右旋奧拉西坦在制藥領域中的應用的制作方法

本發明涉及右旋奧拉西坦的醫藥用途，具體涉及右旋奧拉西坦在制備抗癲癇藥物中的應用。

背景技術：

右旋奧拉西坦((R)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺)是奧拉西坦(Oxiracetam CAS 62613-82-5)的右旋體，CN102603607A公開了其制備方法。與混旋奧拉西坦和左旋奧拉西坦相比，混旋奧拉西坦和左旋奧拉西坦均可以增強記憶，提高學習能力，改善患者的認知功能障礙，而右旋奧拉西坦對認知功能障礙無效。目前尚無右旋奧拉西坦單獨作為藥物應用的報道。

業內人士都清楚，癲癇是一種常見的以反復突然發作的意識喪失伴抽搐為主要癥狀的慢性神經系統疾病，其發作通常是直接由大腦內神經元短暫的異常同步化活動所造成的，但其具體的發病機制目前仍不清楚。作為一種常見病，據世界衛生組織統計，全世界約有五千萬人患有癲癇。由于癲癇可以任何時間發作，且一般發作前沒有任何預兆，因而危害極大；加上癲癇患者還常常伴有抑郁、焦慮癥、偏頭痛、不育、性欲低、自閉癥等并發癥，因而治療癲癇十分困難。

目前，用于抗癲癇的藥物主要有苯妥英鈉、丙戊酸鈉、卡馬西平、苯巴比妥、拉莫三嗪、左乙拉西坦等，臨床反應顯示這些藥物都存在很多副作用，主要表現為智力發育、語言表達、學習記憶等認知功能的減退和顱面部畸形、先天性心臟缺陷、趾端發育不全等胎兒畸形。有報道顯示奧拉西坦用于癲癇患者的輔助治療，用于癲癇后認知和行為障礙的治療，實質上抗癲癇藥物是對中樞神經系統起抑制作用，而混旋奧拉西坦具有增強神經興奮的傳導、促進神經系統活躍，增強記憶、提高學習能力、對健忘有改進作用，奧拉西坦并不具有抗癲癇的功效。因而開發新的抗癲癇藥物十分必要。

技術實現要素：

本發明目的在于提供右旋奧拉西坦在制藥領域的用途，具體是提供右旋奧拉西坦在制備預防或治療癲癇藥物中的應用。

本發明具體涉及右旋奧拉西坦作為制備預防或治療癲癇藥物中的應用，作為癲癇急性發作藥物中的應用。

本發明具體涉及右旋奧拉西坦作為制備預防或治療癲癇藥物中的應用，作為癲癇全身性發作藥物中的應用；作為癲癇部分性發作藥物中的應用；作為癲癇持續狀態藥物中的應用。

上述右旋奧拉西坦在制備預防或治療癲癇藥物中的應用，具體來說可以制備成活性成分為右旋奧拉西坦的藥物組合物，劑型可以是口服制劑，如片劑，滴丸劑，粉劑，顆粒劑，膠囊劑等；注射劑如注射用粉劑，注射用凍干粉等劑型，以上劑型均可以按照常規方法制得。

上述劑型優選為口服膠囊劑、片劑和注射劑。

上述右旋奧拉西坦組合物的給藥劑量(右旋奧拉西坦化合物的含量)每天400mg以上(包括400mg)，優選400～2000mg/天，更優先為800～1600mg/天。

