背景技術：
組蛋白去乙酰酶(hdac)是一類經由組蛋白乙酰化作用來調節基因表現的酶，例如，hdac1-11。已知hdac抑制劑會誘發p21及/或p27表現，p21及p27是兩種在腫瘤細胞中誘發細胞生長抑制、分化及細胞凋亡的蛋白質。參見nimmanapalli等人，blood2003，101，3236-39；及roy等人，molecularcancertherapeutics2007，6，2696-2707。其由此作為強效抗癌劑受到大量關注。參見，例如，lu等人，journalofmedicinalchemistry2005，48，5530-35；kulp等人，clinicalcancerresearch2006，12，5199-5206；及ryan等人，journalofclinicaloncology2005，23，3912-22。
技術實現要素：
本發明是基于某些吲哚、吲哚啉、氮雜吲哚及氮雜吲哚啉化合物可有效抑制hdac的意外發現。
在一態樣中，本發明關于如下顯示的式(i)之化合物：
在該式中，r1是so2ra或ch2ra，其中ra是c1-c10烷基、c2-c10烯基、c2-c10炔基、芳基、雜芳基、c3-c10環烷基、c3-c10環烯基、c1-c10雜環烷基、或c1-c10雜環烯基；烷基、烯基、及炔基各者視情況經鹵基、羥基、硝基、氰基、胺基、c1-c6烷氧基、
此等化合物的一子集包括彼等其中a是吡啶環或嘧啶環及x是ch、c、或n者。吡啶環及嘧啶環各者視情況經鹵基、羥基、硝基、氰基、胺基、c1-c6烷胺基、c2-c10二烷胺基、c1-c6烷氧基、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、芳基、雜芳基、c3-c10環烷基、c3-c10環烯基、c1-c10雜環烷基、或c1-c10雜環烯基單、雙、或三取代，其中烯基視情況經c(o)or＇、c(o)nr＇r＂取代，r＇是h或c1-c6烷基及r＂是h、oh、c1-c6烷基、或芳基。
ra可為萘基或苯基，其各者視情況經鹵基、羥基、硝基、氰基、胺基、c1-c6烷胺基、c2-c10二烷胺基、c1-c6烷氧基、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、芳基、雜芳基、c3-c10環烷基、c3-c10環烯基、c1-c10雜環烷基、或c1-c10雜環烯基單、雙、或三取代，烯基視情況經c(o)or＂＇取代，其中r＂＇是h或c1-c6烷基。
ra亦可視情況經
通常，r2是h或缺失及r3是h。
在另一態樣中，本發明是關于式(i)的化合物，其中r1是so2rb或ch2rb，rb視情況經
先前剛描述化合物的一子集包括彼等其中x是ch、c、或n；r2是h或缺失；及r3是h者。
本文術語「烷基」是指含有1至20個(例如，1至10個或1至6個)碳原子的直鏈或分支鏈烴基。實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基及第三丁基。術語「伸烷基」是指二價烷基。實例包括-ch2-、-ch2ch2-、-ch2ch2ch2-、-ch2(ch3)ch2-及-ch2ch2ch2ch2-。術語「烷氧基」是指-o-烷基。實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、及異丙氧基。
術語「烯基」是指含有2至20個(例如，2至10個及2至6個)碳原子及一或多個雙鍵的直鏈或分支鏈烴基。實例包括-ch＝ch2、-ch＝chch3、-ch2ch＝ch2、及-ch2ch＝chch3。術語「炔基」是指含有2至20個(例如，2至10個及2至6個)碳原子及一或多個三鍵的直鏈或分支鏈烴基。
術語「環烷基」是指具有3至12個碳的飽和單環、雙環、三環、或四環烴基。環烷基的實例包括但不限于，環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環庚基及環辛基。術語「環烯基」是指具有3至12個碳及一或多個雙鍵的部分不飽和單環、雙環、三環、或四環烴基。
術語「雜環烷基」是指具有一或多個雜原子(例如，o、n、p、及s)的非芳族5至8員單環、8至12員雙環、或11至14員三環系統。雜環烷基的實例包括但不限于，哌嗪基、咪唑啶基、氮雜環庚烷基、吡咯啶基、二氫噻二唑基、二氧雜環己基、嗎啉基、四氫吡喃基、及四氫呋喃基。術語「雜環伸烷基」是指二價雜環烷基。術語「雜環烯基」是指具有一或多個雜原子(例如，o、n、p及s)及一或多個雙鍵的非芳族5至8員單環、8至12員雙環、或11至14員三環系統。
術語「芳基」是指6碳單環、10碳雙環、14碳三環芳族環系統，其中各個環可具有1至5個取代基。芳基的實例包括苯基、萘基、及蒽基。
術語「雜芳基」是指具有一或多個雜原子(例如，o、n、p及s)的芳族5至8員單環、8至12員雙環、或11至14員三環系統。實例包括三唑基、惡唑基、噻二唑基、四唑基、吡唑基、吡啶基、呋喃基、咪唑基、苯并咪唑基、嘧啶基、噻吩基、喹啉基、吲哚基、噻唑基、及苯并噻唑基。
術語「鹵基」是指氟、氯、溴、或碘基。術語「胺基」是指衍生自胺的基團，其未經取代或經烷基、芳基、環烷基、雜環烷基、或雜芳基單/雙取代。術語「烷胺基」是指烷基-nh-。術語「二烷胺基」是指烷基-n(烷基)-。
本文提及的烷基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷氧基及芳氧基包括經取代及未經取代部分。取代基的實例包括但不限于，鹵基、羥基、胺基、氰基、硝基、巰基、烷氧羰基、酰胺基、羧基、烷磺酰基、烷羰基、脲基、胺甲酰基、羰基、硫脲基、硫氰酰基、磺酰胺基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、芳基、雜芳基、環烷基及雜環烷基，其中烷基、烯基、炔基、烷氧基、芳基、雜芳基、環烷基、及雜環烷基可進一步經取代。
