、 sCD27、sCD30、sCD44在畑L和RA的診斷和風險評估中已經被用作標志物[25,32,56]。重要的 是，運些活化標志物中沒有一種是僅在活化的B細胞上表達的，運是因為它們還與外周中的 其他免疫細胞類型有關。因此，TSPAN33代表可W用作設及B細胞活化的疾病的診斷工具的B 細胞特異性活化標志物。在淋己瘤和自身免疫性疾病運兩者中使用TSPAN33表達作為潛在 的預后生物標志物的可能性值得進一步研究[57-59]。
[0192] TSPAN33作為針對惡性B細胞的治療性mAb的祀標
[0193] 除了使用TSPAN33作為B細胞活化標志物之外，TSPAN33還是四旋蛋白家族的第33 個成員（TSPAN33)，并且因此是跨膜蛋白。運使得TSPAN33成為用于產生抗TSPAN33 HiAbW實 現治療目的的合適的候選物。CD20是現在歸屬于跨膜結構域4超家族(MS4A1)的密切相關的 蛋白，是用于產生治療性單克隆抗體的重要祀標的實例，所述治療性單克隆抗體已經被證 實有效治療B細胞惡性腫瘤，如NHU慢性淋己細胞性白血病（OX) W及某些自身免疫性疾 病，包括RA[51-52,60]。然而，由于CD20在休止的B細胞和活化的B細胞運兩者上表達，因此 抗CD20 mAb療法會引起外周血液中所有的B細胞W及骨髓中70%的B細胞耗竭[25,36,61]。 因此，對限于活化的B細胞的B細胞標志物(如TSPAN33)的鑒定可W代表用于研發治療B細胞 相關病變的"第二代"mAb的一種替代性策略[32]。其他四旋蛋白（CD151)正在作為可能的治 療性抗體祀標而被研究[62]。我們的數據強烈地表明抗TSPAN33治療性mAb將具有避免所治 療的患者體內大多數的休止B細胞耗竭的重要優勢。
[0194] TSPAN33表達的其他部位
[019引TSPAN33先前被報道為Penumbra(原成紅細胞nu膜），運是因為它最初被鑒定為在 骨髓中的小紅細胞祖細胞群體中表達的分子[14]。鑒于運種表達模式，它被描述成在造血 中起作用。Tspan33^/-小鼠已有所描述[14]并且它們中的一些在3個月大時產生異常的紅細 胞。獲得性純紅細胞再生障礙性貧血是人類的一種相關的病況，其中患者缺少成紅細胞并 且根據病因，可能是自限性的[63]。運些觀測結果表明在人類中暫時抑制TSPAN33可能有受 限的或可管理的副作用。
[0196] 在使用抗TSPAN33 mAb作為人類治療劑時另一可能的并發癥是它在腎臟中的表 達。然而，它在那里的表達模式表明運將不構成顯著的障礙，運是因為Tspan33不在腎小球 中表達（圖8B)，而相反由近曲小管和遠曲小管中的上皮細胞表達（圖8B-8C)。通常由于尺寸 排阻而阻止抗體到達運些部位，運是因為只有更小分子量的蛋白質（如白蛋白（約67 KD)或 血紅蛋白（約68 KD))可滲透穿過腎小球屏障[64]。在腎臟的上皮細胞的頂面和顆粒中觀測 到TSPAN33蛋白質的表達并且運些細胞設及分泌和吸收小蛋白質、離子、W及有機溶質（葡 萄糖和氨基酸），運表明TSPAN33在尿液濾過期間可能參與囊泡運輸和/或信號轉導[12]。此 夕h已經報道，腎臟上皮細胞對基于生物的細胞毒性劑無感受性并且腎細胞癌還對ADCC(抗 體依賴性細胞毒性)具有抗性[6引。最終，已經報道，Tspan33-/-小鼠是可存活的并且能繁殖 的[14]，運表明Tspan33的不存在對腎臟功能造成有限的生理影響。
[0197] Tspan33在B細胞活化中的功能
[0198] 盡管Tspan33在B細胞中的功能當前是未知的，但是在B細胞活化后Tspan33表達被 強烈地誘導則有力地表明它可能設及B細胞信號轉導/活化（即CD9和CD81)、成熟/存活（即 CD37)、或抗原呈遞（即CD63)，運是因為其他B細胞表達的四旋蛋白已知參與運些過程[66-69]。
[0199] 總結
[0200] 我們得出的結論是TSPAN33代表活化和惡性B細胞的一種潛在重要的生物標志物 W及研發用于治療多種類型的B細胞淋己瘤(DLB化、BL、化）W及與病原性B細胞相關的顯示 出活化B細胞表型的一些自身免疫性疾病(SLE和RA)的治療性mAb的潛在祀標。
[0201 ] 實施例5
[0202] 在實施例中所提到的W下出版物W引用的方式并入本文:
[0203] [1]E.V.Rothenberg,J.E.Moore，M.A.Yui，Launching the T-cell-lineage developmental programme,Nat Rev Immunol，8(2008)9-21.