具體地說涉及，使用右旋奧拉西坦化合物或含右旋奧拉西坦化合物的藥物組合物制備用于預防或治療癲癇的藥物。

一種用于預防或治療癲癇的藥物組合物，其中含有右旋奧拉西坦化合物，以及藥學上可接受的輔料。

一種制備用于預防或治療癲癇的藥物組合物的方法，其中包括將右旋奧拉西坦化合物與藥學上可接受的輔料一起制得。

涉及，使用右旋奧拉西坦化合物或含右旋奧拉西坦化合物的藥物組合物制備用于預防或治療癲癇急性發作的藥物。

一種用于預防或治療癲癇急性發作的藥物組合物，其中含有右旋奧拉西坦化合物，以及藥學上可接受的輔料。

一種制備用于預防或治療癲癇急性發作的藥物組合物的方法，其中包括將右旋奧拉西坦化合物與藥學上可接受的輔料一起制得。

涉及，使用右旋奧拉西坦化合物或含右旋奧拉西坦化合物的藥物組合物制備用于預防或治療癲癇全身性發作的藥物。

一種用于預防或治療癲癇全身性發作的藥物組合物，其中含有右旋奧拉西坦化合物，以及藥學上可接受的輔料。

一種制備用于預防或治療癲癇全身性發作的藥物組合物的方法，其中包括將右旋奧拉西坦化合物與藥學上可接受的輔料一起制得。

涉及，使用右旋奧拉西坦化合物或含右旋奧拉西坦化合物的藥物組合物制備用于預防或治療癲癇部分性發作的藥物。

一種用于預防或治療癲癇部分性發作的藥物組合物，其中含有右旋奧拉西坦化合物，以及藥學上可接受的輔料。

一種制備用于預防或治療癲癇部分性發作的藥物組合物的方法，其中包括將右旋奧拉西坦化合物與藥學上可接受的輔料一起制得。

涉及，使用右旋奧拉西坦化合物或含右旋奧拉西坦化合物的藥物組合物制備用于預防或治療癲癇持續狀態的藥物。

一種用于預防或治療癲癇持續狀態的藥物組合物，其中含有右旋奧拉西坦化合物，以及藥學上可接受的輔料。

一種制備用于預防或治療癲癇持續狀態的藥物組合物的方法，其中包括將右旋奧拉西坦化合物與藥學上可接受的輔料一起制得。

治療癲癇方法，其包括向患者給藥右旋奧拉西坦；給藥方式優選為口服或注射。

本發明制備預防或治療癲癇的含右旋奧拉西坦藥物中所使用的右旋奧拉西坦原料純度最好是99.0％以上(光學純度)，以重量百分數計。

分級標準：抽搐行為評價采用修訂的Racine分級標準

0級：無任何發作跡象；

I級：凝視，頭面部輕微顫動；

II級：點頭或濕狗樣抖動

III級：前肢局限性驚厥；

IV級：具有后肢站立的全身強直性驚厥；

V級：具有站立伴摔倒的全身強直陣攣性發作。

出現I-III級發作，為癲癇部分性發作；

出現IV級、V級發作，為癲癇全身性發作；

出現IV-V級發作，持續30min，為SE(癲癇持續狀態)。

為了進一步驗證本發明藥用效果，發明人進行了以下試驗。

(一)右旋奧拉西坦動物體內藥代動力學試驗及生物利用度研究

1.試驗材料

1.1試驗藥品

1.1.1標準品：

奧拉西坦、右奧拉西坦由重慶東澤醫藥科技發展有限公司提供，批號為：奧拉西坦：20080917；右奧拉西坦：20100205。

1.1.2內標：

內標：吡拉西坦，批號100386-200702(含量100.0％)，購于中國藥品生物制品檢定所。

3.2試劑

甲醇(MERK，色譜純)、水(MILLI Q)、乙腈(TEDIA，色譜純)。

3.3儀器

SHIMADZU LC-MS單四級桿質譜儀、Eppendorf 5430臺式高速離心機、XW-80A旋渦混合器、SE812型氮吹儀及SE812J數控恒溫水浴(北京帥恩科技有限責任公司)。

4血漿中奧拉西坦、右奧拉西坦LC-MS測定方法

4.1色譜條件

流動相：甲醇∶水(5∶95)

色譜柱：ZORBAX SB-Aq(2.1×100mm 3.5μ)

流速：0.1mL/min；

柱溫：30℃；

進樣量：10μL

4.2質譜檢測參數

質譜離子化方式：電噴霧離子化(ESI)；離子極性Positive；掃描方式為多重反應監測(MRM)；掃描時間為100ms。用于定量分析的離子反應分別為m/z(奧拉西坦)m/z159.0→m/z113.9和m/z143.1→m/z126.0(吡拉 西坦)。

4.3標準溶液的配制

奧拉西坦標準品的配制：減重法精密稱取奧拉西坦標準品100.01mg，用超純水溶解，在100.0mL容量瓶中定容至刻度，配制成1.0001mg/mL貯備液，臨用時用超純水稀釋到相應的濃度。

右旋奧拉西坦標準品的配制：減重法精密稱取右奧拉西坦標準品100.02mg，用超純水溶解，在100.0mL容量瓶中定容至刻度，配制成1.0002mg/mL貯備液，臨用時用超純水稀釋到相應的濃度。

