治療抑郁癥的中藥組合物活性部位及其制備方法與應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種治療抑郁癥的中藥組合物活性部位及其制備方法與應用，中藥組 合物是由香附和夏枯草按一定重量配比組成，屬于中藥技術領域。
【背景技術】
[0002] 香附和夏枯草均為常用中藥，香附為莎草科植物莎草（Cyperus rotundus L.)的 干燥根莖，具有行氣解郁、調經止痛的功效，為治療肝郁氣滯及婦科疾病的常用中藥，含有 揮發油類、黃酮類、酚酸類、留醇類、糖類等。具有多種藥理活性，如鎮痛、抗炎、清熱、神經 保護、抗氧化、抗誘變、降血脂、降血糖等。醋香附為香附的一種炮制品，2010年《中國藥典》 一部收載的香附炮制品為醋炙香附，其炮制方法為：在香附飲片中加入20%的米醋攪勻，浸 潤至醋被吸收，文火炒干即得。香附醋炙后可增強其行氣解郁、調經止痛的作用。夏枯草為 唇形科植物夏枯草（Prunella vulgaris L)的干燥果穗，具有清火明目、軟堅散結的功效。 含有多種活性成分，如三萜酸類、黃酮類、留醇類、香豆素類、多糖類等，具有抗菌抗炎、抗病 毒、抗氧化、降血糖、降血壓、抗腫瘤等廣泛的藥理作用。
[0003] 抑郁癥是一種常見的精神疾病，是一種以持續的心境低落為主要特征的綜合癥， 主要表現為情緒低落、言語減少，行動遲緩，帶自罪自責，甚至企圖自殺等。屬中醫的"郁 癥"范疇，根據周仲英所著《中醫內科學》對郁證癥候的分類，肝郁是常見證型。傳統中醫 認為，肝氣郁滯是臨床抑郁癥發病的重要因素之一，具有疏肝解郁的方藥常可能具有抗抑 郁作用。另外，肝開竅于目，肝氣郁滯日久易化火，會出現火盛癥狀，因此，香附與夏枯草組 合既能行氣解郁瀉火，又能清肝明目，符合中醫理論治療原則。在抑郁癥模型方面，行為絕 望抑郁動物模型是比較經典的抗抑郁藥物篩選和評價模型，具有簡單、快捷、敏感等特點， 一般采用小鼠懸尾實驗和強迫游泳實驗來造模，將小鼠在規定時間內的不動時間作為考察 指標。另外還有利血平拮抗模型、慢性輕度應激抑郁動物模型等。作為抗抑郁藥物的藥效 學初篩，多采用小鼠懸尾實驗和強迫游泳實驗來進行。目前，抑郁癥的發病率正在快速攀 升，已位居世界10大疾病第4位。據調查估計，到2020年，重性抑郁癥的功能殘疾將僅次 于缺血性心臟病，位居世界第二位。而用于治療抑郁癥的藥物主要有三環類抗抑郁劑、單 胺氧化酶抑制劑和5-羥色胺再攝取抑郁劑，但長期服用都會產生不同程度的副作用，如嗜 睡、視物模糊、高血壓、驚厥和性欲低下等，患者常被迫停止用藥。現代藥理學研究表明，抑 郁癥發病機理甚為復雜，誘發原因較多，針對某單一環節的藥物往往難以取得滿意療效，多 受體靶點才是治療抑郁癥的關鍵。另外，大多數合成的抗抑郁藥物大多存在抗抑郁譜窄、有 效率低、易復發等缺陷，因此，研制安全有效的治療抑郁癥的藥物是非常必要和迫切的。目 前，國內外在抗抑郁藥物的研制與開發方面越來越注重通過多途徑、多靶點、多層次發揮作 用的傳統中藥及復方。
【發明內容】
[0004] 為了解決以上問題，本發明提供了一種治療抑郁癥的中藥組合物活性部位，即香 附與夏枯草組合物(重量組合比例為2:1或1:2)的醇提液萃取物(活性部位）及其制備方 法。
[0005] 本發明還提供了其活性部位在治療抑郁癥藥物中的新應用。