[0204] [2]R.R.Hardy,K.Hayakawa,B cell development pathways，Annu Rev Immunol, 19(2001)595-621.
[0205] [3]J.Zhu，H.Yamane，W.E.化ul，Differentiation of effector CD4 T cell populations(*),Annu Rev Immunol,28(2010)445-489.
[0206] [4]T. Suda，A. 0'Garra，I .MacNeil，M. Fischer，M.W. Bond, A. Zl Otnik， Identification of a novel thymocyte growth-promoting factor derived from B cell lymphomas,Cell Immunol,129(1990)228-240.
[0207] [5]J.D.Bouaziz,K.Yanaba,T.F.Tedder,Regulatory B cells as inhibitors of immune responses and inflammation,Immunol Rev,224(2008)201-214.
[0208] [6 ] S . I . Katz , D . Parker , J . L . Turk , B-ce11 suppression of delayed hypersensitivity reactions,Nature，251(1974)550-551.
[0209] [7]R.Korhonen，E.MoiIanen，Anti-CD20 antibody rituximab in the treatment of rheumatoid arthritis,Basic Clin Pharmacol Toxicol，106(2010)13- 21.
[0210] [8]M.D.Pescovitz,Rituximab,an anti-cd20 monoclonal antibody：history and mechanism of action,Am J Transplant,6(2006)859-866.
[0211] [9]J.Lee，A.Hever，D.Willhite，A.Zlotnik，P.Hevezi，Effects of 民NA degradation on gene expression analysis of human postmortem tissues，FASEB J， 19(2005)1356-1358.
[0212] [10]R.B.Roth，P.Hevezi，J. Le e，D.Willhite，S.M. Lechner，A. C. Foster， A.Zlotnik^Gene expression analyses reveal molecular relationships among 20 regions of 化e human CNS，Neurogenetics，7(2006)67-80.
[0213] [ll]P.A.Gerber，P.A.Hevezi，B.A.Buhren，C.Martinez，H.Schrumpf,M.Gasis， S.Grether-Beck，J.Krutmann，B.Homey，A.Zlotnik,Systematic identification and characterization of novel human skin-associated genes encoding membrane and secreted proteins，PI0S ONE,In Press(2〇l3).
[0214] [12]H.T.Maecker，S.C.Todd，S.Levy,The tetraspanin superfamily:molecular facilitators,FA沈B J，11(1997)428-442.
[0215] [13]A.B.van Spriel，K.L.Puls，M.Sofi，D.Pouniotis，H.Hochrein，Z.Orinska， K. P.Knobeloch，M.Plebanski，M.D.Wright，A regulatory role for CD37 in T cell proliferation,J Immunol，172(2004)2953-2961.
[0216] [14]M.J.Heikens，T.M.Cao，C.Morita，S.L.Dehart，S.Tsai,Penumbra encodes a novel tetr過sp過nin that is highly expressed in erythroid progenitors 過nd promotes effective eiy化ropoiesis，Blood，109(2007)3244-3252.
[0217] [15]J?Seita，D?Sahoo，D?J.Rossi，D?Bhattachaira，T?Serwold，M.A.Inlay， L. I.Ehrlich，J.W.Fathman，D.L.Dill，I.L.Weissman，Gene Expression Commons：an open platform for absolute gene expression profiling，PI0S 0NE，7(2012)e40321.
[0218] [ 16]之.又11，之.化1〇口，6.啡11，E.J.Pone，J.Zhang，T.Mai，L.M.Thomas,A.AI-Qahtani， C.A.White，S.民.Park，P.Steinacker，Z.Li，J.Yates,3rd，B.Herron，！.Otto,H.Zan，H.Fu， P.Casali，14-3-3 adaptor proteins recruit AID to -AGCT-3^-rich switch regions for class switch recombination，Nat Struct Mol Biol，17(2010)1124-1135.
[0219] [17化?J.Kim，C.Kanellopoulos-Langevin，R.M.Merwin，D.H.Sachs，R.Asofsky， Establishment and characterization of BALB/c lymphoma lines with B cell properties，J Immunol，122(1979)549-554.
[0220] [18]E.M.l'an，A.S.Cohen，J.F.F'ries，A.T.Masi，D. J.McShane，N.F.Rothfield， J. G.Schaller，N.Talal，民.J.Winchester，The 1982 revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus,Arthritis 民heum，25(1982)1271-1277.
[0221 ] [19]C.Bombardier，D.D.Gladman，M.B.Urowitz，D.Caron，C.HXhang，Derivation of the SLEDAI.A disease activity index for lupus patients.The Committee on Prognosis S化dies in SLE，Arthritis 加 eum，35(1992)630-640.
[0222] [20]A.M.Burldiardt，K.P.Tai，J.P.Flores-Guiterrez'N.Vilches-Cisneros， K. Kamdar，O.Barbosa-Quintana，R.Valle-Rios，P.A.Hevezi，J.Zuniga，M.Selman， A.J.OuelIette,A.Zlotnik^CXCLl7 is a mucosal chemokine elevated in idiopathic pulmonary fibrosis that exhibits broad antimicrobial activity，J Immunol，188 (2012)6399-6406.
