作為抗病毒增強劑的酰胺化合物的制作方法

專利名稱：作為抗病毒增強劑的酰胺化合物的制作方法
技術領域：
本發明涉及具有CYP450抑制性質且因而可作為某些藥物的增強劑(booster)的 化合物，即，它們在共同施用時可增加某些藥物的至少一種藥物動力學變量。本發明進一步 提供利用所述化合物作為某些藥物的生物利用度增進劑的用途。還提供本發明化合物的制 備方法以及包含這些化合物的藥物組合物。
背景技術：
許多藥物，包括一些HIV蛋白酶抑制劑(PI)以及非核苷逆轉錄酶抑制劑(NNRTI)， 是通過細胞色素P450系統代謝的。該細胞色素P450系統是一組在肝及腸內發現的酶，其 在人體內具有許多功能。細胞色素P450的活性在個體間及各群間是不同的。少量的基因 改變可影響多少特定酶被表達，因而影響藥物有多快被代謝。衍生自特定基因的細胞色素P450酶稱為異型體。根據其化學組成的近似性，異型 體分為族與亞族，酶變體是通過一種編號和字母系統描述的，其反應映了它們的化學及基 因結構。細胞色素P450，亞族IIIA(硝苯地平(niphedipine)氧化酶)，多肽4，亦稱為 CYP3A4，是一種用于裂解和清除藥物以及其它物質的特別的代謝途徑。某些藥物通過細胞色素P450系統的代謝作用經常會導致該類藥物具有不利 的藥物動力學，并且非常需要施用更頻繁和更高的劑量。施用此類藥物與通過細胞色 素P450系統抑制代謝的藥劑，可改善藥物的藥物動力學。在這方面，已公開一些改善某 些藥物的藥物動力學的方法，參見例如USP 6, 037, 157 ；D. E. Kempf et al. Antimicrob. AgentsChemother.，41，pp.654-660(1997)。在W003/049746中公開了改善含六氫呋喃并[2，3_b]呋喃基的HIV蛋白酶抑制劑 的藥物動力學的方法，包括對有需要的人施用治療有效量的含六氫呋喃并[2，3-b]呋喃基 的HIV蛋白酶抑制劑以及治療有效量的細胞色素P450抑制劑的組合(combination)。大部份用于臨床治療的HIV蛋白酶抑制劑現在均與利托那韋(ritonavir)配 對以改善暴露，從而提高臨床功效。所應用的此類型的藥物藥物相互作用稱為“增強 (boosting)”。增強還通過減少藥丸用量以及每日服用頻率以支持簡化的供目前PI的治療 方法。不幸的是，PI方法的利托那韋提高作用，即使在低劑量時，并非沒風險。利托那 韋本身即為一種HIV蛋白酶抑制劑。對利托那韋的抗性與數種抗性突變的一種或多種選 擇相關聯。由利托那韋選擇的抗性突變常賦予或造成對其他的蛋白酶抑制劑的抗性。不 同的突變與對不同藥物的交叉抗性相關聯。例如M46I系與對茚地那韋(indinavir)、奈 非那韋(nelfinavir)及福沙那韋(fosamprenavir)的交叉抗性相關聯(但與沙奎那韋 (saquinavir)無關聯)；V82A，F，T，S單獨與對茚地那韋的交叉抗性相關聯，但與其它突變 組合時亦賦予對奈非那韋、福沙那韋及沙奎那韋的抗性；以及I84V則造成對抗所有可得的 蛋白酶抑制劑的抗性。然而這些突變中并無任一單獨突變與對洛匹那韋(lopinavir)的完全抗性相關聯，每一突變造成部分抗性，并且數種突變一起存在可賦予抗性，對茚地那韋的 反應在對利托那韋抗性的設定中是不可能的。因此，在有效且安全的抗HIV治療中，對利托那韋作為增強劑的替代方式有高度 的醫藥需求。再者，在有效且安全的抗HIV治療中，其中增強劑造成的抗性發展可能性被排 除時，對利托那韋作為增強劑的替代方式亦有高度的醫藥需求。

發明內容
根據本發明，現在發現下列的式(I)化合物具有CYP450抑制性質并且可用作增強 劑。這些化合物由下式表示 其中A和B相互獨立地是H ；Cm烷基，其任選被炔基、雜芳基或選自氮、氧或硫的 雜原子取代，該雜原子任選被Cm烷基取代；或者A和B與它們所連接的氮一起形成5或6 元的飽和、部分或完全不飽和的含有1至4個各自獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的雜環所 述雜原子任選被Cm烷基取代；R2為Cm烷基，其任選被0H、氨基烷基、吡咯烷基、嗎啉基、炔基或任選被鹵素取代 的C3_7環烷基取代；R3 是 0H ；R4是H或烷基；R5是吡啶基或苯基，其任選被鹵素取代；X是0、S或N，其任選被(V6烷基取代。優選的化合物為下列分別具有式(II)、(III)和(IV)的化合物；分別以C1、C6及 C7備選地描述于后文。
其鹽及立體異構型，其中 R為H、苯基、吡啶基、C^e烷基或N: 氏選自
式(I)、(II)、(III)和(IV)化合物經發現能賦予抗HIV的極小抗性或無抗性，并 且因此是對利托那韋(RTV)作為HIV抑制劑的增強劑的有用替代方式。還發現式(I)化合物可作為其它病毒抑制劑如HCV和/或RSV抑制劑的病毒抑制 劑。式(I)化合物與其它藥物如HIV、HCV或RSV抑制劑的組合有利于允許給感染的患者提 供治療，而且該提供是安全、有效的，并允許抗病毒劑與其單獨施用時相比可采用較低的有 效治療劑量。根據毒性與藥丸用量，較低劑量一直是期望的，由此可分別減少不良作用和的 發生率及增加治療適應性。式(I)化合物與HIV或其它病毒抑制劑的組合，在施用該組合 至有需要的患者時，可對這些抗病毒劑提供協同作用。正如上文和下文中所使用的，除非另有說明，否則下列定義均適用。當術語“取代的”用于定義本發明化合物時，其意指在用“取代的”表達中所提及 的或包含的原子上的一個或多個氫被選自所指定的基團置換，前題是未超過所述原子的正 常價數，并且該取代作用將產生化學上穩定的化合物，即一種可以有用程度的純度經過方 便長的時間維持其結構與分子同一性的化合物，該方便長的時間將視應用領域而定。
術語鹵代(素)概括地指氟、氯、溴和碘。本文中所使用的作為基團或基團的一部分的‘％_4烷基”意指具有1至4個碳 原子的直鏈或支鏈的飽和烴基，例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1- 丁基、2- 丁基、2-甲 基-1-丙基；“Cu烷基”則包含"(V4烷基”及其更高級的具5或6個碳原子的同系物，例 如1-戊基、2-戊基、3-戊基、1-己基、2-己基、2-甲基-1- 丁基、2-甲基-1-戊基、2-乙基-1- 丁基、3-甲基-2-戊基等等。在Cm烷基中感舉的是(V4烷基，尤其是異丁基。C3_7環烷基概括地指環丙基、環丁基、環戊基、環己基及環庚基。“雜芳基”是本領域 知曉的并且意指含有一個或兩個(稠合的)芳環的單環或雙環系統；所述環系統含有至少 一個選自氮、氧或硫的雜原子，且該雜原子任選被Cm烷基取代。應注意在這些定義中所使用的任一分子部分上的基團位置可能是在該部分上的 任何位置，只要化學上穩定的即可。除非另外指出，否則這些變量的定義中所使用的基團包括所有可行的異構體，例 如吡啶基包括2-吡啶基、3-吡啶基及4-吡啶基。在下文中所使用的，術語“式(I)化合物例如”、“本化合物”、“本發明化合物”或類 似名詞，意指包括式(I)化合物及其任何亞組、在表中以及下面實施例中描述的化合物，以 及前體藥物、立體化學異構體、消旋混合物、酯類、加成鹽、溶劑化物、季胺類、N-氧化物、金 屬復合物、以及以上任一化合物的代謝物。一個實施方案包含式(I)化合物，或此處記載的 其任一亞組，以及N-氧化物、鹽及其可能的立體異構體。在下文中所使用的，術語“HIV抗病毒劑”和“HIV抑制劑”是可互相交換的，且在 本案敘述的上下文中具有相同的意義。式(I)化合物可在其取代基中包含不對稱中心，因此可以立體化學異構體型式存 在。此處所使用的術語“立體化學異構體”、“立體異構體”及等同術語是定義所有由相同的 原子組成、通過相同的鍵連結但具有不同的三維空間結構(無法互相改變)的可能的化合 物，其是式(I)化合物可能具有的。例如(R)或(S)，或另擇地以星號(*)標示的，是用來指定取代基中不對稱原子的 絕對構型，該指定系將整個化合物考慮在內而非單獨就該取代基而言。除非另外提及或指出，否則化合物的化學命名包括該化合物可能具有的所有可能 的立體化學異構體的混合物。該混合物可能含有該化合物的基本分子結構的所有的非對映 異構體和/或對映異構體。本發明化合物的所有立體化學異構體不論是純化形式或互相混 合的，均屬本發明的范疇。此處所提及的化合物及中間體的純立體異構體被定義為基本上不含該化合物或 中間體的具相同基本分子結構的其它對映異構或非對映異構形式。特別地，術語“立體異構 上純的”是指具有立體異構過量至少80% (例如至少90%的一種異構體和最多10%的其 它可能的異構體)至多達立體異構過量100% (亦即100%的一種異構體且不含其它的異 構體)的化合物或中間體，更特別地，是指具有立體異構過量90 %至多達100 %的化合物或 中間體，再更特別地，是具有立體異構過量94%至多達100%的化合物或中間體，且最特別 地，是具有立體異構過量97%至多達100%的化合物或中間體。術語“純對映異構”及“純 非對映異構”亦應以類似方式理解，但分別是所提的混合物中對映異構體過量與非對映異 構體過量。本發明化合物及中間體的純對映異構體可利用本領域已知的操作法獲得。例如， 可使對映異構體相互分離，其方式是利用光學活性酸或堿將其非對映異構體鹽選擇性結 晶。其實例為酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯酰基酒石酸、及樟腦磺酸。另選地，對映異 構體可通過色譜分析技術利用手性固定相予以分離。假使反應是以立體特異性進行，所述 純立體化學異構體亦可衍生自適宜的起始物質的對應的純立體化學異構體。優選地，若需要特定的立體異構體，該化合物將通過立體特異性制法合成。這些方法將以采用純對映異 構的起始物質較有利。 本發明化合物的非對映異構消旋物可通過公知方法分離獲得。可采用的適當物理 分離法為例如選擇結晶法與色譜分析法，如柱色譜法。 對于某些本發明化合物、其前體藥物、N-氧化物、鹽、溶劑化物、季胺類或金屬復合 物、以及在其制法中使用的中間體，并未實驗測定絕對立體化學構型。本領域技術人員能利 用本領域已知的方法，例如X-射線衍射法，測定此類化合物的絕對構型。本發明亦包括在本發明化合物上出現的所有原子的同位素。同位素包括那些具有 相同的原子數但質量數不同的原子，舉例但非限制性的，氫的同位素包括氚及氘，碳的同位 素包括C-13及C-14。本文中所使用的術語“前體藥物”意指藥學可接受的衍生物，例如酯類、酰胺類及 磷酸酯類，因而在體內生成的該衍生物的生物轉化產物為如同式(I)化合物定義的活性藥 物。Goodman禾口 Gilman 的參考文獻(ThePharmacological Basis of Therapeutics, 8th ed, McGraw-Hill, Int. Ed. 1992, "Bio-transformation of Drugs", p 13-15) f'^l^^mWM 物乃概括地并入本文。前體藥物優選具有良好的水溶性、增加的生物利用度，并且在體內可 容易地代謝為活性抑制劑，本發明化合物的前體藥物可通過修飾化合物中存在的官能基而 制得，其修飾方式是，使修飾物通過常規操作或在體內即分解為母體化合物。優選的是可在體內水解且衍生自那些具有羥基或羧基的式(I)化合物的藥學可 接受的酯前體藥物。在體內可水解的酯類為一種在人體或動物體內會水解產生母體酸或醇 的酯。適合的藥學可接受的羧基酯類包括Cm烷氧基甲基酯例如甲氧基-甲基，CM烷酰基 氧基甲基酯例如特戊酰基氧基甲基，酞基酯，C3_8環烷氧基羰基氧基烷基酯例如1-環 己基羰基-氧基乙基；1，3- 二氧雜環戊烯-2-酮基甲基酯例如5-甲基-1，3- 二氧雜環戊 烯-2-酮基甲基；以及(V6烷氧基羰基氧基乙基酯例如1-甲氧基羰基-氧基乙基其可在本 發明化合物的任何羧基上形成。