專利名稱：：高純度脂肽、脂肽膠束及其制備方法
技術領域：
：本發明涉及高度純凈形式的脂肽，包括達托霉素，它是一種對革蘭氏陽性細菌-包括耐受常規抗生素的菌株-具有有力殺菌活性的脂肽抗生素。本發明還涉及用于制備高度純凈形式脂肽的方法。本發明進一步涉及脂肽的膠束。本發明還涉及脂肽膠束的藥物組合物和使用這些組合物的方法。本發明還涉及從脂肽的無關聯單體制備脂肽膠束和轉化脂肽膠束為無關聯單體的方法。本發明還涉及利用膠束制備脂肽的方法，該方法容易達到商業生產的規模。發明的背景、革蘭氏陽性感染一包括由耐藥性細菌導致的那些一發病率的迅速增加已經重新引起人們對開發新型抗生素的興趣。其中一類是脂肽抗生素，包括達托霉素。達托霉素對臨床上有關的革蘭氏陽性細菌具有有力的體外殺菌活性，這些細菌導致嚴重的和危及生命的疾病。這些細菌包括耐藥性病原體，例如萬古霉素耐受性腸球菌(VRE)、甲氧西林耐受性金黃色葡萄球菌(MRSA)、糖肽中間體易感性金黃色葡萄球菌(GISA)、凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)和青霉素耐受性肺炎鏈球菌(PRSP)，對它們很少有可供替代的治療劑。例如參見Tally等，1999，Exp.Opin.Invest.Drugs8:1223-1238，以下稱為“Tally”。達托霉素的抑制作用是迅速的、濃度依賴性體外與體內殺菌作用，和相對長效的濃度依賴性體內抗生素后作用。Baltz在這本書中描述了達托霉素，即《抗生素的生物工藝學》(BiotechnologyofAntibiotics)，第二版，編輯ff.R.Strohl(NewYorkMarcelDekker,Inc.)，1997，415-435頁，以下稱為"Baltz."。達托霉素，也被稱為LY146032，是一種能從玫瑰孢鏈霉菌(Streptomycesroseosporus))發酵衍生得到的環狀脂肽抗生素。達托霉素是玫瑰孢鏈霉菌(S.Roseosporus)的A-21978C。因子型抗生素中的一員，它由連接到一個環狀13-氨基酸肽的N-末端色胺酸上的癸酰基側鏈構成(圖I)。達托霉素有很好的作用性，因為它抗多數革蘭氏陽性細菌高度有效，并具有高殺菌性和快速作用性，具有低的耐藥性幾率，能有效地對抗具有抗生素耐藥性的生物。現在將此化合物開發成各種制劑以治療由細菌引起的嚴重感染，細菌包括一但不限于一甲氧西林耐受性金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(MRSA)和萬古霉素耐受:性腸球菌(enterococci)(VRE)。一個美國專利描述了包括達托霉素(LY146032)的A-21978C抗生素及其衍生物，和制造并分離A-21978C抗生素及其衍生物的方法。美國專利Re.32，333,Re.32，455和4，800,157記載了在水下需氧發酵條件下通過培養玫瑰孢鏈霉菌(Streptomycesroseosporus))NRL15998而合成達托霉素的方法。美國專利4，885，243描述了一種通過用癸脂肪酸或其脂或鹽供給發酵培養基養料而合成達托霉素的改進方法。美國專利Re.32，310、Re.32，311,4,537，717,4,482，487和4，524，135描述了A-21978C抗生素的脫酰基方法，和此過程中產生的肽核及抗生素衍生物的再酰化方法。所有這些專利都描述了一種純化的脫酰基的A-21978C抗生素核或其衍生物，它們是通過過濾發酵肉湯而分離，然后用DiaionHP-20色譜法和娃膠/C18色譜法純化的。美國專利Re.32，333和Re.32，455公開了一種純化方法，用此方法所有發酵肉湯的濾出液通過一系列沉淀和萃取步驟而得到粗的A-21978C化合物。這種粗的化合物進一步在IRA-68上進行離子交換色譜法和兩次硅膠色譜法純化。單獨的A-21978Q因子由反相硅膠或硅膠/C18分離。美國專利Re.32，333和Re.32，455還公開可以通過使用DiaionHP-20樹脂的制備色譜法并隨后進行硅膠柱色譜法的方法純化A-21978C。美國專利4，874，843描述了一種達托霉素的純化方法。在此方法中將發酵肉湯過濾并通過一含有HP-20樹脂的色譜柱。洗提后，半純化的達托霉素再通過一含有HP-20SS的色譜柱，最后再用HP-20樹脂分離。’843專利指出用此方法從結構相似的化合物中最終拆分和分離達托霉素會受到存在的雜質的阻礙，這些雜質是不能用發酵肉湯的紫外光譜分析辯認的。’843專利進一步指出用硅膠的反相色譜法、硅膠常相色譜法或離子交換色譜法清除這些雜質的嘗試也不能明顯提高達托霉素的純度。’843專利也公開了一種進行純化的“反相法”，包括使發酵產物的水溶液和一種非功能性樹脂在水相中接觸，完全除去這種帶電樹脂中的水，然后用極性有機溶劑再浸濕這種帶電樹脂，用有機溶劑洗滌樹脂，通過提高溶劑的極性從樹脂中洗脫發酵產物并將其回收發酵產物。’843專利教導此方法可以將最終純度從大約80%提高到大約93%，而將產量從大約5%提高到大約35%;但'843專利沒有公開制備達托霉素時存在的雜質種類。美國專利5，912，226揭示了生產達托霉素時兩種雜質產物的鑒定和分離方法。達托霉素，一種a-門冬氨酰肽，經過肽基轉移形成一種穩定的中間體，在其中門冬氨酰基團變成了脫水琥珀酰亞胺基(圖2)。’226專利指出這種中間體-稱為脫水達托霉素-的存在，在PH4-6的條件下更明顯。脫水琥珀酰亞胺基型的再水合產生了第二種降解產物，它包含一個￠-門冬氨酰基團，被稱為達托霉素的￠-異構體(圖3)。’226專利記載，脫水達托霉素的t-BOC衍生物可以由反相硅膠/C_18柱色譜法分離、沉淀，并用反相娃膠/C-18柱色譜法再純化。’226專利還指出也可以用DiaionHP-20ss樹脂色譜法純化達托霉素P-異構體，并用DiaionHP-20樹脂色譜法除鹽分，用反相C-18柱隨之以反轉模式的HP-20樹脂進一步純化。Kirsch等(制藥研究(PharmaceuticalResearch),6:387-393,1989,以下稱"Kirsch")聲稱在達托霉素的純化過程中產生脫水達托霉素和￠-異構體。Kirsch描述了通過控制PH條件和溫度條件降低脫水達托霉素和￠-異構體水平的方法。然而，Kirsch并不能穩定達托霉素并防止達托霉素轉化成脫水達托霉素和隨后的變成3-異構體的異構化過程。Kirsch也不能防止達托霉素降解成與脫水達托霉素和3-異構體無關的其他降解產物。’226專利聲稱可以用這些步驟制備達托霉素以使達托霉素只包含不多于2.5%重量的結合的總脫水達托霉素和￠-異構體，但它沒有指出其它雜質的水平。在美國專利4，874，843講述的方法中和為臨床試驗而進行的達托霉素大規模制備中，觀察到的達托霉素的最高純度是大約90%-93%。需要一種商業可行的方法制造更高純度的達托霉素，并且，如果可能，提高純化后達托霉素的產量。此外，需要得到只含很少或不含脫水達托霉素和￠-異構體型達托霉素的純化達托霉素。也需要降低達托霉素中其它雜質的水平。但是本領域沒有一種方法已顯示能進一步降低脫水達托霉素、3-異構體和其他雜質的水平。發明概述本發明通過提供商業可行的方法制備高水平的純化脂肽以解決這些問題。在一優選實施方案中，脂肽是達托霉素或達托霉素-相關的脂肽。在本發明的一個實施方案中，公開了一種商業可行的方法，能產生純度為95-97%的達托霉素。在另一實施方案中，公開了一種商業可行的方法，幾乎全部除去了主要雜質脫水達托霉素和￠-異構體及其他達托霉素制劑中的雜質。在本發明的另一實施方案中，公開了純化脂肽-包括達托霉素或達托霉素-相關的脂肽-的商業可行的方法，包括從低分子量污染物分離脂肽膠束并從高分子量污染物中分離非聯合脂肽。本發明也提供了分析達托霉素純度并檢測和鑒定達托霉素中其他雜質的高效液相色譜法(HPLC)色譜法，其中的一些是以前未知的。本發明也提供了純化的達托霉素，其純度至少為98%或基本上或完全不含脫水達托霉素和3-異構體。本發明提供了純化的達托霉素其中不含或完全不含脫水-達托霉素，并且與在先技術可能得到的相比，其中的￠-異構體和其他污染物的含量非常低。本發明也提供了脂肽膠束。在一優選實施方案中，膠束包含達托霉素或達托霉素-相關的脂肽。本發明也提供了含有高純度達托霉素或達托霉素-相關的脂肽膠束的組合物及使用這些組合物的方法。對附圖的簡要說明圖I顯示達托霉素的結構。圖2顯示雜質8，CB-131010的結構(以前定義為P_異構體，LY213846)。圖3顯示雜質13，CB-130952的結構(以前定義為脫水_達托霉素，LY178480)。圖4顯示雜質1，CB-131012的預計結構(以前定義為LY212218)。圖5顯示雜質2，CB-131011的預計結構。圖6顯示雜質3，CB-131008的預計結構(以前定義為LY213928)。圖I顯示雜質4，CB-131006的預計結構。圖8顯示雜質6，CB-130989的預計結構(以前定義為LY213827)。圖9顯示雜質7，CB-131005的預計結構。圖10顯示雜質12，CB-131009的預計結構。圖11顯示雜質14，CB-131078的預計結構(以前定義為LY109208)。圖12顯示大量制備包括雜質1-14的達托霉素的HPLC色譜。圖13顯示在PorosP150樹脂上純化后制備達托霉素的HPLC色譜。圖14A-14C顯示膠束狀結構。圖14A顯示球形膠束，其中雙親分子的疏水尾端朝向球形的中央，雙親分子的親水頭端朝向球形的外部，與水性環境接觸。圖14A顯示了一個實施例，其中親水頭端帶負電荷。圖14B顯示了一個脂質雙分子層結構，其中2層雙親分子集合在一起而使每層的疏水尾端相對定向，同時雙分子層每側的親水頭端與水性環境接觸。脂質雙分子層可以是球形或平面狀。圖14C顯示一種脂質體，其中脂質雙分子層，如圖14B所示，形成圍繞水性內部的球形結構。脂質體的親水頭端朝向水性內部和外部的水性環境。圖15顯示測定在pH4.0達托霉素臨界膠束狀濃度(cmc)的實驗結果。圖16顯示通過光散射測定達托霉素膠束的體積分布。達托霉素膠束的平均體積為5.4nm(54A)。對發明的詳細描述發明目的本發明的一個目的是提供一種易于商業化生產的純化脂肽的方法，包括陰離子交換色譜法和疏水色譜法的獨特組合。在一優選實施方案中，用此方法制備純度高于95%的純化達托霉素，并與在先技術方法制備的達托霉素相比，雜質水平降低。在另一優選實施方案中，用此方法制備達托霉素，與在先技術方法相比，所用溶劑的量降低。在另一優選實施方案中，用此方法制備純度高于95%的純化達托霉素相關脂肽。本發明的另一個目的是提供一種增加由微生物制備的脂肽的水平的方法，通過供給發酵培養基低水平脂肪酸養料而用微生物制備此脂肽。用低于美國專利4，885，243建議在達托霉素發酵中使用的癸酸水平，除產生高純度的達托霉素或達托霉素-相關的脂肽外，還增加了經濟效益。在一優選實施方案中，用其方法增加玫瑰孢鏈霉菌(Streptomycesroseosporus)產生的達托霉素的濃度和數量，并降低相關污染物的產生。發酵肉湯中低水平的污染物導致達托霉素更有效的回收和純化，為制備過程提供了高的產量。本發明另一目的是提供一種純化達托霉素或達托霉素相關的脂肽的方法，包括使用改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法。在一優選實施方案中，用此方法制備達托霉素，其純度至少為98%并基本上或完全不含脫水-達托霉素或￠-異構體。在另一優選實施方案中，用此方法將達托霉素-相關的脂肽純化到至少98%純度。本發明另一目的是提供一種純化脂肽的色譜方法，包括陰離子交換色譜法、疏水相互作用色譜法和改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法的新的組合。在一優選實施方案中，采用色譜法的過程純化達托霉素或達托霉素-相關的脂肽。改良緩沖液意外地使脫水-達托霉素能夠從達托霉素中分離，而在先的色譜方法是不可能的。本發明另一目的是提供一種純化脂肽的方法，易于按比例使用脂肽膠束進行商業制備。在一個實施方案中，此方法包括將脂肽溶液從單體的非膠束狀態轉化成膠束狀態，并在純化過程中轉回原來的狀態。在一優選實施方案中，此過程包括將脂肽置于形成膠束的條件中，通過例如體積分離技術，從低分子量的污染物中分離脂肽膠束。在另一優選實施方案中，此方法包括將脂肽置于脂肽以單體形式存在的條件下，并通過例如體積(size)分尚技術從聞分子量分子中分尚單節脂肽分子。在一個優選實施方案中，此方法包括2個步驟使脂肽置于形成膠束的條件下，并從低分子量污染物中分離脂肽膠束，然后將脂肽膠束置于脂肽以單節形式存在的條件下，從高分子量分子或聚集體中分離脂肽單體。可以任意順序進行此2個步驟。在一更優選的實施方案中，體積分離技術是超濾法或體積排除色譜法。本發明進一步的目的是提供使用高壓液相色譜法(HPLC)的改進的方法測定脂肽-包括達托霉素-的純度。本發明另一目的是提供純化的脂肽，例如達托霉素或達托霉素-相關的脂肽，及其藥學可接受的鹽或制劑。在一優選實施方案中，本發明通過說明書記載的方法中的一種，提供達托霉素或純化的達托霉素-相關的脂肽。本發明也提供了純化的脂肽或其鹽的藥物組合物及服用這些組合物的方法。在一優選實施方案中，藥物組合物包含純化的達托霉素。本發明的另一目的是提供脂肽膠束及其藥物可接受的制劑。在一優選實施方案中，本發明提供了達托霉素膠束或達托霉素相關的脂肽膠束及其藥學可接受的制劑。在另一實施方案中，本發明也提供了給需要治療的病人服用脂肽膠束或其藥物制劑的方法。在一優選實施方案中，脂肽膠束采用靜脈注射、胃腸外給藥、肌內或局部給藥的方式。定義除另外說明，本文所用的所用技術和科學術語具有本發明所屬領域技術人員通常理解的意義。除另外說明外，采用化學、生物化學和微生物學、基礎術語學的常規技術實施本發明。術語“分離的”指一種化合物或產品，在混合物中有至少10%，優選至少20%或30%，更優選至少50%、60%或70%，最優選至少80%或90%此化合物。術語“脂肽”指一種分子，其中包含共價地與肽部分相連的類似脂質的部分，及其鹽、酯、酰胺和醚。術語“脂肽”也包括脂肽的保護型，其中將一或多個氨基、羧基或羥基基團加以保護。見，例如《有機合成中的保護基團(ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis)》，Theodoraff.Greene,Johnffiley和Sons,NewYork,1981,其中記載了保護性基團的例子。在一優選實施方案中，脂肽是抗生素。在另一優選實施方案中，脂肽是LY303366、棘白菌素(echinocandins)、月市麥芽毒素(pneumocandins)、阿庫來菌素(aculeacins)、枯草菌溶血素(surfactin)、制磷脂菌素BI(plipastatinBl)、安福霉素或美國專利5，629，288公開的脂肽衍生物。這些脂肽在本領域是已知的。見，例如，美國專利5，202，309和國際PCT申請W000/08197。