專利名稱：復合酶提取花色素的方法及其復合酶制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種提取花色素的方法，具體是一種用復合酶提取花色素的方法及其復合酶制劑。
背景技術：
花色素(Anthocyanidin)又稱花青素，其與糖類物質以糖苷鍵結合之后即為花色苷，是自然界一類廣泛存在于植物中的水溶性天然色素，是一種有著特殊分子結構的生物類黃酮，在植物體內主要以花色苷的形式存在，是國際上公認的清除人體自由基最有效的天然抗氧化劑，具有非常強的生物活性，并且吸收性良好，對人體生物有效性是100%，服用后~■十分鐘就能在血液中檢測到。
花色素可以營養皮膚，增強皮膚免疫力，不但能防止皮膚皺紋的提早生成，還可維持正常的細胞連結、血管的穩定、增強微細血管循環、提高微血管和靜脈的流動，進而達到異常皮膚的迅速愈合，是天然的陽光遮蓋物，能夠防止紫外線侵害皮膚。花色素還能增強視力，消除眼睛疲勞；延緩腦神經衰老；對由糖尿病引起的毛細血管病有治療作用；增強心肺功能；預防老年癡呆。具有超凡的保健價值，開發利用前景非常廣闊。花色素存在于植物的細胞內或吸附在由纖維素、半纖維和果膠等物質組成的細胞壁上，常規的機械或化學方法很難將吸附在細胞壁上的花色苷有效提取出來，因而提取率比較低。
發明內容
為了克服現有技術的不足，本發明公開了一種復合酶提取花色素的方法及其復合酶，花色素提取率高、生產成本低、節能減耗。本發明采用了如下技術方案
復合酶制劑，包括下述配方量的組分纖維素酶疒15wt%、半纖維素酶疒15 wt %、蛋白酶7 15 wt %、果膠酶55 79 wt %。作為優選，復合酶制劑，包括下述配方量的組分纖維素酶10wt%、半纖維素酶10wt %、蛋白酶IOwt %、果膠酶70 wt %。復合酶提取花色素的方法，包括以下步驟
(1)制備新鮮的果漿，用水調節固液比；
(2)在密閉容器中低速攪拌步驟(I)制得的果漿，控制溫度在4(T60°C之間，PH值為3飛之間，加入復合酶制劑，酶解1、小時；所述復合酶制劑的用量為lmg/g 3mg/g;即每Ig果酶中加入Ilmg的復合酶制劑；
(3)酶解完畢，除去果漿中的果渣，制得澄清果汁；
(4)澄清果汁層析法精制后，噴霧干燥制得花色素產品。作為優選，步驟(I)中果漿的固液比為1:8。作為優選，步驟(2)中控制溫度為50°C、PH值為4. 5，復合酶制劑用量為2mg/g，酶解時間為3小時。作為優選，步驟(3)，先由臥螺離心機初濾，除掉果渣，料液經三足離心機過濾，得
澄清果汁。作為優選，步驟(4)，采用大孔樹脂柱層析，用酸性乙醇洗脫；酸性乙醇中乙醇濃度為 70% 100v%，HCl 濃度為 O. lwt%。果實細胞細胞壁的主要構成物質是纖維素、半纖維和果膠，結構較緊密，通常情況下單純依靠機械或化學方法難以將其充分破碎，但通過添加一定量的果膠酶、纖維素酶和半纖維素酶等酶制劑使得細胞的這些構成物質水解，破壞細胞的網狀結構，提高果實的破碎程度，使花色苷得以釋放，從而達到提高花色素的提取率的目的，同時，把大分子的果膠物質降解后，也有利于后一階段的澄清和過濾作業。細胞內的花色素存在于細胞的液泡中，在果槳中加入一定量的果膠酶和蛋白酶， 果膠酶能水解果膠物質破壞細胞結構，蛋白酶則能破壞液泡膜，從而釋放出花色素物質。研究利用復合酶法提取花色素，通過酶解作用，細胞壁被破壞，使吸附在纖維素及細胞壁上的花色素得以釋放，并且破壞了漿果細胞的液泡膜，從而釋放出液泡內花色素物質。為探索最佳提取工藝，提高花色素的提取率，采用復合酶對漿果組織進行降解，以花色苷的提取率為評價指標，篩選出了最佳復合酶組成和最佳酶解工藝。本研究將原料漿果破碎后利用復合酶進行生物酶解，過濾、澄清處理后，再用大孔樹脂精制，得到較高含量的花色素產品。該工藝技術經本單位試用，黑加侖、藍莓、越橘果得到了綜合利用，提高了花色素提取率，降低了生產成本。同時，生產全程低溫操作，有效降低了能耗，減少了對生態環境的影響。本項目實施符合建立節約型社會的發展要求，對于我國作為中草藥植物資源大國，降低我國中藥材及天然植物有效成分生產企業的成本，增強競爭力和可持續發展具有顯著的社會和經濟意義。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明做進一步說明。實施例1