含有羥基的式(I)化合物的體內可水解酯包括無機酯類，例如磷酸酯類及a _酰 基氧基烷基醚類及相關的化合物，其在體內經水解作用將酯裂解后即生成原來的羥基。 a-酰基氧基烷基醚類包括乙酰氧基-甲氧基和2，2_ 二甲基丙酰基氧基-甲氧基。羥 基的在體內可水解的酯形成基團的選擇包括烷酰基、苯甲酰基、苯乙酰基和取代的苯甲酰 基及苯乙酰基、烷氧基羰基(生成烷基碳酸酯類)、二烷基氨甲酰基和N_( 二烷基氨基乙 基)-N-烷基氨基甲酰基(生成氨基甲酸酯)、二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。苯甲酰基上 的取代基實例包括嗎啉代和哌嗪子基，其由環氮原子經亞甲基連結至苯甲酰基環的3-或 4-位。供治療使用時，式(I)化合物的鹽為那些其中的抗衡離子為藥學可接受的。然而， 非藥學可接受的酸或堿的鹽也可能有用，例如在制備或純化藥學可接受的化合物時，所有 的鹽，不論藥學可接受或不可接受的，均包含在本發明的范圍內。前面提及的藥學可接受的酸和堿的加成鹽意指包括式(I)化合物能形成的具有 治療活性的無毒性酸和堿加成鹽。藥學可接受的酸加成鹽可通過此種適當的酸處理該鹽基 形式而方便地獲得。適當的酸包括例如無機酸類，如氫鹵酸(如氫氯酸或氫溴酸)、硫酸、 硝酸、磷酸和類似的酸；或有機酸類，如乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(亦即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(亦即丁二酸)、馬來酸、富馬酸、蘋果酸(亦即羥基丁二酸)、酒石 酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對-甲苯磺酸、環己基氨基磺酸、水楊酸、對-氨基水楊 酸、棕櫚酸和類似的酸。相反地，所述鹽形式可通過用適當的堿處理轉化為游離堿形式。含有一酸性質子的式(I)化合物亦可通過用適當的有機和無機堿處理轉化為其 無毒性的金屬或胺加成鹽型式。適當的堿鹽形式包括，例如，銨鹽，堿金屬和堿土金屬鹽如 鋰、鈉、鉀、鎂、鈣鹽等，與無機堿的鹽，如芐星(benzathine)、N-甲基_D_葡萄糖胺、海巴胺 (hydrabamine)鹽，以及與氨基酸例如精氨酸、賴氨酸等等的鹽。術語“溶劑化物”在此處是用來說明一種分子復合物，其包含i)本發明化合物及 其鹽，和ii) 一種或多種藥學可接受的溶劑分子，例如乙醇、異丙醇、1-甲氧基-2-丙醇、 甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、苯甲醚、四氫呋喃或甲磺酸酯。當該溶劑為水時使用術語 “水合物”。在前面使用的術語“季胺”是定義季銨鹽，其是式(I)化合物通過由式(I)化合 物的堿性氮與適當成季化劑(例如任選取代的烷基鹵化物、芳基鹵化物或芳烷基鹵化物， 如甲基碘化物或芐基碘化物)反應而得以生成。其它具有良好離去基團的反應物亦可采 用，例如三氟甲磺酸烷基酯、甲磺酸烷基酯、和對-甲苯磺酸烷基酯。季胺具有荷正電的 氮。藥學可接受的抗衡離子包括氯、溴、碘、三氟乙酸酯及乙酸酯。所選擇的抗衡離子可利 用離子交換樹脂予以引入。本發明化合物的N-氧化物形式意指包含式(I)中一個或數個氮原子被氧化成所 謂的N-氧化物的化合物。應當理解，式(I)化合物可能具有金屬鍵合、螯合、復合物形成的性質，因此可以 金屬復合物或金屬螯合物存在。式(I)化合物的此類金屬化衍生物將包括在本發明的范圍 內。某些式(I)化合物亦可能以其互變異構體形式存在。此類形式雖然并未在上面的 化學式中明確地指出，但將包括在本發明的范圍內。式(I)化合物具有兩個不對稱中心，如下式的星號所標示的 優選的式(I)化合物系具有如下面式(I-a)的結構中所示的立體化學 根據本發明的式(I)化合物可為選自下列表1、表2、表3或表4的化合物中任一 個。除了取代型式(以R、Ri、R2*X標明)夕卜，還報告了 LC-MS數據(m/z(M+l))和保留時 間(Rt)。列出的結果和實施例是用來示意本發明而不應被解釋為限制本發明的范圍。表 1 優選的化合物為化合物CI、C6和C7。在本發明的優選實施方案中，提供一種組合，其包含(a)式(I)化合物、其鹽或立 體異構體；以及(b)HIV抗病毒劑或其藥學可接受的鹽；其中式(I)化合物選自C1、C6或C7。在本發明的優選實施方案中，提供一種組合，其系包含(a)式⑴化合物、 其鹽或立體異構體；以及(b)HIV抗病毒劑(有時候稱作HIV抑制劑)或其藥學可接 受的鹽；其中式⑴化合物選自C1、C6或C7;并且其中HIV抗病毒劑或HIV抑制劑 選自例如核苷逆轉錄酶抑制劑(NRTI)，例如齊多夫定(zidovudine ；AZT)、地達諾新 (didanosine ；ddl)、扎西他賓(zalcitabine ；ddC)、拉米夫定(lamivudine ；3TC)、司他 夫定(stavudine ；d4T)、恩曲他濱(emtricitabine ；FTC)、阿巴卡韋(abacavir ；ABC)、 阿普西它賓(apricitabine ；AVX-754)、爾夫西它賓(elvucitabine ；ACH-126, 443)、 phosphazide、KP-1461、MIV-210、雷西夫(racivir ；PSI-5004)等等；或者非核苷逆轉錄酶 抑制劑(NNRTI)，例如地拉夫定(delavirdine ；DLV)、依法韋侖(efavirenz ；EFV)、奈韋拉 平(nevirapine ；NVP)、卡普韋林(capravirine ；CPV)、calanolide A、dpivirine (TMC120)、 etravirine(TMC125)、rilpivirine (TMC278)、阿洛夫定(alovudine ；MIV-310)、UC-781 等等；或者核苷酸逆轉錄酶抑制劑(NtRTI)，例如替諾福韋(tenofovir)和替諾福韋 二索羅基富馬酸鹽(tenofovir disoproxil fumarate, TDF)等等；或轉活化蛋白質的 抑制劑，例如TAT-抑制劑，如R0-5-3335、BI-201 ;REV抑制劑；或蛋白酶抑制劑，例如 利托那韋(RTV)、沙奎那韋(saquinavir ；SQV)、洛匹那韋(ABT-378或LPV)、茚地那韋 (IDV)、安潑那韋(amprenavir ；VX-478)、TMC-126、那非那韋(nelfinavir ；AG-1343)、 atazanavir (BMS-232632)、達魯那韋(darunavir ；TMC-114 ；目前以 Prezista 上市)、 SPI-256、福沙那韋(fosamprenavir ；GW433908 或 VX-175)、P-1946、MK-8122 (PPL-100)、 替拉那韋(tipranavir ；PNU-140690、或是化學名稱為(1_芐基_3-{[2-(1_環戊基-哌 啶-4-基氨基)~苯并噻唑-6-磺酰基]-異丁基-氨基} -2-羥基-丙基)_氨基甲酸六 氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯的蛋白酶抑制劑，及類似物；或是病毒整合酶抑制劑，例如 raltegravir (MK-518), elvitegravir (GS-9137 ； JTK-303)、BMS-538, 158 等類似物；或進入 抑制劑，其包括融合抑制劑(如T_20或enfuvirtide，T-1249)，吸附抑制劑及共受體抑制劑；后者包括CCR5拮抗劑和CXR4拮抗劑(如AMD-3100)；進入抑制劑的例子為PR0-140、 PR0-542、TBR-220 (TAK-220)、TBR-652 (TAK-652)、vicriviroc (SCH-417, 690)、TNX-355、 maraviroc (UK-427, 857)、BMS-488, 043、BMS-806 ；成熟抑制劑例如是 bevirimat (PA-457)； 核醣核苷酸還原酶抑制劑(細胞抑制劑)，例如羥基脲及類似物；或以上任一項的組合。更優選的實施方案是一種包含下列物質的組合(a)選自CI、C6或C7的化合 物、其鹽或立體異構體；以及(b)HIV抗病毒劑，其選自達魯那韋(darimavir)或化學名稱 為(1-芐基-3- {[2- (1-環戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-異丁基-氨 基}-2_羥基-丙基)-氨基甲酸六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯的化合物。最優選的組合為其中化合物為噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨 基)-N-異丁基苯并[d]噁唑-6-羧酰胺基)-3_羥基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸酯并且 HIV抑制劑為(1-芐基-3- {[2- (1-環戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-異 丁基-氨基}_2_羥基-丙基)_氨基甲酸六氫呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯。在本發明的一個實施方案中，提供了一種制備如本文所述的組合的方法，其包括 將式(I)化合物或其藥學可接受的鹽，與HIV抗病毒劑或其藥學可接受的鹽合并的步驟。本 發明的另選實施方案提供了其中該組合包含一種或多種如本文所述的其它藥劑的方法。本發明組合以及本發明的化合物本身可被作為醫藥使用。作為藥物或醫藥的應用 包括對HIV-感染的個體全身施用有效劑量以對抗與HIV相關的病癥。本發明化合物，更特 別地，式(II)-(IV)的化合物，在作為增強其它化學實體的藥劑(例如抗病毒化合物)用于 哺乳動物時是特別有用的。因此，本發明組合可用于制備可用于治療、預防或對抗哺乳動物 與HIV感染有關的感染或疾病的醫藥。在本發明的一個實施方案中，提供一種藥物組合物， 其包含根據本文所述的任一實施方案的組合以及藥學可接受的賦形劑。特別地，本發明提 供一種藥物組合物，其包含(a)治療有效量的式(I)化合物或其藥學可接受的鹽；(b)治療 有效量的HIV抗病毒劑或其藥學可接受的鹽；以及(c)藥學可接受的賦形劑。任選地，該藥 物組合物可進一步包含選自HIV抗病毒劑的其它藥劑。如本文所使用的，術語“組合物”欲意包括一種包含特定成份的產品，以及任何由 特定成份的組合直接或間接產生的產品。如本文所使用的，術語“治療有效量”意指在組織、系統、動物或人體中會引起生物 學或醫學反應的活性化合物或組份或藥劑的量，其是由研究員、獸醫、醫學醫生或其它臨床 醫生參考本發明后所探尋的，其包括減輕待治疾病的癥狀。由于本發明涉及含有兩種或多 種藥劑的組合，“治療有效量”為那些制劑一起的用量，以便合并的效應引起所需的生物學 或醫學反應。例如含有(a)式(I)化合物和(b)HIV抗病毒劑的組合物，其治療有效量是在 兩者一起具有治療有效的合并效應時，式(I)化合物的用量與HIV抗病毒劑的量。藥物組合物可以本領域技術人員已知的方法制備。