在另一優選實施方案中，脂肽是達托霉素相關的分子，其中包括達托霉素、A54145、達托霉素-相關的脂肽，公開于美國專利4，537，717,4,482，487、Re.32，311、Re.32，310,5,912，226，現在是美國系列申請No.09/547，357，和登記于1999年12月15日的美國臨時申請Nos.60/170，943,60/170,946或60/170，945，及登記于2000年5月30日的美國臨時申請No.60/208，222的再次公開，特別將這些結合于此作為參考，或A-21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈被正-辛酰基、正-壬酰基、正-十一酰基、正-十二酰基、正-酰基或正-十四酰基脂肪酸側鏈取代。達托霉素-相關的脂肽公開于60/170，943,60/170,946,60/170,945和60/208，222，涉及合成和半合成脂肽，其中將達托霉素的鳥氨酸或犬尿堿殘基或脂肪酸側鏈加以修飾。在一個優選實施方案中，脂肽是達托霉素。術語達托霉素-相關的脂肽指上述化合物及其鹽。術語“達托霉素”指A-21978C0因子型抗生素的正-癸酰基衍生物或其藥學可接受的鹽。“達托霉素”與LY146032是同義詞。見圖I。術語“脫水-達托霉素”指達托霉素衍生物，其中a-達托霉素的門冬氨酰基團經過肽基轉移成為脫水琥珀酰亞胺基團。見圖3。術語“￠-異構體”或“達托霉素￠-異構體”指達托霉素衍生物其中的￠-門冬氨酰基代替了a-門冬氨酰基團。見圖2。當至少樣品的95%是達托霉素或達托霉素-相關的脂肽時，達托霉素或達托霉素-相關的脂肽是“基本純的”。優選地，當至少樣品的97%是達托霉素或達托霉素-相關的脂肽時，達托霉素或達托霉素-相關的脂肽是“基本純的”。當至少樣品的98%是達托霉素或達托霉素-相關的脂肽時，達托霉素或達托霉素-相關的脂肽是“完全純的”。優選地，當至少樣品的99%是達托霉素或達托霉素-相關的脂肽時，達托霉素或達托霉素-相關的脂肽是“完全純的”。當達托霉素或達托霉素-相關的脂肽制劑中另一化合物的量不超過1%時，達托霉素或達托霉素-相關的脂肽“基本不含”另一化合物。當達托霉素或達托霉素-相關的脂肽制劑中另一化合物的量不超過0.5%時，達托霉素或達托霉素-相關的脂肽“完全不含”另一化合物。當達托霉素或達托霉素-相關的脂肽制劑中另一化合物的量不超過0.I%時，達托霉素或達托霉素-相關的脂肽“不含”另一化合物。或者，當在測定限度約為達托霉素或達托霉素-相關的脂肽制劑的0.05%的最大敏感度條件下，不能用HPLC檢出其他化合物時，達托霉素或達托霉素-相關的脂肽“不含”另一化合物。本文記載了示例性的HPLC方法(表I和2)。“純化”達托霉素或達托霉素-相關的脂肽指基本純的達托霉素或達托霉素-相關的脂肽；完全純的達托霉素、或達托霉素-相關的脂肽或其鹽，或指基本不含、完全不含或不含另一化合物的達托霉素、達托霉素-相關的脂肽或其鹽。“部分純化的”達托霉素或達托霉素-相關的脂肽指達托霉素、達托霉素-相關的脂肽或其鹽具有小于90%的純度。達托霉素、達托霉素-相關的脂肽的純度，或另一脂肽的純度指在配制藥物組合物之前脂肽的純度。可以用包括核磁共振(NMR)、氣相色譜/質譜法(GC/MS)，液相色譜/質譜法(LC/MS)或微生物測定法的任何方法測定純度。測定達托霉素純度優選方法是分析型高壓液相色譜法(HPLC)。術語“膠束”指雙親分子聚合體。在液相介質中，聚集體分子的親脂性部分朝向膠束的內部，親水性部分與介質接觸。膠束結構包括但不限于球形、片狀、圓筒狀、橢圓體狀、脂質體狀(liposomal)、薄板狀和液晶狀。見圖14。術語“混合膠束”指一類特定的膠束其中膠束含有多于單一一類的雙親分子。在本發明的上下文中，混合膠束含有一種脂肽和至少一種可以上另一種脂肽的其他雙親分子。混合膠束含有至少10%重量脂肽。在另一實施方案中，混合膠束含有至少20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%脂肽。術語“膠束溶液”指溶液中多于50%重量的脂肽分子以膠束形式存在。優選地至少60%、70%、80%、90%或95%分子以膠束形式存在。膠束溶液被具有10，000道爾頓的標示(nominal)分子量(NMW)的超濾膜截留。術語“臨界膠束濃度"(cmc)指一種依賴于溫度、鹽的濃度和雙親分子的性質和類型的特定的分子濃度。在cmc中，未結合的單體和膠束達到平衡。術語“單體”指不屬于聚集體部分，而以單個分子存在的雙親分子。在本發明的上下文中，術語單體指未結合的脂肽。術語“單體溶液”指溶液中多于50%重量的脂肽分子以單體存在。優選至少60%、70%、80%、90%或95%為單體。單體溶液不被具有10，000道爾頓的分子量(NMW)超濾膜截留，而是通過超濾膜。術語“低離子強度緩沖液”指鹽濃度低于50mM的溶液；術語“中離子強度緩沖液"指鹽濃度為50-250mM的溶液；術語“高離子強度緩沖液”指鹽濃度高于250mM的溶液。制備純化的脂肽的方法本發明的一個實施方案描述了以商業可行的方式生產純化的脂肽的制備色譜法。在一優選實施方案中，脂肽是達托霉素或達托霉素-相關的脂肽。制備色譜法包括按順序使用離子交換色譜法、疏水相互作用色譜法(HIC)和陰離子交換色譜法純化含有脂肽，例如達托霉素或達托霉素-相關的脂肽的方法。在本發明的一個優選實施方案中，純化方法還包括改變發酵條件，其中玫瑰孢鏈霉菌(Streptomycesroseosporus)制備含A21978C的粗產品以增加達托霉素產量并降低雜質和玫瑰孢鏈霉菌(S.roseosporus)發酵培養產生的相關的污染物。下面記載了制備色譜法的一個優選實施方案按美國專利4，885，243的記載，用正-癸酸養料發酵玫瑰孢鏈霉菌(Streptomycesroseosporus),其改進是癸酸養料保持在可能的最低水平，使不致降低發酵的總產量。在一優選實施方案中，在有氧發酵中將殘余的癸酸保持在小于50部分/百萬(ppm)。在一個優選實施方案中，在有氧發酵中殘余癸酸保持在l_20ppm。在一個更優選的實施方案中，在有氧發酵中殘余癸酸保持在約lOppm。在一優選實施方案中，測定發酵過程中殘余癸酸的濃度，并調整癸酸養料水平使殘余癸酸水平持續保持在優選范圍內。在先技術未記載就地達到最佳的含有低水平雜質的達托霉素表達所要求的具體而且低的殘余常量癸酸濃度。發酵后，從發酵肉湯中除去菌絲以使細胞外溶液澄清。優選用任何標準分離技術，例如離心或微濾法從發酵液中除去菌絲。在一優選實施方案中，用微濾法澄清發酵肉湯，例如用PallSep膜系統。在一個優選實施方案中，用工業離心法澄清發酵肉湯，例如Westfalia離心，隨后進行最后的深度過濾。可以用其他設備，例如過濾壓榨機、旋轉鼓過濾器或可選的深度過濾器從發酵肉湯中除去菌絲，以制備適用于大規模柱色譜法的澄清的肉湯。在另一實施方案中，可以在用溶劑分離離心或過濾凈化前用有機溶劑例如丁醇直接從菌絲發酵物中提取達托霉素。根據此實施方案，在提取中可以使用任何有4或多個碳原子的醇。優選的溶劑是正丁醇。與用純化水分離達托霉素比較，用正丁醇給達托霉素帶來初始增加的純化過程。例如，當所用正丁醇的濃度大于10%，并且此過程是在正丁醇形成分離相的條件下進行的-例如在PH4-5，接近達托霉素的等電點時，達托霉素進入正丁醇中(見實施例4)。在另一實施方案中，在使用預活化菌絲的固定反應器中制備達托霉素，對達托霉素非發酵產物使用能量源，優選糖，要素組分，例如氨基酸和氨水，和癸酸。然后用此處記載的方法在固定酶反應器中制備達托霉素。凈化發酵肉湯后，通過離子交換色譜法使凈化溶液中達托霉素的濃度增加(即濃縮)。先使凈化溶液在多數或全部達托霉素與離子交換樹脂結合的條件下與離子交換樹脂接觸。結合后，用適當的離子水緩沖液洗滌樹脂以除去未結合的物質和一些達托霉素雜質。最后，在使達托霉素能從樹脂上分離的條件下洗脫純化的達托霉素。可以根據本發明，用緩沖液和本領域已知的方法進行結合、洗滌和洗脫步驟。例如，可以用含有比洗滌緩沖液高的鹽濃度的緩沖液進行洗脫，此緩沖液的pH低于洗滌緩沖液。在一優選實施方案中，達托霉素與在緩沖液中平衡過的離子交換樹脂結合，此緩沖液不含有增加的鹽濃度，或含有低鹽濃度，PH為中性至堿性。用3倍柱床體積的水，然后用3-6倍柱床體積的含有30-60mMNaCl的中級鹽緩沖液清洗加載后的樹脂。用1_3柱體積含有300-500mMNaCl的高鹽濃度和/或低pH緩沖液洗脫達托霉素。高氯化鈉和可選鹽，例如氯化鉀的濃度也將達托霉素從樹脂上洗脫。在一優選實施方案中，使用高流速陰離子交換樹月旨。在一個優選實施方案中，使用FP-DA13樹脂(Mitsubishi)。可以用柱色譜法或可以按間歇方式進行陰離子交換色譜法。對于商業制備，優選使用間歇方式。可以用步進鹽梯度或連續的鹽梯度清洗和洗脫離子交換樹脂。適宜的步進或連續鹽梯度是任何允許達托霉素從污染物中分離的鹽梯度。在一優選實施方案中，連續的鹽梯度是O-IOOOmMNaCl。在一個優選實施方案中，連續的鹽梯度是100_500mMNaCl或0-400mMNaCl。也可以使用美國專利5，756，680,4,865，729,4,840，730或4，708，782記載的徑向流(Radialflow)色譜法。陰離子交換色譜法后，用疏水相互作用色譜法(HIC)進一步純化達托霉素制劑。美國專利4，874，843記載了此步驟的一個實施方案，這里并入本文參考。在多數或全部達托霉素能與樹脂結合的條件下，使洗脫的水性達托霉素制劑與HIC樹脂接觸。通過將樹脂與增加濃度的非極性溶劑接觸，使荷載有達托霉素的樹脂的水含量減少。在雜質從樹脂上分離，而達托霉素保持結合的條件下，用適當的極性有機溶劑洗滌樹脂。最后，在使達托霉素從樹脂上分離的條件下洗脫達托霉素。一般地，用與洗滌緩沖液相比具有低極性(高極性溶劑水平)和/或高PH的含有溶劑的緩沖液洗脫達托霉素。在一優選實施方案中，HIC的非功能性的樹脂是小顆粒HP-20SS(Mitsubishi)。用有機相溶劑，如一種含有異丙醇、乙腈、丁醇的溶劑或其他溶劑特定地從HP-20SS樹脂上分離結合的達托霉素。在一個更優選的實施方案中，達托霉素結合到已在含有10%乙腈或同等的極性溶劑，例如異丙醇的醋酸鹽緩沖液中平衡的HP-20ss樹脂上。用至少3個柱床體積的平衡緩沖液洗滌荷載達托霉素的樹脂。用3-6個柱床體積的含有非洗脫濃度的極性溶劑的醋酸鹽洗滌緩沖液清洗荷載達托霉素的樹脂，進一步除去另外的雜質。在一優選實施方案中，用30%乙腈或45%異丙醇清洗荷載達托霉素的樹脂。用1-3柱床體積的含有35%或更多乙腈或多于50%異丙醇的醋酸鹽緩沖液洗脫荷載達托霉素的樹脂。在一優選實施方案中，用PH4.0-5.0的35%乙腈或55-60%異丙醇洗脫達托霉素。在另一實施方案中，用1-3柱床體積的有增加的pH的緩沖液洗脫荷載達托霉素的樹脂。在此實施方案中，緩沖液的PH逐漸增加，由于電荷的不同而以不同速率從柱上洗脫不同化合物。在提高的pH，例如，pH6.0-7.0，乙腈的洗脫濃度降低到10-20%。類似地，在提高的pH，例如pH6.0-7.0，異丙醇的洗脫濃度降低到20-25%。控制進行色譜法時的溫度也影響溶劑濃度。在低溫度下的洗脫，即在冷凍條件下，在所有PH條件下都需要增加的溶劑水平。HIC后，用離子交換色譜法降低達托霉素制劑中的有機溶劑。在一優選實施方案中，如上所述使用FP-DA13。第二離子交換色譜法后，將純化的達托霉素去除熱原(cbpyrogenated)、過濾并在冷凍條件下濃縮。可以用本領域已知的任何方法過濾達托霉素。在一個實施方案中，可以通過一下步驟過濾并除熱原i)使達托霉素溶液處于其中的達托霉素為單體和非膠束狀態的條件；ii)在達托霉素將通過濾器而熱原不通過濾器的條件下過濾達托霉素溶液，例如，使達托霉素溶液在PH6.0-8.0，并用額定值為3，000NMW-30,000NMW的超濾器過濾溶液；iii)改變通過濾器的達托霉素溶液使達托霉素聚集，即通過將達托霉素溶液的PH改變為2.5-4.5，使達托霉素形成膠束；iv)在使達托霉素保留在濾器上的條件下過濾達托霉素溶液，即，在30，000NMW或更小的超濾器上，例如反滲膜上濃縮達托霉素；并v)收集除去熱原的達托霉素。在一優選實施方案中，在pH約為7-8的加壓條件下在10，000道爾頓截止分子量(MWCO)的超濾器上過濾步驟(ii)的達托霉素。在一個優選實施方案中，達托霉素的初始濃度為小于40mg/ml,更優選地為約31.25mg/mL。在此條件下,達托霉素通過濾器,而熱原例如脂多糖類(LPS)不能通過。經過初步的超濾后，濾液的pH降低到pH2.5-4.5，濾液在10，000MWC0的超濾器上濃縮到約120mg/mL。在此條件下，達托霉素保留在濾器上。在一優選實施方案中，濾液的PH為pH3.5。經過隨后的濃縮，達托霉素的濃度調整到105mg/mL，檢查內毒素水平，并在無菌條件下灌裝。在另一實施方案中，在pHl.5-3.0進行反滲透納米過濾。采用低pH和冷凍條件以延緩純化的達托霉素的降解。可以進一步通過0.2的濾器過濾達托霉素，以降低生物負載(bioburden)，然后以散裝或小瓶裝進行冷凍干燥。作為上述超濾和濃縮步驟的一種替代，在pH約為4.5將含有達托霉素的洗脫部分與丁醇混合(正、異或叔丁醇)，比例高于I份丁醇對9份達托霉素溶液。在一優選實施方案中，I份丁醇與4份達托霉素溶液混合得到20%丁醇溶液。使丁醇-達托霉素溶液分離成有機相和水相。達托霉素進入有機相，將其收集。達托霉素在有機溶劑中的脫水作用可以穩定達托霉素并防止純化的達托霉素降解成脫水-達托霉素，并隨后形成￠-異構體。最后，向有機相中加入PH6.5-7.5的緩沖劑可以使達托霉素回到水相。濃縮或收集達托霉素后，將達托霉素冷凍干燥。在本發明的另一實施方案中，用制備色譜法純化除達托霉素外的脂肽，例如A54145、LY303366、棘白菌素(echinocandins)、肺麥芽毒素(pneumocandins)、阿庫來菌素(aculeacin)、枯草菌溶血素(surfactin)、制磷脂菌素BI(plipastatinBl)、安福霉素或美國專利5，629，288公開的脂肽衍生物。在另一實施方案中，用制備色譜法純化達托霉素-相關的脂肽，包括A54145，或脂肽，公開于美國專利4，537,717,4,482,487,Re.32,311、Re.32，310、5，912，226，現在是美國系列申請No.09/547，357，和登記于1999年12月15日的美國臨時申請Nos.60/170，943、60/170，946或60/170，945，及登記于2000年5月30日的美國臨時申請No.60/208,222的再次公開，或A-21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈被正辛酰基、正壬酰基、正i^一烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正十四烷酰基脂肪酸側鏈代替。在本發明的另一實施方案中，用“鹽濁法(SaltCloudMethod)”[《生殖工程學導報》(GeneticEngineeringNews),Vol.19,No.20,1、34和43頁，(11月15日，1999)]純化達托霉素或其他脂肽。