熊果酸在制備抗血栓藥物方面的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥或/和保健品領域，具體地說涉及熊果酸的新用途，確切地說是熊 果酸在抗血栓方面的應用。
【背景技術】
[0002] 熊果酸(ursolic acid)又名烏索酸(烏蘇酸），屬五環三萜類化合物。它在自然界 分布很廣，如存在于杜鵑花科植物熊果的葉、果實中，玄參科植物毛泡桐的葉中，以及木樨 科植物女貞的葉中。熊果酸具有廣泛的生物活性，包括抗癌、對肝損傷的保護、抗菌消炎和 抗病毒等作用。近年來發現:熊果酸不僅對多種致癌、促癌物有抵抗作用，而且能抑制多種 惡性腫瘤細胞的生長。它對中樞神經系統(CNS)有明顯的安定和降溫作用，能抑制CCl 4誘 導的肝損傷，體外對G+和（Γ菌及酵母菌等都具有抑制活性，同時熊果酸及其衍生物還對病 毒具有抑制活性。但未見有關于抗血栓反方面的報道。
[0003] 血液中存在著互相拮抗的凝血系統和抗血栓系統(纖維蛋白溶解系統）。在生理情 況下血液中的凝血因子不斷地被激活，從而產生凝血酶，形成微量的纖維蛋白，沉著于血管 內膜上。但這些微量的纖維蛋白又不斷地被激活了的纖維蛋白溶解系統所溶解，同時被激 活的凝血因子也不斷地被單核吞噬細胞系統所吞噬。凝血系統和纖維蛋白溶解系統的動態 平衡，既保證了血液有潛在的可凝固性又始終保證了血液的流體狀態。然而，有時在某些能 促進凝固過程的因素的作用下，打破了上述的動態平衡，觸發了凝血過程，便形成血栓。
[0004] 血栓形成是許多疾病如心肌梗死、缺血性猝死、深靜脈血栓等的基本病理過程，它 嚴重地危害著人類的健康，它的形成與血小板的聚集、粘附，內源性和外源性凝血系統以及 纖維蛋白的形成密切相關。根據世界衛生組織的調查報告，由于動脈粥樣硬化導致的血栓 疾病引起的死亡已經排到了第一位。動脈血栓是由于動脈粥樣硬化，斑塊不穩定發生了斑 塊的破裂，使血液里的血小板發生聚集，激活了體內的凝血系統，最后導致血栓形成。一旦 堵塞以后就會發生組織的缺血和壞死，產生嚴重的后果。在動脈血栓性疾病的急性或特殊 狀態下，需要輔助使用抗血栓藥物，才能達到更好的抗血栓效果。
【發明內容】
[0005] 本發明目的在于克服現有技術缺陷，提供一種熊果酸在制備抗血栓藥物方面的新 應用。
[0006] 其中，所述的新應用是抗血栓作用。
[0007] 熊果酸可購買普通市售產品，也可以自制，從植物中提取獲得。
[0008] 熊果酸(ursolic acid)別名烏索酸，分子式:C3〇H48〇3,結構式如下：
[0009] 本發明對熊果酸的體內抗血栓作用進行考察，結果表明：熊果酸具有良好的抗血 栓作用，可單獨用于制備抗血栓藥物。
【具體實施方式】
[0010] 以下通過實施例形式對本發明的上述內容再做進一步的詳細說明。
[0011] 實施例1熊果酸抗血栓作用實驗 方法:采用皮下注射鹽酸腎上腺素和冰水浴的方法制備大鼠的急性血瘀模型。大鼠連 續灌胃7次，考察熊果酸對急性血瘀模型大鼠血液流變性和凝血四項的影響。
[0012] 儀器和材料:HF6000-4半自動凝血分析儀、HT-100C血流變粘度測試儀、TGL-16gR 高速臺式冷凍離心機(上海安亭科學儀器廠）；凝血酶原時間（PT)測定試劑盒（105262);活 化部分凝血酶時間(APTT)測定試劑盒（1121781);凝血酶時間（TT)測定試劑盒（121151);纖 維蛋白原(FIB)含量測定試劑盒（132079)均由上海太陽生物技術有限公司生產。
[0013] 實驗動物:SPF級的SD大鼠，雌雄各半，體重250~300 g，由河南省實驗動物中心提 供，許可證號：SCXK(豫)2010-0002。
[0014]實驗方法： 樣品溶液的配置:熊果酸用5%的羧甲基纖維素鈉溶解。