內標液：減重法精密稱取吡拉西坦20.02mg，用超純水溶解后，在100.0mL容量瓶中定容至刻度，配制成200.2ug/mL貯備液，臨用時用超純水稀釋至相應的濃度備用。

4.4血漿樣品的提取

吸取20μL含藥血漿樣品于1.5mLEppendorf管中，加入20μL的吡拉西坦(20μg/mL)內標液，旋渦器混勻30s，再向其加入500μL的乙腈，旋渦振蕩5min后，以16000rpm離心10min后，取上清液過1ml SPE C18E小柱，收集濾液置38℃恒溫水浴箱中氮氣吹干，300μL流動相復溶，進樣量10μL。

5毒代樣品的測定結果

5.1奧拉西坦

5.1.1標線的制備及結果

取空白犬血漿20μL，加入奧拉西坦標準品配制的工作液，使血漿中奧拉西坦的濃度分別為0.167、0.33、0.67、1.33、2.67、4.0、6.67、13.33、26.67μg/mL，按“血漿樣品的提取”項下操作，每種濃度各做1份樣品。計算奧拉西坦的峰面積(As)與內標吡拉西坦的峰面積(Ai)的比值(f＝As/Ai)，以濃度(C)對比值(f)作直線回歸，權重參數1/x，奧拉西坦的回歸方程：y＝5.2117X-0.76985(r＝0.9970，權重1/x)

表1奧拉西坦標線數據表

奧拉西坦標準曲線圖見圖1.

奧拉西坦樣品的測定結果

表2 1-2號犬血測定數據表

表3 1-1號犬血測定數據表

表4 2-6號犬血測定數據表

表5 2-5號犬血測定數據表

表6 3-3號犬血測定數據表

表7 3-4號犬血測定數據表

5.2(R)-奧拉西坦

5.2.1標線的制備及結果

取空白犬血漿20μL，加入右奧拉西坦標準品配制的工作液，使血漿中右奧拉西坦的濃度分別為0.067、0.167、0.33、0.67、1.33、2.67、4.0、6.67、13.33μg/mL，按“血漿樣品的提取”項下操作，每種濃度各做1份樣品。計算右奧拉西坦的峰面積(As)與內標吡拉西坦的峰面積(Ai)的比值(f＝As/Ai)，以濃度(C)對比值(f)作直線回歸，權重參數1/x，右奧拉西坦的回歸方程：y＝1.6811X-0.031244(r＝0.9949，權重1/x)

表8右奧拉西坦標線數據表

右旋奧拉西坦標準曲線圖見圖2。

5.2.2右奧拉西坦樣品的測定結果

表9 1-5號犬血測定數據表

表10 1-6號犬血測定數據表

表11 2-3號犬血測定數據表

表12 2-4號犬血測定數據表

表13 3-1號犬血測定數據表

表14 3-2號犬血測定數據表

奧拉西坦與右奧拉西坦在犬體內的主要藥代動力學參數如下：Tmax分別為(1.583±0.465)、(1.667±0.408)h；Cmax分別為(202.383±79.525)、(85.790±19.953)mg/ml；T1/2分別為(0.922±0.131)、(2.039±0.929)h；AUC0-∞分別為(445.340±86.609)、(242.262±31.343)mg*h/ml。以奧拉西坦為參比，右奧拉西坦相對生物利用度為(112.2±11.6)％。經非參數檢驗結果無顯著性差異(P＞0.05)。

(二)毒理試驗

在GLP實驗條件下比較右旋奧拉西坦和奧拉西坦的小鼠毒性，設定劑量為5g/kg，每組10只動物，體重18.3±1.5克，雌雄各半，用0.5％CMC液制得后口服灌服。結果顯示：兩組動物活動正常，無明顯毒性呈現，連續觀察14天無一動物發生死亡兩組間無明顯的毒性差異。

