專利名稱：一種益生菌片的制備方法
技術領域：
本發明屬于保健食品/藥品技術領域，涉及益生菌保健產品，特別涉及一種益生 菌片的制備方法。
背景技術：
益生菌在工業、農業、醫藥、食品、飼料等與人類生活密切相關的重要領域中應用 價值很高。我國對益生菌用于保健食品和保健藥品的研究起步較晚，20世紀90年代起才 開始將雙歧桿菌用于各種保健食品中。目前市場上出現的益生菌保健產品劑型大多為膠囊 齊U，比如整腸生、麗珠腸樂、美常安、聚克、貝飛達、源首膠囊、佳士康等；其次為顆粒劑和散 齊U，比如媽咪愛、培菲康等、樂托爾、常樂康等；第三是片劑，如促菌生、乳酸菌素、金雙歧、思 連康、普樂拜爾等。這些益生菌產品的制備工藝是首先培養益生菌，再離心獲取菌體，再通過凍干或 噴霧干燥獲得菌粉，最后用此菌粉制備各種劑型產品。此類方法設備復雜昂貴、要求高、成 本高、規模化應用受限。
發明內容
本發明解決的技術問題在于提供一種益生菌片的制備方法，該方法簡便易行、設 備要求低、成本低，易規模化應用，而且制成的益生菌片當中活菌數高、菌體存活時間長。本發明是通過以下技術方案來實現一種益生菌片的制備方法，包括以下步驟1)將活化后的益生菌菌種包埋形成益生菌載體顆粒，然后在培養基中擴大培養， 使得益生菌在載體顆粒中生長繁殖，再將益生菌從載體顆粒中釋放，獲得密度達IO11CfuAil 以上的益生菌懸液；2)以質量份數計，將菊芋原粉150 300份、甘露醇20 40份、羥丙基甲基纖維 素鄰苯二甲酸酯50 200份和羥丙基甲基纖維素20 30份充分混合；再按照1. 5 6g 菊芋原粉加入Iml益生菌懸液的比例，加入益生菌懸液混合，然后制粒，在40°C 55°C下干 燥，得到中間顆粒；3)以質量份數計，將滑石粉0. 5 2份、硬脂酸鎂4. 5 8份與中間顆粒混勻，經 過壓片得到益生菌片。所述的益生菌為乳酸菌或雙歧桿菌。所述的益生菌懸液的制備為1)菌種活化將益生菌以lml/lOOml的接種量接入到乳清粉液體培養基中，35°C 45°C培養 12 24h后，得到活化的益生菌菌種；2)菌體包埋將濃度為Ig 4g/100ml的海藻酸鈉溶液，經118°C 121°C滅菌15 25min后與活化的益生菌菌種溶液以1 1體積比混合，然后滴加到足量的已滅菌的0. lmol/L CaCl2溶液中，固化0. 5 Ih后，將形成包埋的益生菌載體顆粒濾出；3)擴大培養以6 20g/100ml的接種量，將益生菌載體顆粒接入到含有0. 5 5g/100ml CaCO3 的乳清粉液體培養基中，35°C 45°C培養12 24h后濾出益生菌載體顆粒，并用無菌水沖 洗；4)菌體釋放將益生菌載體顆粒置于濃度為1 4g/100ml的檸檬酸鈉溶液中，35°C 45°C放置 0. 5 2h后，獲得益生菌懸液，其中益生菌密度達IollCfuAil以上。所述的乳清粉液體培養基是在IOOml牛乳中加入3 7g乳清粉，加熱使其溶解而 得到。與現有技術相比，本發明具有以下有益的技術效果本發明通過將益生菌包埋在海藻酸鈣載體中(由海藻酸鈉與CaCl2反應而得)，讓 益生菌在益生菌載體顆粒中生長繁殖(載體中益生菌數量可達lO^cfu/g)，在檸檬酸鈉溶 液中釋放獲得高密度益生菌菌懸液，然后再將制得的高密度菌懸液直接作為粘合劑與主、 輔料混合、造粒、壓片。本發明無需采用益生菌培養，離心獲取菌體，制備菌粉，最后再用菌粉制備各種劑 型的方法，此法簡便易行、設備要求低、成本低，易規模化應用。本發明在片劑中加入了菊芋粉作為益生菌的增菌劑和活性保護劑，保證了貯存期 間菌的活性。