一種益生菌鹽藻片的制備方法
【專利摘要】本發明公開一種益生菌鹽藻片的制備方法，包括以下步驟：1)將用于保健食品的益生菌接種到液體發酵培養基中，厭氧培養、離心分離，除去上清，收集益生菌菌體；2)用無菌純化水重懸收集的益生菌菌體，獲得益生菌懸液；3)將鹽藻粉、木糖醇、甘露醇、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、聚乙烯吡咯烷酮和阿斯巴甜充分混合，粉碎后過篩，得到鹽藻片粗粉；4)鹽藻片粗粉加入益生菌懸液，將鹽藻片粗粉與益生菌懸液混合后制粒，干燥，得到中間顆粒；5)將硬脂酸鎂和二氧化硅與中間顆粒混勻，然后壓片，得到益生菌鹽藻片。
【專利說明】
一種益生菌鹽藻片的制備方法
技術領域
[0001] 本發明涉及生物制品技術領域，尤其涉及一種益生菌鹽藻片的制備方法。
【背景技術】
[0002] 鹽藻又名杜氏藻，杜氏藻屬（Dunaliella)屬于綠藻門（Chlorophyta)，團藻目 (Vovocales)杜氏藻科(DunalielIaceae)。杜氏藻為單細胞浮游微藻，細胞外無纖維素構成 的細胞壁，僅被一層薄而富有彈性的膜包被。杜氏鹽藻的耐鹽性(NaCL濃度高于30%)和對 pH的耐受范圍極其廣泛，可在pH5-l 1的范圍內生長，最適的NaCl濃度為22% ;逐光、耐強酸 強堿、耐高寒(-27 °C)和酷熱(+53 °C)。
[0003] 杜氏藻灰分含量低于其他綠藻，蛋白質和脂類含量則較高。鹽藻多糖是鹽藻所含 有一系列具有生物功能活性的多糖的總稱，其具有抗病毒、抗腫瘤和抗炎癥的功;杜氏鹽藻 還含有相當數量的葉綠素，具有清除體內藥物殘留的毒素、重金屬和造血功能。以克為單 位，鹽藻算得上是地球上營養密度最高的食品之一;在自然的狀態下，每個鹽藻細胞可以為 人體提供全面而平衡的維生素、礦物質和植物營養素（胡蘿卜素）；它是最小的消化單位之 一，相對于螺旋藻、小球藻等微藻而言，吸收率極高。可以說，鹽藻是理想的天然優質保健食 品和藥品原料。
[0004] 目前關于益生菌、鹽藻為原料制備生物制品的報導和文獻資料尚少。
【發明內容】
[0005] 本發明提供一種對設備要求低、簡便易行，所制備的鹽藻片活菌數高、菌活性保存 時間較長的益生菌鹽藻片的制備方法。
[0006] 本發明通過以下技術手段實現上述技術效果的：一種益生菌鹽藻片的制備方法， 包括以下步驟：
[0007] 1)將用于保健食品的益生菌接種到液體發酵培養基中，在30°C~45°C溫度下厭氧 培養12h~36h，然后將發酵菌液在1~10°C下離心分離，除去上清，收集益生菌菌體；
[0008] 所述的發酵培養基是以質量濃度為5%~20%的液體乳清培養基為基礎培養基， 再添加酵母浸粉至其質量濃度為1 %~10 %，添加蛋白胨至其質量濃度為1 %~5 %，添加葡 萄糖至其質量濃度為2%~8% ;
[0009] 2)用無菌純化水重懸收集的益生菌菌體，獲得益生菌懸液；
[0010] 3)以質量份數計，將20~40份的鹽藻粉、2~5份的木糖醇、1~5份的甘露醇、5~20 份羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、2~3份的聚乙烯吡咯烷酮和1~2份阿斯巴甜充分混 合，粉碎后過80目篩，得到鹽藻片粗粉；
[0011] 4)以2~Sg鹽藻片粗粉加入ImL益生菌懸液的比例，將鹽藻片粗粉與益生菌懸液混 合后制粒，然后在45 °C~70°C下干燥，得到中間顆粒；
