腦膜炎奈瑟氏球菌組合物及其方法

腦膜炎奈瑟氏球菌組合物及其方法
【專利說明】腦膜炎奈瑟氏球菌組合物及其方法
[0001] 相關申請的交叉引用 本申請要求提交于2013年9月8日的美國臨時專利申請序列號61/875,068、提交于2014 年1月13日的美國臨時專利申請序列號61 /926，717和提交于2014年5月6日的美國臨時專利 申請序列號61/989,432的權益，所述申請W其整體通過引用并入本文。 發明領域
[0002] 本發明設及腦膜炎奈瑟氏球菌(化isseria meningitidis)組合物及其方法。
[0003] 發明背景 腦膜炎奈瑟氏球菌是可W引起脈毒癥、腦膜炎和死亡的革蘭氏陰性的有芙膜的細菌。 腦膜炎奈瑟氏球菌基于化學上和抗原性上不同的多糖芙膜可W歸類為至少12個血清群(包 括血清群A、B、C、2犯、山1、1(、1^、胖-135心、￥和2)。具有五種血清群(4、8、(：、￥和化35)的菌株導 致大部分疾病。
[0004] 腦膜炎球菌性腦膜炎是破壞性疾病，其可W在盡管使用抗生素的情況下在數小時 內殺死兒童和青年人。存在針對腦膜炎球菌血清群A、B、C、Y和W135和/或X的改進的免疫原 性組合物的需求。
[000引目前，針對廣泛的MnB分離株的有效的交叉保護性疫苗或組合物仍未市售。例如， 截至目前關于批準的針對血清群B疾病提供保護的多組分組合物的公開結果，尚未證明針 對表達異源LP2086 (f皿P)變體的多個菌株的直接殺菌免疫應答，至少在青少年中是運 樣。至多，截至目前的關于針對血清群B疾病提供保護的多組分組合物的公開結果似乎顯示 針對LP2086 (f皿P)變體的免疫原性，所述LP2086 (f皿P)變體與多組分組合物中的LP2086 (f皿P)變體同源。因此，當決定針對一組不同的或異源的腦膜炎球菌菌株(例如，代表不同 的地理區域）的現實疫苗覆蓋時，需要針對不同MnB分離株的有效的交叉反應疫苗或組合 物。
[0006] 發明概述 為了實現運些和其他需求，本發明設及腦膜炎奈瑟氏球菌組合物及其方法。
[0007] 在一方面，本發明設及組合物，其包括約120 iig/ml的包括SEQ ID NO: 1中所示的 氨基酸序列的第一脂質化的多膚、120 iig/ml的包括SEQ ID NO: 2中所示的氨基酸序列的 第二脂質化多膚、與所述第一多膚約2.8摩爾比的聚山梨醋80、與所述第二多膚約2.8摩爾 比的聚山梨醋80、約0.5 mg/ml侶、約10 mM組氨酸、和約150 mM氯化鋼。在一個實施方案中， 第一劑量為總體積中約0.5 ml。在一個實施方案中，組合物誘導針對腦膜炎奈瑟氏球菌血 清群B的殺菌免疫應答。在一個實施方案中，組合物誘導針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群A、C、 29E、H、I、K、L、W-135、X、Y或Z的殺菌免疫應答。在一個實施方案中，組合物不進一步包括與 SEQ ID NO: 1具有少于100%序列同一性的多膚。在一個實施方案中，組合物不進一步包括 與SEQ ID NO: 2具有少于100%序列同一性的多膚。在一個實施方案中，第一多膚具有總計 258個氨基酸。在一個實施方案中，第二多膚具有總計261個氨基酸。在一個實施方案中，組 合物誘導運樣的血清免疫球蛋白的殺菌效價，所述殺菌效價為在接受第一劑量后的人中比 在接受第一劑量前的人中的血清免疫球蛋白的殺菌效價高至少2倍，其中殺菌效價中的所 述增加在相同條件下在血清殺菌測定中使用人補體來測量。在一個實施方案中，第一脂質 化多膚由SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列組成。在一個實施方案中，第二脂質化多膚由SEQ ID N0:2所示的氨基酸序列組成。
[0008] 在另一方面，本發明設及在人中誘導針對腦膜炎奈瑟氏球菌的免疫應答的方法。 所述方法包括向人施用第一劑量和第二劑量的有效量的組合物，所述組合物包括120 yg/ ml的包括SEQ ID NO: 1中所示的氨基酸序列的第一脂質化的多膚、120 μg/ml的包括SEQ ID NO: 2中所示的氨基酸序列的第二脂質化多膚、與所述第一多膚2.8摩爾比的聚山梨醋 80、與所述第二多膚2.8摩爾比的聚山梨醋80、0.5 111肖/1111侶、10 11^組氨酸、和150 11^氯化 鋼。在一個實施方案中，組合物的劑量具有0.5 ml的總體積。在一個實施方案中，人至多施 用兩個劑量的組合物。