復合酶提取花色素的方法，包括以下步驟
(O制備新鮮的藍莓果漿，果漿的固液比為1:8 ；
(2)在密閉容器中低速攪拌步驟(I)制得的果漿，控制溫度為50°C、PH為3.0，加入復合酶制劑，酶解I小時；所述復合酶制劑的用量為3mg/g ；
(3)酶解完畢，除去果漿中的果渣，制得澄清果汁；
(4 )澄清果汁用大孔樹脂柱層析處理后，用酸性乙醇洗脫，噴霧干燥制得花色素產品。復合酶制劑的配方為纖維素酶10wt%、半纖維素酶10 wt %、蛋白酶IOwt %、果膠酶 70 wt %。花色素提取率為93. 8%。實施例2
復合酶提取花色素的方法，包括以下步驟
(O制備新鮮的藍莓果漿，果漿的固液比為1:8 ；(2)在密閉容器中低速攪拌步驟(I)制得的果漿，控制溫度為60°C、PH為6.O，加入復合酶制劑，酶解8小時；所述復合酶制劑的用量為2mg/g ；
(3)酶解完畢，除去果漿中的果渣，制得澄清果汁；
(4 )澄清果汁用大孔樹脂柱層析處理后，用酸性乙醇洗脫，噴霧干燥制得花色素產品。復合酶制劑的配方為纖維素酶7wt%、半纖維素酶7 wt %、蛋白酶7wt %、果膠酶79 wt %o花色素提取率為96. 5%。實施例3
復合酶提取花色素的方法，包括以下步驟
(O制備新鮮的藍莓果漿，果漿的固液比為1:8 ；
(2)在密閉容器中低速攪拌步驟(I)制得的果漿，控制溫度為45°C，PH為4.5，加入復合酶制劑，酶解3小時；所述復合酶制劑的用量為lmg/g ；
(3)酶解完畢，除去果漿中的果渣，制得澄清果汁；
(4 )澄清果汁用大孔樹脂柱層析處理后，用酸性乙醇洗脫，噴霧干燥制得花色素產品。復合酶制劑的配方為纖維素酶15wt%、半纖維素酶15 wt %、蛋白酶15wt %、果膠酶 55 wt %。花色素提取率為95. 7%。
權利要求
1.復合酶制劑，其特征在于，包括下述配方量的組分纖維素酶疒15wt%、半纖維素酶7 15 wt %、蛋白酶7 15 wt %、果膠酶55 79 wt %。
2.如權利要求1所述的復合酶制劑，其特征在于，包括下述配方量的組分纖維素酶10wt%、半纖維素酶10 wt %、蛋白酶IOwt %、果膠酶70 wt %。
3.復合酶提取花色素的方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)制備新鮮的果漿，用水調節固液比； (2)在密閉容器中低速攪拌步驟(I)制得的果漿，控制溫度在4(T60°C之間，PH值為3飛之間，加入如權利要求1所述的復合酶制劑，酶解廣8小時；所述復合酶制劑的用量為Img/g 3mg/g ； (3)酶解完畢，除去果漿中的果渣，制得澄清果汁； (4)澄清果汁層析法精制后，噴霧干燥制得花色素產品。
4.如權利要求3復合酶提取花色素的方法，其特征在于，步驟(I)中果漿的固液比為1:8。
5.如權利要求3復合酶提取花色素的方法，其特征在于，步驟(2)中控制溫度為50°C、PH值為4. 5，復合酶制劑用量為2mg/g，酶解時間為3小時。
6.如權利要求3復合酶提取花色素的方法，其特征在于，步驟(3)，先由臥螺離心機初濾，除掉果渣，料液經三足離心機過濾，得澄清果汁。
7.如權利要求3復合酶提取花色素的方法，其特征在于，步驟(4)，采用大孔樹脂柱層析，用酸性乙醇洗脫；酸性乙醇中乙醇濃度為709Tl00v%，HCl濃度為O. lwt%。
全文摘要
復合酶提取花色素的方法及其復合酶制劑。本發明公開了一種復合酶制劑，包括下述組分纖維素酶7~15wt%、半纖維素酶7~15wt%、蛋白酶7~15wt%、果膠酶55~79wt%。本發明還公開了一種復合酶提取花色素的方法，包括以下步驟(1)制備新鮮的果漿，用水調節固液比；(2)在密閉容器中低速攪拌步驟(1)制得的果漿，控制溫度在40~60℃之間，PH值為3~6之間，加入上述復合酶制劑，酶解1~8小時；所述復合酶制劑的用量為1mg/g~3mg/g；(3)酶解完畢，除去果漿中的果渣，制得澄清果汁；(4)澄清果汁層析法精制后，噴霧干燥制得花色素產品。
文檔編號C07D311/62GK103013936SQ20121056891
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月25日 優先權日2012年12月25日
發明者鄭猛, 馬全民, 聶復禮, 杜大慶 申請人:浙江惠松制藥有限公司