[0012] 5)將0.03~0.3份的硬脂酸鎂和0.4~0.8份的二氧化硅與97~100份中間顆粒混 勻，然后壓片，得到益生菌鹽藻片。
[0013] 本發明通過不同益生菌和干燥溫度的組合，可達到在干燥過程中益生菌的損失最 小，干燥后有效活菌數存活率可達90%以上。通過不同營養成分和添加劑的組合，不但能使 口味適應不同年齡段的人群，還能更易壓片，劑型更好。
[0014]優選地，所述的益生菌接種到發酵培養基的接種量為液體發酵培養基體積的1~ 5%〇
[0015] 優選地，所述的培養時間以產芽孢菌體產芽孢率大于90%計，為16-36小時。
[0016] 優選地，所述的培養時間以非產芽孢菌體培養時間為12-24小時。
[0017] 優選地，所述的1~10°C下離心分離的轉速為2000~7000r/min，離心時間為5~ 20min〇
[0018] 優選地，所述的益生菌懸液中活性益生菌達1.0X101Qcfu/mL以上。
[0019]優選地，所述保健食品的益生菌包括酪梭酸菌、凝結芽孢桿菌、保加利亞乳桿菌、 嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、雙歧桿菌的一種
[0020] 本發明的優點在于:該方法對設備要求低、簡便易行，所制備的鹽藻片活菌數高、 菌活性保存時間較長。
[0021] 本發明的有益效果在于:本發明采用益生菌、鹽藻粉及多種調味劑、添加劑的科學 配比，使益生菌的存活期更長。通過益生菌在腸道內的定植，逐步恢復重建腸道菌群，不僅 對防治消化吸收不良、潰瘍性結腸炎、克羅恩病、抗生素相關性腹瀉及偽膜性腸炎有良好的 效果，還對肝纖維化、肝硬化等慢性肝病的防治及輔助治療腫瘤，消除放化療對腸黏膜的損 傷，恢復腸屏障功能有很好效果。
【具體實施方式】 [0022] 實施例1
[0023 ]益生菌鹽藻片的制備方法，包括以下步驟：
[0024] 1)將酪梭酸菌，以4%的體積比例接種到液體發酵培養基中，在35°C溫度下厭氧培 養30h，得到芽孢率在90%以上的菌體；
[0025]然后將發酵培養獲得的菌液在2~6°C下離心分離(轉速為3000r/min，離心時間為 15min)，除去上清，收集益生菌菌體；
[0026]所述的液體發酵培養基是以質量濃度為8 %的液體乳清培養基為基礎培養基，再 添加酵母浸粉至其質量濃度為2%，添加蛋白胨至其質量濃度為2% ;添加葡萄糖至其質量 濃度為4 %
[0027] 2)以質量份數計，將30份的鹽藻粉、4份的木糖醇、2份的甘露醇、8份羥丙基甲基纖 維素鄰苯二甲酸酯、2份的聚乙烯吡咯烷酮和1份阿斯巴甜充分混合，粉碎后過80目篩，得到 鹽藻片粗粉；
[0028] 3)以4g鹽藻粉加入ImL益生菌懸液的比例，將鹽藻片粗粉與益生菌懸液混合后制 粒，然后在60°C下干燥，得到中間顆粒；
[0029] 4)將0.05份的硬脂酸鎂和0.45份的二氧化硅與98份中間顆粒混勻，然后壓片，得 到益生菌鹽藻片。
[0030] 實施例2
[0031] 益生菌鹽藻片的制備方法，包括以下步驟：
[0032] 1)將凝結芽孢桿菌，以3%的體積比例接種到發酵培養基中，在37°C溫度下厭氧培 養24h，得到芽孢率在90%以上的菌體；
[0033]然后將發酵培養獲得的菌液在2~6°C下離心分離(轉速為3000r/min，離心時間為 15min)，除去上清，收集益生菌菌體；
[0034] 所述的液體發酵培養基是以質量濃度為7 %的液體乳清培養基為基礎培養基，再 添加酵母浸粉至其質量濃度為2%，添加蛋白胨至其質量濃度為3 % ;添加葡萄糖至其質量 濃度為2 %
