本發明涉及化合物Friedolanostanes的新用途，尤其涉及Friedolanostanes在制備抑制肝臟成纖維細胞增殖藥物中的應用。
背景技術：
肝纖維化是慢性肝損傷向肝硬化發展的動態過程，過去的20年間，肝纖維化的研究取得了長足進展，證實肝纖維化與一定程度的肝硬化都是可逆的。近年來陸續出現了一些抗肝纖維化治療方法，包括化學藥、生物制劑、中藥與基因療法等，但是理想的臨床治療手段仍然缺乏，目前防治肝纖維的關鍵是針對與肝星狀細胞激活相關的環節，主要是：減輕肝損傷；抑制星狀細胞激活，減少細胞外基質產生；調節細胞因子紊亂，促進活化肝星狀細胞凋亡。
本發明涉及的化合物Friedolanostanes是一個2013年發表(Saranyoo Klaiklay，et al.,Friedolanostanes and xanthones from the twigs of Garcinia hombroniana.Phytochemistry,85(2013)161–166..)的新化合物，該化合物擁有全新的骨架類型，目前的用途僅僅促進種子發芽，(Saranyoo Klaiklay，et al.,Friedolanostanes and xanthones from the twigs of Garcinia hombroniana.Phytochemistry,85(2013)161–166..)，本發明涉及的Friedolanostanes在制備抑制肝臟成纖維細胞增殖藥物中的用途屬于首次公開。
技術實現要素：
本發明的目的在于根據現有Friedolanostanes研究中未發現其具有抑制肝臟成纖維細胞增殖活性的報道的現狀，提供了Friedolanostanes在制備抑制肝臟成纖維細胞增殖藥物中的應用。
所述化合物Friedolanostanes結構如式(Ⅰ)所示：
本發明對Friedolanostanes抑制肝臟成纖維細胞增殖作用進行了藥理試驗。活化的肝星狀細胞(HSC)具有成纖維細胞特征，NIH/3T3細胞是研究藥物抗肝纖維化活性常用的細胞模型。本研究以NIH/3T3成纖維細胞為靶細胞，觀察發明藥物對其增殖的影響。用MTT法檢測的抑制細胞增殖的試驗結果表明，本發明藥物對NIH/3T3的細胞增殖有顯著的抑制活性。結果證明Friedolanostanes具有抗肝纖維化作用。
具體實施方式
本發明所涉及化合物Friedolanostanes的制備方法參見文獻(Saranyoo Klaiklay，et al.,Friedolanostanes and xanthones from the twigs of Garcinia hombroniana.Phytochemistry,85(2013)161–166..)
以下通過實施例對本發明作進一步詳細的說明，但本發明的保護范圍不受具體實施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。
實施例1：本發明所涉及化合物Friedolanostanes片劑的制備：
取5克化合物Friedolanostanes，加入糊精195克，混勻，常規壓片制成1000片。
實施例2：本發明所涉及化合物Friedolanostanes膠囊劑的制備：
取5克化合物Friedolanostanes，加入淀粉195克，混勻，裝膠囊制成1000粒。
下面通過藥效學實驗來進一步說明其藥物活性。
實驗例一：采用MTT法評價化合物Friedolanostanes對肝纖維化的抑制作用
1、方法：NIH/3T3細胞株購自引自ATCC(American Type Culture Collection)的中科院上海細胞所細胞庫。將對數生長期的亞融合的NIH/3T3細胞用0.25％胰酶消化，洗滌，離心后，用DMEM培養液(含10％FCS)制成1×104cell/ml的細胞懸液，臺盼藍染色鑒定存活率大于95％，按每孔100ul加入96孔板中，在37℃、5％CO2培養24h同步處理后，棄上清，加入含有不同稀釋濃度藥物的DMEM培養液(含10％FCS)200ul，培養48h，每孔加入MTT溶液孵育4h。棄去培養液，加入150ulDMSO，振蕩10分鐘，使結晶溶解，酶標儀490nm處讀取OD值，結果以OD490表示。
2.結果：
2.1形態學觀察
NIH/3T3在用藥前伸展良好，折光性較弱，有方向性，呈放射狀，細胞增殖的速度快；而加藥物24h后，成纖維細胞數目減少，形狀變得不規則，突起變短，細胞排列混亂，細胞內代謝產物增多。
表1：MTT法檢測本發明藥物對NIH/3T3增殖的抑制作用
注：與細胞陰性對照比較*P<0.05；**P<0.01
結果：本發明藥物在10ug/ml-40ug/ml的濃度范圍內對成纖維細胞NIH/3T3在10％小牛血清的刺激下的細胞增殖有顯著的抑制作用。表明本發明藥物體外對纖維細胞的增殖有顯著抑制作用。
實驗例2：本發明藥物對轉化生長因子-β1(TGF-β1)誘導的成纖維細胞增殖的抑制作用
TGF-β1是促進細胞增殖和膠原生成的強活性因子，在細胞中加入TGF-β110ng/ml刺激細胞增殖，在檢測藥物對TGF-β1誘導的細胞增殖的抑制作用，以分析判斷本發明藥物的作用機理。
表2：MTT法檢測本發明藥物對TGF誘導NIH/3T3增殖的抑制作用
注：*，與細胞+TGF對照P<0.05；**，與細胞+TGF對照P<0.01
結果：本發明藥物在10-40ug/ml兩個濃度區間內對成纖維細胞NIH/3T3在TGF-β1的誘導下的細胞增殖有顯著的抑制作用。表明本發明藥物體外對纖維細胞增殖的抑制作用可能是通過干預TGF信號通路實現的。
由上述實施例表明，本發明對成纖維細胞NIH/3T3在10％小牛血清的刺激下的細胞增殖有顯著的抑制作用；Friedolanostanes對成纖維細胞NIH/3T3在TGF-β1的誘導下的細胞增殖有顯著的抑制作用。由此證明，Friedolanostanes可以明顯抑制肝纖維化的發生和發展，可用于制備抗肝纖維化、防治肝硬化的藥物。