為達到此目的，至少一種式(I) 化合物或其任一亞組以及HIV抗病毒劑，與一種或多種固體或液體藥用賦形劑一起，并且 如果需要，與其它藥物活性化合物合并，調配成適合施用的形式或劑型，然后其即可作為人 類用藥或獸用藥的藥物。在一個實施方案中，如果適當，本發明組合亦可調配成組合制劑以供同時、分開或 順序使用于HIV治療。在此種情況下，式(I)化合物或其任一亞組被調配在含有其它藥學 可接受的賦形劑的藥物組合物中，而適當的HIV抗病毒劑則分開調配于含有其它藥學可接受的賦形劑的藥物組合物中。方便地，這兩種分開的藥物組合物可為藥盒的一部分，以供同 時、分開或順序使用。因此，本發明組合的個別組份可在療程的不同時間分開施用，或以分離或單一組 合形式同時施用。所以本發明應理解為含蓋所有此類同時或交替治療的治療法，并且術語 “施用”據此解釋。在優選的實施方案中，該分開的劑型是以大約同時的方式施用的。包含本發明組合的組合物或產品，不論是共同調配于單一制劑還是調配成同時、 分開或順序使用的，均可以下列方式施用口服(包括混懸劑、膠囊劑、片劑、小袋劑、溶液 劑、乳劑)、舌下、腸胃外(包括皮下注射、靜脈內、肌肉內、皮膚內注射或輸注技術)、局部 地、經直腸(包括栓劑)、經陰道、經植入式儲庫，以含有常規的無毒性藥學可接受的載劑、 佐劑及賦形劑的劑量單位劑型施用。優選的組合物或產品包含式(I)-(IV)中任一式的化合物以及HIV抑制劑，其中 該抑制劑為達魯那韋或化學名稱為(1-芐基-3- {[2- (1-環戊基-哌啶-4-基氨基)-苯 并噻唑-6-磺酰基]-異丁基-氨基}-2-羥基-丙基)-氨基甲酸六氫呋喃并[2，3-b]呋 喃-3-基酯的化合物。根據本發明優選的是一種包含噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨 基)-N-異丁基苯并[d]噁唑-6-羧酰胺基)-3_羥基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸酯的組 合物或產品，并且其中HIV抑制劑為(1-芐基-3- {[2- (1-環戊基-哌啶-4-基氨基)-苯 并噻唑-6-磺酰基]-異丁基-氨基} -2-羥基-丙基)-氨基甲酸六氫呋喃并[2，3-b]呋 喃-3-基酯。對口服施用劑型而言，本發明組合物可與適當添加物混合，例如賦形劑、穩定劑或 惰性稀釋劑，并利用常規方法調配成適合的施用劑型，例如片劑、包衣片劑、硬膠囊劑、水 溶液劑、醇溶液劑或油溶液劑。適合的惰性載劑的實例為阿拉伯膠、氧化鎂、碳酸鎂、磷酸 鉀、乳糖、葡萄糖、或淀粉(特別是玉米淀粉)。在此情況下，可以干式或濕式顆粒實現該制 備。適合的油性賦形劑或溶劑為植物或動物油，例如向日葵油或魚肝油。水或醇溶液的適 合溶劑為水、乙醇、糖溶液、或其混合物。聚乙二醇和聚丙二醇亦可作為其它施用劑型的進 一步的輔助劑。作為立即釋放型片劑時，這些組合物可包含本領域已知的微晶纖維素、磷酸 二鈣、淀粉、硬脂酸鎂和乳糖和/或其它賦形劑、粘合劑、增量劑、崩解劑、稀釋劑和潤滑劑。本發明組合的口服施用亦可適當地通過均勻并且充分混合適當量的各種粉末型 式的組份，任選還包括微細分離的固體載劑，再將混合物填充至例如硬明膠膠囊內而完成。 該固體載劑可包括一種或多種物質作為粘合劑、潤滑劑、崩解劑、著色劑等。適合的固體載 劑包括例如磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石、糖類、乳糖、糊精、淀粉、明膠、纖維素、聚乙烯吡咯烷、 低熔點蠟及離子交換樹脂。本發明組合的口服施用還可通過制備僅含所需量的式(I)化合物(任選地與上述 固體載劑混合)的膠囊劑或片劑，以及僅含所需量的HIV抗病毒劑的膠囊的方式完成。含有 式(I)化合物的壓制片劑可通過均勻并且充分混合活性成份與如前所述的固體載劑，以提 供具有必要的壓縮性質的混合物，然后用適合的機器壓實該混合物至所需形狀與大小。模 制片劑可在適合的機器使用惰性液體稀釋劑潤濕的粉末化式(I)化合物混合物模塑而制 得。口服施用還可通過下述方式完成制備前述含有式(I)化合物的壓制或模制片劑、供插 入標準膠囊(例如硬明膠膠囊)的適合大小的片劑，然后將該片劑插入含有適當量的HIV抗病毒劑粉末的膠囊內。供皮下或靜脈施用時，組合物的活性成份，若需要可利用常規物質(例如助溶劑、 乳化劑或其它輔助劑)，調制成溶液劑、混懸劑或乳劑。組合物的組份還可經凍干，獲得的凍 干物可用于例如生產注射用或輸注用制劑。適合的溶劑例如水、生理鹽水溶液或醇類，如乙 醇、丙醇、甘油，以及糖溶液例如葡萄糖或甘露醇溶液，或另選地各種所述溶劑的混合物。可 注射的溶液或混懸液可根據已知技術配制，利用適合的無毒性、腸胃外可接受的稀釋劑或 溶劑，例如甘露醇、1，3_ 丁二醇、水、林格氏溶液或等滲壓氯化鈉溶液，或適合的分散或潤 濕和懸浮劑，例如無菌、溫和、不揮發性油類，包括合成的甘油單或二酸酯，以及脂肪酸，包 括油酸。本發明的藥物組合物亦可局部施用，尤其當治療靶標包括可容易地通過局部施用 達到的區域或器官時，包括眼部、皮膚、或較末端腸道的疾病。適合的局部用制劑可容易配 制以供這些區域或器官施用。供較末端腸道的局部施用可以直腸栓劑制劑(參見下文)或 適當的灌腸劑實現。還可以采用局部的經皮用貼片。供局部使用時，藥物組合物可被配制成適當的軟膏，其含有懸浮或溶解在一種或 多種載劑中的活性成份。本發明化合物的適合局部施用的載劑包括(但不受限于)礦物油、 液狀石蠟、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水。另選地，藥物組合物 可配制成適當的洗劑或乳膏劑，其含有懸浮或溶解在一種或多種藥學可接受的載劑中的活 性成份。適合的載劑包括但不限于礦物油、脫水山梨醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、十六烷 基酯蠟、鯨蠟硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。當以栓劑形式經直腸施用時，這些制劑可通過混合本發明組合物的個別組份與適 合的非刺激性賦形劑而制備，所述賦形劑例如可可豆脂、合成的甘油酯類或聚乙二醇類，其 在常溫下為固態，但在直腸腔內則液化和/或溶解以釋放藥物。在本發明方法的另一實施方案中，施用方式可與食物(例如高脂餐)一起或不與 食物一起進行。術語“與食物一起”意指用餐是在施用本發明組合的一種或兩種組份時或 不超過約一小時前或后。在一個實施方案中，本發明組合含有一定量的式(I)化合物或其藥學可接受的 鹽，該量在相對于單獨施用HIV抑制劑或抗病毒劑時的生物利用度下，足以在臨床上改善 該HIV抑制劑或抗病毒劑的生物利用度。在另一實施方案中，本發明組合含有一定量的式(I)化合物或其藥學可接受的 鹽，相對于HIV抑制劑單獨施用時的至少一種藥物動力學變量而言，該量足以例如增加HIV 抑制劑的至少一種選自下列的藥物動力學變量在例如12小時時的t1/2、(；in、(；ax、(；S、AUC， 或者在例如24小時時的AUC。進一步的實施方案涉及用于改善HIV抑制劑生物利用度的方法，該包括對需要此 種改善的個體施用本文定義的組合，該組合包含治療有效量的該組合的各種組份。在另一實施方案中，本發明涉及利用式(I)化合物或其藥學可接受的鹽，作為HIV 抑制劑的至少一種選自下列的藥物動力學變量的改善劑在例如12小時時的t1/2、(；in、(；ax、 CSS、AUC，或者是在例如24小時時的AUC ；條件是該應用并不在人體或動物體內實施。此處使用的術語“個體”意指動物，優選哺乳動物，最適宜為人類，其為治療、觀察 或實驗的對象。
生物利用度定義為施用劑量達到體循環的分數。t1/2代表半衰期或血漿濃度降至 其初始值的一半所需的時間。Css為穩態濃度，亦即當輸入藥物速率等于消除速率時的濃度。 Cmin定義為在用藥間隔期間測到的最低(最小)濃度。C-代表在用藥間隔期間測到的最 高(最大)濃度。AUG定義為血漿濃度-時間曲線下在一定期間(例如在12小時或24小 時)內的面積。本發明組合可依該組合內所含的各項組份所適合的特定劑量范圍施用于人體。包 含在該組合內的組份可一起或分開施用。HIV抑制劑以及式(I)化合物或其藥學可接受的 鹽或酯類可能的標示劑量水平為每天0. 02至5. 0克。當HIV抑制劑或抗病毒劑與式⑴化合物合并施用時，HIV抑制劑對式⑴化合 物的重量比的適宜范圍為，約40 1至約1 15，或約30 1至約1 15，或約15 1 至約1 15，典型地約10 1至約1 10，或更典型地約8 1至約1 8。還可使用的 HIV抑制劑對式(I)化合物的重量比的適宜范圍為，約6 1至約1 6，或約4 1至約 1 4，或約3 1至約1 3，或由2 1至約1 2，或約1.5 1至約1 1.5。一方面， HIV抑制劑的重量等于或大于式(I)化合物的重量，其中HIV抑制劑對式(I)化合物的重量 比的適宜范圍為，約1 1至約15 1，典型地約1 1至約10 1，更典型地由約1 1 至約8 1。還可使用的HIV抑制劑對式(I)化合物的重量比的適宜范圍為，約1 1至約 6 1，或約1 1至約5 1，或約1 1至約4 1，或約3 2至約3 1，或約1 1 至約2 1，或約1 1至約1. 5 1。根據一個實施方案，HIV抑制劑與式(I)化合物可一起施用每天一或兩次，每周 一、二、三、四、五或六次，優選經口施用，其中HIV抑制劑每劑的量為約10至約2500毫克， 式(I)化合物每劑的量為約10至約2500毫克。在另一實施方案中，每天一起施用一或兩 次的每一劑量為約50至約1500毫克的HIV抑制劑，以及約50至約1500毫克的式(I)化 合物。在再另一實施方案中，每天或每周一起施用的每一劑量為約100至約1000毫克的 HIV抑制劑，以及約100至約800毫克的式(I)化合物。在再另一實施方案中，每天或每周 一起施用的每一劑量為約150至約800毫克的HIV抑制劑，以及約100至約600毫克的式 (I)化合物。在再另一實施方案中，每天或每周一起施用的每一劑量為約200至約600毫克 的HIV抑制劑，以及約100至約400毫克的式(I)化合物。在再另一實施方案中，每天或每 周一起施用的每一劑量為約200至約600毫克的HIV抑制劑，以及約20至約300毫克的式 (I)化合物。在再另一實施方案中，每天或每周一起施用的每一劑量為約100至約400毫克 的HIV抑制劑，以及約40至約100毫克的式(I)化合物。供每日施用兩次的HIV抑制劑(毫克)/式(I)化合物(毫克)示例性組合劑量 包括 50/100、100/100、150/100、200/100、250/100、300/100、350/100、400/100、450/100、 50/133,100/133,150/133,200/133,250/133,300/133,50/150,100/150,150/150, 200/150、250/150、50/200、100/200、150/200、200/200、250/200、300/200、50/300、80/300、 150/300,200/300,250/300,300/300,200/600,400/600,600/600,800/600,1000/600, 200/666,400/666,600/666,800/666,1000/666,1200/666,200/800,400/800,600/800, 800/800、1000/800、1200/800、200/1200、400/1200、600/1200、800/1200、1000/1200 和 1200/1200。供每日施用兩次的HIV抑制劑(毫克)/式(I)化合物(毫克)其它示例性 組合劑量包括 1200/400、800/400、600/400、400/200、600/200、600/100、500/100、400/50、300/50 和 200/50。然而，應當理解，供任何特定患者的特定劑量水平和服用頻率可能改變并且將取 決于包括以下的多種因素所用特定化合物的活性、代謝穩定性以及該化合物的作用時間 長度；患者的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食；施用的方式和時間、排泄速率、藥物 組合、特定病情的嚴重性、以及進行治療的患者類型。在本發明的一個實施方案中，還提供了一種生產的物品，該物品包括可有效治療 HIV感染的組合物；以及包裝材料，其包括指示該組合物可用于治療HIV感染的標簽；其中 該組合物包含如本文所述的組合。