[0006] 本發明是通過以下方式實現的： 一種香附與夏枯草組合物活性部位的制備方法，其特征包括以下步驟： (1) 粉碎：將香附和夏枯草飲片烘干，分別粉碎成粗粉，混勻； (2) 提取：將步驟（1)混合粗粉以乙醇或甲醇反復提取，提取液過濾，濾液減壓回收乙 醇或甲醇至無醇味，得到醇提物； (3) 萃取：將步驟（2)醇提物加適量蒸餾水，搖勻，分別以正己烷、乙酸乙酯和水飽和的 正丁醇萃取至萃取液無色，分別減壓回收溶劑，將回收溶劑后得到的乙酸乙酯和正丁醇殘 留液合并，攪勻，水浴濃縮后真空干燥，得到香附與夏枯草組合物的活性部位。
[0007] 步驟（1)中香附為香附飲片或醋炙香附飲片。
[0008] 步驟（1沖香附與夏枯草使用高速粉碎機粉碎成20~40目的粗粉，然后按2:1或 1:2混合。
[0009] 步驟（2)中乙醇體積百分比濃度為50%~95%，每克粗粉加8倍~15倍的乙醇或 甲醇，使用乙醇或甲醇加熱回流提取2~3次，每次1~3小時；或超聲提取2~3次，每次 1小時。
[0010] 步驟（2)中減壓回收溶劑的條件為水浴溫度50°C~70°C、壓力0· 06 MP~0· 09MP。
[0011] 使用75%乙醇加熱回流提取3次，每次2h。
[0012] 步驟（3)中真空干燥的條件為60°C~70°C、壓力0· 07 MP~0· 09MP。
[0013] 所述的提取方法得到的萃取物可用于制備治療抑郁癥的口服劑型，這些劑型包 括：片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液、沖劑、混懸劑、溶液劑、噴霧劑等；優選口服劑型，如：膠 囊劑、片劑(如分散片)、顆粒劑、口服液等。
[0014] 本發明的有益效果： Γ|)香附與夏枯草按2:1或1:2組成的組合物其活性部位的抗抑郁效果非常顯著，其作 用強度均比二者單用效果好，為中藥組合物增加了一種新的臨床用途和新的組合比例。
[0015] ?以香附與夏枯草組合物作為抗抑郁藥物的提取對象，可以發揮多途徑、多靶 點、多層次的抗抑郁作用。
[0016] 藝提取方法簡單，易操作，成本低。
[0017] 本發明的藥效學實驗結果： 1.香附與夏枯草組合物醇提物與香附醇提物、夏枯草醇提物對行為絕望抑郁小鼠模型 影響的比較 根據香附和夏枯草中化學成分的性質，以75%乙醇為提取溶媒，分別提取制備香附與 夏枯草組合醇提物、香附醇提物和夏枯草醇提物，比較了三者的抗抑郁效果，以驗證香附與 夏枯草組合的合理性與優勢。
[0018] (1)懸尾實驗 將昆明種（ΚΜ)小鼠56只，分為7組，每組8只，按表1劑量分別給予蒸餾水及藥液， 每天給藥1次，連續15天，末次給藥lh后，在距小鼠尾尖部lcm處，用橡皮膏倒懸貼于橫桿 上6min，頭部距地面約6cm，累記各組后4min小鼠不動時間，即抑郁時間。結果見表1。
[0019] 表1香附、夏枯草及香附與夏枯草不同組合醇提物對懸尾小鼠不動時間的影響 (均值X± s )