在一個實施方案中，人不進一步施用加強劑量的組合物。在一個實施 方案中，人施用第=劑量的組合物。在一個實施方案中，第=劑量后人不進一步施用加強劑 量的組合物。在一個實施方案中，人不進一步施用第四劑量的組合物。在一個實施方案中， 第=劑量在第一劑量后約6個月的時期內施用給人。在一個實施方案中，第二劑量在第一劑 量后至少30天施用。在一個實施方案中，方法進一步包括施用第=劑量的組合物，其中所述 第=劑量在第二劑量后至少90天施用。在一個實施方案中，組合物誘導運樣的血清免疫球 蛋白的殺菌效價，所述殺菌效價為在接受第一劑量后的人中比在接受第一劑量前的人中的 血清免疫球蛋白的殺菌效價高至少2倍，當在相同條件下在血清殺菌測定中使用人補體來 測量時。在一個實施方案中，免疫應答針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B亞家族A菌株(其與表 達A05的腦膜炎奈瑟氏球菌菌株異源)是殺菌的。在一個實施方案中，免疫應答針對腦膜炎 奈瑟氏球菌血清群B亞家族B菌株(其與表達BOl的腦膜炎奈瑟氏球菌菌株異源)是殺菌的。 在一個實施方案中，免疫應答針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B亞家族A菌株(其與腦膜炎奈 瑟氏球菌菌株M98250771異源)是殺菌的。在一個實施方案中，免疫應答針對腦膜炎奈瑟氏 球菌血清群B亞家族B菌株(其與腦膜炎奈瑟氏球菌菌株CDC1127異源)是殺菌的。在一個優 選的實施方案中，免疫應答針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B亞家族B菌株(其與腦膜炎奈瑟 氏球菌菌株CDC1573異源)是殺菌的。在一個實施方案中，第一多膚具有總計258個氨基酸。 在一個實施方案中，第二多膚具有總計261個氨基酸。在一個實施方案中，第一脂質化多膚 由SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列組成。在一個實施方案中，第二脂質化多膚由SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列組成。
[0009] 在一方面，本發明設及組合物，其包括60 iig的包括SEQ ID NO: 1中所示的氨基酸 序列的第一脂質化的多膚、60 iig的包括SEQ ID NO: 2中所示的氨基酸序列的第二脂質化 多膚、與所述第一多膚2.8摩爾比的聚山梨醋80、與所述第二多膚2.8摩爾比的聚山梨醋80、 0.5 mg/ml侶、10 mM組氨酸、和150 mM氯化鋼，其中所述組合物具有約0.5 ml的總體積。
[0010] 在一個實施方案中，組合物誘導針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B亞家族A菌株(其 與表達A05的腦膜炎奈瑟氏球菌菌株異源）的殺菌免疫應答。在一個實施方案中，組合物誘 導針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B亞家族B菌株(其與表達BOl的腦膜炎奈瑟氏球菌菌株異 源）的殺菌免疫應答。在一個實施方案中，組合物誘導運樣的血清免疫球蛋白的殺菌效價， 所述殺菌效價為在接受第一劑量后的人中比在接受第一劑量前的人中的血清免疫球蛋白 的殺菌效價高至少2倍，當在相同條件下在血清殺菌測定中使用人補體來測量時。在一個實 施方案中，組合物不進一步包括與SEQ ID NO: 2具有少于100%序列同一性的多膚。在一個 實施方案中，組合物不進一步包括與SEQ ID N0:2具有少于100%序列同一性的多膚。在一 個實施方案中，第一多膚具有總計258個氨基酸。在一個實施方案中，第二多膚具有總計261 個氨基酸。在一個實施方案中，第一脂質化多膚由SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列組成。在 一個實施方案中，第二脂質化多膚由SEQ ID N0:2所示的氨基酸序列組成。
[0011] 附圖簡述 圖1 一實現hSBA效價 > 化09的受試者比例。hSBA =使用人補體的血清殺菌測定;LLOQ = 定量下限。
[0012] 圖2-用rLP2086免疫后實現hSBA效價中針對普林斯頓大學爆發菌株和個別人個 體的UCSB爆發菌株的4x升高的受試者的百分比（研究B1971012-描述于實施例5、實施例 6)。在臨床研究B1971012中用二價rLP2086免疫的9個人受試者的血清樣品在探索性hSBA中 使用來自普林斯頓大學和來自UCSB的MnB爆發菌株進行評價。參見實施例9。