鹽濁法是以薄膜為基礎的系統，結合有高體積產出量的選擇性分離。可以用鹽濁法與本文公開的方法結合，或分別地純化達托霉素或其他脂肽。本發明的另一實施方案是關于色譜法，它產生了在先技術的色譜法所不能產生的高度純化的脂肽。色譜法包含使用改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法以純化含有脂肽的制劑。在一優選實施方案中，用此方法產生高度純化的達托霉素或達托霉素-相關的脂肽。部分純化的達托霉素使用此方法時，產生至少為98%純度的達托霉素。此方法也產生沒有或基本沒有脫水-達托霉素的達托霉素。此方法包括一下步驟用本領域已知的任何方法或本文所述的方法制備部分純化的達托霉素。進一步用改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法純化達托霉素。在有適當的離子改良緩沖液時，達托霉素結合到離子交換樹脂上，其條件是達托霉素以單體和非膠束狀態結合到樹脂離子上。改良緩沖液含有緩沖劑，例如但不局限于，醋酸鹽、磷酸鹽、檸檬酸鹽和Tris-HCl，或任何其他良好地保持中性PH的緩沖劑。改良緩沖液還含有一或多種離液劑，包括而不局限于，胍、氨、尿素、強還原齊U、苯甲酸鹽、抗壞血酸鹽或另一種能緩和緩沖劑的離子增強劑，使達托霉素易于從雜質中分離。用適當的離子改良緩沖液洗滌荷載達托霉素的樹脂以洗脫雜質，包括脫水-達托霉素。然后在允許達托霉素與結合在樹脂上的雜質-包括￠-異構體-分離的條件下洗脫達托霉素。在一優選實施方案中，改良緩沖液為中性pH(pH6_8)并含有2-6M尿素。在一個進一步優選的實施方案中，離子交換樹脂是PorousResinP150或PorousD50(PEBiosystems)。在一個優選實施方案中，離子交換樹脂是PorousP150。在一個優選實施方案中，達托霉素結合到低離子強度緩沖液中的樹脂上，用低至中離子強度的緩沖液清洗，并用高離子強度的緩沖液洗脫。在一個優選實施方案中，達托霉素結合到含有6M尿素的pH7.0的Tris緩沖液中的Poix)uSP150樹脂上。用3倍柱床體積的Tris緩沖液或其他適宜的緩沖液清洗荷載達托霉素的PorousP150樹脂，緩沖液中所含的鹽濃度可以除去污染物和脫水-達托霉素而不洗脫達托霉素。用Tris緩沖液或其他適宜的緩沖液從PorousP150樹脂上洗脫達托霉素，洗脫緩沖液中鹽的濃度能夠使另外的雜質-包括顯著量的P-異構體-仍結合在柱上。在另一優選實施方案中，使用PorosP150，并且達托霉素結合在含有2M尿素的pH6.0的醋酸鹽緩沖液中的樹脂上。按上述相似的方法洗滌荷載達托霉素的PoroSP150樹脂并洗脫，不同點在于使用含有2M尿素的pH6.0醋酸鹽緩沖液。可以用HPLC或UV檢測器測定產品部分。可以通過柱色譜法或以間歇式方式進行改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法。也可以使用徑向流(Radialflow)色譜法，如美國專利5，756，680、4，865，729,4,840，730或4，708，782所述。可以用步進鹽梯度或連續鹽梯度洗滌和洗脫改良緩沖液增強的陰離子交換樹脂。適宜的步進或連續鹽梯度是任何允許達托霉素與包括但不局限于脫水-達托霉素和異構體的雜質分離的鹽梯度。在一優選實施方案中，連續鹽梯度是O-IOOOmMNaCI。在一個優選實施方案中，鹽梯度是100-500mMNaCl或0-400mMNaCl。在本發明的另一實施方案中，使用改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法純化除達托霉素外的脂肽。這些脂肽化合物包括但不局限于A54145、LY303366、棘白菌素(echinocandins)、肺麥芽毒素(pneumocandins)、阿庫來菌素(aculeacin)、枯草菌溶血素(surfactin)和制磷脂菌素BI(plipastatinBl)(Tsuge等，1996,微生物學文獻集(Arch.Microbiol.)165:243-51)和美國專利5，629，288所述的脂肽衍生物。在另一實施方案中，用改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法純化達托霉素-相關的脂肽，例如A54145或脂肽，公開于美國專利4，537，717,4,482，487、Re.32，311、Re.32,310,5,912，226，現在是美國系列申請No.09/547，357和登記于1999年12月15日的美國臨時申請Nos.60/170，943、60/170,946或60/170,945，及登記于2000年5月30日的美國臨時申請No.60/208，222的再次公開，或A21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈被正辛酰基、正壬酰基、烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正十四烷酰基脂肪酸側鏈代替。在本發明的另一實施方案中，使用色譜法步驟的新組合以純化達托霉素或達托霉素相關的脂肽。此方法包括離子交換色譜法、小顆粒反相色譜法和改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法。純化方法還可以包含改變用玫瑰孢鏈霉菌(Streptomycesroseosporus)制備含A21978C的粗產品的發酵條件。這些方法產生純度至少為98%的達托霉素或達托霉素相關的脂肽。在一優選實施方案中，此方法產生純度高于99%的達托霉素或達托霉素-相關的脂妝。制備色譜法的一個優選實施方案記載如下如美國專利4，885，243所述，用正癸酸原料發酵玫瑰孢鏈霉菌(Streptomycesroseosporus),其改進是癸酸原料保持在不減少如上所述的發酵的總產量的可能最低水平。在另一選擇的實施方案中，只要最終能產生達托霉素核附帶的正癸酰基基團，可以使用不同的原料。這些原料的例子是但不局限于，癸酸酰胺、包括丁基酯的癸酸酯，椰子油或棕櫚油的粗來源、動物來源的癸酸、癸酸的各種鹽、和石化產品來源的癸酸。發酵后，按上述方法澄清細胞外溶液。在一個選擇實施方案中，在如上所述用溶劑分離離心機或過濾進行澄清前可以用有機溶劑如正丁醇從菌絲中提取達托霉素。澄清發酵肉湯后，如上所述先用離子交換色譜法，然后通過HIC使達托霉素在澄清后的溶液中富集。完成HIC后，用本領域已知的任何方法減少達托霉素制劑中的有機溶劑。在一優選實施方案中，如上所述，用離子交換色譜法減少有機溶劑。應在與改良緩沖液增強的色譜法所需的緩沖液相容的緩沖液中將達托霉素從柱上洗脫。或者，可以采用反滲透法或用10，000MWC0過濾器的過濾法，用改良緩沖液代替洗脫緩沖液。在另一優選實施方案中，用蒸發法或在緩沖液中稀釋的方法減少有機溶劑。在一第三優選的實施方案中，用在pHl.5-4.0的反滲透或PH2.5-4.5的超濾除去反相色譜法的溶劑和殘余的鹽。產物可以冷凍以批量儲藏，或冷凍干燥，然后在水中或改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法所用的緩沖液中再水化。用上述改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法進一步純化達托霉素。在改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法后，將純化的達托霉素過濾并在冷凍條件下濃縮。可以用本領域已知的任何方法過濾達托霉素。在一優選實施方案中，如上所述將達托霉素除去熱原并濃縮。或者，可以在pHl.5-4的冷卻條件下用反滲法濃縮達托霉素。用低pH和冷卻條件延緩純化達托霉素的降解。作為一種選擇，或除上述過濾和濃縮步驟外，從改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法得到的含有達托霉素的洗脫部分可以與丁醇(正、異或叔丁醇)在大約PH4.5混合，其比例高于I份丁醇對9份達托霉素溶液。在一優選實施方案中，I份丁醇與4份達托霉素溶液混合，得到20%丁醇溶液。使丁醇-達托霉素溶液分離成有機相和水相。達托霉素進入有機相，將其收集。達托霉素在有機溶劑中脫水可以穩定達托霉素，并防止純化的達托霉素降解成脫水-達托霉素并隨后形成P-異構體。濃縮并收集達托霉素后，將達托霉素冷凍干燥。在本發明的另一實施方案中，如上所述用制備色譜法純化除達托霉素外的脂肽。脂肽膠束的形成及其應用方法本發明的另一實施方案提供了脂肽膠束，形成脂肽膠束的方法和利用脂肽膠束進行脂肽純化和制備藥學組合物的方法。在一優選實施方案中，脂肽是達托霉素-相關的分子，特別包括，達托霉素，A54145，美國專利4，537,717,4,482,487、Re.32,311、Re.32,310,5,912,226中公開的達托霉素-相關的脂肽，現在作為美國系列申請No.09/547，357、于1999年12月15日申請的美國臨時申請Nos.60/170，943、60/170，946或60/170,945，于2000年5月30日申請的美國臨時申請Nos.60/208,222的再次公開，或A-21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基側鏈被正辛酰基、正壬酰基、正i^一烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正-十四烷酰基側鏈代替。在一個更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素。膠束是雙親分子的聚集體。在水性介質中，分子的親脂性部分朝向膠束內部，分子的親水性部分與水性介質接觸。在含有雙親分子的溶液中，當分子的濃度足夠高時，自動形成膠束。膠束的形成使溶液的一些重要的物理性質產生變化，包括滲透壓、濁度、電導率、表面張力、共離子和抗衡離子活性(當是離子型雙親性分子時)、折光率、UV和NMR光譜、部分摩爾體積、粘度、擴散系數、和染料增溶作用。可以通過測定一或多個這些膠束依賴性的物理性質作為雙親分子濃度的參數而確定cmc。可以通過動態激光散射、超速離心、粘度和/或低角度X-射線散射實驗確定膠束的體積和形狀。膠束也可以以液態晶相的形式存在。當脂肽的濃度高于脂肽的cmc時，脂肽可以聚集成膠束。Cmc依賴于脂肽的性質和含有脂肽的水溶液的溫度、鹽濃度和pH。與脂肽的性質相關，通過在親脂性碳鏈中加入CH2基團而降低脂肽的cmc。因此在特定的鹽濃度、溫度和pH產生達托霉素的cmc，那么結構中正癸酰基脂肪酸側鏈被正辛酰基或正壬酰基脂肪酸側鏈代替的A-21978類抗生素將有更高的cmc，而結構中正癸酰基脂肪酸側鏈被正i^一烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正十四烷酰基脂肪酸側鏈代替的A-21978抗生素將有低于達托霉素的cmc。在本發明的一個實施方案中，可以通過加入或減去脂肽的一個CH2基團而控制脂肽的cmc。在一優選實施方案中，脂肽是A-21978，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈被正辛酰基、正壬酰基、正i^一烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正十四烷酰基脂肪酸側鏈代替。在另一實施方案中，可以按說明書的指示計算脂肽大致的cmc。給出脂肽例如達托霉素的cmc，可以計算結構中正癸酰基脂肪酸側鏈被正辛酰基、正壬酰基、正十一烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正十四烷酰基脂肪酸側鏈代替的相關的脂肽的大致cmc。可以通過本領域技術已知的方法完成上述內容。在另一優選實施方案中，給出一種脂肽的cmc，可以計算含有相關的肽部分的脂肽的大致cmc。在一優選實施方案中，給出達托霉素的cmc和在先技術的教導，可以容易地確定相關的脂肽例如A54145的cmc，它是美國專利4，537,717,4,482,487、Re.32，311、Re.32，310,5,912，226中公開的達托霉素-相關的脂肽，現在作為美國系列申請No.09/547，357、于1999年12月15日申請的美國臨時申請Nos.60/170，943,60/170,946或60/170，945，于2000年5月30日申請的美國臨時申請Nos.60/208，222的再次公開。在本發明的另一實施方案中，通過改變含有脂肽的溶液的溫度而改變脂肽的cmc。脂肽的cmc通常隨溶液溫度的增加而增加。因此，降低溫度可以促進膠束形成，升高溫度會阻礙其形成。例如，含有脂肽的溶液可以在4°C形成膠束，因為在此溫度cmc降低，脂肽濃度高于cmc;然而，同樣的脂肽溶液在20°C可以是單節的，因為cmc隨溫度而增加，脂肽濃度此時低于cmc。因此,在一優選實施方案中，脂肽濃度在一個溫度下高于cmc,而在另一較高溫度下低于cmc。在一更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素或達托霉素-相關的分子，例如上述記載的種類。在一更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素。在另一優選實施方案中，在脂肽的純化中利用通過用不同溫度影響cmc而控制形成脂肽膠束的能力。在一更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素或相關的分子，例如以上所記載的。在一個更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素。在另一優選實施方案中，用通過改變溫度而控制脂肽膠束形成的能力制備藥物組合物，它們在某一溫度條件下為膠束狀，在其他溫度條件下為單節的。在一優選實施方案中，藥物組合物含有達托霉素或如上所述的達托霉素-相關的脂肽。在另一優選實施方案中，藥物組合物含有達托霉素。在本發明的另一個實施方案中，加入電解質而減少離子脂肽的cmc。在一優選實施方案中，在含脂肽的溶液中加入鹽，例如NaCl，以降低脂肽膠束中帶電基團之間的排斥力。在一優選實施方案中，脂肽是達托霉素或上述達托霉素-相關的分子。例如，達托霉素的肽部分含有3個天門冬氨酸殘基和一個L-蘇-3-甲基谷氨酸殘基(3-MG)，在中性pH條件下它們都帶電。因此加入電解質，例如NaCl或同等的鹽，將降低達托霉素的cmc。在一優選實施方案中，鹽濃度至少為lOOmM。在一更優選的實施方案中，鹽濃度為150mM-300mM鹽。在一甚至更優選的實施方案中，鹽是NaCl。加入其他脂肽的電解質也會觀察到cmc的降低，例如含有天門冬氨酸殘基、3-MG殘基或其他帶電殘基的達托霉素相關分子。