上文描述的化合物若適用亦包括其鹽及溶劑化物。鹽可在化合物中陰離子與帶正電荷基團(例如，胺基)間形成；適宜陰離子的實例包括氯離子、溴離子、碘離子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、檸檬酸根、甲磺酸根、三氟乙酸根、乙酸根、蘋果酸根、甲苯磺酸根、酒石酸根、延胡索酸根、谷胺酸根、尿甘酸根、乳酸根、戊二酸根、馬來酸根。鹽亦可在陽離子與帶負電荷基團間形成；適宜陽離子的實例包括鈉離子、鉀離子、鎂離子、鈣離子、及銨陽離子諸如四甲基銨離子。鹽進一步包括彼等含有四級氮原子者。溶劑化物是指在活性化合物與醫藥上可接受之溶劑間形成的絡合物。醫藥上可接受的溶劑的實例包括水、乙醇、異丙醇、乙酸乙酯、乙酸、及醇胺。
一種含有上述化合物之一作為治療劑及醫藥上可接受的載劑的醫藥組合物亦在本發明范圍內。該醫藥組合物可進一步含有另一用于治療癌癥之治療劑。本發明亦以上述化合物之一于制造用于治療癌癥之藥物的用途為特征。
一種藉由投與給有需要的個體有效量的任一上述化合物來治療癌癥的方法仍在本發明范圍內。該化合物可習知上每天一次地投與給有需要之個體。術語「治療」是指出于治愈、愈合、緩解、減輕、改變、補救、改善、改良或影響該疾病、癥狀、或誘因的目的施用或投與該化合物給患有癌癥的個體。「有效量」是指對個體產生期望影響所需要的化合物量。如熟習此項技術者所了解，有效量取決于投與途徑、賦形劑用法、及與其他治療劑療法(諸如使用其他活性劑)共使用的可能性而改變。
可藉由本發明方法治療的癌癥包括各種器官的實體及血液腫瘤。實體腫瘤之實例是胰腺癌；膀胱癌；結腸直腸癌；乳癌，包括轉移性乳癌；前列腺癌，包括雄激素依賴性及雄激素非依賴性前列腺癌；腎癌，包括轉移性腎細胞癌癥；肝細胞癌；肺癌，包括非小型細胞肺癌(nsclc)、細支氣管肺泡癌(bac)、及肺腺癌；卵巢癌，包括進行性上皮細胞或原發性腹膜癌；宮頸癌；胃癌；食道癌；頭頸癌，包括頭及頸部鱗細胞癌；黑色素瘤；神經內分泌癌，包括轉移性神經內分泌腫瘤；腦腫瘤，包括膠質瘤、間變少突膠質瘤、成人膠質母細胞紅斑、及成人間變星狀膠質細胞瘤；骨癌；及軟組織肉瘤。血液惡性腫瘤的實例是急性骨髓白血病；慢性髓細胞性白血病(cml)，包括加速cml及cml胚細胞相；急性淋巴母細胞白血病；慢性淋巴母細胞白血病；霍奇金氏(hodgkin)病；非霍奇金氏淋巴瘤，包括卵泡淋巴瘤及大腦皮質細胞淋巴瘤；b細胞淋巴瘤；t細胞淋巴瘤；多發性骨髓瘤；瓦爾登斯特倫氏(waldenstrom)巨球蛋白血癥；骨髓增生異常癥候群，包括難治型貧血、環形鐵粒幼紅細胞性難治性貧血、母細胞過多性難治性貧血(raeb)、及轉化中raeb；及骨髓增生癥候群。
為實踐本發明的方法，上述醫藥組合物可藉由吸入噴霧、經局部、經直腸、經鼻、經頰、經陰道、或經由植入儲液器以經口、非經腸方式投與。本文使用的術語「非經腸」包括皮下、皮內、靜脈內、肌肉內、肋內、動脈內、腔內、胸骨內、鞘內、病灶內、顱內注射或輸注技術。
經口投與的組合物可呈包括膠囊、錠劑、乳液、水性懸浮液、分散液、及溶液的各種經口可接受劑量形式。在錠劑情況下，通常使用的載劑包括乳糖及玉米淀粉。亦通常添加潤滑劑，諸如硬脂酸鎂。對于呈膠囊形式的經口投與，可用稀釋劑包括乳糖及干燥玉米淀粉。當水性乳液或懸浮液是經口投與時，可將該活性成分懸浮或溶于與乳化劑或懸浮劑組合的油相中。若需要，可添加某些甜味劑、香料、或著色劑。經口固體劑型可藉由非晶型噴霧干燥技術、熱熔擠出策略、微粒化、及奈米研磨技術來制備。
一種吸入組合物或經鼻氣溶膠可根據醫藥調配技術中熟知的技術來制備。其通常制成含于鹽水中的溶液，采用芐醇或其他適宜防腐劑、吸收促進劑、氟碳、及/或其他增溶劑或分散劑。
一種具有活性化合物的組合物亦可呈用于直腸投與的栓劑的形式投與。
醫藥組合物中的載劑必須是在以下意義上「可接受」：其與該組合物的活性成分相容(較佳地，能使該活性成分穩定)及對于待治療的個體沒有不利影響。一或多種增溶劑可用作遞送活性化合物的醫藥賦形劑。其他載劑的實例包括膠態二氧化硅、硬脂酸鎂、纖維素、月桂基硫酸鈉及d&cyellow#10。
本發明的化合物可與一或多種治療癌癥的其他活性劑一起使用。由此，本發明亦關于一種藉由投與給有需要的個體有效量的本發明化合物及有效量的一或多種其他活性劑來治療癌癥的方法。活性劑包括但不限于，免疫調節劑，諸如干擾素α、β及γ；抗病毒劑，諸如病毒唑及金剛胺；吲哚胺2，3-二加氧酶及/或色胺酸2，3-二加氧酶抑制劑；及在hdac相關聯條件中其他目標的抑制劑。此活性劑及本發明化合物可在兩個分開時間或同時但以兩種劑型施用給個體。或者，其可在如上文描述用作單一劑型的組合物中組合。
本發明的一或多個實施例的細節在下文描述中闡明。本發明的其他特征、目標及優點在該描述及專利申請范圍中顯而易見。
具體實施方式
下文表1中顯示本發明的實例化合物：
表1：實例化合物
本發明的化合物可藉由在此項技術中熟知的合成方法來制備。參見r.larock，comprehensiveqrganictransformations(第二版，vch出版商1999)；p.g.m.wuts及t.w.greene，greene′sprotectivegroupsinorganicsynthesis(第四版，johnwileyandsons2007)；l.fieser及m.fieser，fieserandfieser′sreagentsfororganicsynthesis(johnwileyandsons1994)；及l.paquette編輯，encyclopediaofreagentsfororganicsynthesis(第二版，johnwileyandsons2009)及其隨后版本。可用于合成本發明化合物的具體途徑可在vinodkumar等人，j.polym.sci.a.2008，14，37-49；及varasi等人，j.med.chem.2011，54，3051-64中發現。