奧拉西坦為市售藥物，其藥代動力學、毒理等均為公知常識。

(三)右旋奧拉西坦抗癲癇實驗研究

采用氯化鋰-匹羅卡品造大鼠癲癇模型，以左乙拉西坦為陽性對照，選用氯化鋰-匹羅卡品大鼠癲癇模型的急性發作期作為觀察時間，采用預防給藥的方式。

1實驗材料與系統

1.1實驗材料

供試品：

右奧拉西坦，原料，乳白色粉末，批號20100205，溶于水。

左奧拉西坦，白色粉末，批號091202，溶于水。

以上均由重慶東澤醫藥科技發展有限公司提供。

陽性對照品：

左乙拉西坦片，用于成人及4歲以上兒童癲癇患者部分性發作的加用治療。性狀為藍色橢圓形薄膜包衣片，規格0.25g/片，生產企業UCB Pharma S.A，成人初始劑量為500mg/次，每日兩次，即1000mg/60kg，16.7mg/kg，按體表面積折算為大鼠劑量為100mg/kg。

左奧和右奧臨用前用純凈水制得，左乙拉西坦片臨用前用0.5％CMC制得成所需濃度懸液。溶媒對照品采用0.5％CMC，批號2014010801，成都市科龍化工試劑廠。

試劑：

硝酸毛果云香堿(匹羅卡品)滴眼液，規格5ml：25mg，批號：14101901，山東博士倫福瑞達制藥有限公司。臨用前用NS稀釋為3mg/ml濃度。

無水氯化鋰，白色顆粒，分子量42.39，成都科龍化工試劑廠。用NS配成12.7mg/ml備用。

1.2實驗系統

實驗動物

品種/品系：SD大鼠

等級：SPF級

供應單位：成都達碩生物科技有限公司

生產許可證號：SCXK(川)2008-24

購入動物性別及數量：50只，雌雄各半；

購入時體重范圍：120～150g

動物的飼養管理

動物飼養管理的環境條件

飼養房間：屏障系統動物實驗室

環境等級：屏障系統

溫度：20～25℃

相對濕度：40～70％；

換氣次數：10-15次/小時

照明時間：每日12h/12h交替照明。

動物籠具：PC聚碳酸酯鼠盒(L×W×H：460mm×315mm×210mm)，由蘇州市蘇杭動物設備廠生產。

墊料：墊料為玉米芯，由蘇州雙獅實驗動物飼料科技有限公司提供，經高溫高壓蒸汽滅菌消毒后用于動物使用。

籠具更新頻率：每周更換2-3次。

清掃與消毒：每日試驗操作和飼喂工作結束后清掃，然后由動物管理室進行消毒。消毒液交替選用84消毒液、來蘇爾和新潔爾滅，每周一次輪流交換消毒液的種類。

檢疫

檢疫期設為7天，期間每日對動物外觀、一般狀態進行觀察記錄，若動物出現異常，可能對試驗有影響，則應剔除，在試驗時不得使用。

飼料

鼠全價顆粒飼料，由四川省醫科院實驗動物研究所生產，符合GB14924.3-2001標準，經Co60照射滅菌后使用。

給料方法：自由攝取。

飲用水

高壓蒸汽滅菌自來水，由動物飲水瓶自由攝取。

2試驗方法

2.1動物識別和編號

檢疫期采用尾部標記法，即在鼠尾用記號筆劃線表示動物號。給藥前按體重分層隨機化分組法分組，用苦味酸染色法進行標記。

2.2劑量設置

動物隨機分為4組，10只/組。選擇左乙拉西坦作為陽性對照，選用臨床劑量的1.5倍，即150mg/kg。奧拉西坦的臨床劑量為800mg/次，一日兩次，即1600mg/60kg，26.7mg/kg，按體表面積折算為大鼠劑量160mg/kg。右奧和左奧則分別選其一半劑量，即80mg/kg，1.5倍即120mg/kg。給藥量為1ml/100g， 連續灌胃給藥7天后造模觀察。由于左乙拉西坦給藥1.3h(80min)后，血藥濃度達峰，故我們每組均選擇末次給藥后80分鐘開始造模，

具體劑量設置如下：

2.3試驗方法

造模方法：經過多次預試，選擇如下方法造模：動物ip.氯化鋰3mmol/kg(1.5ml/L)127mg/kg(12.7mg/ml，lml/100g體重)，24h后，37.5mg/kg匹羅卡品分三次ip.注射，每次12.5mg/kg(2.5mg/ml，0.5ml/100g體重)，間隔10分鐘。