因此，在一優選實施方案中，在溶液中加入鹽以降低達托霉素相關的脂肽的cmc,例如A54145，美國專利4，537,717,4,482,487、Re.32，311、Re.32，310,5,912，226中公開的達托霉素-相關的脂肽，現在作為美國系列申請No.09/547，357、于1999年12月15日申請的美國臨時申請Nos.60/170，943,60/170,946或60/170，945，于2000年5月30日申請的美國臨時申請Nos.60/208,222的再次公開，或A21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈被正辛酰基、正壬酰基、正i^一烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正十四烷酰基脂肪酸側鏈代替。在另一實施方案中，降低鹽濃度以增加離子脂肽的cmc。在一優選實施方案中，離子脂肽是達托霉素或上述達托霉素-相關的脂肽。在另一優選實施方案中，在脂肽的純化中利用通過改變電解質濃度影響cmc而控制形成脂肽膠束的能力。在一更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素或上述達托霉素-相關的分子。在一更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素。在另一優選實施方案中，利用通過電解質濃度而控制形成脂肽膠束的能力制備藥物組合物，它們在某一電解質濃度是膠束狀，而在其它電解質濃度是單節的。在一優選實施方案中，藥物組合物含有達托霉素或上述達托霉素-相關的脂肽。在另一優選實施方案中，藥物組合物含有達托霉素。在本發明的另一實施方案中，控制含有脂肽的溶液的pH以影響脂肽的cmc。在一優選實施方案中，脂肽是達托霉素或達托霉素-相關的分子，例如上述記載的。在一個更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素。在一個實施方案中，控制PH使脂肽的濃度高于在某一pH的cmc，并低于在另一pH的cmc。例如，對于達托霉素，在溫度20_25°C的水中，在pH4.O的cmc非常低于pH6.O或7.5的cmc。在pH4.0,在此條件下的cmc約為400yg/mL。見圖15。另外，在pH6.5，即使150mg/mL的達托霉素，其中的達托霉素也是單節的(其中鹽濃度是150mM-300mMNaCl，溫度是4°C)。因此，對于達托霉素，pH4.0的cmc低于在高pH或低pH溶液中的cmc。不同pH水平下cmc的改變也可以用于其他帶電脂肽，包括上述相關的達托霉素的脂肽。在另一優選實施方案中，在脂肽的純化中利用通過改變pH而影響cmc，從而控制脂肽膠束形成的能力。在一優選實施方案中，脂肽是達托霉素或達托霉素-相關的分子，如上所述者。在一甚至更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素。在另一優選實施方案中，利用通過PH控制形成脂肽膠束的能力而制備藥物組合物，它們在特定的pH是膠束狀，的達托霉素-相關的脂肽，或A-21978抗生素一其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈由正辛酰基、正壬酰基、正i^一烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正十四烷酰基脂肪酸側鏈替換。、在一更優選實施方案中，脂肽是達脫霉素。在本發明的另一實施方案中，膠束一無論其是混合的或只含有一種脂肽分子一都含有治療上有用的脂肽。在一優選實施方案中，脂肽是抗生素。在一更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素。在濃度為lmg/mL，pH大約為4.0，達脫霉素在水中形成約為5.4而1(54.4)的膠束。見圖16。在另一優選實施方案中，膠束包括一種或多種不同種類的治療物質。在一個實施方案中，治療物質可以在溶液中與脂肽混合，因而從脂肽中形成膠束而治療物質被限制于疏水內核中。在另一實施方案中，治療物質與脂肽和一種或多種雙親分子混合，因而由脂肽和其它雙親分子形成混合膠束而在疏水內核中發現治療物質。在一優選實施方案中，治療物質是抗生素、抗炎劑或抗真菌劑。在一更優選的實施方案中，治療物質是以下公開的抗生素和抗真菌劑。在另一優選實施方案中，治療物質的疏水環境中可溶，但不溶于水溶液。在本發明的另一實施方案中，脂肽可以形成脂質體，它是囊狀膠束，其中球形的脂質雙層包圍著一個水性內核。見圖14，c部分。脂質體對于治療用途是有利的，因為它們可以輕易地與質膜融合，可以用于將物質限制在它們的內部水性室中。這些物質可以是只溶于水溶液的物質。在一個實施方案中，溶液包含脂肽和另一可通過超聲波處理生成脂質體的雙親分子。在另一實施方案中，單獨的脂肽可以超聲波降解生成脂質體。在一優選實施方案中，脂質體包括達托霉素或達托霉素-相關的脂肽，如A54145，是美國專利4，537，717、4，482，487、Re.32，311、Re.32，310,5,912，226中公開的達托霉素_相關的脂肽，現在作為美國系列申請No.09/547，357、于1999年12月15日申請的美國臨時申請Nos.60/170，943、60/170，946或60/170，945，于2000年5月30日申請的美國臨時申請Nos.60/208，222的再次公開，或A-21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈由正辛酰基、正壬酰基、正十一烷酰基、正十二烷酰基、正十三酰或正十四酰脂肪酸側鏈替換。在一更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素。在另一優選實施方案中，在脂質體內部的水性室中有一種或多種治療物質。在一優選實施方案中，此治療物質是抗生素、抗炎劑或抗真菌劑。在一更優選的實施方案中，此治療物質是下面公開的抗生素或抗真菌劑。在另一優選實施方案中，此治療物質可溶于水溶液。在另一優選實施方案中，藥物組合物含有脂質體。在一優選實施方案中，藥物組合物含有脂肽膠束或含有治療物質的脂肽膠束。脂肽膠束可以是球形的膠束、混合膠束或脂質體。含有脂肽膠束的藥物組合物可以使注射或靜脈注射給藥時的局部炎癥降低到最小。在一個實施方案中，藥物組合物包括鹽、用來維持一定PH的緩沖液和膠束。在另一個實施方案中，藥物組合物含有一種或多種穩定膠束和/或穩定脂肽或其它治療物質的藥劑。在一個實施方案中，藥物組合物也含有一種或多種治療物質。在一優選實施方案中，此治療物質是抗生素、抗炎劑或抗真菌劑。在一更優選的實施方案中，此治療物質是以下公開的抗生素或抗真菌劑。此治療物質可以是加入膠束中的治療物質之外的物質，或者可以是組成膠束的治療劑。可以將藥物組合物干燥或凍干，在此情況下當任一種水溶液一如水或緩沖液一添加到藥物組合物中時將形成膠束。在一優選實施方案中，藥物組合物是凍干的，并包括再形成膠束時的鹽的生理濃縮物，和維持PH值的緩沖液，在此pH下，當加入無菌水或其它緩沖液時，在室溫自然地形成膠束。在一更優選的實施方案中，藥物組合物含有達托霉素或相關的脂肽，如上述公開的達托霉素-相關的脂肽A54145，或A-21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈由正辛酰基、正壬酰基、正i^一烷酰基、正十二烷酰基、正十三酰或正十四酰脂肪酸側鏈替換。在一更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素。在另一實施方案中，藥物組合物是溶于水的。當使用脂質體時這是優選的。在一優選實施方案中，藥物組合物含有脂質體的穩定劑。在本發明的另一方面，將膠束溶液分離和/或純化。在一個實施方案中，通過超濾將膠束從較小的取代基中分離。根據膠束的體積選擇超濾膜。通常，10，000NMW或30，000NMW的膜足以保留膠束并使較小的取代基，如污染物通過。在另一實施方案中，可以使用透析、密度梯度離心法或體積排除色譜法分離和/或純化膠束。這些方法在此領域中廣為人知。在一個實施方案中，膠束純度高于30%，此處的純度是通過將膠束的重量與單節形式的脂肽或其它分子的重量相比較測定得到的。在一優選實施方案中，膠束純度高于50%、60%、70%、80%、90%或95%。在本發明的另一方面，形成脂肽膠束然后通過改變溫度、pH值、電解液濃度和/或脂肽濃度將其分離的能力提供了一種純化脂肽的方法。在一個實施方案中，此方法包括在脂肽形成膠束的條件下從低分子量的污染物中純化脂肽然后利用體積選擇技術，如超濾或體積排除色譜法將膠束從污染物中分離。在此發明的另一實施方案中，此方法包括在脂肽形成膠束的條件下濃縮脂肽然后利用體積選擇技術濃縮它們。在一個更優選的實施方案中此方法包括作為單獨步驟的純化和濃縮。在本發明的另一實施方案中，此方法包括在脂肽是單節的條件下從高分子量的污染物一包括熱原物質(如脂多糖)中一純化脂肽，然后利用體積選擇技術將單節脂肽溶液從高分子量的污染物中分離。在一優選實施方案中，如上討論，體積選擇技術是超濾法。在另一優選實施方案中，脂肽是達托霉素或相關的脂肽，如上公開的達托霉素-相關的脂肽如A54145或A-21978抗生素一其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈由正辛酰基、正壬酰基、正十一烷酰基、正十二烷酰基、正十三酰或正十四酰脂肪酸側鏈替換。在一更優選的實施方案中，脂肽是達托霉素下面討論用膠束純化達托霉素的色譜法的優選實施方案如上記載，利用正癸酸原料發酵玫瑰孢鏈霉菌。發酵后，如上記載澄清細胞外溶液。然后，如上記載將澄清制劑加到陰離子交換樹脂上，如FP-DA13。用1-3柱體積的含有300-500mMNaCl的提高的鹽緩沖液將達托霉素從樹脂柱中洗脫。用酸將洗脫的達托霉素制劑的pH值調節為2.5-5.0。在一優選實施方案中，此酸是稀釋的磷酸。在PH2.5-4.7，300-500mMNaCI和溫度為2_15°C的條件下，達托霉素形成膠束。通過10，000-30，000NMW的超濾膜將達托霉素制劑過濾。在超濾時，用含有30mM乙酸鈉，pH3.5的緩沖液，在溫度最高為15°C的條件下清洗達托霉素制劑。由于洗脫條件，初始的鹽濃度是300mMNaCl，但鹽濃度隨清洗進行而降低。由于達托霉素處于膠束狀，它保留在過濾器中而小于10，000-30，000(取決于所使用的過濾器)的雜質則通過過濾器。所得到的達托霉素的純度大約為85-90%。作為一可選的步驟，可以稀釋達托霉素制劑，將其pH升高到6.5以使達托霉素轉化成單節狀態。然后使達托霉素制劑通過10，000NMW的超濾膜。此可選的步驟顯著降低熱原物質含量。分析達托霉素純度的方法本發明的另一實施方案提供了測定達托霉素純度的分析方法。在以前的技術中，許多與達托霉素共同純化的污染物不能被確認或辨別，因為顯示和測量雜質的能力受到分析方法和可使用設備的限制。見，如美國專利4，874，843和Kirsch等人(的記載)。更加敏感的分析型HPLC系統和技術的發展使分辨由在先技術的方法制備出的達托霉素批量產品中存在的幾種污染物變為可能。更高分辨率的HPLC方法顯示由在先技術方法純化的達托霉素被已被確認的雜質污染，如脫水達托霉素和￠-異構體，和其他在實施在先技術方法時與達托霉素共同純化(并在已建立的HPLC檢測條件下與達托霉素共同洗脫)的未知的污染物。現在確認這些污染物使開發清除這些污染物的方法變為可能。如上討論，脫水-達托霉素和P-異構體曾經被記載為在制備達托霉素時總是反復出現的雜質。利用此處記載的HPLC分析，辨別出了其它大約十二種在生產達托霉素時產生的雜質，其中有些是以前未曾鑒別出的。利用美國專利4，874，843公開的方法未能在純化后清除這些雜質。鑒別出了至少10種這些化合物(見，例如圖2-11)。并且，這些化合物中的至少6種并非形成脫水-達托霉素和達托霉素的P-異構體形式的反應的直接結果，而是在發酵或純化達托霉素時由其它不相關的過程產生的化合物。下面記載的本發明中的方法也可以顯著降低這些雜質的水平(見實施方案)。本領域中已知的任何方法都可以用來測定達托霉素制劑中其它化合物的量。確認達托霉素污染物的方法包括但不限于質譜法、紅外線光譜法、毛細管電泳和核磁共振光譜法。測定達托霉素制劑中其它化合物的量的一種優選方法是HPLC。在本發明中使用兩種方法來測定達托霉素雜質。與第二種方法相比，第一種方法的分辨率稍低。在兩種方法中都使用了帶有PENelson’sTurbochrom軟件4.I版本的島津或HPHPLC系統。表I概括了第一解決方法，表2概括了第二解決方法表II.溶劑傳送系統模式等度(Isocratic)泵流速1.5mL/min運行時間30分鐘2.溶劑ApH4.5的0.5%NH4H2PO4中的34%乙腈溶劑BpH4.5的0.5%NH4H2PO4中的20%乙腈目標條件是在15.0±0.5分鐘時保留達托霉素。溶劑B可以與溶劑A—起使用以調節HPLC的流動相條件實現所要求的保留時間。3自動取樣冷卻器5(4-6)°C4.注射體積5uL-75uL(20uL正常)5.柱IB_SIL(Phenomenex),C-8,5u,4.6mmX250mm(或等同物)6.預柱IB_SIL(Phenomenex),C-8,5u,4.6mmX30mm(或等同物)7檢測波長214nm8.柱溫度環境溫度9.積分可以測定峰面積的計算機系統或積分器表2I.溶劑傳送系統模式等度(Isocratic)泵流速1.5mL/min運行時間75分鐘2.溶劑ApH3.25的0.45%NH4H2PO4中的20%乙腈溶劑BpH3.25的0.45%NH4H2PO4中的50%乙腈目標條件是在pH3.25的0.45^NH4H2PO4中大約35%乙腈(50%溶劑B)，以在第36.0±1.5分鐘時保留達托霉素；但是，可以使用溶劑比來調節HPLC流動相組合以實現所要求的時間。3.自動取樣冷卻器5(4-6)°C4.注射體積5uL-75uL(20uL正常)5.柱IB_SIL(Phenomenex),C-8,5u,4.6mmX250mm(或等同物)6.預柱IB_SIL(Phenomenex),C-8,5u,4.6mmX30mm(或等同物)7.檢測波長214nm8.柱溫25(22-28)°C9.積分可以測定峰面積的計算機系統或積分器純化的脂肽、藥物組合物及其使用方法本發明的另一個目標是提供純化的脂肽，和鹽、酯、酰胺、醚及其保護形式，同時提供含有純化的脂肽或其鹽的藥物制劑。在一優選實施方案中，脂肽是上面記載的達托霉素或達托霉素-相關的脂肽。本發明更進一步的目標是提供包含脂肽膠束的藥物組合物。在一優選實施方案中，脂肽膠束是包含達托霉素或一種或多種達托霉素-相關的脂肽的膠束。