[0223] [21]A.Schaffer，A.Cerutti，S. Shah，H.Zan，P.Casali,The evoIutionariIy conserved sequence upstream of the human Ig heavy chain S gamma 3 region is an inducible promoter：synergistic activation by CD40 ligand and IL-4 via cooperative NF-kappa B and STAT-6binding sites,J Immunol ,162(1999)5327-5336.
[0224] [22]S.R.Park，H.Zan，Z.Pal，J.Zhang,A?Al-Qahtani，E?J.Pone，Z.Xu，T.Mai， P.Casali，HoxC4 binds to the promoter of the cytidine deaminase AID gene to induce AID expression,class-switch DNA recombination and somatic hypermutation,Nat Immunol,10(2009)540-550.
[0225] [23]J?L.MaraviIlas-Montero，P?G.Gillespie'G.Patino-Lopez，S?Shaw， L. Santos-Argumedo,Myosin Ic participates in B cell cytoskeleton rearrangements，is recruited to the immunologic synapse,and contributes to antigen presentation,J Immunol，187(2011)3053-3063.
[0226] [24]E.C.Breen'S.K.Hussain'L.Magpantay，L.P.Jacobson，R.Detels， C.S.Rabkin，R.A.Kaslow，D.Variakojis，J.H.Bream，C.R.Rinaldo，R.F.Ambinder， O.Martinez_Maza，B-cell stimulatory cytokines and markers of immune activation are elevated several years prior to the diagnosis of systemic AIDS-associated non-Hodgkin B-cell lymphoma,Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，20(2011)1303-1314.
[0227] [25]A. J.De 民〇〇3,0.1(.]\1;[1'；[01^，1(.1.目(116爭3611，六.之丄過虹0;[^，1(^.1(0口601^7， M. M.Madeleine，L.Magpantay，O.Martinez-Maza，Markers of B-cell activation in relation to risk of non-Hodgkin lymphoma，Cancer 民es，72(2012)4733-4743.
[0228] [26]K.C.Anderson，M.P.Bates，B.L.Slaughenhoupt，G.S.Pinkus， S.F.Schlossman^L.M.Nadler,Expression of human B cell-associated antigens on leukemias and lymphomas：a model of human B cell differentiation,Blood,63 (1984)1424-1433.
[0229] [27]S.Gurbuxani，J.Anastasi，E.Hyjek，Diffuse large B-cell lymphoma- more than a diffuse collection of large B cells：an entity in search of a meaningful classification，Arch Pa化ol Lab Med，133(2009)1121-1134.
[0230] [28]P.McGowan，N.Nelles，J.Wimmer'D.Williams，J.Wen，M.Li，A.Ewton， C.Curry，Y.Zu，A.Sheehan，C.C.Chang，Differentiating between Burkitt lymphoma and CDlO+diffuse large B-cell lymphoma：the role of commonly used flow cytometry cell markers and the application of a multiparameter scoring system,Am J Clin Pathol，137(2012)665-670.
[0231] [29]N.Nakamura，H.Nakamine，J.Tamaru，S.Nakamura，！.Yoshino，K.Ohshima， M.Abe，The distinction between Burkitt lymphoma and diffuse large B-Cell lymphoma with c-myc rearrangement，Mod Pathol，15(2002)771-776.
[0232] [30]R.Kuppers，l'he biology of Hodgkin'S lymphoma,Nat Rev Cancer,9 (2009)15-27.
[0233] [31]P.Perez-Galan，M.Dreyling，A.Wiestner,Mantle cell lymphoma:biology， pathogenesis，and the molecular basis of treatment in the genomic era,Blood, 117(2011)26-38.
[0234] [32]H.Nyman，M.Jerkeman，M丄.Karjalainen-Lindsberg，A.H.Banham，S丄eppa， Prognostic impact of activated B-cell focused classification in diffuse large B-cell lymphoma patients treated with R-CH0P，Mod Pathol ,22(2009)1094-1101.
[0235] [33]Y.Suzuki,T.Yoshida，G.Wang，T?Togano，S?Miyamoto，K?Miyazaki， K.Iwabuchi，M.Nakayama，民.Horie，N.Ni itSU，Y.Sato，N.Nakamura,Association of CD20 levels with clinicopathological parameters and its prognostic significance for patients with DLB(X，Ann Hematol,91(2012)997-1005.
[0236] [34]T.Dorner，C.Giesecke，P.E丄ipsky,Mechanisms of B cell autoimmunity in SLE，Arthritis Res Ther，13(2011)243.
[0237] [35]P.E.Spronk'B.T.vd Gun,P.C.Limburg，C.G.KaIlenberg，B cell activation in clinically quiescent systemic lupus erythematosus(SLE)is related to immunoglobulin levels,but not to levels of anti-dsDNA，nor to concurrent T cell activation,Clin Exp Immunol ,93(1993)39-44.
[0238] [36]J.E.Gottenberg'C.Miceli-Richard，B.Ducot，P.Goupille，B.Combe， X.Mariette,Markers of B-Iymphocyte activation are el