下文反應圖1描繪可根據其來合成本發明化合物1至8的途徑。注意在反應圖1及下文反應圖中het是指在化合物25至32各者中的雜環。
反應圖1.化合物1至8的合成途徑
在上文反應圖中，試劑及條件如下：(a)3-溴代苯磺酰氯、koh、硫酸氫四丁銨(tbahs)、ch2cl2、室溫(rt)，產率56％至93％；(b)nahco3、pph3、pd(oac)2、丙烯酸第三丁酯、三乙胺(tea)、二甲基甲酰胺(dmf)，80℃，產率37％至89％；(c)三氟乙酸(tfa)，rt，產率97％至54％；及(d)i.六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯啶鏻(pybop)，et3n，鄰(四氫-2h-哌喃-2-基)羥胺(nh2othp)、dmf，rt；ii.5％tfa、meoh，rt，產率10％至33％。
化合物1至8的合成及其分析數據如下顯示。
(e)-3-(3-(1h-吲哚-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(1)
可依與描述用于制備3的方式相似的方式由化合物35a以5％總產率獲得標題化合物，均在下文顯示。熔點(mp)＝188至191℃。1hnmr(500mhz，cd3od及dmso)：δ6.66(d，j＝15.0hz，1h)、6.85(s，1h)、7.29(t，j＝7.0hz，1h)、7.39(t，j＝8.0hz，2h)、7.57至7.63(m，2h)，7.78至7.81(m，2h)、7.91(t，j＝7.5hz，1h)、8.04(d，j＝8.0hz，1h)、8.10(s，1h)。ms(ei)m/z：341.0(m+，1.2％)，344.0(100％)。c17h14o4n2s(m+)的hrms(ei)：計算值342.3691；實測值342.0676。
(e)-n-羥基-3-(3-(吲哚啉-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(2)
可依與下文顯示描述用于制備3的方式相似的方式由化合物35b以1.04％總產率獲得標題化合物。mp＝207至209℃。1hnmr(500mhz，cd3od)：δ2.65(t，j＝8.0)、3.70(td，j＝5.0、8.5，2h)、6.35(d，j＝1.65，1h)、6.75(d，j＝5.5hz，1h)、6.85(d，j＝7.0hz，1h)、6.97(d，j＝7.0hz，1h)、7.29(t，j＝8.0hz，1h)、7.36(t，j＝8.0hz，1h)、7.40(d，j＝16.0hz，1h)、7.50(t，j＝8.0hz，1h)、7.57(t，j＝8.0hz，1h)、7.69(d，j＝11.0hz，1h)。ms(ei)m/z：343.0(m+，0.16％)，116(100％)。c17h16o4n2s(m+)的hrma(ei)：計算值344.3849；實測值344.0834。
(e)-3-(3-(1h-吲唑-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(3)
將含于無水ch2cl2(30ml)中的吲唑(500mg，4.23mmol)、氫氧化鉀(470mg，8.46mmol)及硫酸氫四丁銨(220mg，0.63mmol)的混合物利用氮氣攪拌30分鐘。過濾該混合物及使用水(30ml)及ch2cl2(30mlx3)萃取濾液。收集有機層及經無水mgso4干燥。在經由過濾移除mgso4之后，在真空中濃縮該濾液以產生油狀產物。藉由急驟管柱經硅膠(3∶1etoac/正己烷；rf＝0.28)來純化殘留物以獲得1270mg(89％)呈白色固體的33c：1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.32(t，j＝8.0hz，1h)、7.36(t，j＝8.0hz，1h)、7.59(td，j＝1.5、8.5hz，1h)、7.68(d，j＝8.0hz，1h)、7.71(d，j＝8.0hz，1h)、7.91(d，j＝8.0hz，1h)、8.13(t，j＝2.0hz，1h)、8.19(d，j＝8.5hz，1h)、8.22(s，1h)。
將化合物33c(1250mg，3.71mmol)、丙烯酸第三丁酯(0.60ml，4.45mmol)、三乙胺(tea；0.75ml，6.32mmol)、三苯基膦(tpp；480mg，1.86mmol)、乙酸鈀(410mg，1.86mmol)、及碳酸氫鈉(310mg，3.70mmol)的混合物在dmf(2ml)中加熱至80℃持續5小時。隨后使用水中止此反應及使用ch2cl2(3x30ml)萃取。收集有機層及經無水mgso4干燥。在經由過濾移除mgso4之后，在真空中濃縮該濾液。藉由急驟管柱經硅膠(3∶1etoac/正己烷；rf＝0.28)來純化殘留物以獲得1180mg(81％)呈固體的34c：1hnmr(500mhz，cdcl3)δ1.51(s，9h)、6.38(dd，j＝6.0、16.5hz，1h)、7.35(t，j＝7.5hz，1h)、7.48(d，j＝16.0hz，1h)、7.55(d，j＝8.0hz，2h)、7.58(td，j＝1.0、7.0hz，1h)、7.70(d，j＝8.0hz，1h)、7.98(d，j＝2.0hz，2h)、8.20(s，1h)、8.22(d，j＝8.5hz，1h)。
