專利名稱：N-保護的烯丙基甘氨酸酯的拆分方法
技術領域：
本發明涉及到N-保護的烯丙基甘氮酸酯的拆分方法，能制備得到N-保護的 光學純烯丙基甘氨酸，屬于酶在手性合成中的應用領域。
N-保護的烯丙基甘氨酸及酯是一類重要的中間體，廣泛用于很多重要的蛋 白酶抑制劑和其它手性藥物中間體的合成中。這類化合物可用下面的通式進行 表示，結構式中，A是乙酰基、丙酰基、丁酰基、芐氧羰基或者叔丁氧羰基， R2是氫、含有1到6個碳的垸基或者含有6到15個碳的芳基。<formula>formula see original document page 4</formula>
其中，化合物N-保護的烯丙基L-甘氨酸是特別重要的一個中間體。它用途廣泛， 尤其是用于制備具有光學活性的環狀氨基酸。
多篇專利和文獻都報導了光學純N-保護烯丙基甘氨酸的合成。但是，這些 工藝涉及到很多步的合成路線，而且產率和光學純度通常都很低。Schricker發 表的一篇文獻(Schricker, B. et al.歷oog. CTzem.丄欲.1992, 2, 387)報導了 運用a-糜蛋白來制備光學純的N-保護L-烯丙基甘氨酸，但是，其產率和光學純 度都很低。而且，a-糜蛋白是一種從動物身上衍生而來的酶，本身非常昂貴并在 藥物生產中是被禁止使用。因此，這些工藝都不能適用于經濟、大規模地合成 光學純的N-保護烯丙基甘氨酸。
背景技術：
發明內容
本發明所要解決的技術問題是將提供一種產率高、反應時間短、工業能 大規模運用的N-保護的烯丙基甘氨酸酯的拆分方法，從而能制備得到純度很高
的N-保護的烯丙基甘氨酸和酯。
為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是所述的N-保護的烯丙基 甘氨酸酯的拆分方法，其拆分過程的反應方程式如下
n m
上式中，Ri選自乙酰基、丙酰基、丁酰基、芐氧羰基或者叔丁氧羰基，R2選自 氫、含有1到6個碳的烷基或者含有6到15個碳的芳基。其拆分過程包括如下
將1摩爾的化合物I溶于500毫升到2000毫升的磷酸緩沖液和有機溶劑中 形成有機溶液，其中有機溶劑的加入重量為磷酸緩沖液重量的0~70%，在上述 體系中，加入枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體、并且加入重量為化合物I的0.1 20%，； 保持體系在0。C到6(TC之間，優選為10 5(TC之間。，pH值在5到9之間，機械 攪拌，攪拌速度為每分鐘100到500轉，攪拌到3到24小時，停止反應，過濾， 回收枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體。濾液用堿調節PH為8到10，用1000毫升到 2000毫升的萃取有機溶劑萃取2到6次，合并有機相，干燥劑干燥，減壓蒸餾 或者柱層析得到化合物II^N-保護的L-烯丙基甘氨酯；水相用無機酸調節到 PH為2到4，用1000毫升到2000毫升的萃取有機溶劑萃取2到6次，合并有 機相，干燥劑干燥，減壓蒸餾或者柱層析得到化合物IIIN-保護的L-烯丙基甘氨酸。
上面所述的有機溶劑選自甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、己醇、丙酮、甲苯、
己烷；優選乙醇或丁醇。有機溶劑的用量優選為1000~1500亳升。
上述機械攪拌的速度優選為每分鐘250到300轉之間，攪拌時間優選為5 到18小時。
上面所述的堿選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳 酸氫鉀。
上面所述的萃取有機溶劑選自二氯甲垸、乙酸乙酯、苯、甲苯、乙醚、氯仿。
上面所述的干燥劑選自無水硫酸鈉、無水硫酸鎂。 上面所述的無機酸選自鹽酸、硫酸、磷酸。
本發明的有益效果是使用本發明所述的方法，產率高，反應時間短，催 化劑可回收，產品光學純度高，由于枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體本身是由微生 物源衍生而來、并可以大規模地得到，因而更適合工業上的大規模運用。
具體實施例方式
下面通過具體實施例對本發明作進一步的描述，但不以任何方式限制本發明。
實施例1:
<formula>formula see original document page 6</formula>取50 ml， O.IM， PH=7.0的Na2H2P04*Na2HP04緩沖溶液至入250毫升三角瓶中，加入消旋的5.7 g化合物1和枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體的磷酸緩沖溶液 (0.67 g枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體懸浮在60 ml Na2H2P(VNa2HP04緩沖溶液 中)，于5(TC下攪拌5小時，控制PH值在7.5-8.0之間，用高效液相色譜法(HPLC) 監控反應結束。過濾得酶可重復使用。滴加6MNaOH調節PH值到9，用乙酸 乙酯提取兩遍，有機層干燥旋干得2.54 g化合物2 (光學純度>98%，產率為 89°/。)。水相使用36%鹽酸調節到3，用乙酸乙酯提取兩遍，有機層干燥旋干得 2.32g化合物3 (光學純度>99%，產率為81%)。