實施例表5提供一些在各種活體外試驗中測試化合物C1-C55時所獲得的結果的概要。有 關這些試驗的更多詳細內容列于表格下方。給出的結果與實施例是用來舉例說明本發明， 而不應被解釋為限制本發明的范圍。
試驗1和2 抗病毒活件/毒件以細胞試驗測試本發明化合物抗病毒活性，其根據下列操作步驟進行。 使用綠色熒光蛋白質(GFP)和HIV-特異性啟動子、HIV-1長末端重復序列(LTR) 設計人類T-細胞株MT4。此細胞株命名為MT4LTR-EGFP，并且可用于體外評估待測化合物 的抗HIV活性。在HIV-1感染的細胞中，會生產出Tat蛋白質，其會向上調節LTR啟動子并 且最終導致刺激GFP報導基因生產，得以熒光分析進行中的HIV-感染情形。類似地，用GFP和構成性細胞巨化病毒(CMV)啟動子設計MT4細胞。此細胞株命 名為MT4CMV-EGFP，并且可用于體外評估待測化合物的細胞毒性。在此細胞株中，使GFP 水平與感染的MT4 LTR-EGFP細胞相比較。細胞毒性檢測的化合物會減低模擬感染的MT4 CMV-EGFP細胞的GFP水平。可以測定有效濃度值例如50%有效濃度(EC5Q)，并且通常以iiM表示。EC5Q值定 義為測試化合物減低HIV-感染細胞的熒光50%時的濃度。50%細胞毒性濃度(CC5(1，uM) 定義為測試化合物減低模擬感染的細胞的熒光50%時的濃度。CC5(I對EC5(i的比率定義為選 擇性指數(SI)，并且是抑制劑抗-HIV活性的選擇性的指標。HIV-1感染和細胞毒性的最終 監測是使用掃瞄顯微鏡完成。影像分析允許有極敏感的病毒感染檢測。測定是在細胞壞死 前進行，其通常是在感染約五天后發生，特別地，測定是在感染三天后進行。表5列出對抗野生型HIV-1 IIIB株的pEC5Q值以及一些挑選的本發明化合物的 pcc50 值。pEC50 值對應于"log10 (EC50)，pCC50 值對應于"log10 (CC50)。列出的化合物具有pEC5(1值低于4.00至最高4.88 ￡(5(1。達魯那韋是一種商業可 得的HIV蛋白酶抑制劑，具有8. 17的pEC5(1值。就抗病毒活性而言，當與8. 17相比較時， < 4至4. 88的pEC5Q范圍明顯較低，因此證明本發明化合物對HIV具有極低的抗性或無抗 性。同樣地，本發明化合物所報道的毒性值范圍低于4. 00至最高4. 86pCC5(l，證明這些化合 物的低或極低毒性。試驗3 測試化合物(HLM15’ )的代謝穩定性亞細胞組織制劑是根據Gorrod 等人(Xenobiotica，5，pp. 453-462 (1975))通過 組織機械勻漿后離心分離而制得。使人類肝組織在冰-冷的0. 1M Tris-HCl(pH 7.4)緩沖 液中漂洗以洗除過量的血液。然后擦干組織，稱重，再利用外科剪刀粗略地剪碎。使組織 碎片在3倍體積的冰-冷的0. 1M磷酸鹽緩沖液(pH 7.4)中勻漿，利用配備Teflon杵的 Potter-S(Braun，意大利)或者Sorvall 0mni_Mix均質機勻漿7x10秒。在兩種情況下，勻 漿過程中，容器要保持在冰內/上。利用Sorvall離心機或Beckman超速離心機在4°C下以 9000xg離心處理該組織勻漿物20分鐘。所得上清液可儲存于-80°C并且命名為‘S9’。利 用Beckman超速離心機在4°C下以100，000xg離心處理該S9部分60分鐘。將所得上清液 小心吸出，分份，命名為‘胞質溶膠’。使片狀沉淀物再懸浮于0.1M磷酸鹽緩沖液(pH7.4) 中，以每0. 5克原始組織重量的終體積為1毫升的比例制備，并命名為‘微粒體’。所有的亞 細胞部分經分份后立即在液氮中冷凍并儲存于-80°C直至使用。將測試化合物和NADPH-產生系統添加至懸浮于0. 1M磷酸鹽緩沖液(pH 7. 4)中 的人類肝微粒體(‘微粒體’部分，蛋白質濃度1毫克/毫升)中，以獲得下列的最終反應 混合物濃度5 y M測試化合物、0. 8mM D-葡萄糖-6-磷酸鹽、0. 8mM MgCl2和0. 8U/毫升葡 萄糖-6-磷酸鹽脫氫酶。熱-滅活(95°C下10分鐘)的‘S9’或微粒體用于空白實驗。反 應混合物在37°C下孵育5分鐘，然后通過加入0. 8mM ^ -NADP使反應開始。使反應孵育0 或15分鐘。接著通過加入2倍體積的DMS0(或乙腈)終止反應。將樣品離心(10分鐘，900xg)，再通過LC-MS分析。
試驗4 :CYP450抑制作用測試化合物的代謝被不同CYP P450同功酶抑制的作用是使用大腸桿菌表達的蛋 白質(3A4、2C9、2D6、1A2和2C19)測定的，其將它們的特異性底物轉化為熒光分子(表6)。 此種熒光分子是使用熒光板讀數器(Vict0r2(WallaC)或Fluoroskan (Labsystems))測量 的。抑制酶反應的化合物將導致熒光訊號減弱。CYP P450酶是自行制備的或市購的，并且 儲存于-80°C。表6 由各個大腸桿菌表汰的CYP P450同功_介導的轉仆,作用 此試驗在黑色96孔Costar權中進行。將測試化合物加至存在NADPH產生系統的 CYP P450酶溶液中。在37°C下預孵育5分鐘后，添加新配制的磷酸鹽緩沖(pH 7. 4)的底物 溶液。采用已知的CYP P450抑制劑作為陽性對照組，陰性對照組在CYP P450酶不存在下進 行。最終反應混合物濃度參見表7。使反應混合物在37°C下分別培育30min(CYP3A4-BFC)、 30min (CYP3A4-BQ)、lOmin(CYP3A4-DBF)、15min(CYP1A2-CEC)、30min(CYP2C9-MFC, CYP2C19-CEC)或45min (CYP2D6-AMMC)。然后通過添加200 u 1乙腈終止該反應，并檢測熒 光信號。表7 供CYP P450同功_抑制i式駘的j|終反應、混合物濃度 CYP P450同功酶抑制作用(％抑制)的計算%活性=(100/ (陽性對照組平均值-陰性對照組平均值))x (樣品平均值_陰性 對照組平均值)% 抑制=100-% 活性試驗5 %代謝阻斷TMC114代謝的抑制作用將達魯那韋(目前以Prezista 銷售的TMC 114)和待測增強劑化合物添加到懸 浮于磷酸鉀緩沖液(PH 7.4)中的人類肝微粒體(‘微粒體’部分，蛋白質濃度1毫克/毫 升)中，以最終反應混合物濃度為3yM達魯那韋及3yM測試化合物。在非增強的平行反 應中，未添加測試化合物。煮沸的人類肝微粒體用于空白實驗。在添加(以1 3(v/v)比率)由下列組成的 NADPH生成混合物到2% NaHC03中后0 _煙堿酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(0 "NADP, 0. 5毫 克/毫升，653. 2 u M)、D-葡萄糖-6-磷酸鹽(2毫克/毫升，7. ImM)、葡萄糖_6_磷酸鹽脫氫 酶(1. 5U/毫升)，使反應混合物在37°C下孵育30或120分鐘，然后通過提高溫度至95°C以 終止反應。利用HPLC-MS測定達魯那韋的濃度。對照組值為12% (10個實驗的中間值)， 其是在剩余的TMC 114百分比在非增強反應(=測試化合物不存在)中測定時獲得的。為了測試體內的“增強容量”(=化合物提高達魯那韋的藥物動力學的能力)，代 表性實例CI、C6和C7是在施用5毫克/公斤體重的達魯那韋15分鐘前，以5毫克/公斤 體重的劑量經口(在適合的賦形劑中，例如PEG400-或PEG400/30%鹽水或Hp0⑶)給予 一組(n = 3)喂食的雄性小獵犬。經口用藥是利用灌食法完成。在所有時間，使犬自由且 可持續的用水。血液樣品是在用藥后0 (=用藥前)、0. 5、1、2、4、7和24小時的時候從頸靜 脈收集的。將樣品在5°C下以1900xg離心10分鐘使血漿分離。分離的血漿在血液取樣后 兩小時內儲存于冰箱中。在所有的時間，血液和血漿樣品均放置在熔冰上并避免光照。通 過LC-MS/MS方法針對達魯那韋及增強化合物作分析各個血漿樣品。達魯那韋的藥物動力 學參數是使用非隔室模型(noncompartmental)分析法、WinNonLin軟件5. 0版，Pharsight 計算的，并且列于表8中。所列的數值系3只犬的平均值。交叉變化(fold change ；FC)值 意指與對照組實驗(只給5毫克/毫升達魯那韋)的差異。
表8寸汰■幃■騎綱褲 實驗試劑均購自商業來源，并以收到的狀態使用，薄層色譜分析法是在硅膠60F254板 (Merck)上進行，LC-MS分析是利用下列方法之一完成。化合物C1-C55的數據列于表1 (參 見前面)。LCMS-方法 1HPLC-系統Waters Alliance 2695 (泵 + 自動取樣器)，Waters 996(光二極管陣 列_檢測器)柱Waters XTerra MS C18 2. 5 μ m 50x4. 6mm溫度55°C流動相A:10mM HC00NH4+0. 1% HCOOH 在水中B : CH3CN梯度0分鐘15% B，3 分鐘95% B, 4. 2 分鐘95% B平衡時間1.2分鐘流速2毫升/分鐘注射體積0. 5毫克/毫升溶液，5微升MS-檢測器Waters ZQ離子化以正和負模式的電噴射LCMS-方法 2HPLC-系統Waters Alliance 2790 (泵 + 自動取樣器)，Waters 996(光二極管陣 列_檢測器)柱Waters SunFire C18 3. 5 μ m 100x4. 6mm溫度55°C流動相A IOmM NH400CH+0. 1 % HCOOH 在水中B:乙月青梯度0分鐘5% B, 5. 4 分鐘95% B, 7. 2 分鐘95% B平衡時間1.8分鐘流速1.5毫升/分鐘注射體積0. 5毫克/毫升溶液，5微升MS-檢測器Waters LCT離子化以正及負模式的電噴射
NMR光譜是在以400MHz操作的Bruker Avance 400光譜儀上記錄的。化學位移 以ppm給出，J值以Hz為單位。多重峰性使用下列縮寫標示d指雙峰，t指三峰，m指多重 峰,等等。化合物名稱利用ChemdrawUltra 9. 0. 7版(CambridgeSoft)生成。臉式(I)化合物是根據方案1、2和3所提供的概括性方法1、2和3制得的。更詳細 的步驟描述于下文。 方案1 方法1 方案2 方法2 方案3 方法3方案4及5闡釋某些中間體羧酸(在上面方案中是以Il標示的)在無法市購取 得的情況下的制法。這些方案旨在闡釋而非限制。