向化合物34c(1030mg，2.60mmol)固體及三氟乙酸(8.60ml，0.13mmol)及攪拌30分鐘，接著添加水(20ml)以產生白色固體。藉由過濾收集所得固體及藉由乙醇再結晶純化以獲得450mg(53％)呈粉色固體的35c：1hnmr(500mhz，cd3od及cdcl3)δ6.07(d，j＝16.0hz，1h)、6.97(t，j＝7.5hz，1h)、7.11(t，j＝8.0hz，1h)、7.19(d，j＝7.0hz，1h)、7.22(d，j＝7.5hz，1h)、7.36(dd，j＝8.0、13.5hz，2h)、7.52(d，j＝8.0hz，1h)、7.69(s，1h)、7.78(d，j＝8.5hz，1h)、7.89(s，1h)。
將化合物35c(420mg，1.28mmol)、pybop(770mg，1.52mmol)、dmf(1ml)、nh2othp(150mg，1.29mmol)及tea(1ml，3.52mmol)的混合物在氮氣中攪拌5小時。過濾該混合物及使用水(30ml)及ch2cl2(3x30ml)萃取濾液。收集有機層及經無水mgso4干燥。在經由過濾移除mgso4之后，在真空中濃縮濾液以產生油狀產物。藉由急驟管柱經硅膠(1∶2etoac/正己烷；rf＝0.39)來純化殘留物以產生白色固體。隨后向固體添加5％三氟乙酸(60ml)及甲醇(3ml)，隨后攪拌30分鐘。在真空中濃縮此反應及過濾以產生白色產物。藉由水/ch2cl2清洗該混合物以獲得80mg(18％)呈紫色固體的3：mp＝166至168℃；1hnmr(500mhz，cd3od及dmso)δ6.52(d，j＝16.0hz，1h)、7.39(t，j＝7.5hz，1h)、7.51至7.54(m，2h)、7.64(t，j＝8.0hz，1h)、7.79(d，j＝8.0hz，2h)、7.90(d，j＝8.0hz，1h)、8.11(s，1h)、8.21(d，j＝8.5hz，1h)、8.35(s，1h)；c16h13o4n3s(m-h)的hrms(esi)計算值343.0627，實測值342.0541。
(e)-3-(3-((7h-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(4)
可依與上文描述用于制備3的方式相似的方式由化合物35d以59.88％總產率獲得標題化合物：1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ6.62(d，j＝15.5hz，1h)、6.96(d，j＝4.0hz，1h)、7.51(d，j＝15.5hz，1h)、7.67(t，j＝8.0hz，1h)、7.92(d，j＝7.5hz，1h)，8.00(d，j＝4.0hz，1h)、8.10(d，j＝8.0hz，1h)、8.37(s，1h)、9.00(s，1h)、9.12(s，1h)。
(e)-3-(3-(1h-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(5)
可依與描述用于制備3的方式相似的方式由化合物35e以17％總產率獲得標題化合物：mp＝148至150℃。1hnmr(500mhz，cd3od)：δ6.58(d，j＝16.0hz，1h)、7.04(d，j＝4.0hz，1h)、7.59(d，j＝15.5hz，1h)、7.63(t，j＝8.0hz，1h)、7.69(dd，j＝5.5、8.5hz，1h)、7.91(d，j＝7.5hz，1h)、8.06(d，j＝7.5hz，1h)、8.24(s，1h)、8.37(d，j＝4hz，1h)、8.64(d，j＝5.0hz，1h)、8.86(d，j＝8.5hz，1h)。
(e)-3-(3-(1h-吡咯并[2，3-c]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(6)
可依與描述用于制備3的方式相似的方式由化合物35f以33％總產率獲得標題化合物：mp＝128至129℃；1hnmr(500mhz，cd3od)δ6.58(d，j＝17.0hz，1h)、7.19(d，j＝3.5hz，1h)、7.59(d，j＝15.5hz，1h)、7.65(t，j＝8.0hz，1h)、7.95(d，j＝7.5hz，1h)、8.13(d，j＝8.0hz，1h)、8.18(d，j＝6.0hz，1h)、8.30(s，1h)、8.49(d，j＝6.5hz，1h)、8.54(d，j＝3.5hz，1h)、9.56(s，1h)；ms(ei)m/z：342.0(m+，3.57％)，118(100％)；c16h13o4n3s(m+)的hrms(ei)計算值343.0627；實測值343.0629。
(e)-3-(3-(1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(7)
可依與描述用于制備3的方式相似的方式從化合物35g以20％總產率獲得標題化合物：mp＝188至191℃；1hnmr(500mhz，cd3od)δ6.55(d，j＝15.5hz，1h)、6.74(d，j＝4.0hz，1h)、7.25(dd，j＝5.0、7.5hz，1h)、7.54(m，1h)、7.57(d，j＝4.0hz，1h)、7.78(d，j＝8.0hz，1h)、7.82(d，j＝4.0hz，1h)、7.97(dd，j＝1.5、7.5hz，1h)、8.06(d，j＝7.5hz，1h)、8.33(dd，j＝1.5、4.5hz，1h)、8.36(s，1h)；ms(ei)m/z：342.0(m+，2.20％)，118(100％)；c16h13o4n3s(m+)的hrms(ei)：計算值343.0627；實測值343.0626。