所有此處涉及的脂肽膠束不僅指所有脂肽膠束，還特別地考慮到達托霉素，或相關的脂肽，如上述公開的達托霉素-相關的脂肽A54145，或A-21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈被正辛酰基、正壬酰基、正i^一烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正十四烷酰基脂肪酸側鏈代替。并且，所有此處涉及的脂肽膠束特別考慮上述討論的球形膠束、混合膠束和脂質體。純化的脂肽、其藥學可接受的鹽或脂肽膠束可以配制為口服、靜脈內、肌內、皮下、氣霧劑、局部用藥或胃腸外給藥的形式以治療或預防疾病，特別是細菌感染。在一優選實施方案中，純化的脂肽是純化的達托霉素或達托霉素-相關的脂肽。此處涉及的“純化達托霉素”、“純化達托霉素相關的脂肽”或“純化脂肽”包括它們制藥學上可接受的鹽。可以使用任何制藥學上可接受的，與達托霉素或所感興趣的脂肽相容的載體或賦形劑配制達托霉素、達托霉素-相關的脂肽或其它脂肽膠束。見，例如《藥物添加劑手冊》(HandbookofPharmaceuticalAdditives):根據商品名稱、化學藥品、功能和生產者對多于6000種產品的國際指南，Ashgate出版公司，M-Ash和I.Ash編輯，1996;Merck索引化學藥品、藥物和生物制劑的百科全書，S.Budavari編輯,年刊；《Remington’s制藥科學》(Remington，sPharmaceuticalSciences),Mack出版公司，Easton,PA；Martindale:《藥物參考大全》(TheCompleteDrugReference),K.Parfitt編輯，1999;和Goodman&Gilman，s《治療的藥物基礎》(ThePharmaceuticalBasisofTherapeutics),Pergamon出版社，NewYork,NY,L.S.Goodman等編輯；這些文章的內容在此引用作為參考，以對用于人體治療的各種抗菌劑的給藥方法進行一般描述。本發明中的純化的達托霉素、達托霉素-相關的脂肽或其它脂肽膠束可以與通常的制藥載體和賦形劑混合而以以下形式使用片劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙囊劑(wafers)、霜劑和其它類似形式。達托霉素、達托霉素-相關的脂肽和脂肽膠束可以如在此討論的一樣，和其它治療劑和抗生素混合。含有本發明化合物的此組合物含有大約0.I到大約90%重量的活性化合物，更通常的含量是從大約10到大約30%。本發明的組合物可以用控制釋放系統(如膠囊)或持續釋放系統(如生物可侵蝕的基質)傳送。在美國專利No.4,452,775(授予Kent)、5，239,660(授予Leonard)、3，854，480(授予Zaffaroni)中記載有示例性的適用于本發明組合物給藥的延遲釋放傳遞系統。此組合物包含常用的載體和賦形劑，如玉米淀粉或凝膠、乳糖、蔗糖、微晶纖維素、高嶺土、甘露醇、磷酸二鈣、氯化鈉和褐藻酸。此組合物可以包含交聯羧甲基纖維素鈉、微晶纖維素、玉米淀粉、羥乙酸淀粉鈉和海藻酸。片劑粘合劑可以包括阿拉伯樹膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮(Povidone)、羥丙基甲基纖維素、蔗糖、淀粉和乙基纖維素。可以使用的潤滑劑包括硬脂酸鎂或其它硬脂酸金屬鹽、硬脂酸、硅氧烷流體、滑石、蠟、油和膠態二氧化硅。也可以使用如薄荷油、鹿蹄草油、櫻桃調味料或類似物作為調味劑。也需要加入調色劑以使藥劑有更美觀的外觀或幫助鑒別產品。對于口服用藥，固體制劑，如片劑和膠囊特別有用。也可以發明持續釋放或包有腸溶衣的制劑。對于兒科和老年病的應用，懸浮液、糖漿和可咀嚼的片劑特別適合。對于口服給藥，藥物組合物使用例如片劑、膠囊、懸浮液或液體的形式。藥物組合物優選制成含有治療有效量的活性成分的劑量單位形式。這樣的劑量單位的例子是片劑和膠囊。為治療目的，這些片劑和膠囊除含有活性成分外，還可以含有常規的載體，如粘合劑，如阿拉伯樹膠、凝膠、聚乙烯吡咯烷酮、山梨醇或黃芪膠；填充劑，如磷酸鈣、糖膠、乳糖、玉米淀粉、山梨醇或蔗糖；潤滑劑，例如硬脂酸鎂、聚二乙烯、二氧化硅或滑石；崩解劑，如馬鈴薯淀粉，調味或調色劑，或可接受的濕潤劑。口服液體制劑通常是水或油溶液、懸浮液、乳劑、糖漿或酏劑形式，可以包含常規的添加劑，如懸浮劑、乳化劑、非水性劑、防腐劑、調色劑和調味劑。口服液體制劑可以包括脂肽膠束或單節形式的脂肽。液體制劑的添加劑的例子包括阿拉伯樹膠、杏仁油、乙醇、分餾椰子油、凝膠、葡萄糖糖漿、甘油、氫化食用脂肪、卵磷脂、甲基或丙基對-羥基苯甲酸酯、丙二醇、山梨醇或山梨酸、卵磷脂、甲基纖維素、甲基或丙基對-苯甲酸酯、丙二醇、山梨醇或山梨酸。對于靜脈內(IV)應用，可以將水溶性的達托霉素、達托霉素-相關的脂肽或其它脂肽溶解在任何一種常用的靜脈用流體中，并灌注給藥。對于脂肽膠束，在脂肽的濃度高于其cmc的條件下，將脂肽溶解到靜脈用制劑中。本領域的普通技術人員可以遵循本發明的教導改變PH值、溫度和鹽濃度以得到含有脂肽膠束的靜脈溶液。并且，還可以通過超聲波處理(sonicate)脂肽溶液以得到脂肽脂質體。靜脈用制劑可以包括載體、賦形劑或穩定齊U，包括但不限于鈣、人血清蛋白、檸檬酸鹽、醋酸鹽、氯化鈣、碳酸鹽和其它鹽。靜脈用流體包括但不限于生理學鹽水或Ringer’s溶液。也可以將達托霉素或達托霉素-相關的脂肽置于注射器、套管、導管和管線中。胃腸外給藥制劑可以是水性或非水性等滲無菌溶液或懸浮液。這些溶液或懸浮液可以由含有一種或多種在口服給藥制劑中提到的載體的無菌粉末或顆粒制成。對于胃腸外給藥特別可取的是脂肽膠束。化合物可以溶解在聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、苯甲醇、氯化鈉，和/或各種緩沖液中。對于肌內制劑，可以將脂肽化合物的無菌制劑或此化合物適合的可溶鹽形式，如鹽酸鹽，溶解到藥物稀釋液如注射用水(WFI)、生理鹽水或5%葡萄糖中給藥。對于胃腸外給藥特別需要脂肽膠束，因為它們不大可能在注射部位不會引起局部炎癥。不希望限制于任何理論，可能脂肽膠束比單節的脂肽引起更少的局部炎癥，因為在注射時可能引起炎癥的脂質尾隱藏在膠束的內部，而與脂質尾相比不易引起局部炎癥的肽核暴露在組織中。可以遵循本發明的教導制備用于肌內和腸胃外制劑的脂肽膠束以得到含有脂肽膠束的制劑。并且，可以通過超聲波處理(sonicate)脂肽溶液以得到脂肽脂質體。也可以將此化合物的合適的不溶形式在水基或藥學可接受的油基一如長鏈脂肪酸酯如油酸乙酯中制備成懸浮液給藥。可以通過在能進行生物降解的聚合物，如聚交酯-聚乙交酯(polylactide-polyglycolide)內形成化合物的微囊基質來制造可注射的儲存劑型(Injectabledepotforms)。可以根據藥物與聚合物的比率和所使用的特定聚合物的性質來控制藥物的釋放速率。其它能進行生物降解的聚合物的例子包括聚(鄰位酯)和聚合(酸酐)。也通過將此藥物圍入與身體組織相容的微乳液中而制備儲備可注射(Depotinjectable)的制劑。為局部應用，本發明的化合物和膠束也可以制備成用于皮膚、鼻和喉粘膜的適宜劑型，并可以采用霜劑、軟膏、液體噴霧劑或吸入劑、錠劑或喉涂劑的劑型。這些局部制劑還可以包括化學物質，例如二甲基亞砜(DMSO)以促進活性成分的表面滲透。對于局部制齊U，達托霉素、達托霉素-相關的脂肽、其適宜的鹽或脂肽膠束的無菌制劑可以以霜劑、軟膏、噴霧劑或其他局部敷料的形式給藥。局部制劑也可以采取浸有純化的達托霉素、達托霉素-相關的脂肽或脂肽膠束組合物的繃帶的劑型。用于耳或眼，本發明的化合物可以是用疏水或親水性基質制成的液體或半液體劑型，例如軟膏、霜劑、洗劑、涂劑或粉末。對于直腸給藥，本發明的化合物可以以與常規載體一如可可脂、蠟或其它甘油酯混合的栓劑形式給藥。對于氣溶膠制劑，可以在吸入器，例如計量吸入器和噴霧器中使用純化的達托霉素或達托霉素-相關的脂肽或此化合物的鹽型的無菌制劑。脂肽膠束的無菌制劑也可以用于氣溶膠制劑。氣溶膠制劑對于治療呼吸系統感染特別有用，例如肺炎和竇性(sinusbased)感染。或者，本發明的化合物可以為粉末的形式用于當傳遞時在適當的藥劑學可接受的載體中的重構。如果粉末形式要作為脂肽膠束重構，此粉末可以由緩沖液和/或鹽構成，因而用特定數量的無菌水或鹽水進行的重構會使此脂肽形成膠束。或者，考慮到用于重構脂肽以得到膠束的藥劑學可應用的載體的數量和種類，此粉末劑型中可以有操作說明。在另一實施方案中，此化合物的單位劑量劑型可以是此化合物、它的鹽或脂肽膠束的溶液，分散于滅菌、密封的安瓿中的適當稀釋液中。單位劑量中此化合物的濃度可以改變，例如，從大約1%到大約50%，這取決于所使用的化合物及其溶解性和醫師所需要的劑量。如果組合物包含單位劑量，優選每一單位劑量含有50-500mg的活性物質。對于成人治療，根據療程和給藥頻率，每日所使用的劑量范圍優選從IOOmg到3g。另一方面，本發明提供了一種治療感染的方法，特別是那些在人體和其它動物身上由革蘭氏陽性細菌引起的感染。術語“治療”一詞用來指預防感染和控制宿主動物被感染后已形成的感染。已形成的感染可以是急性的或慢性的。此方法包括給人或其它動物服用有效劑量的本發明化合物。有效劑量通常大約在0.l_25mg/kg之間的純化的達托霉素、達托霉素-相關的脂肽或藥劑學可接受的鹽。達托霉素或達托霉素-相關的脂肽可以是單節的或是部分脂肽膠束。優選劑量是約l_25mg/kg的純化的達托霉素或達托霉素-相關的脂肽或其藥劑學可接受的鹽。更優選的劑量是約l_12mg/kg的純化達托霉素或其藥劑學可接受的鹽。在一個實施方案中，本發明提供了一種對接受者用治療有效量的達托霉素或其它抗菌脂肽治療感染，特別是在由革蘭氏陽性細菌引起的感染的方法。達托霉素或抗菌脂肽可以是單節的或存在于脂肽膠束中。授予Rogers的美國專利No.5，041，567和PCT專利申請號為EP94/02552(公開號W095/05384)的文獻記載了傳遞抗菌劑的示例性的過程，其文件的所有內容完全結合在此作為參考。此處使用的術語“治療有效量”指根據本發明能預防發作、減輕癥狀或停止細菌感染發展的達托霉素或抗菌脂肽的量。術語“治療”被定義為對接受者給以治療有效量的本發明化合物以防止感染的發生和控制或消除感染。此處記載的術語“接受者”指哺乳動物、植物或細胞培養物。在一優選實施方案中，接受者是需要脂肽化合物治療的人或其它動物患者。脂肽抗生素化合物可以以單一的每日劑量或每日多劑量給藥。此治療體系可以要求長期服藥，如數天或2-4星期。每次給藥劑量或給藥總量取決于例如這些因素感染的性質和嚴重性、患者的年齡和一般健康狀況、患者對抗生素的耐受性和此感染中涉及的微生物。在申請日為1999年9月24日的美國系列申請No.09/406,568中公開了一種給藥方法，結合于此作為參考，它要求申請日為1998年9月25日的美國臨時申請Nos.60/101，828和1999年3月24日的60/125，750作為優先權。本發明的方法包括給需要的患者服用能有效降低或消除革蘭氏陽性細菌感染的數量的純化達托霉素或其他脂肽抗生素或其藥物組合物。達托霉素或脂肽抗生素既可以是單節的也可以存在于脂肽膠束中。此抗生素可以通過口服、腸胃外、吸入、局部、直腸、鼻、口腔、陰道等途徑給藥，或通過植入儲藥囊、外置泵或導尿管的方式給藥。可以將此抗生素制成用于眼或氣霧劑用途。純化的達托霉素、脂肽抗生素或其藥物組合物也可以直接注射或給藥到膿腫處、心室或關節內。胃腸外給藥包括皮下、靜脈內、肌內、關節內、滑膜內、腦池內(cisternal)、鞘膜內、肝內、傷口內(intralesional)和盧頁內注射或灌注。在一優選實施方案中，達托霉素或其他脂肽通過靜脈注射、皮下注射或口服給藥。也可以用本發明的方法治療細菌感染的病人，其感染是由于任何種類的革蘭氏陽性細菌引起或加劇的。在一優選實施方案中，根據本發明的方法給患者服用純化的達托霉素、達托霉素-相關的脂肽、其他脂肽或其藥物組合物。在另一優選實施方案中，會由以下細菌引起和加劇細菌感染，但并不僅限于這些種甲氧西林易感的和抗甲氧西林的葡萄球菌(包括金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)、溶血葡萄球菌(Staphylococcushaemolyticus)、人葡萄球菌(Staphylococcushominis)、腐生葡萄球菌(Staphylococcussaprophyticus)和凝固酶陰性葡萄球菌(coagulase-negativestaphyIococci))、糖肽中間體易感性金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(GISA)、青霉素易感性和抗青霉素的鏈球菌(包括肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、釀胺鏈球菌(Streptococcuspyogenes)、無乳鏈球菌(Streptococcusagalactiae)、鳥鏈球菌(Streptococcusavium)、牛鏈球菌(Streptococcusbovis)、乳鏈球菌(Streptococcuslactis)、血鏈球菌(Streptococcussangius)和C組鏈球菌、G組鏈球菌及亞急性鏈球菌(viridansstreptococci))、腸球菌(包括萬古霉素易感性和抗萬古霉素菌株，如類腸球菌(Enterococcusfaecalis)和屎腸球菌Enterococcusfaecium))、艱難梭菌(Clostridiumdifficile)、梭狀梭菌(Clostridiumclostridiiforme)、無害梭菌(Clostridiuminnocuum)、產氣莢膜梭菌(Clostridiumperfringens)、多枝梭菌(Clostridiumramosum)、流感嗜血菌(Haemophilusinfluenzae)、單核細胞增生利斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)、杰氏棒狀桿菌(Corynebacteriumjeikeium)、雙歧桿菌(Bifidobacteriumspp.)、產氣真桿菌(Eubacteriumaerofaciens)、遲緩真桿菌(Eubacteriumlentum)、嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus)、干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei)、植物乳桿菌(Lactobacilllusplantarum)、乳球菌(Lactococcusspp.)、明串珠菌(Leuconostocspp.)