配制而成。本發明具有優越的治療理氣開竅，活血通絡，行氣止痛等心血管疾病的療效，具有顯著的保護血管內皮損傷的作用。同時不僅解決了解決了由于揮發油屬于脂溶性成分，不易溶于水溶性基質中而使生物利用度下降的問題，而且使制備的滴丸圓整均勻，色澤一致，無粘連現象。
【專利說明】艷山姜揮發油滴丸及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種理氣開竅，活血通絡，行氣止痛的，治療心血管疾病，具有保護血 管內皮細胞損傷、心肌缺血或梗死的艷山姜揮發油滴丸及其制備方法，屬于制藥【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 心血管系統疾病是人類最為常見的一種疾病，是目前威脅人類健康的頭號殺手， 已成為當今世界人口的第一大死亡病因。在我國，隨著人口老齡化加速，人民生活水平提 高，生活節奏加快，飲食結構向高熱、高脂化發展，人群中冠心病、心絞痛等心血管系統疾病 也已成為危害人類健康及生命的嚴重疾病之一，心血管疾病患者急劇增加，估計我國心血 管病現患人數為2. 9億，每10秒就有1人死于心血管病，每年約有350萬人死于心血管病， 占總死亡原因的41 %，居各種疾病之首，且呈上升趨勢。世界銀行曾預測，中國心血管病死 亡率高于日本和歐美等發達國家，2005年?2015年，心血管疾病、卒中和糖尿病將給中國 造成約5500億美元的經濟損失。同時，由于飲食結構改變，造成膽固醇攝入量過多，以及工 作、生活壓力加大、運動量減少，環境污染等原因，心腦血管疾病發病率呈現年輕化的趨勢， 三、四十歲的人患心腦血管病的比例逐年增加，心血管疾病的高發生率與死亡率日益受到 社會的廣泛關注。由于冠心病、心絞痛是常見的多發病之一，持續時間長，多為慢性病，需要 長期用藥。目前常用的治療心血管系統疾病，如冠心病、心絞痛，的藥品主要是硝酸酯類藥 物、β阻滯劑、鈣拮抗劑、調血脂藥及抗血小板聚集藥物，但其具有如頭痛、眩暈、血壓下降、 心動過速等不良反應，長期使用還會產生耐藥性。
[0003] 艷山姜[Alpiniazerumber(Pers· )BurttetSmith]，別名月桃、良姜、土砂仁、虎子 花等，為姜科（Zingiberaceae)、姜亞科（Zingiberoideae)、山姜屬（AlpiniaRoxb.)植物， 英文名beautiful galangal，為多年生常綠叢生草本植物。艷山姜的干燥成熟果實，具有溫 中燥濕，行氣止痛，截瘧的功效，是貴州少數民族治療心腹冷痛，胸腹脹滿，消化不良，嘔吐 腹瀉等癥狀的習用藥材。大量研究結果顯示，艷山姜的主要有效成分揮發油，具有廣泛的抗 炎、鎮痛以及防治心血管系統疾患等多方面的生物活性。據研究報道，艷山姜植物是比較好 的藥用植物，具有重要的藥用價值，其莖、種子和葉均含有揮發油，同時也是重要的香料植 物、纖維植物及觀賞植物，具有重要的經濟和觀賞價值。艷山姜主要化學成分為揮發油類、 黃酮類和二萜類、有機酸類等化合物，其中β -水芹烯、α -菔烯、β -菔烯、1，8-桉葉油醇、 莰烯含量較高。揮發油類具有抗心肌缺氧，降壓，抗炎，鎮痛，降血脂，抗動脈粥樣硬化，抗氧 化，抗潰瘍的作用。前期研究中，課題組已證實艷山姜揮發油可明顯提高LPS誘導損傷的 HUVECs的細胞存活率，降低LDH外漏，減少炎癥相關細胞因子（TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、 IL-8)的釋放，及減少Ang II、ET-1、TXA2的釋放，增加NO、PGI2的含量，結果顯示E0FAZ對 LPS誘導損傷的HUVECs具有顯著保護作用，起到治療心血管系統疾病。