制成的益生菌片劑中在0 3個月益生菌活菌數在101(lCfU/g以上，第4 5 個月益生菌活菌數在109cfu/g以上，在6 9個月益生菌活菌數在108cfu/g以上，在10 12個月益生菌活菌數在107cfu/g以上。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細描述，所述是對本發明的解釋而不是 限定。益生菌具體選擇衛生部辦公廳公布的《可用于食品的菌種名單》中的菌種，包括乳 酸菌和雙歧桿菌。益生菌所用的培養基為乳清粉液體培養基在IOOml牛乳中加入3 7g乳清粉， 加熱使其溶解即得。壓片制劑用主、輔料菊芋原粉將菊芋干粉碎，過80目篩，制成得到菊芋原粉；其他所用原料均為壓片 制劑常規用料。實施例1一種益生菌片的制備方法，具體包括以下步驟1)益生菌懸液的制備菌種活化將乳酸菌以lml/lOOml的接種量接入乳清粉液體培養基中，35°C培養 24h后，得到活化的益生菌菌種；菌體包埋將lg/100ml的海藻酸鈉溶液，經118°C 121°C滅菌15min后與活化的益生菌菌種溶液以1 1體積比混合，然后滴加到足量的已滅菌的0. lmol/L &(12溶液中， 固化0. 5h后，將形成包埋的益生菌載體顆粒(含乳酸菌)濾出；擴大培養以6g/100ml的接種量，將益生菌載體顆粒接入到含有0. 5g/100ml CaCO3的乳清粉液體培養基中，35°C培養24h后濾出益生菌載體顆粒，并用無菌水沖洗； 菌體釋放將益生菌載體顆粒置于1 4g/100ml的檸檬酸鈉溶液中，35°C放置2h 后，獲得益生菌懸液，其中益生菌密度達IO11CfuAil以上。2)以質量份數計，按將菊芋原粉150g、甘露醇20g、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸 酯50g和羥丙基甲基纖維素20g的比例充分混合；再按照1. 5g菊芋原粉加入Iml益生菌懸 液的比例，加入IOOml益生菌懸液混合，然后制粒，在40°C 55°C下干燥，得到中間顆粒；3)以質量份數計，將滑石粉0. 5g、硬脂酸鎂4. 5g與干燥后所得的中間顆粒混勻， 經過壓片得到益生菌片。實施例2一種益生菌片的制備方法，具體包括以下步驟1)益生菌懸液的制備菌種活化將雙歧桿菌以lml/lOOml的接種量接入乳清粉液體培養基中，45°C厭 氧培養12h后，得到活化的益生菌菌種；菌體包埋將4g/100ml的海藻酸鈉溶液，經120°C滅菌25min后與活化的益生菌 菌種溶液以1 1體積比混合，然后滴加到足量的已滅菌的0. lmol/LCaCl2溶液中，固化Ih 后，將形成包埋的益生菌載體顆粒(含雙歧桿菌)濾出；擴大培養以20g/100ml的接種量，將益生菌載體顆粒接入到含有5g/100ml CaCO3 的乳清粉液體培養基中，45°C培養12h后濾出益生菌載體顆粒，并用無菌水沖洗；菌體釋放將益生菌載體顆粒置于4g/100ml的檸檬酸鈉溶液中，45°C放置0. 5h 后，獲得益生菌懸液，其中益生菌密度達IO11CfuAil以上。2)以質量份數計，按將菊芋原粉300g、甘露醇40g、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸 酯200g和羥丙基甲基纖維素30g的比例充分混合；再按照6g菊芋原粉加入Iml益生菌懸 液的比例，加入50ml益生菌懸液混合，然后制粒，在40°C 55°C下干燥，得到中間顆粒；3)以質量份數計，將滑石粉2g、硬脂酸鎂8g與干燥后所得的中間顆粒混勻，經過 壓片得到益生菌片。