[0035] 2)以質量份數計，將35份的鹽藻粉、4份的木糖醇、1份的甘露醇、5份羥丙基甲基纖 維素鄰苯二甲酸酯、1份的聚乙烯吡咯烷酮和1份阿斯巴甜充分混合，粉碎后過80目篩，得到 鹽藻片粗粉；
[0036] 3)以5g鹽藻粉加入ImL益生菌懸液的比例，將鹽藻片粗粉與益生菌懸液混合后制 粒，然后在65 °C下干燥，得到中間顆粒；
[0037] 4)將0.05份的硬脂酸鎂和0.45份的二氧化硅與97份中間顆粒混勻，然后壓片，得 到益生菌鹽藻片。
[0038] 實施例3
[0039 ]益生菌鹽藻片的制備方法，包括以下步驟：
[0040] 1)將雙歧桿菌，以5%的體積比例接種到液體發酵培養基中，在45°C溫度下厭氧培 養36h，然后將發酵培養獲得的菌液在2~6°C下離心分離(轉速為7000r/min，離心時間為 20min)，除去上清，收集益生菌菌體；
[0041 ]所述的液體培養基是以質量濃度為20 %的液體乳清培養基為基礎培養基，再添加 酵母浸粉至其質量濃度為10%，添加蛋白胨至其質量濃度為5% ;添加葡萄糖至其質量濃度 為8% ;
[0042] 2)用無菌純化水重懸收集的益生菌菌體，獲得益生菌懸液；
[0043] 3)以質量份數計，將40份的鹽藻粉、5份的木糖醇、5份的甘露醇、20份羥丙基甲基 纖維素鄰苯二甲酸酯、3份的聚乙烯吡咯烷酮和2份阿斯巴甜充分混合，粉碎后過80目篩，得 到鹽藻片粗粉；
[0044] 4)以Sg鹽藻粉加入ImL益生菌懸液的比例，將鹽藻片粗粉與益生菌懸液混合后制 粒，然后在70°C下干燥，得到中間顆粒；
[0045] 5)將0.3份的硬脂酸鎂和0.45份的二氧化硅與99份中間顆粒混勻，然后壓片，得到 益生菌鹽藻片。
[0046] 實施例4
[0047] 益生菌鹽藻片的制備方法，包括以下步驟：
[0048] 1)將保加利亞乳桿菌，以1 %的體積比例接種到液體發酵培養基中，在30°C溫度下 厭氧培養12h;
[0049] 然后將發酵培養獲得的菌液在1°C下離心分離（轉速為2000r/min，離心時間為 5min)，除去上清，收集益生菌菌體；
[0050] 所述的液體培養基是以質量濃度為5%的液體乳清培養基為基礎培養基，再添加 酵母浸粉至其質量濃度為1%，添加蛋白胨至其質量濃度為1%;添加葡萄糖至其質量濃度 為2% ;
[0051] 2)用無菌純化水重懸收集的益生菌菌體，獲得益生菌懸液；
[0052] 3)以質量份數計，將20份的鹽藻粉、2份的木糖醇、1份的甘露醇、5份羥丙基甲基纖 維素鄰苯二甲酸酯、2份的聚乙烯吡咯烷酮和1份阿斯巴甜充分混合，粉碎后過80目篩，得到 鹽藻片粗粉；
[0053] 4)以2g鹽藻粉加入ImL益生菌懸液的比例，將鹽藻片粗粉與益生菌懸液混合后制 粒，然后在45 °C下干燥，得到中間顆粒；
[0054] 5)將0.03份的硬脂酸鎂和0.4份的二氧化硅與100份中間顆粒混勻，然后壓片，得 到益生菌鹽藻片。
[0055] 實施例5
[0056] 益生菌鹽藻片的制備方法，包括以下步驟：
[0057] 1)將嗜酸乳桿菌，以5%的體積比例接種到液體發酵培養基中，在45°C溫度下厭氧 培養24h;
[0058]然后將發酵培養獲得的菌液在10°C下離心分離(轉速為7000r/min，離心時間為 20min)，除去上清，收集益生菌菌體；
[0059]所述的液體培養基是以質量濃度為20 %的液體乳清培養基為基礎培養基，再添加 酵母浸粉至其質量濃度為10%，添加蛋白胨至其質量濃度為5% ;添加葡萄糖至其質量濃度 為8% ;
[0060] 2)用無菌純化水重懸收集的益生菌菌體，獲得益生菌懸液；