[0004] 將艷山姜揮發油制備成片劑或顆粒劑，在貯存過程中揮發油容易析出到片劑的表 面，造成劑量的損失和片劑表面質量的下降，并且片劑起效慢，顆粒劑在沖調過程中可能導 致揮發油揮發而損失；將艷山姜揮發油制備成硬膠囊，容易對膠囊殼造成軟化和溶蝕；將 艷山姜揮發油制備成軟膠囊，但軟膠囊的膠囊殼對藥物的釋放有一定的阻礙作用，藥物釋 放較慢。
[0005] 滴丸是指固體或液體藥物與基質加熱熔化混勻后，滴入不相混溶的冷凝液中，收 縮冷凝而成的制劑。滴丸劑具有服用量少、崩解和溶出迅速等特點，對于提取量較小、脂溶 性較強的中藥是很好的劑型。由于載體對藥物具有濕潤、阻礙聚集、增溶和抑晶的作用，藥 物在基質中主要以分子、微晶或膠體狀態存在，藥物總表面積增大，不僅能增加一些難溶 性中藥有效成分的溶解度、溶出速度和吸收速率，而且也提高了有效成分的生物利用度。 因此，將艷山姜揮發油制備成滴丸制劑可以解決其它片劑存在的問題。然而，如果采用常規 組分和方法制備的艷山姜揮發油滴丸，不能使揮發油性質的藥物良好的分散在熔融的滴丸 基質中，而影響其吸收，影響了滴丸在滴制時的成形質量和藥物療效。而且滴丸基質配比不 當也容易造成丸圓整度不好、有拖尾、孔隙、松散、滴丸均勻度差的問題。
【發明內容】
[0006] 本發明的目的在于，提供一種艷山姜揮發油滴丸及其制備方法。本發明對血管內 皮細胞損傷具有優越的治療效果，因此具有治療理氣開竅，活血通絡，行氣止痛等心血管疾 病的療效，同時不僅解決了解決了由于揮發油屬于脂溶性成分，不易溶于水溶性基質中而 使生物利用度下降的問題，而且使制備的滴丸圓整均勻，色澤一致，無粘連現象。
[0007] 為解決上述技術問題，本發明提供的技術方案如下：一種艷山姜揮發油滴丸，由 艷山姜揮發油、混合基質、適量助溶劑和適量輔料制備而成；所述的艷山姜揮發油和混合基 質的質量比為1 :2?8,所述的混合基質是聚乙二醇6000或聚乙二醇6000和聚乙二醇4000 以1?7:1?6的質量比配制而成，輔料選自硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、蟲蠟、氫化植物油、 硬脂醇、鯨蠟醇、半合成脂肪酸酯中的一種或兩種。
[0008] 上述的艷山姜揮發油滴丸中，艷山姜揮發油與混合基質的質量比為1:3?5,混合 基質是由聚乙二醇6000與聚乙二醇4000以2-7:1-4的質量比配制而成。
[0009] 前述的艷山姜揮發油滴丸中，所述的助溶劑是吐溫類或司盤類助溶劑，助溶劑的 質量為混合基質的0. 01-12%。
[0010] 前述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法，將艷山姜果實用水蒸氣蒸餾法或超臨界萃 取法提取，得艷山姜揮發油，備用；取聚乙二醇6000和聚乙二醇4000組成的混合基質，混合 均勻，然后置49-60°C水浴上保溫，加入吐溫類助溶劑，攪拌混合均勻后加入艷山姜揮發油， 再攪拌混合均勻；滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
[0011] 上述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法中，艷山姜果實150g,水蒸氣蒸餾法，或超臨 界萃取法提取，得艷山姜揮發油，將揮發油離心棄水層，再加入無水硫酸鈉以吸盡水分，備 用；取艷山姜揮發油質量的2. 38倍的聚乙二醇6000和1. 12倍的聚乙二醇4000,混合均勻， 至無氣泡，完全熔融，然后置49-60°C水浴上保溫，然后加入基質4%倍量的吐溫80,混合均 勻，再加入艷山姜揮發油，使完全溶解，攪拌混合均勻，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸 表面的冷凝液，即得成品。