(e)-3-(3-(2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(8)
可依與描述用于制備3的方式相似的方式由化合物35h以10％總產率獲得標題化合物：mp＝228至230℃；1hnmr(500mhz，cd30d及cdcl3)δ3.04(t，j＝8.0hz，2h)、4.04(t，j＝8.0hz，2h)、6.50(dd，j＝5.0、8.0hz，1h)、7.45(d，j＝7.5hz，1h)、7.51(d，j＝7.5hz，1h)、7.55(d，j＝16.0hz，1h)、7.72(d，j＝7.0hz，1h)、7.97(d，j＝8.0hz，1h)、8.00(d，j＝8.0hz，1h)、8.05(d，j＝4.5hz，1h)、8.21(s，1h)；ms(ei)m/z：347.0(m+，0.90)，116(100％)；c16h15o4n3s(m+)的hrms(ei)：計算值345.3730；實測值345.0783。
下文反應圖2顯示制備本發明化合物9至13的合成途徑。
在此反應圖中，試劑及條件是如下：(a)4-溴代苯磺酰氯、koh、tbahs、ch2cl2、rt，88％至93％；(b)nahco3、pph3、pd(oac)2、丙烯酸第三丁酯、net3、dmf、80℃，35％至83％；(c)tea、rt，97％至53％；及(d)i.pybop、et3n、nh2othp、dmf，rt；ii.5％tfa、meoh、rt，9％至44％。
制備化合物9至13是在下文詳細描述。
反應圖2.合成化合物9至13
(e)-3-(4-(1h-吲唑-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(9)
向含于無水ch2cl2(30ml)中的吲唑(500mg，4.23mmol)、氫氧化鉀(470mg，8.46mmol)、及硫酸氫四丁銨(220mg，0.63mmol)的混合物添加4-溴代苯磺酰氯(1300mg，5.10mmol)及添加之后攪拌過夜。過濾該混合物及添加水接著使用ch2cl2(3x30ml)萃取。收集有機層及經無水mgso4干燥及在真空中濃縮以產生油狀產物。藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝3∶1；rf＝0.30)來純化殘留物以獲得1250mg(產率88％)呈固體的36a：1hnmr(500mhz，cdcl3)δ7.11(td，j＝2.5、8.5hz，1h)、7.31(dd，j＝2.0、7.5hz，1h)、7.64(dd，j＝9.0、16.0hz，2h)、7.68(d，j＝9.0hz，2h)、7.96(dd，j＝1.5、7.0hz，2h)、8.62(s，1h)。
將36a(1270mg，3.78mmol)、丙烯酸第三丁酯(0.60ml，4.54mmol)、三乙胺(0.75ml，6.45mmol)、三苯基膦(490mg，1.90mmol)、乙酸鈀(420mg，1.90mmol)、及碳酸氫鈉(320mg，3.78mmol)的混合物在dmf(2ml)中加熱至80℃持續5小時。隨后過濾該混合物及使用水(30ml)及ch2cl2(3x30ml)萃取濾液。收集有機層及經無水mgso4干燥。在經由過濾移除mgso4之后，在真空中濃縮濾液以產生油狀產物，藉由急驟管柱經硅膠(1∶10etoac/正己烷)來純化該油狀產物以獲得680mg(47％)呈黃色固體的37a：1hnmr(500mhz，cdcl3)δ1.57(s，9h)、6.38(d，j＝16.0hz，1h)、7.46(t，j＝7.5hz，1h)、7.50至7.59(m，3h)、7.70(dd，j＝3.5、8.5hz，1h)、7.98(dd，j＝9.0、17.0hz，2h)、8.19至8.23(m，2h)。
向化合物37a(560mg，1.46mmol)固體添加三氟乙酸(4.80ml，0.07mmol)及攪拌30分鐘接著添加水(20ml)以產生白色固體。藉由過濾收集所得固體及藉由甲醇再結晶來純化以獲得410mg(86％)呈白色固體的38a：1hnmr(500mhz，cd3od)δ6.44(d，j＝16.0hz，1h)、7.35(t，j＝8.0hz，1h)、7.53至7.62(m，4h)、7.71(d，j＝8.0hz，1h)、7.94(d，j＝8.0hz，2h)、8.16(d，j＝8.5hz，1h)、8.23(s，1h)。
將化合物38a(640mg，1.96mmol)、pybop(1170mg，2.31mmol)、dmf(1ml)、nh2othp(230mg，1.96mmol)、及三乙胺(1ml，5.35mmol)的混合物在氮氣下攪拌5小時，隨后過濾，及使用水(30ml)及ch2cl2(30mlx3)萃取該濾液。收集有機層及經無水mgso4干燥。在經由過濾移除mgso4之后，在真空中濃縮該濾液以產生油狀殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2；rf＝0.40)來純化該殘留物以產生白色固體。隨后向固體添加5％三氟乙酸(60ml)及甲醇(3ml)，隨后攪拌30分鐘。在真空中濃縮此反應混合物及過濾以產生白色產物，其經水/ch2cl2清洗以獲得110mg(16％)呈紫色固體的9：mp＝140至142℃；1hnmr(500mhz，cd3od及dmso)δ6.53(d，j＝16.0hz，1h)、7.39(t，j＝7.5hz，1h)、7.52(d，j＝16.0hz，1h)、7.63(t，j＝8.0hz，1h)、7.67(d，j＝8.0hz，2h)、7.79(d，j＝8.0hz，1h)、7.94(d，j＝8.5hz，2h)、8.20(d，j＝9.0hz，1h)、8.34(s，1h)；c16h13o4n3s(m+)的hrms(ei)計算值343.0627，實測值343.0627。