、小球菌(Pediococcus)、厭氧消化鏈球菌(Peptostreptococcusanaerobius)、不解糖消化鏈球菌(PeptostreptococcusasaccaroIyticus)、大消化鏈球菌(Peptostreptococcusmagnus)、微小消化鏈球菌(Peptostreptococcusmicros)、普氏消化鏈球菌(Peptostreptococcusprevotii)、產生消化鏈球菌(Peptostreptococcusproductus)、瘡皰丙酸桿菌(Propionibacteriumacnes)和放線菌(Actinomycesspp.)。在體外試驗中，達托霉素抵抗傳統的“耐受性”菌株的抗菌活性可以與其抵抗傳統的“易感性”菌株相比。并且達托霉素抵抗易感菌株的最小抑制濃度值(MIC)—般低于萬古霉素4倍。因而，在一優選實施方案中，根據本發明的方法，將純化的達托霉素、達托霉素相關的脂肽抗生素或其藥物組合物對表現出對包括萬古霉素在內的其它抗生素具有抗藥性的患者給藥。并且，不同于糖肽抗生素，達托霉素顯示出對抗革蘭氏陽性生物的快速的、與濃度相關的殺菌活性。從而，在一優選實施方案中，根據本發明的方法對需要快速產生抗菌療效的患者給予純化的達托霉素、脂肽抗生素或其藥物組合物。本發明的方法可以用于身體任何器官或組織的革蘭氏陽性細菌感染。這些器官或組織包括但不限于骨骼肌、皮膚、血流、腎、心臟、肺和骨。本發明的方法可以用于治療而不僅限于皮膚和軟組織感染、菌血癥和尿道感染。本發明的方法可以用來治療團體獲得呼吸道感染，包括但不限于耳炎、竇炎、慢性支氣管炎和肺炎，包括由抗藥性肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)或流感嗜血菌(Haemophilusinfluenzae)引起的肺炎。本發明的方法也可以用來治療包括不同種類的革蘭氏陽性細菌的混合感染，或包括革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌一包括需氧菌、caprophilic或厭氧菌一的混合感染。這些感染包括腹內感染和產科/婦產科感染。本發明的方法可以用于醫院感染的減緩治療，包括但不限于肺炎、腹內敗血癥、皮膚和軟組織感染，及骨骼和關節感染。本發明的方法也可以用來治療以下感染，包括但不限于心內膜炎、腎炎、膿毒性關節炎和骨髓炎。在一優選實施方案中，以上記載的任何疾病都可以用純化的達托霉素、脂肽抗生素或其藥物組合物來治療。此外，既可以用單節的，也可以用膠束狀的達托霉素或脂肽抗生素來治療這些疾病。達托霉素、達托霉素-相關的脂肽或其他脂肽也可以加入人的飲食或動物飼料中給藥。如果作為總攝食量的一部分來給藥，達托霉素或其他脂肽的量可以少于食物重量的I%，優選不超過食物重量的0.5%。對于動物的飲食，達托霉素或脂肽可以加入通常的食品中，或加入預混合料中。除達托霉素或其他脂肽抗生素之外，可以同時服用一種或多種抗真菌劑和/或一或多種抗生素來實施本發明的方法。同時服用達托霉素或其他脂肽抗生素之外的抗真菌劑和抗生素對于治療由不同種類革蘭氏陽性細菌引起的混合感染、由革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌引起的混合感染，或由細菌和真菌引起的混合感染是有用的。并且，達托霉素或其他脂肽抗生素可以改善一種或多種同時服用抗生素的毒性。已顯示服用達托霉素和氨基甙類能改善由氨基甙類引起的腎毒性。在一優選實施方案中，一種抗生素和/或抗真菌劑可以與純化的達托霉素、其它脂肽抗生素，或在含有純化與達托霉素或其它脂肽抗生素的組合物中同時服用。其它治療劑與達托霉素或其他脂肽抗生素同時給藥可以通過單節或膠束狀的達托霉素或脂肽抗生素進行。如前所述，球形的脂肽膠束可以用來增溶顯示出低水溶性的藥齊U。另外，脂肽脂質體可以用來俘獲脂質體囊中溶于水介質的藥劑。根據以下說明書的教導，本領域的普通技術人員都能制造含有治療藥劑，如抗炎劑、抗真菌劑和其它抗生素的脂肽膠束。可以與達托霉素或其他脂肽抗生素共同給藥的抗菌劑包括但不限于青霉素及相關藥物、碳青霉烯、頭孢菌素及相關的藥物、氨基甙類、桿菌肽、短桿菌肽、莫匹羅星、氯霉素、甲砜霉素、夫西地酸鈉(fusidatesodium)、林可霉素、氯林肯霉素、大環內酯、新生霉素、多粘菌素、利福霉素、壯觀霉素、四環素、萬古霉素、替考拉寧、鏈陽性菌素、包括璜胺藥物的抗葉酸劑、甲氧芐氨嘧啶及其與乙胺嘧啶的組合、包括硝基呋喃、烏洛托品杏仁酸鹽和烏洛托品馬尿酸鹽的合成抗菌劑、硝基咪唑、喹諾酮、氟喹諾酮、異煙肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺、對氨基水楊酸(PAS)、環絲氨酸、卷曲霉素、乙硫異煙胺、原磺酰胺(prothionamide)、氨硫脲(thiacetazone)、紫霉素、扁枝衣霉素、糖肽、glycylcylcline、ketolides、Il惡唑烷酮；亞胺培南(imipenen)、丁胺卡那霉素、奈替米星、磷霉素、慶大霉素、頭孢曲松、Ziracin,LY333328、CL331002、HM3647、Linezolid,SynercicU氨曲南和甲硝唑、依匹普林(Epiroprim)、OCA-983、GV-143253、Sanfetrinem鈉、CS-834、比阿培南、A-99058.I、A-165600、A-179796、KA159、DynemicinA,DX8739、DU6681；Cefluprenam,ER35786、Cefoselis、SanfetrinemcelexetiI>HGP-31、頭抱匹羅、HM-3647、RU-59863、Mersacidin、KP736、Rifalazil;Kosan、AM1732、MEN10700、Lenapenem、B02502A、NE-1530、PR39、K130、0〇20000、0卩。2045、￥611印1^111、？0138312、？0140248、。？111905、硫培南、1'行16的11^。(《71、RO-65-5788、Cyclothialidine、Sch-40832、SEP132613、micacocidinA、SB-275833,SR-15402、SUNA0026、T0C39、卡蘆莫南、頭孢唑蘭、Cefetametpivoxil和T3811。在一優選實施方案中，根據本發明能夠與達托霉素共同給藥的抗菌劑包括但不限于亞胺培南、丁胺卡那霉素、奈替米星、磷霉素、慶大霉素、頭孢曲松、替考拉寧、Ziracin、LY333328、CL331002、HM3647、Linezolid,SynereicU氨曲南和甲硝唑。可以與達托霉素或其他脂肽抗生素共同用藥的抗真菌劑包括但不限于Caspofungen>Voriconazole、舍他康唑、IB-367、FK-463、LY-303366、Sch-56592、Sitafloxacin、DB-289多烯烴，如兩性霉素、制霉菌素、Primaricin；唑系(azoles),如氟康唑、伊曲康唑和酮康唑；丙烯胺，如萘替芬和特比萘芬；和抗代謝物如氟胞嘧啶。其它抗真菌劑包括但不限于=Fostel等人在《今日藥物發現》5:25-32(2000)公開的種類，此處引用作為參考。Fostel等人公開的抗真菌化合物包括Corynecandin、Mer_WF3010、Fusacandins、Artrichitin/LL15G256Y、幾殼菌素、Cispentacin、Azoxybacillin、Aureobasidin和Khafrefungin。達托霉素或其他脂肽抗菌素，包括達托霉素相關的脂肽，可以根據此方法給藥直到細菌感染被根除或降低。在一個實施方案中，服用達托霉素或其他脂肽3天到6個月。在一優選實施方案中，服用達托霉素或其他脂肽7到56天。在一個更優選的實施方案中，月艮用達托霉素或其他脂肽7到28天。在一個更優選的實施方案中，服用達托霉素或其他脂肽7到14天。如果需要，達托霉素或其他脂肽可以被服用更長或更短時間。本發明具體涉及以下方面I.完全純凈的達托霉素。2.純度至少為98%的達托霉素。3.基本沒有脫水-達托霉素并基本沒有達托霉素的P-異構體的達托霉素。4.根據項3所述的達托霉素，其完全沒有脫水-達托霉素。5.根據項3所述的達托霉素，其沒有脫水-達托霉素。6.基本沒有任一雜質1-14的達托霉素。7.根據項6所述的達托霉素，其中完全沒有任一雜質1-14。8.根據項1-7中任一項所述的達托霉素，其中用HPLC測定達托霉素的純度。9.一種含有達托霉素的藥物組合物，其中的達托霉素選自完全純的達托霉素、純度至少為98%的達托霉素、基本沒有脫水-達托霉素和基本沒有達托霉素3-異構體的達托霉素、完全沒有脫水-達托霉素和基本沒有達托霉素3-異構體的達托霉素、沒有脫水-達托霉素和基本沒有達托霉素3-異構體的達托霉素、基本沒有雜質1-14的達托霉素，和完全沒有雜質1-14的達托霉素。10.項9所述的藥物組合物，還含有一和多種抗生素、一或多種抗真菌劑，或一種抗生素和一種抗真菌劑。11.純化達托霉素的方法，其中達托霉素選自完全純的達托霉素、純度至少為98%的達托霉素、基本沒有脫水-達托霉素和基本沒有達托霉素3-異構體的達托霉素、完全沒有脫水-達托霉素和基本沒有達托霉素3-異構體的達托霉素、沒有脫水-達托霉素和基本沒有達托霉素3-異構體的達托霉素、基本沒有雜質1-14的達托霉素，和完全沒有雜質1-14的達托霉素；包括以下步驟a)提供脫水-達托霉素和￠-異構體總量至少為2.5%的達托霉素制劑；b)在有改良緩沖液的情況下使達托霉素制劑結合在陰離子交換樹脂上，條件是使達托霉素以單體和非膠束狀態結合在陰離子交換樹脂上；c)在有改良緩沖液的情況下清洗陰離子交換樹脂，條件是洗脫脫水-達托霉素但保留達托霉素；并且d)在有改良緩沖液的情況下洗脫達托霉素，條件是使達托霉素與￠-異構體分離。12.項11所述的方法，其中的陰離子交換樹脂是PorosD50或PorosP150。13.項11或12所述的方法，其中的離子改良緩沖液含有摩爾濃度為2-6M的尿素，pH為6.0-7.O。14.項11所述的方法，還包括過濾和濃縮洗脫的達托霉素的步驟。15.純化達托霉素的方法，其中達托霉素選自完全純的達托霉素、純度至少為98%的達托霉素、基本沒有脫水-達托霉素和基本沒有達托霉素3-異構體的達托霉素、完全沒有脫水-達托霉素和基本沒有達托霉素3-異構體的達托霉素、沒有脫水-達托霉素和基本沒有達托霉素3-異構體的達托霉素、基本沒有雜質1-14的達托霉素，和完全沒有雜質1-14的達托霉素；包括以下步驟a)用正癸酸原料發酵玫瑰孢鏈霉菌，在發酵肉湯中產生達托霉素；b)澄清發酵肉湯；c)使發酵肉湯經過陰離子交換色譜法以得到富含達托霉素的制劑；d)使富集的達托霉素制劑經過疏水相互作用色譜法以得到半純化的達托霉素制劑；并且e)使半純化的達托霉素制劑經過改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法以得到純化的達托霉素。16.根據項15所述的方法，其中步驟a)調節正癸酸以達到發酵過程中正癸酸的剩余濃度為每百萬份中不大于50份(ppm)。17.根據項15所述的方法，其中步驟b)所述的澄清包括用含有丁醇的緩沖液提取發酵肉湯。18.根據項15所述的方法，其中步驟c)的陰離子交換色譜法在FP-DA13樹脂上進行。19.根據項15所述的方法，其中步驟d)的疏水相互作用色譜法在HP-20SS樹脂上進行。20.根據項19所述的方法，其中疏水相互作用色譜法在中性pH下進行，并且溶劑濃度低于在酸性PH下進行疏水相互作用色譜法時所用的溶劑濃度。21.根據項20所述的方法，其中通過改變樹脂的pH，不經過除去溶劑的步驟而回收HP-20ss樹脂。22.根據項15所述的方法，其中步驟e)的改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法在PorosD50或Porosl50樹脂上進行。、23.根據項22所述的方法，其中步驟e)的改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法包括以下步驟i)將步驟d)得到的半純化的達托霉素制劑置于適于改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法的緩沖液中；ii)在有改良緩沖液的情況下將達托霉素制劑結合到陰離子交換樹脂上，條件是使其中的達托霉素以單體和非膠束的狀態結合到陰離子交換樹脂上；iii)在有改良緩沖液的情況下清洗陰離子交換樹脂，條件是洗脫脫水-達托霉素而保留達托霉素；并且iv)在有改良緩沖液的情況下洗脫達托霉素，條件是使達托霉素與￠-異構體分離。24.根據項23所述的方法，其中的清洗和洗脫步驟包括使用連續鹽梯度或步進鹽梯度。25.根據項15所述的方法，其中的清洗和洗脫步驟包括使用連續鹽梯度或步進鹽梯度。26.根據項15所述的方法，其中通過連續流動色譜法或徑向流色譜法進行此方法。27.根據項15所述的方法，在步驟e)前還包括陰離子交換色譜法的步驟。28.根據項15所述的方法，還包括過濾和/或濃縮達托霉素的步驟。29.根據項15所述的方法，還包括對達托霉素除熱原的步驟。30.根據項29所述的方法，還包括冷凍干燥達托霉素的步驟。31.用項11-30中任一項的方法制備的達托霉素。32.一種分離的化合物，選自CB131012,CB-131011,CB-131008,CB-131006,CB-130989,CB-131005,CB131009和CB-131078。33.一種治療病人感染的方法，包括給需要的病人有效量的項9或10所述的藥物組合物的步驟。34.根據項33所述的方法，包括給需要的病人同時服用除達托霉素外的抗菌劑的步驟。35.根據項34所述的方法，其中所述的抗菌劑選自青霉素及其相關藥物、碳青霉烯類、頭孢菌素及相關的藥物、氨基甙類、桿菌肽、短桿菌肽、莫匹羅星、氯霉素、甲砜霉素、夫西地酸鈉、林可霉素、氯林肯霉素、大環內酯、新生霉素、多粘菌素、利福霉素、壯觀霉素、四環素、萬古霉素、替考拉寧、鏈陽性菌素、包括璜胺藥物的抗葉酸劑、甲氧芐氨嘧啶及其與乙胺嘧啶的組合、包括硝基呋喃、烏洛托品杏仁酸鹽和烏洛托品馬尿酸鹽的合成抗菌劑、硝基咪唑、喹諾酮、氟喹諾酮、異煙肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺、對氨基水楊酸(PAS)、環絲氨酸、卷曲霉素、乙硫異煙胺、原磺酰胺、氨硫脲、紫霉素、扁枝衣霉素、糖肽、glycylcylcline、ketolides、卩惡唑燒酮；亞胺培南、丁胺卡那霉素、奈替米星、磷霉素、慶大霉素、頭孢曲松、Ziracin、LY333328、CL331002、HM3647、Linezolid,SynercicU氨曲南和甲硝唑、依匹普林、OCA-983、GV-143253、Sanfetrinem鈉、CS-834、比阿培南、A-99058.I、A-165600、A-179796、KA159、DynemicinA,DX8739、DU6681；Cefluprenam,ER35786、Cefoselis、SanfetrinemcelexetiI>HGP-31、頭抱匹羅、HMR-3647、RU-59863>Mersacidin、KP736、Rifalazil;Kosan、AM1732、MEN10700、Lenapenem、B02502A、NE-1530,PR39、K130、0〇20000、0卩。