方案4 2-甲基苯并M噁唑-6-甲酸(4. 2)的合成使化合物4. 1 (1. 10g)和1，1，1-三甲氧基乙烷(5mL)的溶液在微波中在100°C下 加熱5分鐘。使反應混合物在真空下濃縮，得到1. 26g的化合物4. 2(95%純度)為棕色粉 末。NMR(400MHz, DMS0-d6) 8 ppm2. 66(s,3H) ,7. 74 (d，J = 8. 4Hz，1H)，7. 96 (dd，J = 8. 3， 1. 4Hz, 1H)，8. 16 (d, J = 1. 4Hz, 1H)，13. 07 (s (br)，1H). 方案5 合成2_(乙基(甲基)氨基)苯并[d]噁唑-6-甲酸(5.6)在冰浴中向無水MeOH(4L)的攪拌的溶液中滴加CH3C0C1 (490mL)，低于10°C。然 后加入化合物4. 1 (486g，3. 17mol)。使該混合物在室溫下攪拌2天。TLC (EtOAc/石油醚= 1 1)顯示反應完全。在真空下除去MeOH。將水(4L)加至該混合物中。緩緩加入K2C03， 直到pH= 10。分離有機相，用妝2504干燥，濃縮，得到化合物5.2(46(^，80%)為棕色固 體。將化合物5. 2(393g，2. 35mol)和 o_ 乙基黃原酸鉀(393g，2. 45mol)在吡啶(3L) 中的混懸液加熱至回流達12小時。TLC (EtOAc/石油醚=1 2)顯示反應完全。使該混 合物冷卻至室溫，再傾入到四個5L燒瓶中，其中含有1600mL濃HC1和10L冰水。使反應攪 拌5分鐘，通過過濾回收固體產物。將該固體用1L水洗滌，再干燥30分鐘。使該固體溶 解于10L乙酸乙酯中，用2L的IN HC1和1L的鹽水洗滌，用Na2S04干燥，濃縮，得到化合物 5. 3(390g,79. 3% )為粉紅色固體。在低于20°C下向化合物 5. 3(320g，1. 53mol)和 K2C03(276g，2mol)在Et0AC(3L)中 的混懸液中加入Mel (238. 9g，1. 68mol)。使該混合物在室溫下攪拌12小時。TLC (EtOAc/ 石油醚=1 3)顯示反應完全。將水(2L)加至該混合物中。分離有機相，用Na2S04干燥， 濃縮，得到5.4(320g，93.8% )為粉紅色固體。使化合物5. 4 (5g)溶解于75mL THF中。加入N-甲基-N-乙基胺(13. 2g，10eq)，再將該混合物在70°C攪拌直到LC-MS顯示反應完全。使該混合物蒸發至干燥，該化合物 5.5(5. 25g,99% )就這樣用于下一反應。使化合物5. 5(5. 25g)溶解于 THF-水 1 1 (IOOmL)中。加入 LiOH (5. 36g，IOeq)。 將該混合物在70°C攪拌過夜。加入濃HCl直到見到沉淀。將該混合物用IOOmL 2-Me-THF 萃取3次。使合并的有機層用MgSO4干燥。過濾，蒸發溶劑，得到5. 6為淡黃色固體。使該 化合物在真空下干燥過夜。得到 4. 33g(88% )。1H NMR(400MHz, DMS0-d6) δ ppm 1. 20 (t, J =7. 2Hz,3H)，3. 15 (s, 3H)，3. 58 (q, J = 7. 1Hz，2H)，7. 29 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，7. 80 (dd, J = 8. 3，1. 5Hz, 1H)，7. 84 (d, J=L 5Hz, 1H)，12. 65 (s (br)，1H)最終化合物的代表性實例通過方法1制備 方案6 合成噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羥基-4-(^異丁基苯并[d]噻唑_6_甲 酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C7)使⑶-1-((S)_環氧乙烷-2-基)-2_苯基乙基氨基甲酸叔丁酯(25. Og) (6. 1)和 異丁基胺(10. Oeq)在異丙醇(150mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。使反應混合物在真 空下濃縮，定量得到6. 2。使該粗產物在高真空下干燥，就這樣用于下一步驟。使在二氯甲烷中的(2S，3R) -3-羥基_4_ (異丁基氨基)苯基丁烷_2_基氨基甲 酸叔丁酯(6. 2) (31. Og)加至苯并噻唑-6-甲酸(1. 05eq)、三乙胺(1. 5eq)和HATU(2-(7_氮 雜-IH-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3_四甲基脲鐺六氟磷酸鹽，1.05eq)在二氯甲烷(500mL) 中的溶液中。反應混合物在室溫下攪拌過夜。加入水，相分離。有機相用飽和Na2CO3水溶 液、鹽水洗滌三次，用MgSO4干燥，在減壓下濃縮。使殘余物通過柱色譜法純化(洗脫液二 氯甲烷一二氯甲烷/甲醇95 5)，定量得到化合物6. 3。將氯代三甲基甲硅烷(3eq)加至(2S，3R)_3_羥基_4_(N-異丁基苯并[d]噻 唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸叔丁酯(6. 3) (45g)和碘化鈉(4eq)在乙 腈(300mL)中的溶液中。反應混合物在室溫下攪拌2小時。加入2M NaOH水溶液，持續攪 拌另外30分鐘。將鹽水和二氯甲烷加至反應混合物中。分離有機相，用鹽水洗滌，用MgSO4 干燥，在減壓下濃縮。將該化合物通過柱色譜法純化(洗脫液二氯甲烷一二氯甲烷/甲醇9 1)，獲得26. 6g (74% )的6. 4為白色固體。使N-((2R，3S)-3-氨基-2-羥基-4-苯基丁基)-N-異丁基苯并[d]噻唑-6-甲 酰胺(6.4) (20. 9g)、2，5-二氧代吡咯烷-1-基噻唑-5-基甲基碳酸酯(1. Oeq)和三乙胺 (1. 2eq)在2-甲基-四氫呋喃(300mL)中的溶液在室溫下攪拌3小時。將反應混合物用飽 和Na2C0yK溶液洗滌，用1%304干燥，在減壓下濃縮。使該粗產物通過柱色譜法純化(洗脫 液二氯甲烷一二氯甲烷/甲醇95 5)，得到24.0g(85% )的純化合物C7。NMR (400MHz,氯仿-d_ ) S ppm 0. 63—0. 80 (m，6H)，1. 71 — 1. 86 (m，1H)， 2. 90-3. 02 (m, 1H)，3. 02-3. 23 (m, 3H)，3. 41-3. 53 (m, 1H)，3. 82-4. 06 (m, 3H)，4. 86 (s (br)， 1H)，4. 99-5. 08 (m, 1H)，5. 16-5. 33 (m, 2H)，7. 17-7. 33 (m, 5H)，7. 53 (d, J = 8. 2Hz, 1H)， 7. 82 (s, 1H) ,8. 02 (s, 1H) ,8. 17 (d, J = 8. 3Hz, 1H) ,8. 78 (s, 1H) ,9. 09 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_異丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)_3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C1) NMR(400MHz,氯仿-d ) S ppm 0. 58-0. 84 (s (br), 6H)，1. 28 (t，J = 7. 1Hz， 3H)，1. 77 (s (br)，1H)，2. 90-2. 99 (m, 1H)，3. 00-3. 41 (m, 3H)，3. 17 (s, 3H)，3. 42 (d (br)，J = 13. 9Hz, 1H), 3. 62 (q, J = 7. 2Hz，2H)，3. 71-4. 05 (m，3H)，5. 05-5. 34(m，4H)，7. 14-7. 37 (m, 8H), 7. 79 (s, 1H) ,8. 76 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羥基-4-(^異丁基-2-(哌啶-1-基)-苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C3) NMR (400MHz,氯仿-d. ) S ppm 0. 71 (s (br)，6H)，1. 64-1. 80 (m，6H)， 2. 82-3. 27 (m, 4H)，3. 4 (d，J = 12. 9Hz, 1H)，3. 69 (s,4H)，3. 75-4. 07 (m 3H)，4. 92-5. 3 (m, 4H)，7. 14-7. 32 (m, 8H)，7. 78 (s, 1H)，8. 75 (s, 1H)吡啶-4-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_異丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)_3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C10) 1H NMR (400MHz,氯仿-d. ) δ ppm 0· 75 (s (br)，6H)，1· 25 (t，J = 7·2Ηζ，3Η)， 1. 75(s，1Η)，2· 90-2. 99(m，1Η)，3· 0-3. 40(m，3H)，3· 20(s，3H)，3· 42(d，J = 12. 6Ηζ，1Η)， 3. 62 (q, J = 7. 2，2H)，3. 71-4. 05 (m, 3H), 4. 94 (d, J = 14. 3Hz, 1H)，5. 07 (d, J = 14. 8Hz, 1H)，5. 07 (s (br)，1H)，5. 23 (s (br)，1H)，7. 09 (d，J = 4. 6，2H)，7. 1-7. 3 (m, 8H)，8. 53 (d, J = 5. 9，2H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)-N-甲基苯并[d]噁唑_6_甲 酰氨基)-3-羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C19) 1H NMR(400MHz,氯仿 _d) δ ppm 1. 27 (t，J = 7. 1Hz，3H)，2. 85-3. 96 (m，1H)， 2· 98-3. 09(m，4H)，3· 18 (s，3Η)，3· 37-3. 48 (m，1Η)，3· 61 (q，J = 7. 1Hz，2Η)，3· 77-4. 01 (m， 3Η)，5. 03 (s (br)，1H)，5. 12-5. 25 (m, 2H)，5. 37 (s (br)，1H)，7. 10-7. 32 (m, 7H)，7. 10 (s, 1H)， 7. 78 (s，1H) ,8. 75 (s，1H)噻唑-5-基甲基(25，35)-3-羥基-4-(^異丁基-2-(吡咯烷-1_基)苯并[d] 噁唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C51)1H NMR (400MHz,氯仿-d) δ ppm 0. 50-0. 70 (m, 6H) , 1. 48-1. 62 (m, 1H), 1. 98-2. 09 (m, 4Η)，2. 83-2. 95 (m, 2Η)，3. 03-3. 20 (m, 3H)，3. 64 (t, J = 6. 6Hz,4H)， 3. 79-4. 07 (m, 3H)，5. 18-5. 30 (m, 2H)，5. 42 (s (br)，1H)，5. 66 (s (br)，1H)，7. 05-7. 34 (m, 8H), 7. 83 (s，1H) ,8. 74 (s，1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-4-(^乙基-2-(乙基(甲基)氨基)苯并[d]噁唑_6_甲 酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C29) 1H NMR(400ΜΗζ，氯仿 _d) δ ppm 1. 10 (t, J = 6. 7Ηζ，3Η)，1. 28 (t, J = 7. 1Ηζ，3Η)，