實施例2:<formula>formula see original document page 7</formula>
取75ml， O.IM， PH=7.0的Na2H2PCVNa2HPO4緩沖溶液至入250毫升三角 瓶中，加入消旋的7.63 g化合物4和枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體的磷酸緩沖溶 液(0.67 g枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體懸浮在60 ml Na2H2PO^Na2HP04緩沖溶 液中)，于1(TC下攪拌18小時，控制PH值在7.8-8.0之間，用高效液相色譜法 (HPLC)監控反應結束。過濾得酶可重復使用。滴加飽和碳酸鈉溶液調節PH 值到8，用乙酸乙酯提取兩遍，有機層干燥旋干得3.24g化合物5 (光學純度> 98%,產率為85%)。水相使用冷的36%鹽酸調節到4，用乙酸乙酯提取兩遍， 有機層干燥旋干得3.47 g化合物6 (光學純度> 99%,產率為91%)。
權利要求
1、N-保護的烯丙基甘氨酸酯的拆分方法，其特點是其拆分過程的反應方程式如下上式中，R1選自乙酰基、丙酰基、丁酰基、芐氧羰基或者叔丁氧羰基，R2選自氫、含有1到6個碳的烷基或者含有6到15個碳的芳基。其拆分過程包括如下步驟將1摩爾的化合物I溶于500毫升到2000毫升的磷酸緩沖液和有機溶劑中形成有機溶液，其中有機溶劑的加入重量為磷酸緩沖液重量的0～70％，在上述體系中，加入枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體、并且加入重量為化合物I的0.1～20％，保持體系在0℃到60℃之間，pH值在5到9之間，機械攪拌，攪拌速度為每分鐘100到500轉，攪拌到3到24小時，停止反應，過濾，回收枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體。濾液用堿調節PH為8到10，用1000毫升到2000毫升的萃取有機溶劑萃取2到6次，合并有機相，干燥劑干燥，減壓蒸餾或者柱層析得到化合物II；水相用無機酸調節到PH為2到4，用1000毫升到2000毫升的萃取有機溶劑萃取2到6次，合并有機相，干燥劑干燥，減壓蒸餾或者柱層析得到化合物III-N-保護的L-烯丙基甘氨酸。
2、 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的有機溶劑選自甲 醇、乙醇、丙醇、丁醇、己醇、丙酮、甲苯、己垸，其用量優選為1000~1500
3、 根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的有機溶劑選自乙醇或丁醇。
4、 根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于保持體系在10~50"c之間。
5、 根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于機械攪拌的速度為每分鐘250到300轉之間，攪拌時間為5到18小時。
6、 根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述的堿選自氫氧 化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀。
7、 根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述的萃取有機溶劑選自二氯甲烷、乙酸乙酯、苯、甲苯、乙醚、氯仿。
8、 根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述的干燥劑選自無水硫酸鈉、無水硫酸鎂。
9、 根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于所述的無機酸選自鹽酸、硫酸、磷酸。
全文摘要
本發明公開了一種N-保護的烯丙基甘氨酸酯的拆分方法，其特點是其拆分過程的反應方程式如上。上式中，R<sub>1</sub>選自乙酰基、丙酰基、丁酰基、芐氧羰基或者叔丁氧羰基，R<sub>2</sub>選自氫、含有1到6個碳的烷基或者含有6到15個碳的芳基。其主要原理是使用枯草桿菌蛋白酶交聯酶晶體處理式I的化合物，使其水解而拆分得到化合物II——N-保護的L-烯丙基甘氨酯、以及化合物III——N-保護的L-烯丙基甘氨酸。上述方法產率高，反應時間短，催化劑可回收，產品光學純度高，更適合工業上的大規模運用。
文檔編號C07C269/00GK101284797SQ20081012386
公開日2008年10月15日 申請日期2008年6月11日 優先權日2008年6月11日
發明者姚亦明, 銳 李, 方 袁, 韓國霞 申請人:常州恩滋生物科技有限公司