[0015] 雌雄各半的SD大鼠，隨機分為4組，每組7只。分別為空白組、模型組、陽性對照組和 熊果酸給藥組。連續灌胃給藥7次，早晚各一次(每次間隔12h)，空白對照組和模型組給予相 應的空白溶劑(5%的羧甲基纖維素鈉），陽性對照組給予阿司匹林（100 mg/kg)，給藥組給予 相應的藥物，于第5次給藥后開始造模，方法如下： 大鼠皮下注射鹽酸腎上腺素注射液(〇. 8 mg/kg )2次，間隔時間為4 h。第1次皮下 給予鹽酸腎上腺素后2 h，將大鼠置于0~2 °C冰水中游泳5 min，造成大鼠急性血瘀模 型。最后一次皮下注射鹽酸腎上腺素后大鼠禁食不禁水飼養，在相應的時間給第六次藥。最 后一次注射鹽酸腎上腺素16 h進行最后一次藥，給藥30 min后用10 %水合氯醛（300 mg/ kg)麻醉大鼠，于腹主動脈取血，測量相應的指標。
[0016] 數據處理:結果采用算術平均值和標準差表示，數值統計采用SPSS19.0軟件單因 素方差分析法(One-Way AN0VA)比較其顯著性差異。測定結果如下： 表1熊果酸對急性血瘀模型大鼠全血粘度的影響
Data represent mean土SD· n=7； 與空白組相比，*#P〈〇. OOI; 與模型組相比，###Ρ〈〇·〇〇1 ; 與陽性對照相比，^P〈〇 · 001 or，0 · 001 <^卩〈0 · 01。
[0017] 由表1可知，模型組與空白組相比，高、中、低切變頻率下的全血粘度均極顯著升高 (P〈0.001 )，說明大鼠的急性血瘀模型造模成功。與模型組相比，熊果酸給藥組各切變頻率 下的全血粘度均極顯著降低(P〈〇.001)，且在各切變頻率下熊果酸降低全血粘度的效果與 陽性對照阿司匹林相當(P>〇.05)，說明熊果酸具有良好的抗血栓活性。
[0018] 表2熊果酸對急性血瘀模型大鼠血漿粘度的影響
Data represent mean±SD. n=7； 與空白組相比，*#P〈〇. 001; 與模型組相比，###P〈〇 · 001，or，0 · 001<##P〈0 · 01，#P〈0 · 05; 與陽性對照相比，^P〈〇 · 001 or，0 · 001 <^卩〈0 · 01。
[0019] 由表2可知：模型組與空白組相比，在中切變率下的血漿粘度極顯著升高（P〈 0.001)，說明大鼠急性血瘀模型造模成功。與模型組相比，熊果酸給藥組可極顯著降低血漿 粘度(P〈0.001 )，且其效果與陽性對照相當(P>0.05 )，說明熊果酸具有良好的抗血栓活性。
[0020] 表3熊果酸對急性血瘀模型大鼠凝血四項的影響
Data represent mean±SD. n=7； 與空白組相比，*#P〈〇. 001; 與模型組相比，###P〈〇 · OOI，or，O · OOI<##P〈0 · OI，#P〈0 · 05; 與陽性對照相比，^P〈〇. 001。
[0021]由表3可知：模型組與空白組相比，TT、APTT和PT均極顯著地降低，而FIB極顯著地 升高(P〈0.001)，說明大鼠的急性血瘀模型造模成功。與模型組相比，熊果酸給藥組可極顯 著地延長TT、APTT和PT，且能極顯著地降低FIB(P〈0.001 )，且熊果酸給藥組延長TT和APTT 的效果與陽性對照阿司匹林相當(P>〇.05)。說明各個給藥組可以通過內源性凝血途徑和外 源性凝血途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而來抑制血栓的形 成。
【主權項】
1.熊果酸在制備抗血栓藥物方面的應用。
【專利摘要】本發明屬于天然產物領域，具體涉及熊果酸的新用途。通過體內抗血栓活性進行考察，結果表明，熊果酸具有良好的抗血栓活性，可以用于制備抗血栓藥物。
【IPC分類】A61K31/56, A01P7/02
【公開號】CN105708841
【申請號】CN201610047586
【發明人】康文藝, 郭秀春, 余琦, 謝平耀, 王學標
【申請人】河南大學