由于每次觀察動物數量有限，試驗分為四批進行。

2.4觀察指標

記錄造模后3h內癲癇發作情況，發作級別、各級別的潛伏期、發作持續時間、發作次數，死亡率，與模型對照組比較。

3試驗結果

所有大鼠均于第一次注射匹魯卡品后5～10min出現膽堿能周圍神經刺激癥狀。即豎毛、流涎、血淚癥，并出現不同程度的以下表現，包括：少動、盯視、嘴部自動癥、點頭、眨眼、濕狗樣晃動。

3.1死亡率和出現SE的動物數

右旋奧拉西坦對氯化鋰-匹羅卡品造大鼠癲癇模型中死亡率和SE出現率的影響見圖3。

以上試驗結果顯示，造模后各組動物均出現不同程度的堿能周圍神經刺激癥狀和不同級別的抽搐狀況，在造模后1-7天內有一定的死亡率。模型對照組的死亡率為40％，左乙組為50％，左奧組為30％，右奧組為10％。各組出現癲癇持續狀態的百分率分別為60％、70％、40％、20％，右奧組動物出現SE的百分比較對照組明顯下降。從以上實驗數據看出，與模型對照組比較，右奧組動物的死亡率和SE出現率都明顯降低，說明右奧拉西坦可以降低匹羅卡品癲癇模型大鼠出現癲癇持續狀態的百分率，降低死亡率，對癲癇大鼠具有保護作用。

3.2不同級別的動物數

注：*表示與模型對照組經X²檢驗，P＜0.05

右旋奧拉西坦對氯化鋰-匹羅卡品造大鼠癲癇模型中不同癲癇級別癥狀出現率的影響見圖4。

以上試驗中，各組動物基本全部出現I級和II級癥狀，左奧和右奧組動物有一半未出現III級及以上癥狀，右奧組出現IV級的動物數為20％，較模型對照組有顯著性差異(P＜0.05)。說明右奧拉西坦可以明顯降低模型大鼠出現IV級癥狀的數量，抑制癲癇發作。

3.3不同級別的潛伏期

實驗數據顯示，右奧組動物出現I級、II級和III級癥狀的潛伏期較模型對照組是呈現延長的趨勢。說明右奧拉西坦可以延長模型動物出現癲癇部分發作時的時間，對癲癇大鼠具有保護作用。

3.4不同級別的發作次數或持續時間

注：*表示與模型對照組經方差分析，P＜0.05

右奧組動物出現V級發作的持續時間較對照組明顯下降(P＜0.05)。

說明右奧拉西坦可以減少模型動物出現V級發作的時間，對癲癇大鼠具有保護作用。

采用戊四氮(PTZ)點燃大鼠癲癇模型，以丙戊酸鈉為陽性對照，觀察右奧拉西坦是否有抗癲癇的作用。

1.供試品、對照品和試劑

供試品：

右奧拉西坦，原料，白色粉末，批號20150603，含量：99.92％，溶于水。由成都百途醫藥科技有限公司提供。

陽性對照品：

丙戊酸鈉，批號140440，規格0.5g/片，賽諾菲杭州制藥有限公司。口服胃腸吸收迅速而完全，約1～4小時血藥濃度達峰值，生物利用度近100％。人用每日最大劑量30mg/kg，按體表面積折算為大鼠劑量為185mg/kg，取其3倍約 500mg/kg作為給藥劑量。

