一種板藍根精制多糖的制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種板藍根精制多糖的制備方法,旨在提供一種操作簡單,蛋白脫除率高,多糖損失量小,環境友好的板藍根精制多糖的制備方法;其技術要點依次包括下述步驟:1)提取板藍根水提物,濃縮后醇沉,再過濾,復溶,得到板藍根濃縮粗液;2)將步驟1)得到的板藍根濃縮粗液采用離子交換樹脂吸附純化,制得板藍根精制多糖。
【專利說明】一種板藍根精制多糖的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明公開一種多糖的制備方法,具體的說是,一種板藍根精制多糖的制備方法。【背景技術】
[0002]板藍根多糖具有抗病毒作用,對非特異性免疫和體液免疫均有一定的增強作用。其粗多糖提取物 含有大量蛋白質、色素等雜質,對多糖產品的純度和藥效都有較大影響,尤其是要將其開發成純度較高的藥品時,除去粗多糖中所含的蛋白和色素是一個必不可少的純化步驟。
[0003]傳統的多糖脫蛋白方法有Seavag法、三氯乙酸法、HCl法、酶法等,其中Seavag法最為常用,Seavag法是三氯乙酸和正丁醇按一定比例混合對多糖液進行萃取,重復數次,直至脫盡蛋白。使用該法不僅多糖損失量大,產品中的有機溶劑難以除凈;而且有機溶劑使用量大,成本高、污染環境。多糖脫色方法有活性炭吸附化、大孔樹脂吸附法、氧化法等。采用以上方法,通常脫色效率不高,或會對多糖造成一定損失、破壞。傳統工藝中,脫蛋白與脫色常分兩步完成,工藝復雜,耗時長。
【發明內容】
[0004]針對上述問題,本發明的目的在于提供一種操作簡單,蛋白脫除率高,多糖損失量小,環境友好的板藍根精制多糖的制備方法。
[0005]為解決上述技術問題,本法提供的技術方案是這樣的:該板藍根精制多糖的制備方法,其特征在于,依次包括下述步驟:
[0006]I)提取板藍根水提物,濃縮后醇沉,再過濾,復溶,得到板藍根多糖液;
[0007]2)將步驟I)得到的板藍根多糖液采用離子交換樹脂吸附純化,制得板藍根精制多糖。
[0008]上述的板藍根精制多糖的制備方法,步驟I)所述的板藍根多糖液按生藥計含量為
0.02 ~lg/mL。
[0009]上述的板藍根精制多糖的制備方法,步驟I)所述的板藍根多糖液的pH值為I~12 ;所述的pH值采用lmol/L NaOH溶液或lmol/L HCl溶液調節。
[0010]上述的板藍根精制多糖的制備方法,步驟2)所述的離子交換樹脂為大孔型弱酸陽離子交換樹脂。
[0011]上述的板藍根精制多糖的制備方法,所述的大孔型弱酸陽離子交換樹脂的母體為聚丙烯酸,功能基團為羧基。
[0012]上述的板藍根精制多糖的制備方法,步驟2)所述的離子交換樹脂吸附時間為I~5h;吸附溫度為25~50°C。
[0013]本發明提供的技術方案,依據板藍根多糖一般呈中性而蛋白帶電的性質,利用離子交換樹脂能吸附相反電荷的分子,大孔樹脂吸附小分子的特性,實現板藍根粗多糖的脫蛋白和脫色。[0014]該方法具有操作簡單,蛋白脫除率高,多糖損失量小等優點,并且在操作過程無需降低多糖液濃度,減少了后續操作與成本;并且在操作過程未使用有毒的有機溶劑,避免了有機溶劑殘留的危害,減少了環境污染;并且所采用的樹脂為可再生樹脂,可以重復使用,降低了生產成本,有利于工業生產應用。
【具體實施方式】
[0015]下面結合實施例對本發明作進一步說明,但本發明的保護范圍并不限于此。
[0016]實施例1
[0017]I)稱取板藍根20g,加入300mL去離子水,90°C溫浸提取,提取2次,每次2h ;合并2次提取液,減壓濃縮至IOOmL,加入280mL乙醇,使乙醇濃度為70%。靜置10h,濾紙過濾得到醇沉物,用200mL乙醇洗滌,加入400mL去離子水,超聲復溶,減壓濃縮至60mL,濾去不溶物,即得濃度約0.33g/mL (按生藥計)板藍根多糖液。
[0018]2)預處理的大孔型弱酸陽離子交換樹脂
[0019]用lmol/L鹽酸溶液以2~3倍柱體積的洗脫2小時,去離子水沖洗柱子至接近中性;然后再用lmol/L NaOH溶液以2~3倍柱體積的洗脫2小時,去離子水沖洗柱子至接近中性;最后用lmol/L鹽酸溶液以2~3倍柱體積的洗脫2小時,去離子水沖洗柱子至接近中性,具體參數見表1。
[0020]本發明所述的大孔型弱酸陽離子交換樹脂可以再生,在方法為,采用lmol/L鹽酸溶液以2~3倍柱體積的洗脫2小時,去離子水沖洗柱子至接近中性;然后再用lmol/LNaOH溶液以2~3倍柱體積的洗脫2小時,去離子水沖洗柱子至接近中性;最后用lmol/L鹽酸溶液以2~3倍柱體積的洗脫2小時,去離子水沖洗柱子至接近中性。
[0021]表1尚子交換樹脂廣品說明
[0022]
【權利要求】
1.一種板藍根精制多糖的制備方法,其特征在于,依次包括下述步驟: 1)提取板藍根水提物,濃縮后醇沉,再過濾,復溶,得到板藍根多糖液; 2)將步驟I)得到的板藍根濃縮粗液采用離子交換樹脂吸附純化,制得板藍根精制多糖。
2.根據權利要求1所述的板藍根精制多糖的制備方法,其特征在于:步驟I)所述的板藍根多糖液含量為0.02~lg/mL (按生藥計)。
3.根據權利要求1所述的板藍根精制多糖的制備方法,其特征在于:步驟I)所述的板藍根多糖液的PH值為I~12。
4.根據權利要求3所述的板藍根精制多糖的制備方法,其特征在于:所述的pH值采用lmol/L NaOH溶液或lmol/L HCl溶液調節。
5.根據權利要求1所述的板藍根精制多糖的制備方法,其特征在于:步驟2)所述的離子交換樹脂為大孔型弱酸陽離子交換樹脂。
6.根據權利要求5所述的板藍根精制多糖的制備方法,其特征在于:所述的大孔型弱酸陽離子交換樹脂的母體為聚丙烯酸,功能基團為羧基。
7.根據權利要求1所述的板藍根精制多糖的制備方法,其特征在于:步驟2)所述的離子交換樹脂吸附時間為 I~5h。
8.根據權利要求1所述的板藍根精制多糖的制備方法,其特征在于:所驟2)所述的離子交換樹脂吸附溫度為25~50°C。
【文檔編號】C08B37/00GK103694363SQ201310613139
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年11月27日 優先權日:2013年11月27日
【發明者】呂竹芬, 陳燕忠, 謝清春, 馮思欣 申請人:廣東藥學院