[0012] 前述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法中，取艷山姜揮發油質量的2. 38倍的聚乙 二醇6000和1. 12倍的聚乙二醇4000,充分攪拌，混合均勻，然后置49-60°C水浴上保溫，然 后加入滴丸基質6%倍量的吐溫80,混合均勻，再加入艷山姜揮發油，使完全溶解，攪拌混 合均勻，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
[0013] 前述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法中，取艷山姜藥材150g置超臨界流體萃取 機的萃取釜中萃取，收集艷山姜揮發油，將揮發油離心棄水層，再加入無水硫酸鈉以吸盡水 分，備用；艷山姜揮發油用裝有能切割5萬-1000分子量超濾膜的超濾裝置過濾，將膜上液 與膜下液分離，膜上液棄去，膜下液為艷山姜揮發油備用。
[0014] 前述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法中，取艷山姜揮發油的質量的1-5倍的聚乙 二醇6000和1-3倍的聚乙二醇4000,在60-100°C水浴充分攪拌，至無氣泡，完全熔融，然后 置49-60°C水浴上保溫，然后加入吐溫或司盤類助溶劑，混合均勻，加入上述艷山姜揮發油， 使完全溶解，攪拌混合均勻，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
[0015] 前述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法中，取艷山姜藥材150g置超臨界流體萃取 機的萃取釜中萃取，收集提取物，得艷山姜揮發油，將揮發油離心棄水層，再加入無水硫酸 鈉以吸盡水分，備用；取上述提取物重量2. 38倍量的聚乙二醇6000和1. 12倍量的聚乙二 醇4000,在60-KKTC水浴充分攪拌，至無氣泡，完全熔融，然后置49-60°C水浴上保溫，然后 加入滴丸基質〇. 1 %倍量的司盤40,混合均勻，加入上述提取物，使完全溶解，攪拌混合均 勻，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即可成品。
[0016] 與現有技術相比，本發明具有以下有益效果：本發明對混合基質的組成和配比作 了改進，使艷山姜揮發油更穩定，使用更安全，易溶解、更易吸收、作用更快、更強，從而達到 溫中燥濕，行氣止痛，理氣開竅，活血化瘀，的功效，用于氣陰兩虛，心悸脈結代，胸悶不舒， 胸痛及冠心病心絞痛和短暫性腦缺血見有上述癥狀者，含服效果更佳。本發明實驗時采用 現有的滴丸基質，不能使揮發油性質的藥物良好的分散在熔融的滴丸基質中，而影響其吸 收。眾所周知，藥物要在體內溶解后才能吸收，藥物在滴丸中由于固體分散的原因，呈微細 結晶，無定形微粒或分子狀態存在，所以難溶性藥物滴丸的作用快、療效高。因此，藥物在熔 融的滴丸基質中的溶解度成為本發明制備成滴丸制劑、使其達到療效的關鍵。本發明中提 取出來的揮發油成分，用常規的水溶性滴丸基質，雖然可以將揮發油完全溶解在熔融的滴 丸基質中，但是一定程度影響了滴丸在滴制時的成形質量和藥物療效；通過實驗選擇，我們 發現本發明使用的：水溶性與非水溶性基質混合作為本發明滴丸的基質，可以增加藥物熔 融時的溶解量，兩種溶解性各異的基質，具有相差較大的極性和介電常數，可相互調節成與 藥物相近的極性和介電常數。本發明在滴丸基質中加入一定量的助溶劑，從而增加藥物的 溶解量，提高藥物的載藥量，并使藥物與胃腸道體液間接觸角變小，增加了藥物的潤濕性， 因而使藥物加速溶解，吸收增多。同時，由于在滴丸基質中加入藥物，滴丸基質的性質發生 了變化，不同的滴丸基質配比，在冷凝液中收縮冷凝的程度不同，導致滴丸成型的質量，本 發明通過實驗研究，優選出了最適宜制備艷山姜揮發油的基質的組成及其配比，使制備的 滴丸圓整均勻，色澤一致，無粘連現象。再進一步地，本發明還對艷山姜揮發油的提取方法 作了進一步優選，不僅可以高效率地獲取活性成分，而且可以最大程度地保證艷山姜揮發 油的藥性。