(e)-3-(4-(1h-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(10)
可依與上文描述用于制備9的方式相似的方式由化合物38b以44％總產率獲得標題化合物：mp＝118至190℃。1hnmr(500mhz，cd3od)：δ6.57(d，j＝16.0hz，1h)、7.01(d，j＝3.5hz，1h)、7.54(d，j＝15.5hz，1h)、7.63(dd，j＝5.5、8.5hz，1h)、7.74(d，j＝8.5hz，2h)、8.07(d，j＝8.5hz，2h)、8.28(d，j＝4.0hz，1h)、8.61(d，j＝5.0hz，1h)、8.76(d，j＝8.5hz，1h)。
(e)-3-(4-(1h-吡咯并[2，3-c]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(11)
可依與描述用于制備9的方式相似的方式由化合物38c以22％總產率獲得標題化合物：mp＝167至169℃；1hnmr(500mhz，cd3od)δ6.53(d，j＝16.0hz，1h)、7.15(d，j＝3.5hz，1h)、7.54(d，j＝15.5hz，1h)、7.76(d，j＝8.5hz，2h)、8.12(d，j＝6.5hz，1h)、8.14(d，j＝8.5hz，2h)、8.46(t，j＝3.5hz，1h)、8.48(s，1h)、9.51(s，1h)；c16h13o4n3s(m-h)的hrms(esi)計算值343.0627，實測值342.0542。
(e)-3-(4-(1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(12)
可依與描述用于制備9的方式相似的方式由化合物38d以9％總產率獲得標題化合物：mp＝169至170℃；1hnmr(500mhz，cd3od)δ6.54(d，j＝16.0hz，1h)、6.74(d，j＝3.5hz，1h)、7.25(dd，j＝5.0、9.0hz，1h)、7.53(d，j＝16.0hz，1h)、7.68(d，j＝8.5hz，2h)、7.81(d，j＝4.0hz，1h)、8.97(dd，j＝1.5、8.0hz，1h)、8.11(d，j＝8.5hz，2h)、8.31(dd，j＝1.0、4.5hz，1h)；c16h13o4n3s(m+)的hrms(ei)計算值343.3571，實測值343.0627。
(e)-3-(4-(2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-n-羥基丙烯酰胺(13)
可依與描述用于制備9的方式相似的方式由化合物38e以28％總產率獲得標題化合物：mp＝220至223℃：1hnmr(500mhz，cd3od及dmso)δ3.04(t，j＝8.0hz，2h)、4.04(t，j＝8.0hz，2h)、6.54(d，j＝16.0hz，1h)、6.51(dd，j＝5.0、7.5hz，1h)、7.49(d，j＝9.0hz，1h)、7.53至7.58(m，2h)、7.77(d，j＝8.0hz，1h)、7.98(d，j＝7.5hz，1h)、8.04(d，j＝5.0hz，1h)、8.23(s，1h)；c16h13o4n3s(m+)的hrms(ei)計算值345.3571，實測值345.0783.
下文在反應圖3中顯示制備本發明的化合物14至21的合成途徑。
試劑及條件如下：(a)i.4-氯代甲基苯甲酸甲酯、nah、dmf，rt；ii.1nkoh、meoh，回流；及(b)鄰苯二胺、n-(3-二甲胺基丙基)-n′-乙基碳二酰亞胺鹽酸鹽(edc)、羥基苯并三唑(hobt)、tea、dmf，rt。
反應圖3.化合物14至21的合成
化合物14至21的制法在下文詳細描述。
4-((1h-吲哚-1-基)甲基)-n(2-胺基苯基)苯甲酰胺(14)
將含于無水ch2cl2(30ml)中的吲哚(500mg，4.27mmol)、氫氧化鉀(480mg，8.54mmol)、及nh2othf(220mg，0.643mmol)的混合物于氮氣氛圍下攪拌30分鐘，其后添加4-(氯甲基)苯甲酸甲酯(950mg，5.12mmol)。攪拌混合物過夜及過濾。添加水至該濾液接著使用ch2cl2(30mlx3)萃取。收集有機層及經無水mgso4干燥及在真空中濃縮以產生油狀產物。向所得殘留物添加氫氧化鋰(210mg，8.58mmol)及隨后在含有meoh(7.6ml)及水(7.6ml)的溶劑中加熱至100℃持續2h。過濾該混合物及添加水接著使用ch2cl2(30mlx3)萃取。收集有機層及經無水mgso4干燥及在真空中濃縮以產生油狀產物，使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1；rf＝0.325)來純化該油狀產物以產生呈固體的40a(570mg，79％)。1hnmr(500mhz，cd3od)：δ5.40(s，2h)、6.59(d，j＝3.0hz，1h)、7.11至7.25(m，6h)、7.67(d，j＝8.0hz，1h)、8.02(d，j＝8.5hz，2h)。