[0061] 3)以質量份數計，將40份的鹽藻粉、5份的木糖醇、5份的甘露醇、20份羥丙基甲基 纖維素鄰苯二甲酸酯、3份的聚乙烯吡咯烷酮和2份阿斯巴甜充分混合，粉碎后過80目篩，得 到鹽藻片粗粉；
[0062] 4)以Sg鹽藻粉加入ImL益生菌懸液的比例，將鹽藻片粗粉與益生菌懸液混合后制 粒，然后在70°C下干燥，得到中間顆粒；
[0063] 5)將0.3份的硬脂酸鎂和0.8份的二氧化硅與99份中間顆粒混勻，然后壓片，得到 益生菌鹽藻片。
[0064]各實施例益生菌鹽藻片成分如下：
[0066]以上所述，僅為本發明較佳實施例而已，故不能以此限定本發明實施的范圍，即依 本發明申請專利范圍及說明書內容所作的等效變化與修飾，皆應仍屬本發明專利涵蓋的范 圍內。
【主權項】
1. 一種益生菌鹽藻片的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 將用于保健食品的益生菌接種到液體發酵培養基中，在30°c~45°C溫度下厭氧培養 12h~36h，然后將發酵菌液在1~10°C下離心分離，除去上清，收集益生菌菌體； 所述的發酵培養基是以質量濃度為5%~20%的液體乳清培養基為基礎培養基，再添 加酵母浸粉至其質量濃度為1 %~10 %，添加蛋白胨至其質量濃度為1 %~5%，添加葡萄糖 至其質量濃度為2 %~8 %; 2) 用無菌純化水重懸收集的益生菌菌體，獲得益生菌懸液； 3) 以質量份數計，將20~40份的鹽藻粉、2~5份的木糖醇、1~5份的甘露醇、5~20份羥 丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、2~3份的聚乙烯吡咯烷酮和1~2份阿斯巴甜充分混合，粉 碎后過80目篩，得到鹽藻片粗粉； 4) 以2~8g鹽藻片粗粉加入lmL益生菌懸液的比例，將鹽藻片粗粉與益生菌懸液混合后 制粒，然后在45 °C~70°C下干燥，得到中間顆粒； 5) 將0.03~0.3份的硬脂酸鎂和0.4~0.8份的二氧化硅與97~100份中間顆粒混勻，然 后壓片，得到益生菌鹽藻片。2. 根據權利要求1所述的益生菌鹽藻片的制備方法，其特征在于，所述的益生菌接種到 發酵培養基的接種量為液體發酵培養基體積的1~5%。3. 根據權利要求1所述的益生菌鹽藻片的制備方法，其特征在于，所述的培養時間以產 芽孢菌體產芽孢率大于90%計，為16-36小時。4. 根據權利要求1所述的益生菌鹽藻片的制備方法，其特征在于，所述的培養時間以非 產芽孢菌體培養時間為12-24小時。5. 根據權利要求1所述的益生菌鹽藻片的制備方法，其特征在于，所述的1~10°C下離 心分離的轉速為2000~7000r/min，離心時間為5~20min。6. 根據權利要求1所述的益生菌鹽藻片的制備方法，其特征在于，所述的益生菌懸液中 活性益生菌達1.0 X 101()cfu/mL以上。7. 根據權利要求1所述的益生菌鹽藻片的制備方法，其特征在于，所述保健食品的益生 菌包括酪梭酸菌、凝結芽孢桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿 菌、雙歧桿菌的一種。
【文檔編號】A61K9/20GK105963326SQ201610418416
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年6月13日
【發明人】郭亮, 王盛洲, 何學松, 彭繼博, 肖彩云, 韓菲, 錢圓
【申請人】合肥賽為智慧醫療有限公司