[001引序列標識符 SEQ ID NO: 1表示重組腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B，2086變體A05多膚抗原的氨基酸序 列。
[0014] SEQ ID NO: 2表示重組腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B，2086變體BOl多膚抗原的氨基 酸序列。
[001引 SEQ ID NO:3表示在沈Q ID NO: 1和沈Q ID NO: 2的位置1-4處的氨基酸殘基。
[0016] 沈Q ID N0:4表示重組奈瑟氏球菌亞家族A LP2086多膚(rLP2086) (A05)多膚抗 原的N末端的氨基酸序列。
[0017] SEQ ID N0:5表示奈瑟氏球菌亞家族A LP2086 M98250771多膚(A05)多膚抗原的N 末端的氨基酸序列。
[0018] SEQ ID NO:6表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體B153的氨基酸序列。
[0019] SEQ ID NO:7表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體A04的氨基酸序列。
[0020] SEQ ID NO:8表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體A05的氨基酸序列。
[0021 ] SEQ ID NO:9表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體A12的氨基酸序列。
[0022] SEQ ID NO: 10表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體A22的氨基酸序列。
[0023] SEQ ID NO: 11表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體B02的氨基酸序列。
[0024] SEQ ID NO: 12表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體B03的氨基酸序列。
[00巧]SEQ ID NO: 13表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體B09的氨基酸序列。
[0026] SEQ ID NO: 14表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體B22的氨基酸序列。
[0027] SEQ ID NO: 15表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體B24的氨基酸序列。
[0028] SEQ ID NO: 16表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體B44的氨基酸序列。
[0029] SEQ ID NO: 17表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體B16的氨基酸序列。
[0030] SEQ ID NO: 18表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體A07的氨基酸序列。
[0031 ] SEQ ID NO: 19表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體A19的氨基酸序列。
[0032] SEQ ID NO:20表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體A06的氨基酸序列。
[0033] SEQ ID NO:21表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體A15的氨基酸序列。
[0034] SEQ ID NO:22表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體A29的氨基酸序列。