向含于干燥dmf(2ml)中的化合物40a(570mg，2.27mmol)的混合物添加4-甲基嗎啉(0.5ml，7.95mmol)，經氮氣攪拌30分鐘。向該反應混合物添加hobt(460mg，3.41mmol)及edc(650mg，3.41mmol)及鄰苯二胺(270mg，2.50mmol)及攪拌5小時，其隨后經過濾。向濾液添加水，接著使用ch2cl2(30mlx3)萃取。收集有機層及經無水mgso4干燥及在真空中濃縮以產生油狀產物，使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1；rf＝0.22)來純化及使用乙酸乙酯/丙酮再結晶該油狀產物以產生呈固體的14(240mg，31％)。mp＝207至210℃。1hnmr(500mhz，cd3od)：δ5.48(s，2h)、6.51(d，j＝3.0hz，1h)、6.73(t，j＝8.0hz，1h)、6.86(dd，j＝1.0、8.0hz，1h)、6.99至7.09(m，3h)、7.14(d，j＝8.0hz，1h)、7.22(d，j＝8.5hz，2h)、7.26(d，j＝8.0hz，1h)、7.29(d，j＝3.5hz，1h)、7.55(d，j＝7.5hz，1h)、7.87(d，j＝8.5hz，2h)。ms(ei)m/z：341.0(m+，39.63％)，57(100％)。c21h18on4(m+)的hrms(ei)：計算值341.4058；實測值341.1529。
n-(2-胺基苯基)-4-(吲哚啉-1-基甲基)苯甲酰胺(15)
可依與描述用于制備14的方式相似的方式由化合物40b以31％總產率獲得標題化合物：1hnmr(500mhz，cd3od)：δ2.99(t，j＝8.5hz，2h)、3.37(t，j＝8.5hz，2h)、4.38(s，2h)、6.57(d，j＝8.0hz，1h)、6.66(t，j＝7.5hz，1h)、6.76(t，j＝7.5hz，1h)、6.90(d，j＝7.5hz，1h)、7.03(t，j＝7.5hz，1h)、7.07至7.10(m，2h)、7.23(d，j＝7.0hz，1h)、7.56(d，j＝8.5hz，2h)、8.00(d，j＝8.0hz，2h)。ms(ei)m/z：343.0(m+，100％)。c22h21on3(m+)的hrms(ei)：計算值343.4216；實測值343.1683。
4-((1h-吲唑-1-基)甲基)-n-(2-胺基苯基)苯甲酰胺(16)
可依與描述用于制備14的方式相似的方式由化合物40c以30％總產率獲得標題化合物：mp＝185至188℃。1hnmr(500mhz，cdcl3及cd3od)：δ5.46(s，2h)、6.58(t，j＝8.0hz，1h)、6.64(d，j＝8.0hz，1h)、6.86(t，j＝8.0hz，1h)、6.94至6.98(m，2h)、7.04(d，j＝8.0hz，2h)、7.17(d，j＝5.5hz，2h)、7.55(d，j＝8.0hz，1h)、7.67(d，j＝8.0hz，2h)、7.84(s，1h)。ms(ei)m/z：342.0(m+，32.79％)，235(100％)。ms(ei)m/z：342.0(m+，32.79％)，235(100％)。c21h18on4(m+)的hrms(ei)：計算值342.3938；實測值342.1478。
4-((1h-吡咯并[3，2-b]吡啶-1-基)甲基)-n-(2-胺基苯基)-苯甲酰胺(17)
可依與描述用于制備14的方式相似的方式由化合物45d以23％總產率獲得標題化合物：mp＝116至118℃。1hnmr(500mhz，cdcl3及cd3od)：δ5.26(s，2h)、6.53(d，j＝3.5hz，1h)、6.62(t，j＝8.0hz，1h)、6.67(d，j＝8.0hz，1h)、6.89(t，j＝8.0hz，1h)、6.53(dd，j＝5.0、8.5hz，1h)、7.01(d，j＝7.0hz，1h)、7.02(d，j＝8.0hz，2h)、7.31(d，j＝3.5hz，1h)、7.44(d，j＝8.5hz，1h)、7.72(d，j＝8.0hz，2h)、8.15(d，j＝4.5hz，1h)。ms(ei)m/z：342.0(m+，89.71％)，208(100％)。c21h18on4(m+)的hrms(ei)：計算值342.3938；實測值342.1483。
4-((1h-吡咯并[3，2-c]吡啶-1-基)甲基)-n-(2-胺基苯基)苯甲酰胺(18)
可依與描述用于制備14的方式相似的方式由化合物40e以32％總產率獲得標題化合物：mp＝165至167℃。1hnmr(500mhz，cd3od)：δ5.59(s，2h)、6.76(t，j＝7.5hz，1h)、6.81(d，j＝3.5hz，1h)、6.89(d，j＝8.0hz，1h)、7.07(t，7.0hz，1h)、7.16(d，j＝7.5hz，1h)、7.31(d，j＝8.0hz，2h)、7.51(d，j＝6.0hz，1h)、7.55(d，j＝3.0hz，1h)、7.93(d，j＝8.0hz，2h)、8.17(d，j＝6.0hz，1h)、8.86(s，1h)。ms(ei)m/z：342.0(m+，21.0％)，207(100％)。c21h18on4(m+)的hrms(ei)：計算值342.3938；實測值342.1479。
4-((1h-吡咯并[2，3-c]吡啶-1-基)甲基)-n-(2-胺基苯基)-苯甲酰胺(19)
可依與描述用于制備14的方式相似的方式由化合物40f以27％總產率獲得標題化合物：mp＝154至155℃。1hnmr(500mhz，cd3od)：δ5.64(s，2h)、6.65(d，j＝3.0hz，1h)、6.74(t，j＝7.5hz，1h)、6.87(d，j＝8.5hz，1h)、7.05(t，j＝8.0hz，1h)、7.15(d，j＝8.0hz，1h)、7.31(d，j＝8.0hz，2h)、7.63(d，j＝5.5hz，1h)、7.67(d，j＝3.0hz，1h)、7.92(d，j＝8.0hz，2h)、8.08(d，j＝4.0hz，1h)、8.66(s，1h)。ms(ei)m/z：342.0(m+，21.11％)，207(100％)。c21h18on4(m+)的hrms(ei)：計算值342.3938；實測值342.1480。