2.84-2. 96 (m, 1Η)，2. 98-3. 10 (m, 1Η)，3. 21 (s，3Η)，3. 28-3. 43 (m, 3H)，3. 64 (q, J = 7. 2Hz, 2H)，3. 72-4. 03 (m, 3H)，5. 14-5. 33 (m, 3H)，7. 14-7. 29 (m, 6H)，7. 30-7. 39 (m, 2H)，7. 79 (s, 1H) ,8. 76 (s，1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4_(N-乙基-2_(吡咯烷-1-基)苯并[d]噁唑_6_甲 酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C30) 1H NMR (400MHz,氯仿 _ d ) δ ppm 1. 02-1. 17 (s，3H)，2. 03 (t，J = 6. 6Hz, 4H)，2. 82-3. 07 (m, 1H)，3. 07-3. 13 (m, 1H)，3. 28-3. 44 (m, 3H)，3. 65 (t，J = 6. 5Hz,4H)，
3.70-4. 03 (m, 3H)，5. 10-5. 30 (m, 3H)，5. 41-5. 55 (m, 1H)，7. 08-7. 42 (m, 8H)，7. 77 (s, 1H)， 8. 75 (s，1H)噻唑-5-基甲基(2S，3S)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_異丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C52) 1H NMR (400MHz,氯仿-d ) δ ppm 0. 52—0. 71 (m，6H)，1. 27 (t，J = 7. 1Hz)， 1. 47-1. 61 (m, 1H) ,2. 86-2. 97(m,2H) ,3. 02-3. 22 (m，6H) ,3. 61 (q, J = 7. 2Hz，2H)， 3. 78-4. 06 (m, 3H)，5. 09-5. 30 (s,2H)，5. 42 (s (br)，1H)，5. 56 (s (br)，1H)，7. 06-7. 33 (m, 8H), 7. 84 (s，1H) ,8. 79 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-4-(^(環己基甲基)-2-(吡咯烷-1-基)苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C31) 1H NMR (400MHz,氯仿-d. ) δ ppm 0· 44-0. 65 (m，2H)，0· 90-1. 20 (m，3H)，
1.36-1. 50 (m，2H)，1. 50-1. 70(m,4H) ,2. 04(t, J = 6. 6Hz，4H)，2· 81-2. 96 (m, 1H)，
2.96-3. 10 (m, 1H)，3. 10-3. 21 (m, 1H)，3. 21-3. 34 (m, 1H)，3. 45-3. 56 (m, 1H)，3. 58-4. 04 (m, 7H)，5. 08-5. 28 (m, 3H)，5. 38-5. 51 (m, 1H)，7. 09-7. 36 (m, 8H)，7. 77 (s, 1H)，8. 75 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-4-(^(環己基甲基)-2-(乙基(甲基)氨基)苯并[d] 噁唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C32) 1H NMR(400MHz,氯仿-d ) δ ppm 0. 46-0. 68(m，2H)，0· 92-1. 18(m，3H)，1. 27 (t, J = 7. 1Ηζ，3Η)，1. 36-1. 50 (m, 2H)，1. 50-1. 76(m，4H)，2. 83-2. 97 (m, 1H)，2. 97-3. 10 (m, 1H)，3. 10-3. 23 (m, 4H)，3. 23-3. 33 (m, 1H)，3. 40-3. 52 (m, 1H)，3. 61 (q，J = 7. 1Hz，2H)，
3.69-4. 03 (m, 3H)，5. 07-5. 25 (m, 3H)，5. 25-5. 39 (m, 1H)，7. 08-7. 35 (m, 8H)，7. 78 (s, 1H)， 8. 76 (s，1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _3_羥基-1-苯基-4- (N-(丙_2_炔基)_2_ (吡咯 烷-1-基)苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)丁-2-基氨基甲酸酯(C33) 1H NMR (400MHz，氯仿-d. ) δ ppm 2· 06 (t，J = 7. OHz，4H)，2· 37 (t，J = 2. 2Hz， 1H)，3. 0 (s (br)，2H)，3. 58 (d, J = 13. 3Hz, 1H)，3. 68 (t, J = 6. 7Hz，4H)，3. 8-4. 15(m，3H)，
4.18-4. 22 (m, 1H)，5. 05 (s, 1H)，5. 15-5. 26 (m, 2H)，7. 19-7. 30 (m, 6H)，7. 34 (d, J = 8. IHz, 1H), 7. 43 (d, J = 8. 0Hz, 1H)，7. 52 (s, 1H) ,8. 77 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_ (2_羥基_2_甲基丙基) 苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C34) 1H NMR (400MHz，氯仿-d) δ ppm 1. 27 (t, J = 7. 1，3H)，1. 71 (s，6H)，2. 6-3. 15 (m, 3H)，3. 19 (s，3H)，3. 62 (q, J = 7. 1Hz，2H)，3. 4-4. 3 (m, 5H)，5. 19 (s (br)，3H)，7. 14-7. 25 (m, 7H), 7. 29 (d, J = 7. 8Ηζ，1Η)，7· 79(s，lH)，8. 77(s，lH) (2 個質子未觀察到)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_ (丙_2_炔基)苯并[d] 噁唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C35) 1H NMR(400MHz,氯仿 _ d ) δ ppm 2. 37 (t, J = 2. 26Hz, 1H)，3. 00 (s (br)，2H)，
3.23(s，3H)，3· 56 (d，J = 13. 2Hz，1H)，3· 63 (q, J = 7. 1Ηζ，4Η)，3· 85-4. 15(m，4H)，
4.18-4. 25 (m, 1H)，5. 04 (s (br)，1H)，5. 05-5. 4 (m, 2H)，7. 15-7. 30 (m, 5H)，7. 33 (d, J = 8. 1Hz, 1H)，7. 44 (s, 1H)，7. 51 (s，1H)，7. 81 (s，1H)，8. 77 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_異丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-1-(4_氟苯基)-3_羥基丁-2-基氨基甲酸酯(C53)
1H NMR(400MHz，氯仿-d) δ ppm 0. 58-0. 84 (s (br)，6H)，1. 28 (t，J = 7. 0Hz，3H)， 1. 77 (s (br)，1H)，2. 90-3. 28 (m, 4H)，3. 20 (s, 3H)，3. 36-3. 88 (m, 1H)，3. 63 (q, J = 7. 2Hz, 2H)，3· 85-3. 94(m，3H)，4· 95(s(br)，1H)，5· 18-5. 25 (m，3Η)，6. 94 (t，J = 8. 6Hz，2H)， 7. 15-7. 20 (m, 3H)，7. 31 (s，1H)，7. 32 (d, J = 8. OHz, 1Η)，7. 82 (s, 1H)，8. 78 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙炔基氨基)-N_(丙-2-炔基)苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C42) 1H NMR(400MHz,氯仿-d ) δ ppm 2. 34 (t, J = 2· 4Hz，1Η)，2· 37 (s (br)，1Η)， 2. 84-3. 15(m，2H)，3. 6(d，J = 13. 4Hz，1Η)，3. 8—4. 2 (m，6Η)，4. 24 (d，J = 2. 4Hz，2H)， 5. 16-5. 23 (m, 3H)，7. 1-7. 3 (m, 5H)，7. 39 (d, J = 8. OHz, 1Η)，7. 4-7. 5 (m, 1Η)，7. 52 (s, 1H)， 7. 8 (s，1H)，8. 79 (s，1H) (1 個質子未觀察到)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _3_羥基_4_ (N-異丁基苯并[d]噻唑_6_甲酰氨 基)-1_(吡啶-3-基)丁-2-基氨基甲酸酯(C55) 1H NMR (400MHz,氯仿-d ) δ ppm 0. 0—0· 74 (m，6H)，1. 71 — 1. 86 (m，1H)， 2. 92-2. 98 (m, 1H)，3. 08-3. 22 (m, 3H)，3. 45-3. 49 (m, 1H)，3. 89-3. 98 (m, 3H)，4. 86 (s (br)， 1H), 5. 04(s(br)，1H)，5. 10(d(br)，J = 9. 2Hz, 1H)，4· 99-5. 08 (m, 1H)，5· 17-5. 28 (m, 2H)，
7.18-7. 20 (m, 1H)，7· 53 (d, J = 7. 6Hz, 1H)，7· 60(d(br)，1H)，7· 82 (s，1H)，8· 03 (s，1Η)，