2045、￥611印1^111、？0138312、？0140248、。？111905、硫培南、1'行16的11^。(《71、RO-65-5788、Cyclothialidine、Sch-40832,SEP132613、micacocidinA、SB-275833,SR-15402、SUNA0026、T0C39、卡蘆莫南、頭孢唑蘭、頭孢他美新戊酰氧甲酰和T3811。36.根據項33所述的方法，其中所述的抗菌劑選自亞胺培南、丁胺卡那霉素、奈替米星、磷霉素、慶大霉素、替考拉寧、Ziracin、LY333328、CL331002、HM3647、Linezolid和Synercid、氨曲南,和甲硝唑組成的組。37.根據項33所述的方法，包括給需要的病人同時服用抗真菌劑的步驟。38.根據項37所述的方法，其中所述的抗真菌劑選自多烯烴、唑類、丙烯胺、抗代謝產物、Fusacandins和幾殼菌素。39.根據項37所述的方法，其中所述的抗真菌劑選自兩性霉素、制霉菌素、Primaricin、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、萘替芬、特比萘芬、氟胞喃唳、Corynecandin、Mer-ffF3010>Artrichitin/LL15G256y、Cispentacin、Azoxybacillin、Aureobasidin和Khafrefungin。40.一種純化達托霉素的方法，包括以下步驟a)用正癸酸原料發酵玫瑰孢鏈霉菌，在發酵肉湯中產生達托霉素；b)澄清發酵肉湯；c)使發酵肉湯經過陰離子交換色譜法以得到富含達托霉素的制劑；d)使富集的達托霉素制劑經過疏水相互作用色譜法以得到半純化的達托霉素制劑；并且e)使半純化的達托霉素制劑經過陰離子交換色譜法以得到純化的達托霉素。41.根據項40所述的方法，其中調節步驟a)的正癸酸原料使在發酵過程中達到正癸酸的濃度不高于每百萬份中50份(ppm)。42.根據項40所述的方法，其中步驟b)所述的澄清包括過濾或離心和深度過濾。43.根據項40所述的方法，其中步驟c)的陰離子交換色譜法在FP-DA13樹脂上進行。44.根據項40所述的方法，其中步驟d)的疏水相互作用色譜法在HP_20ss樹脂上進行。45.根據項44所述的方法，其中的疏水相互作用色譜法在中性pH，并且溶劑濃度低于在酸性pH下進行疏水相互作用色譜法時所用的溶劑濃度。46.根據項45所述的方法，其中通過在酸性pH裝載柱并在中性pH條件下洗脫柱而回收HP-20ss樹脂。47.根據項40所述的方法，其中步驟e)的陰離子交換色譜法在FP-DA13樹脂上進行。48.根據項40所述的方法，其中使用步驟e)的陰離子交換色譜法以降低從步驟b)得到的溶劑的水平。49.根據項40所述的方法，其中清洗和洗脫步驟包括采用連續的鹽梯度。50.根據項40所述的方法，其中清洗和洗脫步驟包括采用步進的鹽梯度。51.根據項40所述的方法，其中通過連續流動色譜法進行此方法。52.根據項40所述的方法，還包括過濾和/或濃縮達托霉素步驟。53.根據項40所述的方法，還包括通過超濾除去達托霉素中熱原的步驟。54.根據項53所述的方法，其中所述的除熱原包括以下步驟i)使達托霉素溶液處于其中的達托霉素為單體和非膠束狀態的條件；ii)在達托霉素將通過濾器而熱原不通過濾器的條件下過濾達托霉素溶液；iii)改變通過濾器的達托霉素溶液使達托霉素聚集；iv)在使達托霉素保留在濾器上的條件下過濾達托霉素溶液；并V)收集達托霉素。55.根據項53所述的方法，還包括冷凍干燥達托霉素的步驟。56.根據項23所述的方法，通過徑向流色譜法進行此方法。57.一種脂肽膠束，所包含的脂肽選自達托霉素、A54145、達托霉素-相關的脂肽和A-21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈被正-辛酰基、正-壬酰基、正-十一酰基、正-十二酰基、正-酰基或正-十四酰基脂肪酸側鏈取代。58.項57的脂肽膠束，其中的脂肽是達托霉素。59.項57的脂肽膠束，其中的脂肽膠束是球形、層狀、圓筒形或囊狀膠束。60.項59所述的脂肽膠束，其中的脂肽膠束是球形膠束或一種脂質體。61.項57所述的脂肽膠束，其中的脂肽膠束是混合膠束。62.一種藥物組合物，包含的脂肽選自達托霉素、A54145、達托霉素-相關的脂肽和A-21978抗生素，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈被正-辛酰基、正-壬酰基、正-十一酰基、正-十二酰基、正-酰基或正-十四酰基脂肪酸側鏈取代；其中脂肽膠束是球形、層狀、圓筒形或囊狀膠束或混合膠束。63.項62所述的藥物組合物，其中藥物組合物還含有一或多種治療劑。64.項63所述的藥物組合物，其中的治療劑選自抗炎劑、抗真菌劑和抗生素。65.項63所述的藥物組合物，其中的治療劑結合在膠束的內部或形成膠束的一部分。66.項64所述的藥物組合物，其中所述的抗菌劑選自青霉素及相關藥物、碳青霉烯類、頭孢菌素及相關的藥物、氨基甙類、桿菌肽、短桿菌肽、莫匹羅星、氯霉素、甲砜霉素、夫西地酸鈉、林可霉素、氯林肯霉素、大環內酯、新生霉素、多粘菌素、利福霉素、壯觀霉素、四環素、萬古霉素、替考拉寧、鏈陽性菌素、包括璜胺藥物的抗葉酸劑、甲氧芐氨嘧啶及其與乙胺嘧啶的組合、包括硝基呋喃、烏洛托品杏仁酸鹽和烏洛托品馬尿酸鹽的合成抗菌劑、硝基咪唑、喹諾酮、氟喹諾酮、異煙肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺、對氨基水楊酸(PAS)、環絲氨酸、卷曲霉素、乙硫異煙胺、原磺酰胺氨硫脲、紫霉素、扁枝衣霉素、糖肽、glycylcylcline、ketolides、卩惡唑燒酮；亞胺培南、丁胺卡那霉素、奈替米星、磷霉素、慶大霉素、頭孢曲松、Ziracin、LY333328、CL331002、HM3647、Linezolid,SynercicU氨曲南和甲硝唑、依匹普林、OCA-983、GV-143253、Sanfetrinem鈉、CS-834、比阿培南、A-99058.I、A-165600、A-179796、KA159、DynemicinA,DX8739、DU6681；Cefluprenam,ER35786、Cefoselis、SanfetrinemcelexetiI>HGP-31、頭抱匹羅、HM-3647>RU-59863>Mersacidin、KP736、Rifalazil;Kosan、AM1732、MEN10700、Lenapenem、B02502A、NE-1530,PR39、K130、0〇20000、0卩。2045、￥611印1^111、？0138312、？0140248、。？111905、硫培南、1'行16的11^(^71、RO-65-5788、Cyclothialidine、Sch-40832,SEP132613、micacocidinA、SB-275833,SR-15402、SUNA0026、T0C39、卡蘆莫南、頭孢唑蘭、頭孢他美新戊酰氧甲酰和T3811。67.根據項66所述的藥物組合物，其中所述的抗菌劑選自亞胺培南、丁胺卡那霉素、奈替米星、磷霉素、慶大霉素、替考拉寧、Ziracin、LY333328、CL331002、HMR3647、Linezolid和Synercid、氨曲南,和甲硝唑組成的組。68.根據項64所述的組合物，其中所述抗真菌劑選自多烯烴、唑類(azoles)、丙烯胺、抗代謝產物、Fusacandins和糞殼菌素。69.根據項68所述的組合物，其中所述的抗真菌劑選自兩性霉素、制霉菌素、Primaricin、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、萘替芬、特比萘芬、氟胞喃唳、Corynecandin、Mer-ffF3010>Artrichitin/LL15G256y、Cispentacin、Azoxybacillin、Aureobasidin和Khafrefungin。70.一種治療病人感染的方法，包括給需要的病人服用有效量的項62-69中任一項所述的藥物組合物。71.根據項70所述的方法，其中的藥物組合物含有達托霉素。72.根據項70所述的方法，還包括將除脂肽外的抗真菌劑、抗炎劑或抗生素對需要的病人給藥。73.一種純化選自達托霉素、A54145、達托霉素-相關的脂肽和A-21978抗生素的脂肽抗生素的方法，其中達托霉素的正癸酰基脂肪酸側鏈被正-辛酰基、正-壬酰基、正-十一酰基、正-十二酰基、正-酰基或正-十四酰基脂肪酸側鏈取代，此方法包括以下步驟a)使脂肽制劑為單體和非膠束狀態；b)改變脂肽溶液的條件使脂肽形成膠束；c)從低分子量材料中分離脂肽膠束；并且d)收集脂肽膠束。74.根據項73所述的方法，其中的脂肽是達托霉素。75.根據項73所述的方法，通過超濾法從低分子量材料中分離其中的脂肽膠束。76.根據項75所述的方法，用10，000或30，000標示分子量(NMW)的膜進行其中的超濾過程。77.根據項73所述的方法，還包括以下步驟e)使步驟d)中收集的脂肽處于其中的脂肽膠束分離成脂肽單體的條件下；f)從高分子材料中分離脂肽單體；并g)收集脂肽單體。78.根據項73所述的方法，其中采用陰離子交換色譜法或重復的疏水色譜法以產生步驟a)的脂肽制劑。79.一種純化達托霉素的方法，包括以下步驟a)在發酵肉湯中用正癸酸原料發酵玫瑰孢鏈霉菌，產生達托霉素；b)澄清發酵肉湯；c)使發酵肉湯經過間歇式或柱色譜法以得到富含達托霉素的制劑；d)改變達托霉素溶液的條件使達托霉素形成膠束；e)從低分子量材料中分尚達托霉素膠束；并f)收集達托霉素膠束。80.根據項79所述的方法，還包括以下步驟f)使步驟e)收集的達托霉素處于其中的達托霉素膠束分離成達托霉素單體的條件下；g)從高分子量材料中分離達托霉素單體；并h)收集達托霉素單體。81.根據項79所述的方法，其中間歇式或柱色譜法是陰離子交換色譜法或重復疏水色譜法。82.根據項81所述的方法，其中用FP-DA13樹脂進行所述的陰離子交換色譜法，用HP-20andHP-20ss樹脂進行重復疏水相互作用色譜法。83.根據項73所述的方法，其中是通過改變脂肽溶液的溫度、電解質濃度、pH或溶劑濃度中的一或多種因素而達到所述的改變的。84.根據項83所述的方法，其中pH從中性或堿性變為pH約2.5-4.7。85.根據項83所述的方法，其中的溫度從至少15°C變為2-10C。86.一種制備含有脂肽膠束的藥物組合物的方法，其中的膠束所含的脂肽選自達托霉素、A54145、達托霉素-相關的脂肽和A-21978抗生素，其中正癸酰基脂肪酸側鏈被正辛酰基、正壬酰基、正i^一烷酰基、正十二烷酰基、正十三烷酰基或正十四烷酰基脂肪酸側鏈代替，此方法包括以下步驟a)使脂肽為單體狀態；并b)加入將脂肽轉變成膠束的藥學可接受的溶液以形成藥物組合物。87.根據項86所述的方法，其中的單體形式的脂肽為干燥或冷凍干燥狀態。88.根據項86所述的方法，其中的單體形式的脂肽是溶液狀態。89.根據項86所述的方法，其中藥學可接受的溶液包含電解質、緩沖液或溶劑中的一或多種。90.根據項89所述的方法，其中的緩沖液將藥物組合物的pH保持在pH2.5-4.5之間。91.根據項86所述的方法，還包括在藥物組合物中加入一或多種治療劑的步驟。92.根據項91所述的方法，其中的治療劑是另一種抗生素、一種抗炎劑、一種抗真菌劑或在藥物組合物中加入它們中的任何組合。93.根據項92所述的方法，其中的抗生素、抗炎劑或抗真菌劑結合在脂肽膠束中。94.根據項92所述的方法，其中的抗生素、抗炎劑或抗真菌劑不結合在脂肽膠束中。為能更充分地理解本發明，現提出下列實施方案。這些實施方案的目的只是為了說明本發明，而在任何方面都不能理解為對本發明范圍的限制。實施例I在受控制的癸酸原料發酵條件下進行玫瑰孢鏈霉菌(S.roseosporus)NRRL菌株15998的發酵培養使抗生素的產出最優化而使污染物的產出最小。用氣體色譜法測定殘留癸酸原料的量，從誘導開始(大約在第30小時)到收獲結束，目標的殘留水平是IOppm癸酸。將培養物離心，并隨后分析澄清的肉湯，用HPLC測定生成的達托霉素。產物滴定度一般在每公升發酵肉湯2.1-2.6克之間。既可以用Pall-S印的微孔過濾法也可以使用完全商業規模的離心和深度過濾法收獲發酵產物。將澄清的肉湯加到陰離子交換樹脂-三菱FP-DA13上，然后在pH6.5下用30mMNaCl清洗并在pH6.0-6.5下用300mMNaCl洗脫。或者，在pH6.5用60mMNaCl清洗FP-DA13柱，并在pH6.0-6.5下用500mMNaCl洗脫。洗脫物加到HIC樹脂-HP_20ss上，用30%乙腈清洗，并在pH4.0-5.0下用35%乙腈洗脫。或者，用45%的異丙醇清洗HIC樹脂，并用55-60%的異丙醇洗脫。洗出物加到FP-DA13樹脂上，并如前述進行清洗和洗脫。最終的陰離子交換步驟可以減少三分之一或更多的溶劑。在pHl.5-2.5下用0.2的過濾器進行反滲(Reverseosmosisdiafiltration)和濃縮,然后將達托霉素的制劑冷凍。在無菌灌裝之前用注射水(WFI)進行最終的反轉滲透透過過濾以清洗達托霉素并調節它的濃度。然后將瓶裝或散裝的達托霉素凍干。實施例2通過玫瑰孢鏈霉菌(S.roseosporus)的發酵培養生產達托霉素，并用美國專利4，885，243記載的方法以微孔過濾從5500升發酵肉湯中提純出部分純化的達托霉素(9.9Kg)。用美國專利4，874，843記載的方法將此部分純化的達托霉素進一步提純，得到純度為91%的大量達托霉素的制劑。經過HPLC分析，這種達托霉素制劑含有14種雜質(見實施例10)。將達托霉素制劑加到含有6M尿素的pH7.0的Tris緩沖液中的PorosP150陰離子交換樹脂(PE生物系統(PEBiosystems))上,使其與樹脂結合。在開始同一緩沖液中NaCl梯度洗脫之前，用三個柱體積量的緩沖液清洗樹脂。或者，可以用30mMNaCl的固定鹽水平有效地從柱中清除污染物。在O-IOOOmMNaCl梯度之間，在大約300mMNaCl時從樹脂上洗脫純化的達托霉素。根據“第一"HPLC方法測定，洗脫的達托霉素的純度高于99%。這種純化的達托霉素只含有一種可檢測的達托霉素污染物。不能檢出脫水-達托霉素和￠-異構體(少于0.01%污染物)。未確認的污染物的水平高于0.1%并低于0.5%。實施例3按實施例2記載的方法制備大批量純度為91%的達托霉素制劑。將這種達托霉素制劑加到存在于含有6M尿素的pH7.0醋酸鹽緩沖液中的PoroSD50陰離子交換樹脂上(PE生物系統)。按實施例2記載的同樣方式清洗并洗脫PotosD50陰離子交換樹脂。根據“第二’MPLC方法測定，從柱中洗脫的達托霉素的純度為96.92%。本發明的產品只含有最初的14種雜質中的兩種(少于0.5%污染)。在純化的達托霉素制劑中不能檢出脫水-達托霉素(少于0.01%污染，準確定量少于0.05%)o實施例4按實施例2記載的方法制備含達托霉素的發酵肉湯。