[0017] 本發明藥效研究實驗：
[0018] 實驗分組及方法：
[0019] 實驗分成三個組：空白組（ControlDose，Contr. )、LPS 模型組（ModelDose，LPS)、 中劑量艷山姜揮發油滴丸藥組（MediumDose，M. D.)。空白組加無血清DMEM和生理鹽水，LPS 模型組加無血清DMEM和LPS (15 μ g/ml)，M. D組加艷山姜揮發油滴丸和LPS (15 μ g/ml)。除 空白對照組外，各組分別給予相應藥物干預保護lh后，再給予LPS復制HUVECs炎性損傷模 型。
[0020] 蘇木素-伊紅染色（HE染色）：
[0021] 將形態完好的細胞接種到3孔板內，長滿后上述方法分組給藥。各組細胞用PBS 浸洗3次，每次5分鐘，加4%的多聚甲醛固定15min，棄去多聚甲醛，PBS浸洗3次，每次5 分鐘，待孔內干燥后，加蘇木精染液染色15-20min，PBS浸洗3次，每次5分鐘，HCL-乙醇 (75%乙醇配制1% HCL)分化30秒，PBS浸洗3次，每次5分鐘，95%乙醇潤洗5秒，伊紅染 液染色（5-10)分鐘，70%乙醇洗2次。鏡檢著色滿意后觀察細胞，拍照。
[0022] 取生長良好的傳代培養的HUVECs，制成細胞懸液，以每孔IX 104個接種于96孔培 養板（每孔100 μ 1)，培養至細胞基本融合，換成無血清的DMEM培養液繼續培養24h，使細 胞同步化，按上述方法分組給藥。再加入MTT(5mg/ml)20l·! 1，繼續孵育4h，終止培養。小心 吸去孔內培養液，每孔加入150μ 1二甲基亞砜，低速震蕩lOmin，使結晶物充分溶解。在酶 聯免疫檢測儀490nm波長處測量各孔吸光值，結果以0D值表示。細胞存活率=實驗組0D 值/對照組0D值X100%。
[0023] 乳酸脫氫酶（LDH)的測定：
[0024] 將HUVECs按2. 4. 1項下方法分組給藥處理后，收集24孔板培養液，吸出培養 液，-20°C冰箱保存，備測。
[0025] (1)分析原理：LDH能夠催化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸與2,4_二硝基苯肼反應在堿 性環境下形成棕紅色苯腙化合物，在440nm波長測定，通過比色求出酶的活力。
[0026] (2)分析方法：根據試劑盒說明書完成。取樣：
[0027]
【權利要求】
1. 艷山姜揮發油滴丸，其特征在于：主要由艷山姜揮發油、混合基質和適量助溶劑制 備而成；所述的艷山姜揮發油和混合基質的質量比為1 :2?8,所述的混合基質是聚乙二醇 6000或聚乙二醇6000和聚乙二醇4000以1?7:1?6的質量比配制而成的混合基質。
2. 根據權利要求1所述的艷山姜揮發油滴丸，其特征在于：艷山姜揮發油與混合基質 的質量比為1:3?5,混合基質是由聚乙二醇6000與聚乙二醇4000以2?7:1?4的質量 比配制而成。
3. 根據權利要求1所述的艷山姜揮發油滴丸，其特征在于：所述的助溶劑是吐溫類或 司盤類助溶劑，助溶劑的質量為混合基質的〇. 01-12%。
4. 根據權利要求1至3任一項所述的艷山姜揮發油滴丸，其特征在于：制備原料還包 括輔料，艷山姜揮發油和輔料的質量比為1 :〇. 1?5 ;且輔料選自硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、 蟲蠟、氫化植物油、硬脂醇、鯨蠟醇、半合成脂肪酸酯中的一種或兩種。
5. 根據權利要求1至4任一項所述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法，其特征在于： 將艷山姜果實用水蒸氣蒸餾法或超臨界萃取法提取，得艷山姜揮發油，備用；取聚乙二醇 6000和聚乙二醇4000組成的混合基質，混合均勻，然后置49-60°C水浴上保溫，加入吐溫類 助溶劑，攪拌混合均勻后加入艷山姜揮發油，再攪拌混合均勻；滴入冷凝液中，制成滴丸，拭 去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