8.17 (d, J = 8. 4Hz, 1H)，8. 47 (s (br)，2H)，8. 78 (s, 1H)，9. 10 (s，1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基(甲基)氨基)_N_異丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-(吡啶-3-基)丁 -2-基氨基甲酸酯(C54) 1H NMR(400MHz,氯仿-d ) δ ppm 0. 73 (s (br)，6H)，1. 28 (t，J = 7. 2Hz,3H)， 1. 78(s(br)，1H) , 2. 92-2. 94 (m, 1H) , 3. 04-3. 15(m，2H) ,3. 20 (s, 3H) , 3. 26 (dd, J = 14. 0,8. 4Hz, 1H) ,3. 39 (d, J = 12. 4Hz, 1H) ,3. 63 (q, J = 7. 1Hz，2H)，3. 87-3. 94 (m，3H)， 5. 00 (s (br)，1H)，5. 16-5. 30 (m, 3H)，7. 18-7. 21 (m, 2H)，7· 31 (s，1H)，7. 32 (d, J = 8. OHz, 1Η)，7. 58-7. 60 (s, 1Η)，7. 82 (s, 1H)，8. 47 (s (br)，2H)，8. 78 (s, 1H)化合物的代表性實例通過方法2制備 方案7:合成苯并[d][l，3] 二氧雜環戊烯-5-基甲基(2S，3R) _4_ (2_ (乙基(甲 基)氨基)-N_異丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸 酯(C36)將(2R，3S) -3- ( 二芐基氨基)-1-(異丁基氨基)-4-苯基丁烷-2-醇(7. 1) (29. 5g)在二氯甲烷(200mL)中的溶液加至2-(乙基(甲基)氨基)苯并[d]噁唑-6-甲 酸(1.05eq)、三乙胺(2. Oeq)和BOP(苯并三唑基N-氧基三二甲基氨基鱗六氟磷酸鹽， 1. 05eq)在二氯甲烷(500mL)中的溶液中。反應混合物在室溫下攪拌4小時。加入水，相 分離。有機相用飽和Na2CO3水溶液洗滌三次，用MgSO4干燥，在減壓下濃縮。使殘余物通過 柱色譜法純化(洗脫液庚烷/乙酸乙酯6 4—乙酸乙酯)，得到38g(87%)的化合物 7. 2.將鈀/ 碳(5g，10 % w/w Pd/C)加至 N- ((2R，3S) _3_ ( 二芐基氨基)_2_ 羥基 _4_ 苯 基丁基)-2_(乙基(甲基)氨基)-N-異丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰胺(7. 2) (18g)在甲醇 (400mL)中的溶液中。使反應混合物在室溫和H2氣氛下攪拌，直到LCMS顯示完全轉化。將 該混合物用硅藻土過濾。濾液蒸發后，得到10.6g(83%)的化合物7. 3。使N- ((2R，3S) _3_氨基_2_羥基_4_苯基丁基)_2_ (乙基(甲基)氨基)-N-異丁 基苯并[d]噁唑-6-甲酰胺(7. 3) (416mg)、苯并[d] [1,3] 二氧雜環戊烯_5_基甲基4-硝基 苯基碳酸酯(1.05eq)、DMAP(0. 2eq)和三乙胺(l.Oeq)在DMF(IOmL)中的溶液在室溫下攪 拌過夜。加入水，相分離。有機相用飽和Na2CO3水溶液洗滌三次，用MgSO4干燥，在減壓下濃 縮。使反應混合物用飽和Na2CO3水溶液洗滌，用MgSO4干燥，在減壓下濃縮。該粗產物通過柱 色譜法純化(洗脫液二氯甲烷/甲醇99 1 — 97 3)，得到263!1^(45%)的純化合物 (C36)。1H NMR(400MHz，氯仿 _d) δ ppm 0. 72 (s，6H)，1· 28 (t，J = 7. 2Hz，3H)，1. 77 (s (br)， 1H)，2. 94-3. 26 (s+m, 3H+4H)，3. 40-3. 43 (m, 1H)，3. 63 (q, J = 7. IHz，2H)，3. 84-3. 97 (m, 3H)，4. 88-3. 93 (m, 3H)，5. 15 (s (br)，1H)，5. 95 (s, 2H)，6. 75-6. 77 (m, 3H)，7. 18-7. 32 (m, 8H)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _3_羥基_4_ (N-異丁基甲基-IH-苯并[d]咪 唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C8) 1H NMR (400MHz,氯仿-d· ) δ ppm 0. 61-0. 78 (m，6H)，1. 70-1. 85 (m，1H)， 2. 90-3. 02 (m, 1H)，3. 02-3. 28 (m, 3H)，3. 39-3. 53 (m, 1H)，3. 86 (s,3H)，3. 76-4. 07 (m, 3H)， 5. 00-5. 30 (m, 4H)，7. 17-7. 32 (m, 6H)，7. 51 (s，1H)，7. 76-7. 84 (m, 2H)，7. 94 (s, 1H)，8. 78 (s, 1H)化合物的代表性實例通過方法3制備 方案8 合成噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2_(乙基氨基)-N-異丁基苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C27)將(2R，3S) _3_ (二芐基氨基)(異丁基氨基)~4~苯基丁烷_2_醇(8. 1)的草酸 鹽(60. Og)、二碳酸二叔丁酯(0. 99eq)和三乙胺(3. 3eq)在二氯甲烷(IOOOmL)中的溶液在 室溫下攪拌過夜。使反應混合物用飽和NaHCO3水溶液洗滌，用MgSO4干燥，在減壓下濃縮。 該粗產物通過柱色譜法純化(洗脫液二氯甲烷)，得到60. 3g(99% )的純化合物8. 2。將鈀/ 碳(12.4g，10 % w/w Pd/C)加至 was added to a solution of (2R, 3S)-3-( 二芐基氨基)-2-羥基-4-苯基丁基(異丁基)氨基甲酸叔丁酯(8. 2) (60. 3g)在 甲醇(400mL)中的溶液中。使反應混合物在室溫和H2氣氛下攪拌直到LCMS顯示完全轉化。 將該混合物用硅藻土過濾，在減壓下濃縮。該粗產物通過柱色譜法純化(洗脫液二氯甲烷 —二氯甲烷/甲醇(NH3)93 7)，得到32.6g(83%)的純化合物8. 3。使(2R，3S)-3-氨基-2-羥基-4-苯基丁基(異丁基)氨基甲酸叔丁酯(8.3)、2，5-二氧代吡咯烷-1-基噻唑-5-基甲基碳酸酯(l.Oeq)和三乙胺(1. Oleq)在2_甲基-四 氫呋喃(600mL)中的溶液在室溫下攪拌3小時。使反應混合物用飽和NaHC03水溶液洗滌， 用皿8504干燥，在減壓下濃縮。該粗產物(8.4)就這樣用于下一步驟。向噻唑-5-基甲基(2R，3S)-2_羥基-4-苯基丁烷-1，3_ 二基二氨基甲酸叔丁酯 (8. 4) (46. 3g)在二氯甲烷(400mL)中的溶液中加入在異丙醇中的HC1 (5-6N) (100mL)。使 反應混合物在室溫下劇烈攪拌，直到顯示完全轉化。使反應混合物在真空下濃縮。將該殘 余物用飽和NaHC03水溶液洗滌，用MgS04干燥，在減壓下濃縮，得到33. 9g (92% )的純化合 物 8. 5。將噻唑-5-基甲基(2S，3R)-3_羥基_4-(異丁基氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲 酸酯(8. 5) (1125mg)加至2_(乙基氨基)苯并[d]噁唑-6-甲酸(1. Oeq)、三乙胺(3. Oeq) 和B0P (苯并三唑基N-氧基三二甲基氨基鱗六氟磷酸鹽，l.Oeq)在二氯甲烷(10mL)中的混 合物中。反應混合物在室溫下攪拌過夜。加入水，相分離。使有機相用飽和NaHCOyK溶液洗 滌3次，用1%504干燥，在減壓下濃縮。使殘余物通過柱色譜法純化(洗脫液二氯甲烷一二 氯甲烷 / 甲醇(NH3) 98 2)，得到116511^(66%)的純化合物 C27。NMR(400MHz，氯仿 _d) 8 ppm 0. 56-0. 81 (m,6H), 1.31 (t, J = 7. 1Hz，3H)，1. 65-1. 85 (m，1H)，2. 80-3. 30 (m，4H)， 3. 31-3. 58 (m, 3H)，3. 70-4. 04 (m, 3H)，5. 04-5. 35 (m, 4H)，5. 61 (s (br)，1H)，7. 04-7. 42 (m, 8H), 7. 79 (s, 1H) ,8. 76 (s, 1H) 噻唑-5-基甲基(2S，3R) ~4~ (2_氨基_N_異丁基苯并[d]噻唑_6_甲酰氨 基)-3-羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C6)NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 58-0. 84 (m，6H)，1. 70 (s (br)，1H)， 2. 80-2. 95 (m, 1H)，2. 97-3. 17 (m, 3H)，3. 33 (d, J = 13. 6Hz, 1H)，3. 8-4. 0 (m, 3H)， 4. 9-5. 1 (m，2H)，5. 11-5. 23 (m，2H)，5. 41 (s (br) , 2H), 7. 14-7. 37(m，6H)，7. 44 (d，J = 8. 2Hz, 1H)，7. 57 (s, 1H)，7. 74 (s，1H)，8. 70 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羥基-4-(^異丁基-2-(4_甲基哌嗪基)苯并 [d]噁唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C15) NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 63-0. 78 (m, 6H) , 1. 68-1. 85 (m, 1H), 2. 36 (s,3H)，2. 45-2. 60 (m, 4H) 2. 83-2. 98 (m, 1H)，2. 98-3. 29 (m, 3H)，3. 35-3. 48 (m, 1H)， 噻唑-5-基甲基(2S，3R) ~4~ (2~ (2~ ( 二甲基氨基)乙基氨基)_N_異丁基苯并[d] 噁唑-6-甲酰氨基)_3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C16) NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 62-0. 80 (m，6H)，1. 65-1. 85 (m，1H)，2. 29 (s， 6H)，2. 55-2. 62 (m, 2H) 2. 85-3. 27 (m, 4H)，3. 35-3. 43 (m, 1H)，3. 54 (s,2H)，3. 75-4. 04 (m, 3H)，4. 93-5. 30 (m, 4H)，5. 86 (s (br)，1H)，7. 11-7. 38 (m, 8H)，7. 81 (s，1H)，8. 78 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羥基-4-(^異丁基-2-(甲基氨基)苯并[d]噁 唑-6-甲酰氨基)-1_苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C26)NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 58-0. 