用微孔過濾法使其澄清。在pH4.5下，用20%正丁醇或異丁醇萃取此澄清的產物(一份丁醇對4份澄清溶液)。再次萃取此澄清的產物，使部分純化達托霉素的產量高于澄清溶液中達托霉素總量的90%。通過添加pH6.5水性緩沖液從丁醇相中回收達托霉素，添加體積是丁醇體積的一半或更多，將達托霉素從丁醇相萃取到水相。此丁醇萃取步驟產生部分純化的達托霉素制劑，相對于澄清溶液其純度是5倍，濃度是10倍。然后按美國專利No.4，874，843記載的方法將這種達托霉素水性制劑純化，得到了純度為91%的達托霉素。達托霉素含有14種雜質。將此達托霉素制劑加到存在于含有6M尿素的pH7.0醋酸鹽緩沖液中的PorosD50陰離子交換樹脂上。在同一緩沖液中，開始用從O-IOOOmM的NaCl梯度洗脫之前，先用3個離子交換樹脂床體積的含有6M尿素的pH7.OTris緩沖液清洗樹脂。大約在300mMNaCl，從樹脂上洗脫純化的達托霉素。用“第二”HPLC方法測定，達托霉素的純度為98%。實施例5按實施例2記載的方法發酵達托霉素。5500升發酵肉湯含有13公斤達托霉素。在pH4.5，用20%正丁醇直接萃取發酵肉湯，將達托霉素分離到丁醇內。用正丁醇再次萃取發酵肉湯以得到高于發酵肉湯內總達托霉素90%的產量。用pH6.5的醋酸鹽水溶液緩沖液萃取此丁醇相，得到達托霉素，其純度是發酵肉湯的5倍(35%)而濃度是10倍。按美國專利4，885，243中記載的方法微孔過濾這種水相達托霉素，然后按美國專利4，874，843的方法純化。用這種方法可以得到純度約為91%的達托霉素。按在先技術，用HPLC法測定達托霉素含有14種雜質。將此達托霉素制劑加到存在于含有6M尿素的pH7.0醋酸鹽緩沖液中的PotosD50陰離子交換樹脂柱上。按實施例2的指示清洗并洗脫此樹脂。用第二種HPLC法測定，此色譜法步驟的產品的純度大約是98%-99%。實施例6用玫瑰孢鏈霉菌(S.roseosporus)的發酵培養基制備達托霉素,不同是,在用微孔過濾或離心過濾法澄清時，降低了殘留癸酸的供給量，以將發酵物的質量改善到10%純度。在發酵過程中，監測并定時調整癸酸水平以使殘留癸酸的水平保持在少于50ppm，優選地，在I-IOppm之間。按美國專利4，885，243記載的方法將發酵肉湯經微孔過濾以從5500升發酵肉湯中生產出12.I公斤部分純化的達托霉素。在中性PH的醋酸鹽緩沖液中澄清的發酵肉湯與陰離子交換劑，FP-DA13(三菱)，結合，在含有30mMNaCl的醋酸鹽緩沖液中清洗，隨后在300mMNaCl用醋酸鹽緩沖液洗脫。此陰離子交換步驟制備純度高于70%的達托霉素。按美國專利4，874，843的方法，并改進地使用HP_20ss樹脂將這種部分純化的達托霉素進一步純化。特別地，將這種部分純化的達托霉素裝載于存在于含有10%乙腈的醋酸鹽緩沖液中的HP-20ss樹脂上，在醋酸鹽緩沖液中用含有30%乙腈的醋酸鹽緩沖液清洗，并用40%乙腈洗脫，根據第二HPLC法測定，可以得到純度約為94-96%的達托霉素。按實施例5記載的方法，使用PorosD50樹脂對此產品進行改進的緩沖液增強的陰離子交換色譜法處理。達托霉素的純度高于99%并且只含有按在先技術方法生產出的14種雜質中的兩種。實施例7按實施例2記載的方法生產純度為93%的達托霉素制劑。將此產品加到存在于含有2M尿素的pH6.0醋酸鹽緩沖液中的PorosP150陰離子交換樹脂(PE生物系統)上。用三柱體積量的緩沖液清洗這種PorosP150樹脂。在此含有2M尿素的pH6.0醋酸鹽緩沖液中用0-400mMNaCl的梯度將達托霉素從樹脂中洗脫出來。在150_300mMNaCl之間洗脫出達托霉素。按第一HPLC法測定，從柱中洗出的達托霉素的純度是99.0-99.5%。達托霉素含有痕量的4種雜質，其含量少于達托霉素總量的I%。從純化的達托霉素制劑中未檢出脫水-達托霉素(小于0.02%污染度)。實施例8按實施例2記載的方法生產純度為93%的達托霉素制劑。將此產品加到存在于含有2M尿素的pH6.0醋酸鹽緩沖液中的PorosP150陰離子交換樹脂(PE生物系統)上。用6柱體積量的存在于含有2M尿素的pH6.0醋酸鹽緩沖液中的60mMNaCl(“清洗緩沖液”)清洗此柱。清洗緩沖液可以在50-75mMNaCl之間變化。此清洗實際上可除去所有脫水_達托霉素。用16柱體積量的存在于含有2M尿素的pH6.0醋酸鹽緩沖液中的250mMNaCl洗脫達托霉素。按“第一”HPLC方法測定，達托霉素的純度為98.5-99.5%。實施例9使用一種顯著地降低了進行HP-20SS色譜法所需的溶劑濃度的方法制備實施例2中記載的達托霉素制劑。出乎意料的是，當在中性PH條件下進行HP-20SS色譜法，而不是如美國專利4，874，843所記載在酸性pH條件下進行時，洗脫達托霉素所用溶劑，40%的乙腈或55-60%異丙醇酒精分別降低到12%和25%。在一優選實施例中，可以使用pH轉換重復利用HP_20ss樹脂而不需清除溶劑。在pH6.5-7.0，從FP-DA13樹脂柱洗脫之后，達托霉素裝載于平衡-如在pH6.6的60mM醋酸鹽中平衡-的HP-20SS樹脂柱上。用5_8柱床體積量(CBV)的清洗緩沖液清洗此樹脂柱。一種示例性的清洗緩沖液是PH6.6的5%異丙醇/60mM醋酸鹽。用洗脫緩沖液將達托霉素從樹脂柱中洗出。一種示例性的洗脫緩沖液是PH6.6的2-3CBV25%異丙醇/60mM醋酸鹽。用解吸緩沖液使樹脂柱解吸。在一個實施例中，用PH6.6-7.0的1CBV40%異丙醇/60mM醋酸鹽解吸樹脂柱。調整達托霉素溶液至pH3.5-4.0并再次裝載于HP_20ss樹脂柱以進一步提高純度。在一個實施例中，用0.25M磷酸將從pH6.5的HP-20SS樹脂柱洗脫的達托霉素調整到PH3.5。再將此達托霉素溶液裝載于預解吸并在pH3.5的60mM醋酸鹽中平衡過的HP-20SS樹脂柱。用pH調節緩沖液清洗樹脂柱以使pH為6.5。一種示例性的pH調節緩沖液是5-8份CBV的pH6.6的5%異丙醇/60mM醋酸鹽。用洗脫緩沖液洗脫達托霉素，如果需要，進一步用陰離子交換法或其他純化方法純化。在再利用之前，用解吸緩沖液解吸并清潔HP-20SS樹脂柱。一種示例性的清潔過程包括用3份CBVO.5MNa0H清洗，用I份CBV水清洗，然后在平衡之前用0.25M磷酸清洗。此樹脂柱可以保存在0.5MNa0H中。實施例10通過半制備的HPLC法和使用正離子和負離子模式的液體色譜/質譜(LC/MS)法鑒定按實施例2的記載制備的大量達托霉素。色譜法分析前在PorosP150陰離子交換樹脂上的大量達托霉素的雜質曲線列于表3，大量達托霉素制劑的色譜如圖12所示。表權利要求1.純化的達托霉素組合物，其含有達托霉素，其相對于表3中所示的雜質為至少93%純的，所述達托霉素通過包括以下步驟的方法來純化a.在溶液中形成達托霉素聚集體；b.在使所述達托霉素聚集體保留在過濾器上的條件下對所述溶液進行過濾；c.從過濾器中收集所述達托霉素聚集體；和d.由所述達托霉素聚集體得到純化的達托霉素。2.權利要求I的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括通過以下步驟來得到用于形成步驟Ia中的達托霉素聚集體的達托霉素a.將達托霉素加載于陰離子交換樹脂；b.在pH6.5用30mMNaCl水溶液洗滌所述陰離子交換樹脂上的達托霉素；和c.在pH6.0-6.5用300mMNaCl水溶液從所述陰離子交換樹脂中洗脫達托霉素。3.權利要求1-2中任一項的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括如下得到步驟2a中的達托霉素a.發酵玫瑰抱鏈霉囷以在發酵肉湯中廣生達托霉素；b.使所述發酵肉湯澄清以得到加載于步驟2a中的陰離子交換樹脂的達托霉素。4.權利要求1-3中任一項的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括以下步驟a.使步驟Id中的達托霉素與HIC樹脂結合；b.洗滌與所述HIC樹脂結合的達托霉素；c.用有機相溶劑使達托霉素從所述HIC樹脂中移出；和d.在達托霉素聚集體呈單體和非膠束狀態的條件下從所述HIC樹脂中得到達托霉素制劑。5.權利要求4的組合物，其中所述HIC樹脂包括HP-20SS樹脂，且所述有機相溶劑包括異丙醇。6.權利要求4-5中任一項的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括以下步驟使在步驟4d中從所述HIC樹脂中得到的達托霉素與陰離子交換樹脂接觸以降低有機溶劑在所述達托霉素制劑中的量。7.權利要求1-6中任一項的組合物，其中所述陰離子交換樹脂為FP-DA13樹脂，且所述達托霉素聚集體包括達托霉素膠束。8.權利要求1-7中任一項的組合物，其中所述達托霉素由具有表3中所示任意雜質I至14中一種或多種的達托霉素來純化。9.權利要求1-8中任一項的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括以下步驟a.將含有通過發酵玫瑰孢鏈霉菌而得到的達托霉素的經澄清的肉湯加載于陰離子交換樹脂；b.在pH6.5用30mMNaCl水溶液洗滌所述陰離子交換樹脂上的達托霉素；c.在pH6.0-6.5用300mMNaCl水溶液從所述陰離子交換樹脂中洗脫達托霉素；d.在由步驟9c得到的達托霉素中形成達托霉素膠束聚集體；e.在使所述達托霉素膠束保留在過濾器上的條件下對步驟9d中得到的達托霉素膠束進行過濾；f.將來自步驟9e的經過濾的達托霉素膠束加載于HIC樹脂；g.在PH3.5-6.5用異丙醇從步驟IOf中的HIC樹脂中洗脫達托霉素；h.將步驟9g的洗脫液中的達托霉素加載于陰離子交換樹脂；i.從步驟9h的陰離子交換樹脂中洗脫純化的達托霉素。10.權利要求9的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括以下步驟a.加載含有通過用正癸酸養料發酵玫瑰孢鏈霉菌而得到的達托霉素的經澄清的肉湯；b.在pH6.5用30mMNaCl水溶液洗滌FP-DA13陰離子交換樹脂上的達托霉素；c.在pH6.0-6.5用300mMNaCl水溶液從所述FP-DA13陰離子交換樹脂中洗脫達托霉素；d.在由步驟IOc得到的達托霉素中如下形成達托霉素膠束在2-15°C的溫度將由步驟IOc得到的達托霉素的pH調整至3.0至4.8;e.在使所述達托霉素膠束保留在過濾器上的條件下對步驟IOd中得到的膠束達托霉素進行過濾；f.將來自步驟IOe的經過濾的達托霉素膠束加載于HP-20SSHIC樹脂；g.在pH3.5-6.5用20-30%異丙醇從步驟IOf中的HP_20ssHIC樹脂中洗脫達托霉素；h.將步驟IOg的洗脫液中的達托霉素加載于FP-DA13陰離子交換樹脂；i.從步驟IOh的陰離子交換樹脂中洗脫純化的達托霉素；和j.對由步驟IOi得到的達托霉素進行凍干。11.純化的達托霉素組合物，其含有達托霉素，其相對于表3中所示的雜質為至少93%純的，所述達托霉素通過包括以下步驟的方法來純化a.在對玫瑰孢鏈霉菌進行的發酵培養中形成達托霉素；b.得到含有來自所述發酵培養的達托霉素的經澄清的肉湯；c.將經澄清的含有所述達托霉素的肉湯加載于FP-DA-13陰離子交換樹脂；d.在pH6.5用30mMNaCl水溶液洗滌所述FP-DA-13陰離子交換樹脂上的達托霉素；e.在pH6.0-6.5用300mMNaCl水溶液從所述FP-DA-13陰離子交換樹脂中洗脫達托霉素；f.在2-15°C的溫度將從所述FP-DA-13陰離子交換樹脂中洗脫的達托霉素的pH調整至pH3.0至4.8以形成含有達托霉素的膠束；g.含有達托霉素的膠束如下純化用過濾器對溶液進行過濾，其中使含有達托霉素的膠束保留在過濾器上；h.從過濾器中收集含有達托霉素的膠束；和i.從保留在過濾器上的含有達托霉素的膠束中得到純化的達托霉素。12.權利要求11的組合物，其中所述過濾器為10，000NMW過濾器。13.權利要求11或12中任一項的組合物，其中從保留在過濾器上的含有達托霉素的膠束中得到純化的達托霉素的步驟包括以下步驟j.將從過濾器中收集的含有達托霉素的膠束加載于HP20ss樹脂；k.用異丙醇洗滌所述HP20SS樹脂上的達托霉素；I.用異丙醇從所述HP20ss樹脂中洗脫達托霉素；和m.由從所述HP20SS樹脂中洗脫的達托霉素得到純化的達托霉素。14.權利要求13的組合物，其中由從所述HP20SS樹脂中洗脫的達托霉素得到純化的達托霉素的步驟包括以下步驟n.將從所述HP20ss樹脂中洗脫的達托霉素加載于FP-DA13樹脂柱；a.在pH6.5用30mMNaCl水溶液洗滌所述FP-DA-13陰離子交換樹脂上的達托霉素；b.在pH6.0-6.5用300mMNaCl水溶液從所述FP-DA-13陰離子交換樹脂中洗脫達托霉素；o.在pHI.5至2.5對從所述FP-DA-13陰離子交換樹脂中洗脫的達托霉素進行反滲和濃縮以得到純化的達托霉素。15.權利要求14的組合物，其還包括用注射水進行反滲以洗滌所述達托霉素和對所述達托霉素進行凍干。16.權利要求15的組合物，其還包括將所凍干的達托霉素在pH為4.0至5.0的生理鹽水(約140mMNaCl)中復溶。17.純化的達托霉素組合物，其含有達托霉素，其為至少93%純的，所述達托霉素通過包括以下步驟的方法來純化a.將經澄清的含有通過對玫瑰孢鏈霉菌進行發酵培養而得到的達托霉素的肉湯加載于FP-DA-13陰離子交換樹脂；b.在pH6.5用30mMNaCl水溶液洗滌所述FP-DA-13陰離子交換樹脂上的達托霉素；c.在pH6.0-6.5用300mMNaCl水溶液從所述FP-DA-13陰離子交換樹脂中洗脫達托霉素；d.在2-15°C的溫度將從所述FP-DA-13陰離子交換樹脂中洗脫的達托霉素的pH調整至pH3.0至4.8以形成含有達托霉素的膠束；e.含有達托霉素的膠束如下純化用過濾器對溶液進行過濾，其中使含有達托霉素的膠束保留在過濾器上；f.從過濾器中收集含有達托霉素的膠束；和g.從保留在過濾器上的含有達托霉素的膠束中得到純化的達托霉素，其中純度相對于表3中所示的雜質為至少93%。全文摘要本發明公開了高度純化的達托霉素和含有此化合物的藥物組合物。本發明公開了一種純化達托霉素的方法，包括順序進行陰離子交換色譜法、疏水相互作用色譜法和陰離子交換色譜法的步驟。本發明也公開了一種通過改良緩沖液增強的陰離子交換色譜法純化達托霉素的方法。本發明也公開了通過玫瑰孢鏈霉菌發酵產生達托霉素的改進的方法。本發明也公開了分析達托霉素純度的高壓液相色譜法。本發明還公開了脂肽膠束和制備膠束的方法。本發明也公開了用脂肽膠束純化脂肽抗茵素，如達托霉素的方法。本發明還公開了在治療方面使用脂肽膠束。文檔編號C07K1/20GK102671181SQ20121008077公開日2012年9月19日申請日期2001年1月18日優先權日2000年1月20日發明者A.R.塔利亞尼,J.P.德庫西,M.澤諾尼,P.D.林奇,T.J.凱萊赫,賴正吉申請人:卡比斯特制藥公司