6. 根據權利要求5所述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法，其特征在于：取艷山姜果實 150g，水蒸氣蒸餾法，或超臨界萃取法提取，得艷山姜揮發油，將揮發油離心棄水層，再加入 無水硫酸鈉以吸盡水分，備用；再取艷山姜揮發油質量的2. 38倍的聚乙二醇6000和1. 12 倍的聚乙二醇4000,混合均勻，至無氣泡，完全熔融，然后置49-60°C水浴上保溫，然后加入 基質4%倍量的吐溫80,混合均勻，再加入艷山姜揮發油，使完全溶解，攪拌混合均勻，滴入 冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
7. 如權利要求5所述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法，其特征在于：按重量份取1份 艷山姜揮發油、2. 38份聚乙二醇6000、1. 12份聚乙二醇4000和0. 5份，充分攪拌，混合均 勻，然后置49-60°C水浴上保溫，然后加入聚乙二醇6000和聚乙二醇4000的混合基質的 6%倍量的吐溫80,混合均勻，再加入艷山姜揮發油，使完全溶解，攪拌混合均勻，滴入冷凝 液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
8. 如權利要求5所述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法，其特征在于：艷山姜揮發油 的制備方法是，取艷山姜藥材置超臨界流體萃取機的萃取釜中萃取，收集艷山姜揮發油， 將揮發油離心棄水層，再加入無水硫酸鈉以吸盡水分，備用；艷山姜揮發油用裝有能切割5 萬-1000分子量超濾膜的超濾裝置過濾，將膜上液與膜下液分離，膜上液棄去，膜下液為艷 山姜揮發油備用。
9. 如權利要求5所述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法，其特征在于：按重量份取1份 艷山姜揮發油、1-5份聚乙二醇6000、1-3份的聚乙二醇4000和0. 5-3份單硬脂酸甘油酯， 在60-KKTC水浴充分攪拌，至無氣泡，完全熔融，然后置49-60°C水浴上保溫，然后加入吐 溫或司盤類助溶劑，混合均勻，加入上述艷山姜揮發油，使完全溶解，攪拌混合均勻，滴入冷 凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
10. 如權利要求5所述的艷山姜揮發油滴丸的制備方法，其特征在于：取艷山姜藥材 150g置超臨界流體萃取機的萃取釜中萃取，收集提取物，得艷山姜揮發油備用；取上述提 取物重量2. 38倍量的聚乙二醇6000、1. 12倍量的聚乙二醇4000、0. 1-0. 5倍量的硬脂醇和 0. 2-4. 9倍量的鯨蠟醇在60-KKTC水浴充分攪拌，至無氣泡，完全熔融，然后置49-60°C水 浴上保溫，然后加入滴丸基質0. 1 %倍量的司盤40,混合均勻，加入上述提取物，使完全溶 解，攪拌混合均勻，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即可成品。
【文檔編號】A61K36/9062GK104056159SQ201410341087
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年7月17日 優先權日:2014年7月17日
【發明者】沈祥春, 陶玲, 張彥燕, 令狐克剛, 林丹 申請人:沈祥春, 陶玲