實施例3一種益生菌片的制備方法，具體包括以下步驟1)益生菌懸液的制備菌種活化將乳酸菌以lml/lOOml的接種量接入乳清粉液體培養基中，40°C培養 20h后，得到活化的益生菌菌種；菌體包埋將3g/100ml的海藻酸鈉溶液，經118°C滅菌20min后與活化的益生菌 菌種溶液以1 1體積比混合，然后滴加到足量的已滅菌的0. lmol/LCaCl2溶液中，固化 0. 8h后，將形成包埋的益生菌載體顆粒濾出；擴大培養以10g/100ml的接種量，將益生菌載體顆粒接入到含有3g/100ml CaCO3 的乳清粉液體培養基中，40°C培養20h后濾出益生菌載體顆粒，并用無菌水沖洗；菌體釋放將益生菌載體顆粒置于3g/100ml的檸檬酸鈉溶液中，40°C放置Ih后，獲得益生菌懸液，其中益生菌密度達IO11CfuAil以上。2)以質量份數計，按將菊芋原粉200g、甘露醇30g、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸 酯IOOg和羥丙基甲基纖維素25g的比例充分混合；再按照4g菊芋原粉加入Iml益生菌懸 液(活化的益生菌菌種)的比例，加入50ml益生菌懸液混合，然后制粒，在40°C 55°C下 干燥，得到中間顆粒；3)以質量份數計，將滑石粉lg、硬脂酸鎂6g與干燥后所得的中間顆粒混勻，經過 壓片得到益生菌片。實施例4一種益生菌片的制備方法，具體包括以下步驟 1)益生菌懸液的制備菌種活化將雙歧桿菌以lml/lOOml的接種量接入乳清粉液體培養基中，38°C厭 氧培養16h后，得到活化的益生菌菌種；菌體包埋將2. 5g/100ml的海藻酸鈉溶液，經120°C滅菌15min后與活化的益生 菌菌種溶液以1 1體積比混合，然后滴加到足量的已滅菌的0. lmol/L CaCl2溶液中，固 化0. 8h后，將形成包埋的益生菌載體顆粒濾出；擴大培養以15g/100ml的接種量，將益生菌載體顆粒接入到含有3. 5g/100ml CaCO3的乳清粉液體培養基中，38°C培養16h后濾出益生菌載體顆粒，并用無菌水沖洗；菌體釋放將益生菌載體顆粒置于2. 5g/100ml的檸檬酸鈉溶液中，36°C放置1. 5h 后，獲得益生菌懸液，其中益生菌密度達IO11CfuAil以上。2)以質量份數計，按將菊芋原粉250g、甘露醇36g、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸 酯150g和羥丙基甲基纖維素24g的比例充分混合；再按照2. 5g菊芋原粉加入Iml益生菌 懸液的比例，加入IOOml益生菌懸液混合，然后制粒，在50°C下干燥，得到中間顆粒；3)以質量份數計，將滑石粉1. Sg、硬脂酸鎂6. 6g與干燥后所得的中間顆粒混勻， 經過壓片得到益生菌片。實施例5一種益生菌片的制備方法，具體包括以下步驟1)益生菌懸液的制備菌種活化將乳酸菌以lml/lOOml的接種量接入乳清粉液體培養基中，42°C培養 18h后，得到活化的益生菌菌種；菌體包埋將2g/100ml的海藻酸鈉溶液，經120°C滅菌25min后與活化的益生菌 菌種溶液以1 1體積比混合，然后滴加到足量的已滅菌的0. lmol/LCaCl2溶液中，固化 0. 6h后，將形成包埋的益生菌載體顆粒濾出；擴大培養以12g/100ml的接種量，將益生菌載體顆粒接入到含有2g/100ml CaCO3 的乳清粉液體培養基中，42°C培養18h后濾出益生菌載體顆粒，并用無菌水沖洗；菌體釋放將益生菌載體顆粒置于2g/100ml的檸檬酸鈉溶液中，40°C放置0. 8h 后，獲得益生菌懸液，其中益生菌密度達IO11CfuAil以上。2)以質量份數計，按將菊芋原粉200g、甘露醇35g、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸 酯160g和羥丙基甲基纖維素28g的比例充分混合；再按照5g菊芋原粉加入Iml益生菌懸 液的比例，加入40ml益生菌懸液混合，然后制粒，在45°C下干燥，得到中間顆粒；