80 (m, 6H) , 1. 65-1. 85 (m, 1H), 2. 79-3. 31 (m, 7H)，3. 36-3. 52 (m, 1H)，3. 71-4. 07 (m, 3H)，5. 05-5. 38 (m, 4H)，5. 76 (s (br)， 1H)，7. 06-7. 42 (m, 8H)，7. 79 (s, 1H)，8. 76 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _3_羥基_4_ (N_異丁基苯并[d]噁唑_6_甲酰氨 基)-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C38)NMR (400MHz,氯仿-d) S ppm 0. 62-0. 80 (m, 6H) , 1. 65-1. 86 (m, 1H), 2. 82-2. 98 (m, 1H)，2. 99-3. 22 (m, 3H)，3. 38-3. 58 (m, 1H)，3. 62-4. 10 (m, 3H)，4. 70-5. 35 (m, 4H)，7. 05-7. 33 (m, 5H)，7. 34-7. 43 (m, 1H)，7. 65 (s, 1H)，7. 72-7. 87 (m, 2H)，8. 17 (s, 1H)， 8. 76(s,1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R) _4_ (2-乙基_N_異丁基苯并[d]噁唑_6_甲酰氨 基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C39) NMR (400MHz,氯仿 _ d ) S ppm 0. 61-0. 80 (m, 6H)，1. 46 (t, J = 7. 5Hz，3H)， 1. 64-1. 85 (m, 1H)，2. 83-3. 23 (m, 6H)，3. 38-3. 57 (m, 1H)，3. 72-4. 05 (m, 3H)，4. 82-5. 04 (m, 1H)，5. 07-5. 37 (m, 3H)，7. 03-7. 36 (m, 6H)，7. 54 (s, 1H)，7. 59-7. 72 (m, 1H)，7. 79 (s, 1H)， 8. 76(s,1H)噻唑-5-基甲基(25，3幻-3-羥基-4-(^異丁基-2-甲基苯并[d]噁唑_6_甲酰 氨基)-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C40)
NMR (400MHz,氯仿-d. ) S ppm 0. 62-0. 79 (m，6H)，1. 66-1. 86 (m，1H)， 2. 66 (s, 3H)，2. 83-2. 98 (m, 1H)，2. 99-3. 23 (m, 3H)，3. 37-3. 53 (m, 1H)，3. 76-4. 06 (m, 3H)， 4. 85-4. 96 (m, 1H)，5. 05-5. 33 (m, 3H)，7. 10-7. 36 (m, 6H)，7. 54 (s, 1H)，7. 60-7. 70 (m, 1H)， 7. 80 (s, 1H) ,8. 76 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-3_羥基-4_(N-異丁基-2-苯基苯并[d]噁唑_6_甲酰 氨基)-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸酯(C41)
NMR (400MHz,氯仿-d. ) S ppm 0. 58-0. 80 (m，6H)，1. 69-1. 86 (m，1H)， 2. 88-3. 00 (m, 1H)，3. 00-3. 26 (m, 3H)，3. 39-3. 55 (m, 1H)，3. 77-4. 07 (m, 3H)，4. 78-5. 32 (m, 4H)，7. 10-7. 33 (m, 5H)，7. 38 (d, J = 8. 3Hz, 1H)，7. 50-7. 60 (m, 3H)，7. 65 (s, 1H)， 7. 70-7. 84 (m, 2H)，8. 21-8. 34 (m, 2H)，8. 77 (s, 1H)噻唑-5-基甲基(2S，3R)-3_羥基-4_(N-異丁基-2-iso丙基苯并[d]噁唑_6_甲 酰氨基)-l_苯基丁烷-2_基氨基甲酸酯(C45) 1H NMR(400ΜΗζ,氯仿 _ d. ) δ ppm 0. 62-0. 80 (m, 6Η)，1. 48 (d, J = 6. 9Ηζ,6Η)， 1. 68-1. 86 (m, 1Η)，2. 89-3. 01 (m, 1H)，3. 01-3. 22 (m, 3H)，3. 27 (hept, J = 7. OHz, 1H)， 3. 34-3. 49 (m, 1H)，3. 79-4. 05 (m, 3H)，4. 85-5. 02 (m, 2H)，5. 13-5. 32 (m, 2H)，7. 15-7. 36 (m, 6H), 7. 53 (s，1H), 7. 70 (d, J = 8. 2Hz, 1H)，7. 82 (s, 1H) ,8. 78 (s, 1H)
權利要求
下式的化合物或其鹽和立體異構體其中R是H、苯基、吡啶基、C1-6烷基或其中A和B相互獨立地是H；C1-6烷基，其任選被炔基、雜芳基或選自氮、氧或硫的雜原子取代，該雜原子任選被C1-6烷基取代；或者A和B與它們所連接的氮一起形成5或6元的飽和、部分或完全不飽和的含有1至4個各自獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的雜環所述雜原子任選被C1-6烷基取代；R1選自R2為C1-6烷基，其任選被OH、氨基烷基、吡咯烷基、嗎啉基、炔基或任選被鹵素取代的C3-7環烷基取代；R3是OH；R4是H或烷基；R5是吡啶基或苯基，其任選被鹵素取代；X是O、S或N，其任選被C1-6烷基取代。FPA00001142576100011.tif,FPA00001142576100012.tif,FPA00001142576100013.tif
2.ISCh烷基，其任選被OH、氨基烷基、吡咯烷基、嗎啉基、炔基或任選被鹵素取代的C 環烷基取代； R3 是 0H ； R4是H或烷基；R5是吡啶基或苯基，其任選被鹵素取代； X是0、S或N，其任選被Cm烷基取代。 2.權利要求1的化合物，其具有下式結構
3.權利要求1的化合物，其具有下式結構
4.權利要求1的化合物，其具有下式結構
5.用作藥物的權利要求1-4任一項的化合物。
6.權利要求1-4任一項的化合物在制備用于增強抗HIV過濾性病原體作用的藥物中的 用途。
7.一種組合，其包含a)權利要求1-4任一項的化合物和b)HIV抑制劑，或其藥學可接受的鹽。
8.權利要求7的組合，其中所述HIV抑制劑是達魯那韋或化學名稱為(1-芐 基-3- {[2- (1-環戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-異丁基-氨基} -2-羥 基-丙基)_氨基甲酸六氫-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯的化合物。
9.權利要求8的組合，其中所述化合物是噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2-(乙基(甲 基)氨基)_N-異丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸 酯，并且該HIV抑制劑是達魯那韋或化學名稱為(1-芐基-3- {[2- (1-環戊基-哌啶-4-基 氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-異丁基-氨基} -2-羥基-丙基)-氨基甲酸六氫_呋喃并 [2,3-b]呋喃-3-基酯的化合物。
10.權利要求9的組合，其中所述化合物是噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2-(乙基(甲 基)氨基)_N-異丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨基甲酸 酯，并且該HIV抑制劑是化學名稱為(1-芐基-3- {[2- (1-環戊基-哌啶-4-基氨基)-苯 并噻唑-6-磺酰基]-異丁基-氨基} -2-羥基-丙基)-氨基甲酸六氫-呋喃并[2，3-b] 呋喃-3-基酯的化合物。
11.用作藥物的權利要求7-10任一項的組合。
12.權利要求7-10任一項的組合在制備用于治療或預防HIV感染的藥物中的用途。
13.權利要求7-10任一項的組合，其中式(I)-(IV)化合物中任一種或其藥學可接受鹽 的用量，在相對于單獨施用所述HIV抑制劑時的生物利用度下，該量足以在臨床上改善所 述HIV抑制劑的生物利用度。
14.權利要求7-10任一項的組合，其中式(I)-(IV)化合物中任一種或其藥學可接受的 鹽的用量，相對于HIV抑制劑單獨施用時的所述至少一種藥物動力學變量而言，該量足以 增加HIV抑制劑的至少一種選自下列的藥物動力學變量在12小時時的t1/2、(；in、(；ax、Css、 AUC，或者在24小時時的AUC。
15.一種藥物組合物，其包含權利要求7-10任一項的組合，以及藥學可接受的賦形劑。
16.一種產品，其包含權利要求1-4任一項的式(I)-(IV)的任一化合物，以及HIV抑制 劑或其藥學可接受的鹽；并作為組合制劑在HIV治療中同時、分開或順序使用。
17.權利要求16的產品，其中所述HIV抑制劑是達魯那韋或化學名稱為(1-芐 基-3- {[2- (1-環戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并噻唑-6-磺酰基]-異丁基-氨基} -2-羥基-丙基)_氨基甲酸六氫-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯的化合物。
18.權利要求17的產品，其中所述化合物是噻唑-5-基甲基(2S，3R)-4-(2-(乙基 (甲基)氨基)-N_異丁基苯并[d]噁唑-6-甲酰氨基)-3_羥基-1-苯基丁烷-2-基氨 基甲酸酯，并且所述HIV抑制劑是(1-芐基-3- {[2- (1-環戊基-哌啶-4-基氨基)-苯并 噻唑-6-磺酰基]-異丁基-氨基}-2_羥基-丙基)_氨基甲酸六氫-呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基酯。
全文摘要
本發明涉及具有CYP450抑制性質且因而可作為某些藥物的增強劑的化合物，即，它們在共同施用時可增加某些藥物為至少一種藥物動力學變量。本發明進一步提供利用所述化合物作為某些藥物的生物利用度改善劑的用途。還提供了本發明化合物的制備方法和藥物組合物。
文檔編號C07D417/14GK101878210SQ200880118280
公開日2010年11月3日 申請日期2008年12月5日 優先權日2007年12月6日
發明者B·S·哈倫伯格, G·A·E·范特克盧斯特, G·Y·P·哈徹, J·C·薩薩基, J·E·鮑梅斯特, T·H·M·瓊克斯, W·B·G·謝彭斯 申請人:泰博特克藥品公司