右奧臨用前用純凈水配制，丙戊酸鈉片臨用前用0.5％CMC配制成所需濃度懸液。溶媒對照品采用0.5％CMC，批號2014010801，成都市科龍化工試劑廠。

試劑：

戊四氮(PTZ)，Sigma，MKBT2860V，白色粉末，臨用時用NS配成7mg/ml濃度備用。

2.實驗系統

2.1實驗動物

品種/品系：SD大鼠

等級：SPF級

供應單位：成都達碩生物科技有限公司

生產許可證號：SCXK(川)2008-24

購入動物性別及數量：40只，雄性；

購入時體重范圍：120～150g

2.2動物的飼養管理

2.2.1動物飼養管理的環境條件

飼養房間：屏障系統動物實驗室

環境等級：屏障系統

溫度：20～25℃

相對濕度：40～70％；

換氣次數：10-15次/小時

照明時間：每日12h/12h交替照明。

動物籠具：PC聚碳酸酯鼠盒(L×W×H：460mm×315mm×210mm)，由蘇州市蘇杭動物設備廠生產。

墊料：墊料為玉米芯，由蘇州雙獅實驗動物飼料科技有限公司提供，經高溫高壓蒸汽滅菌消毒后用于動物使用。

籠具更新頻率：每周更換2-3次。

清掃與消毒：每日試驗操作和飼喂工作結束后清掃，然后由動物管理室進行消毒。消毒液交替選用84消毒液、來蘇爾和新潔爾滅，每周一次輪流交換消 毒液的種類。

2.2.2檢疫

檢疫期設為7天，期間每日對動物外觀、一般狀態進行觀察記錄，若動物出現異常，可能對試驗有影響，則應剔除，在試驗時不得使用。

2.2.3飼料

鼠全價顆粒飼料，由四川省醫科院實驗動物研究所生產，符合GB14924.3-2001標準，經Co60照射滅菌后使用。

給料方法：自由攝取。

2.2.4飲用水

高壓蒸汽滅菌自來水，由動物飲水瓶自由攝取。

3試驗方法

3.1動物識別和編號

檢疫期采用尾部標記法，即在鼠尾用記號筆劃線表示動物號。分組后用苦味酸染色法進行標記。

3.2造模方法

大鼠腹腔注射PTZ，劑量為亞驚厥劑量35mg/kg(7mg/ml，0.5ml/100g體重)，每周3次。每次ip前稱重，觀察動物ip.后1-2h內的行為學變化，根據修訂的Racine評分進行行為學計分。連續出現3次4級及以上的癲癇發作表示點燃成功。

根據前期預試，一般在注射PTZ第10次開始連續出現3次4級癥狀，造模成功。

3.3劑量設置

選擇點燃成功的動物進行分組，動物按體重隨機分為4組，8-10只/組。選擇丙戊酸鈉作為陽性對照，選用臨床劑量的約3倍，即500mg/kg。根據前期試驗結果，選擇120mg/kg為右奧拉西坦的低劑量，取其3倍360mg/kg作為高劑量。給藥量為1ml/100g，連續灌胃給藥10天。具體劑量設置如下：

表1劑量設置

3.4試驗方法

每組動物每天給藥后1小時(按丙戊酸鈉的達峰時間計)ip.PTZ 35mg/kg，然后觀察2h內的行為學變化，根據修訂的Racine評分進行行為學計分，連續給藥10天。分級標準同上。

3.5觀察指標

記錄每天ip.PTZ后2h內癲癇發作情況，記錄發作級別、潛伏期、死亡率，與模型對照組比較。

4試驗結果

4.1模型篩選

41只動物造模期間共有3只動物死亡，篩篩選出27只點燃成功的動物，按照癲癇發作級數分組，每組7只動物左右。

4.2死亡率

給藥期間，模型組有2只動物死亡，死亡率為25％，右奧低劑量組死亡一只動物，高劑量組和陽性對照組沒有動物死亡。經卡方檢驗，未見統計學差異。

表2對死亡率的影響

4.3 4級以上癥狀的發生率

表3-1 4級以上癥狀動物的發生率(％)

表3-2 4級以上癥狀動物的發生率(％)

注：與模型對照組比較，經卡方檢驗，*表示P＜0.05；^**表示P＜0.01。

結果見表3-1、3-2和圖5。結果顯示，給藥期間模型組動物四級以上癥狀出現的頻率一直維持在較高水平(80％)，與模型組比較，三個給藥組在給藥初期未見明顯差異，從D7(D指的是天數，D7為第七天)起，發生率明顯降低，一直持續至給藥末，具有統計學差異。右奧高劑量組動物從D7開始僅出現2-3級發作，未見4、5級癥狀發生。從發生率的曲線圖也可看出，三個給藥組的4、5級癥狀發生率明顯低于模型對照組，以右奧高劑量組的效果最佳。

4.4潛伏期

結果見表4-1、4-2，在給藥初期，各給藥組與模型組比較，其發作潛伏期沒有明顯差異。從D4開始，陽性組動物和右奧高劑量組動物的發作潛伏期明顯延長(P＜0.05、P＜0.01)，一直持續至給藥末期。右奧低劑量組從D6開始，發作潛伏期較模型對照組明顯延長(P＜0.05、P＜0.01)，一直持續至給藥末期。