注：與對照組比較*P〈〇. 05, #P〈0. 01 根據文獻，以概率相加法計算香附、夏枯草及二者組合的藥效（E)及比值Q，公式為： E香附=(T模型一T香附）/T模型，E夏枯草=(?'模型一T夏枯草）/1'模型 E組合=(T模型_Τ復配）/T模型，Q=E組合/ (E香附+E夏枯草一E香附X E夏枯草) 判斷標準：Q >1為二者有協同作用，組合后作用增強；Q〈1為二者組合作用強度降 低。Q=1為二者組合后協同作用不明顯；其中T為各組小鼠懸尾的不動時間。本發明的結 果為： E香附=〇· 2975，E夏枯草=0· 1654，E香附:夏枯草（2:1組合)=0.4200，Q香附:夏枯草（2:1組合）=1.015 >1; 計算結果顯示，香附醇提物能明顯縮短小鼠懸尾的不動時間（與模型組比較P〈〇. 05); 香附與夏枯草按2:1組合后，能顯著縮短小鼠懸尾的不動時間（P〈0. 01);計算的Q比值大于 1，其抗抑郁作用明顯優于單用香附醇提物和單用夏枯草醇提物，說明二者組合后其抗抑郁 作用增強。
[0020] 從表1中可以看出，香附與夏枯草按不同比例組合（2:1、1:2、1:1)的醇提物，其抗 抑郁作用強度不同，以2:1或1:2配合的醇提物，其縮短小鼠懸尾的不動時間的強度最大 (與對照組比較有顯著性差異P〈〇. 01，P〈〇. 05)，而以1:1組合的醇提物也有一定抗抑郁作 用，但與對照組比較無統計學意義（P>〇. 05)。
[0021] (2)強迫游泳實驗 分組、給藥方式及時間同上。末次給藥lh后，將小鼠放于內徑20cm，水深15cm的塑料 桶中，水溫保持在24-26°C，測定小鼠6min內后4min不動時間。結果見表2。
[0022] 表2香附、夏枯草及香附-夏枯草不同組合醇提物對小鼠強迫游泳不動時間的影 響(均值X± s )
注：與對照組比較*P〈〇. 05, #P〈0. 01 以概率相加法計算香附、夏枯草及二者組合物醇提物的藥效（E)及比值Q。公式為： E香附=(T模型一T香附）/T模型，E夏枯草=(?'模型一T夏枯草）/1'模型 E組合=(T模型-T復配）/T模型，Q=E組合/ Φ香附+E夏枯草-E香附X E夏枯草），公式中T為小鼠強迫 游泳的不動時間。
[0023] 以t檢驗法比較不同組與對照組之間的差異性，P值越小說明差異性越大，抗抑郁 作用越強。
[0024] 計算結果如下： 藥效E香附=0· 2779, E夏枯草=0.1826，E香附:夏枯草（2:1組合)=0· 4383, Q香附:夏枯草（2:1組合）=1.070 >1 結果顯示，香附醇提物能明顯縮短強迫游泳小鼠的不動時間（與對照組比較P〈〇. 05); 香附與夏枯草按2:1組合后，能顯著縮短強迫游泳小鼠的不動時間（P〈0. 01);計算的Q比值 均大于1，其抗抑郁作用明顯優于單用香附醇提物和單用夏枯草醇提物，說明二者組合后其 抗抑郁作用增強，具有協同作用。
[0025] 從表2中可以看出，香附與夏枯草按2:1和1:2組合后的醇提物，其縮短強迫游泳 小鼠的不動時間的作用顯著（P〈〇. 01和P〈〇. 01);以1:1配合的醇提物也有縮短強迫游泳 小鼠不動時間的作用（P〈〇. 05)，但作用比2:1和1:2強度要弱。
[0026] 結果說明香附與夏枯草組合后有協同抗抑郁作用；香附與夏枯草按2:1或1:2組 合，其抗抑郁作用效果更好。
[0027] 本發明的活性部位與香附與夏枯草組合水煎液的抗抑郁作用比較 我們將得到的香附與夏枯草按2:1組合的醇提物，分別以正己烷、乙酸乙酯和水飽和 的正丁醇萃取，合并乙酸乙酯和正丁醇2個萃取物，作為本發明的活性部位，同時制備香