3)以質量份數計，將滑石粉1. Sg、硬脂酸鎂7.5g與干燥后所得的中間顆粒混勻， 經過壓片得到益生菌片。對于制備的益生菌片劑在0 12個月內檢測其包含益生菌活菌數的變化，具體 如表1所示在0 3個月益生菌活菌數在101(lCfU/g以上，第4 5個月益生菌活菌數在 109cfu/g以上，在6 9個月益生菌活菌數在108cfu/g以上，在10 12個月益生菌活菌 數在107cfu/g以上。可以看出隨著時間的延長，活菌數逐漸減少，在相當長的時間內仍能 夠保持較高的活菌數。表1益生菌片劑存儲期間活菌數變化表
權利要求
一種益生菌片的制備方法，其特征在于，包括以下步驟1)將活化后的益生菌菌種包埋形成益生菌載體顆粒，然后在培養基中擴大培養，使得益生菌在載體顆粒中生長繁殖，再將益生菌從載體顆粒中釋放，獲得密度達1011cfu/ml以上的益生菌懸液；2)以質量份數計，將菊芋原粉150～300份、甘露醇20～40份、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯50～200份和羥丙基甲基纖維素20～30份充分混合；再按照1.5～6g菊芋原粉加入1ml益生菌懸液的比例，加入益生菌懸液混合，然后制粒，在40℃～55℃下干燥，得到中間顆粒；3)以質量份數計，將滑石粉0.5～2份、硬脂酸鎂4.5～8份與中間顆粒混勻，經過壓片得到益生菌片。
2.如權利要求1所述的益生菌片的制備方法，其特征在于，所述的益生菌為乳酸菌或 雙歧桿菌。
3.如權利要求1所述的益生菌片的制備方法，其特征在于，所述的益生菌懸液的制備為1)菌種活化將益生菌以lml/lOOml的接種量接入到乳清粉液體培養基中，35°C 45°C培養12 24h后，得到活化的益生菌菌種；2)菌體包埋將濃度為Ig 4g/100ml的海藻酸鈉溶液，經118°C 121°C滅菌15 25min后與活 化的益生菌菌種溶液以1 1的體積比混合，然后滴加到足量的已滅菌的0. lmol/L CaCl2 溶液中，固化0. 5 Ih后，將形成包埋的益生菌載體顆粒濾出；3)擴大培養以6 20g/100ml的接種量，將益生菌載體顆粒接入到含有0. 5 5g/100ml CaCO3的乳 清粉液體培養基中，35°C 45°C培養12 24h后濾出益生菌載體顆粒，并用無菌水沖洗；4)菌體釋放將益生菌載體顆粒置于濃度為1 4g/100ml的檸檬酸鈉溶液中，35°C 45°C放置 0. 5 2h后，獲得益生菌懸液，其中益生菌密度達IollCfuAil以上。
4.如權利要求3所述的益生菌片的制備方法，其特征在于，所述的乳清粉液體培養基 是在IOOml牛乳中加入3 7g乳清粉，加熱使其溶解而得到。
全文摘要
本發明公開了一種益生菌片的制備方法，通過將益生菌包埋在海藻酸鈣載體中，讓益生菌在益生菌載體顆粒中生長繁殖(載體中益生菌數量可達1011cfu/g)，在檸檬酸鈉溶液中釋放獲得高密度益生菌菌懸液，然后再將制得的高密度菌懸液直接作為粘合劑與主、輔料混合、造粒、壓片。本發明無需采用益生菌培養，離心獲取菌體，制備菌粉，最后用此菌粉制備各種劑型的方法，此法簡便易行、設備要求低、成本低，易規模化應用。
文檔編號A23L1/29GK101843337SQ20101019365
公開日2010年9月29日 申請日期2010年6月7日 優先權日2010年6月7日
發明者呂嘉櫪, 袁秀麗, 馬強 申請人:陜西科技大學