[00巧]SEQ ID NO:23表示腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B,2086變體B15的氨基酸序列。
[0036] 發明詳述 本發明人令人驚奇地發現包括包含SEQ ID NO: 1中所示的氨基酸序列的第一脂質化 多膚和包含SEQ ID NO: 2中所示的氨基酸序列的第二脂質化多膚的組合物。組合物具有在 人中可接受的安全性概況且組合物令人驚奇地在人中引發針對至少超過兩種不同的腦膜 炎奈瑟氏球菌菌株的廣泛的交叉反應性殺菌免疫應答。
[0037] 本發明人進一步發現用異源LP2086 (因子H結合蛋白（f皿P))亞家族A和B疫苗的2 劑量施用時間表和3劑量施用時間表令人驚奇地在人受試者中W高比例產生針對來自腦膜 炎奈瑟氏球菌血清群B的測試菌株的> 8的hSBA效價。當相比于2劑量施用時間表時，3劑量 施用時間表可W提供在人中針對不同的MnB臨床菌株的最廣泛的保護。
[0038] 本發明人還令人驚奇地發現在同時施用rLP2086組合物和針對人乳頭狀瘤病毒 (HPV4)的四價免疫原性組合物后產生針對人乳頭狀瘤病毒和腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B的 強力的免疫應答。例如，同時施用rLP2086組合物和HPV4組合物產生至少針對表達甜BP(其 與rLP2086組合物中的那些f皿P異源）的腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B測試菌株的免疫應答。 此類異源測試菌株包括表達A22巧BP、A56 f皿P、B24 f皿P或B44 f皿P的野生型腦膜炎奈 瑟氏球菌血清群B菌株，其與rLP2086組合物中的円證P各自異源。參見W0/2012/032489、WO/ 2013/132452、美國專利公開號US20120093852和美國專利公開號US20130243807,其描述了 變體甜BP蛋白，尤其包括A22巧BP、A56 f皿P、B24 f皿P和B44 f皿P。運些參考文獻各自W 其整體通過引用并入。同時施用還令人驚奇地產生至少針對HPV 6型、11型、16型和/或18型 的免疫應答。同時施用rLP2086組合物和HPV4組合物后針對HPV型的免疫應答當相比于在不 存在rLP2086組合物的情況下由施用HPV4組合物產生的免疫應答時是不差的 (noninferior)。
[0039] 此外，本發明人令人驚奇地發現在同時施用rLP2086組合物和針對白喉、破傷風、 百日咳和脊髓灰質炎的組合物后產生針對白喉、破傷風、百日咳和脊髓灰質炎和腦膜炎奈 瑟氏球菌血清群B的強力的免疫應答。例如，同時施用rLP2086組合物和RE陽VAX組合物產生 至少針對表達巧BP(其與rLP2086組合物中的那些甜BP異源）的腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B 測試菌株的免疫應答。同時施用還令人驚奇地產生至少針對REPEVAX中9種抗原的免疫應 答：白喉、破傷風、百日咳類毒素、百日咳絲狀血凝素、百日咳百日咳桿菌粘附素、百日咳菌 毛凝集原（fimbrial agglutinogen)2 + 3型、脊髓灰質炎病毒1型、脊髓灰質炎病毒2型、脊 髓灰質炎病毒3型。同時施用rLP2086組合物和RE陽VAX組合物后針對RE陽VAX抗原的免疫應 答當相比于在不存在rLP2086組合物的情況下由施用REPEVAX組合物產生的免疫應答時是 不差的（noninferior)。
[0040] 此外，本發明人令人驚奇地發現rLP2086組合物誘導針對表達巧BP B153變體的 ST409腦膜炎奈瑟氏球菌的殺菌免疫應答。例如，在使用人補體的血清殺菌測定(hSBA)中發 現當接觸人二價rLP2086組合物免疫血清時，表達f皿P B153變體的菌株易于被殺滅。
[0041 ] 組合物和疫苗 在一方面，本發明設及針對腦膜炎奈瑟氏球菌的組合物。組合物包括具有SEQ ID NO: 1中所示的氨基酸序列的第一脂質化多膚和具有SEQ ID NO: 2中所示的氨基酸序列的第二 脂質化多膚。