表4-1發作潛伏期數據(m，X±SD)

表4-2發作潛伏期數據(m，X±SD)

注：與模型對照組比較，單因素方差分析，*表示P＜0.05；^**表示P＜0.01。

試驗結果顯示，造模后各組動物均出現不同程度的堿能周圍神經刺激癥狀和不同級別的發作狀況，造模期間有一定的死亡率(3/41)。給藥期間也有動物死亡，其中模型對照組的死亡率為25％，陽性對照組為0，右奧低劑量組為14.3％，右奧高劑量組為0，右奧高劑量和陽性對照丙戊酸鈉組的死亡率為0，就絕對值來看，對癲癇發作動物具有保護作用。

就4級以上癥狀的發生率和發作潛伏期的結果來看，右奧和陽性藥對本癲癇模型均有明顯的保護作用，表現在給藥中后期4級以上癥狀發生率明顯降低、發作潛伏期明顯延長，其中以右奧高劑量的作用最為明顯。

從本試驗結果顯示，右奧對該癲癇模型具有療效，表現在死亡率、4級以上癥狀出現率都較模型對照組低，且發作潛伏期較模型對照也明顯延長。

本發明有益效果是：

發明人意外發現右旋奧拉西坦具有抗癲癇活性，其對癲癇急性發作作用明顯，尤其是癲癇急性大發作有明顯的抑制作用；右旋奧拉西坦對癲癇全身性發作、癲癇部分性發作以及癲癇持續狀態均有較好的抑制作用，而且右旋奧拉西坦生物利用度高，毒性低，適合進一步開發成為抗癲癇藥物。本發明使用了純度大于99.0％的右旋奧拉西坦原料，有效排除了藥物中其他成分的干擾，而右旋奧拉西坦為單一活性成分，使得藥品的質量更加容易控制，同時療效更加明確。本發明提供的右旋奧拉西坦組合物患者適應性強，而且制備方法簡單，利于工業化。

附圖說明

圖1奧拉西坦標準曲線圖

圖2右奧拉西坦標準曲線圖

圖3右旋奧拉西坦對氯化鋰-匹羅卡品造大鼠癲癇模型中死亡率和SE出現率的影響

圖4右旋奧拉西坦對氯化鋰-匹羅卡品造大鼠癲癇模型中不同癲癇級別癥狀出現率的影響

圖5右旋奧拉西坦對戊四氮(PTZ)點燃大鼠癲癇模型4級以上癥狀發生率曲線圖

具體實施方式

下面將描述本發明的幾個實施例，但本發明的內容并不局限于此。

實施例1

處方組成為：

(a)右旋奧拉西坦(純度為99.5％) 200mg/粒

(b)乳糖 80mg/粒

(c)微晶纖維素 70mg/粒

以制成1000粒右旋奧拉西坦膠囊劑為例，具體制備方法是：先將原輔料過80篩，稱取處方量的右旋奧拉西坦、乳糖、微晶纖維素混合均勻，直接充填膠囊。

實施例2

處方組成為：

以制成1000片右旋奧拉西坦片劑為例，具體制備方法是：先將原輔料過80目篩，稱取處方量的右旋奧拉西坦、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加2％HPMC水溶液制軟材，制粒，烘干，整粒，向顆粒中加入處方量的滑石粉，混合均勻，壓片。

實施例3

處方組成為：

以制成1000粒右旋奧拉西坦膠囊劑為例，具體制備方法是：先將原輔料過80目篩，稱取處方量的右奧拉西坦、乳糖、羧甲基淀粉鈉混合均勻，加10％PVP乙醇溶液制軟材，制粒，烘干，整粒，向顆粒中加入處方量的滑石粉，混合均勻，充填膠囊。

實施例4

以制成右旋奧拉西坦注射液為例，具體制備方法是：稱量右旋奧拉西坦(純度為99.3％)50g，葡萄糖150g，500ml注射用水溶解于稀配罐中，溫度控制在50～60℃，攪拌直至完全溶解，將溶解液冷卻到25℃，向上述配好的溶解液中加入活性炭脫色，再將其中的活性炭過濾除去，加入磷酸鹽緩沖液將該溶解液的pH值調節為4.0，再加入注射用水至5000ml，灌封，在105℃滅菌30分鐘，得到右旋奧拉西坦注射液。