[0042] 本發明人令人驚奇地發現誘導針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B的多個菌株的有效 的廣泛保護性免疫應答的單一腦膜炎奈瑟氏球菌多膚組分。因此，在一個實施方案中，組合 物不包括融合蛋白。在一個實施方案中，組合物不包括嵌合蛋白。在一個實施方案中，組合 物不包括雜合蛋白。在一個實施方案中，組合物不進一步包括膚片段。在另一實施方案中， 組合物不進一步包括不是f皿P的奈瑟氏球菌多膚。例如，在一個實施方案中，組合物不包括 PorA蛋白。在另一個實施方案中，組合物不包括化dA蛋白。在另一實施方案中，組合物不進 一步包括奈瑟氏球菌肝素結合抗原(NHBA)。在另一實施方案中，組合物不進一步包括奈瑟 氏球菌外膜囊泡(0MV)。在一個優選的實施方案中，除了第一多膚和第二多膚外，組合物不 進一步包括抗原。
[0043] 在另一方面，本發明人令人驚奇地發現衍生自至少兩種腦膜炎奈瑟氏球菌血清群 B菌株的多膚抗原誘導針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B的多個菌株的有效的廣泛保護性免 疫應答。因此，在一個實施方案中，組合物不進一步包括不是衍生自腦膜炎奈瑟氏球菌血清 群B亞家族A M98250771菌株和/或腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B亞家族B CDC1573菌株的多 膚。
[0044] 在一個實施方案中，組合物不進一步包括與SEQ ID NO: 1具有少于100%序列同一 性的多膚。在一個實施方案中，組合物不進一步包括與SEQ ID NO: 2具有少于100%序列同 一性的多膚。在一個實施方案中，組合物不進一步包括與SEQ ID NO: 1和/或SEQ ID NO: 2 的全長具有少于100%序列同一性的多膚。
[004引在一個實施方案中，組合物進一步包括聚山梨醋80、侶、組氨酸和氯化鋼。在一方 面，組合物包括約60 iig的包括SEQ ID NO: 1中所示的氨基酸序列的第一脂質化的多膚、約 60 iig的包括SEQ ID NO: 2中所示的氨基酸序列的第二脂質化多膚、與每一多膚2.8摩爾比 的聚山梨醋80、作為憐酸侶的0.5 mg侶/ml、10 mM組氨酸、和150 mM氯化鋼，其中所述組合 物優選具有約0.5 ml的總體積。
[0046] 在一方面，組合物包括約120 μg/ml的包括SEQ ID NO: 1中所示的氨基酸序列的 第一脂質化的多膚、約120 μg/ml的包括SEQ ID NO: 2中所示的氨基酸序列的第二脂質化 多膚、與每一多膚2.8摩爾比的聚山梨醋80、作為憐酸侶的0.5 mg侶/ml、10 mM組氨酸、和 150 mM氯化鋼。
[0047] 在進一步的方面，組合物包括約a)60 Jig的包括SEQ ID NO: 1中所示的氨基酸序 列的第一脂質化的多膚;b)60 iig的包括SEQ ID NO: 2中所示的氨基酸序列的第二脂質化 多膚;c)18 yg聚山梨醋80;d)250 yg侶;e)780 yg組氨酸，和;f)4380 yg氯化鋼。
[0048] 在一個示例性實施方案中，組合物包括約60 iig的由SEQ ID NO: 1中所示的氨基 酸序列組成的第一脂質化的多膚、約60 yg的由SEQ ID NO: 2中所示的氨基酸序列組成的 第二脂質化多膚、與第一脂質化多膚和與第二脂質化多膚2.8摩爾比的聚山梨醋80、0.5 mg/ml憐酸侶、10 mM組氨酸、和150 mM氯化鋼，其中所述組合物具有約0.5 ml的總體積。在 示例性的實施方案中，組合物是無菌等滲緩沖的液體懸浮液。在示例性的實施方案中，組合 物具有P冊.0。在示例性的實施方案中，第一多膚和第二多膚吸附在侶上。
[0049] 在一個實施方案中，組合物具有約0.5 ml的總體積。在一個實施方案中，組合物的 第一劑量具有約0.5 ml的總體積。"第一劑量"指在第0日施用的組合物的劑量。"第二劑量" 或"第=劑量"指在第一劑量后施用的組合物的劑量，其可W是或可W不是與所述第一劑量 相同的量。
[0050] 在使用第一劑量給人后，組合物是免疫原性的。在一個實施方案中，第一劑量為總 體積中約0.5 ml。
[0051] 組合物誘導運樣的血清免疫球蛋白的殺菌效價，所述殺菌效價為在接受第一劑量 后的人中比在接受第一劑量前的人中的血清免疫球蛋白的殺菌效價高至少1倍、優選高至 少2倍，當在相同條件下在使用人補體的血清殺菌測定化SBA)中測量時。
[0052] 殺菌效價或殺菌免疫應答為針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B。在優選的實施方案 中，殺菌效價或殺菌免疫應答為針對腦膜炎奈瑟氏球菌血清群B亞家族A菌株且針對腦膜炎 奈瑟氏球菌血清群B亞家族B菌株。最優選的，殺菌效價或殺菌免疫應答至少針對腦膜炎奈 瑟氏球菌血清群B亞家族B，BO1菌株。
[0053] 在一個實施方案中，組合物誘導運樣的血清免疫球蛋白的殺菌效價，所述殺菌效 價為在接受第一劑量的組合物后的人中比在接受所述劑量前的人中的血清免疫球蛋白的 殺菌效價高至少1倍、諸如例如，至少1.01倍、1.1倍、1.5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8 倍、9倍、10倍、11倍、12倍、13倍、14倍、15倍、或16倍，當在相同條件下在血清殺菌測定中使 用人補體來測量時。
[0054] 在一個實施方案中，組合物是免疫原性組合物。在一個實施方案中，組合物是用于 人的免疫原性組合物。在另一個實施方案中，組合物是疫苗。"疫苗"指包括抗原的組合物， 其含有誘導對于該抗原特異性的免疫應答的至少一種表位。疫苗可W通過皮下、經口、口 鼻、或鼻內施用途徑直接施用于受試者。優選地，肌內施用疫苗。在一個實施方案中，組合物 是人疫苗。在一個實施方案中，組合物是針對腦膜炎奈瑟氏球菌的免疫原性組合物。
[0055] 在一個實施方案中，組合物是液體組合物。在一個優選的實施方案中，組合物是液 體懸浮液組合物。在另一個優選的實施方案中，組合物不是凍干的。
[0056] 第一多膚 在一個實施方案中，組合物包括具有SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列的第一多膚。在一 個優選的實施方案中，組合物包括約60 iig的包含SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列的第一多 膚，其中所述組合物優選具有0.5 ml的總體積。在另一個實施方案中，組合物包括約120 y g/ml的包含SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列的第一多膚。多膚是來自腦膜炎奈瑟氏球菌菌 株M98250771的經修飾的因子H結合蛋白（円證P)。円證P的描述公開于W02012032489和美國專 利公開US 2012/0093852,其各自W其整體通過引用并入。多膚是在多膚的S個位置共價連 接的=種主要脂肪酸C16:0、C16:1和C18:l的N末端脂質化的。第一多膚包括總計258個氨基 酸。
[0057] 第一多膚包括在所述多膚的N末端區域引入的兩個修飾，當相比于來自腦膜炎奈 瑟氏球菌菌株M98250771的對應野生型序列時。第二位置的甘氨酸作為引入克隆位點的結 果而加入。第二修飾包括缺失四個氨基酸。因此，在一個實施方案中，第一多膚包括在N末端 的C-G-S-S序列（SEQ ID NO: 3)。參見沈Q ID NO: 1，前四個氨基酸殘基。
[0058] 第一多膚序列和野生型奈瑟氏球菌序列之間的N末端序列差異如下。因此，在一個 實施方案中，第一多膚包括SEQ ID N0:1所示的氨基酸序列的至少前2、3、4、5、6、7、8、9、10、 11、12、13個或更多個氨基酸殘基。優選地，第一多膚包括SEQ ID NO: 1的至少前4個、更優選 至少前6個、且最優選至少前8個氨基酸殘基。
[0059] 在一個實施方案中，第一多膚包括SEQ ID NO: I所示的氨基酸序列。在一個實施方 案中，第一多膚具有總計258個氨基酸。在一個實施方案中，第一多膚不包括與SEQ ID NO: 1 具有少于100%序列同一性的氨基酸序列。在另一個實施方案中，第一多膚由SEQ ID NO: 1 所示的氨基酸序列組成。在另一個實施方案中，第一多膚包括氨基酸序列KDN。參見例如， SEQ ID NO: 1的氨基酸殘基73-75。在另一個實施方案中，第一多膚在多膚的N末端包括SEQ ID N0:3所示的氨基酸序列。在另一個實施方案中，第一多膚在多膚的N末端包括SEQ ID NO: 4所示的氨基酸序列。
[0060] 在優選的實施方案中，第一多膚使用本領域已知的標準技術在重組宿主細胞中容 易地表達。在另一個優選的實施方案中，第一多膚包括SEQ ID NO: 1的N和/或C結構域上的 殺菌表位。在一個實施方案中，第一多膚包括SEQ ID NO: 1中所示的氨基酸序列的至少前4、 5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、 32、33、34、