4-((1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基)甲基)-n-(2-胺基苯基)苯甲酰胺(20)
可依與描述用于制備14的方式相似的方式由化合物40g以37％總產率獲得標題化合物：mp＝158至159℃。1hnmr(500mhz，cdcl3及cd3od)：δ5.29(s，2h)、6.28(d，j＝3.5hz，1h)、6.51(t，j＝7.5hz，1h)、6.58(d，j＝3.0hz，1h)、6.78(t，j＝6.5hz，1h)、6.85(dd，j＝5.0、8.0hz，1h)、6.91(d，j＝8.0hz，1h)、6.98(d，j＝8.0hz，2h)、7.00(d，j＝3.5hz，1h)、7.61(d，j＝8.0hz，2h)、7.72(dd，1.5、8.0hz，1h)、7.97(d，j＝3.5hz，1h)。ms(ei)m/z：342.0(m+，72.6％)，147(100％)。
n-(2-胺基苯基)-4-((2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基)甲基)苯甲酰胺(21)
可依與描述用于制備14的方式相似的方式由化合物40h以49％總產率獲得標題化合物：mp＝105至107℃。1hnmr(500mhz，cd3od及dmso)：δ2.99(t，j＝8.5hz，2h)、3.42(t，j＝8.5hz，2h)、4.17(s，2h)、4.63(s，2h)、6.47(dd，j＝5.5、6.5hz，1h)、6.77(dd，j＝5.0，6.5hz，1h)、6.82(d，j＝8.0hz，1h)、7.05(t，j＝7.5hz，1h)、7.22(d，j＝7.0hz，1h)、7.31(d，j＝7.5hz，1h)、7.43(d，j＝8.0hz，2h)、7.86(d，j＝5.0hz，1h)、7.97(d，j＝8.0hz，2h)、9.21(s，1h)。ms(ei)m/z：344.0(m+，51.03％)，237(100％)。c21h20on4(m+)的hrms(ei)：計算值344.4097；實測值344.1636。
下文在反應圖4中顯示制備本發明的化合物22至24的合成途徑。
反應圖4.合成化合物22至24
試劑及條件如下：(a)i.3-氯代磺酰基苯甲酸甲酯、nah、dmf，rt；ii.1nkoh、meoh，回流；(b)鄰苯二胺、edc、hobt、tea、dmf，rt；及(c)i.鄰苯羥胺、edc、hobt、tea、dmf，rt；ii.pd/c、h2、meoh，rt。
化合物22至24的制法在下文詳細描述。
n-(2-胺基苯基)-4-(吲哚啉-1-基磺酰基)苯甲酰胺(22)
向3-(氯代磺酰基)苯甲酸(220mg，1.01mmol)、水(30ml)及吲哚啉(120mg，1.01mmol)的混合物添加nahco3以將混合物ph調整至8。在攪拌2小時后，在該混合物中添加hcl直至ph＝3，隨后在真空中濃縮，及過濾以產生白色產物，藉由在乙醇中再結晶來純化該白色產物以產生呈白色固體的41(100mg，33％)。1hnmr(500mhz，cd3od)：δ2.92(t，j＝8.0hz，2h)、3.98(t，j＝8.0hz，2h)、7.00(t，j＝7.4hz，1h)、7.09(d，j＝7.4hz，1h)、7.23(t，j＝7.8hz，1h)、7.57(t，j＝7.8hz，1h)、7.65(t，j＝8.1hz，1h)、8.01(d，j＝7.9hz，1h)、8.27(d，j＝7.8hz，1h)、8.54(s，1h)。
將化合物41(100mg，0.33mmol)添加至含于干燥dmf(1ml)中的4-甲基嗎啉(0.2ml，1.38mmol)溶液，將其在氮氣氛圍下攪拌30分鐘。在所得反應混合物中添加hobt(80mg，0.59mmol)、edc(110mg，0.59mmol)、及鄰苯二胺(50mg，0.43mmol)及攪拌5小時，其后過濾。將水添加至濾液，接著使用ch2cl2(30mlx3)萃取。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生油狀產物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2；rf＝0.19)來純化該油狀產物以產生呈白色固體的22(100mg，77％)。mp＝192至193℃。1hnmr(500mhz，cdcl3及cd3od)：δ2.74(t，j＝8.4hz，2h)、3.81(t，j＝8.4hz，2h)、6.65(t，j＝7.5hz，1h)、6.70(d，j＝8.0hz，1h)、6.82(t，j＝8.0hz，1h)、6.93(d，j＝7.4hz，1h)、6.94(d，j＝7.5hz，1h)、7.02(d，j＝7.5hz，1h)、7.03(d，j＝7.4hz，1h)、7.41(t，j＝8.0hz，1h)、7.44(d，j＝8.0hz，1h)、7.74(d，j＝7.5hz，1h)、8.00(d，j＝8.0hz，1h)、8.24(s，1h)。ms(ei)m/z：393.0(m+，68.13％)，116(100％)。c21h19o3n3s(m+)的hrms(ei)：計算值393.4589；實測值393.1143。
n-羥基-4-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基甲基-苯甲酰胺(23)
將40g(0.51g，4.2mmol)、edc(1.82g，11.7mmol)、hobt(1.68g、12.4mmol)、nmm(1.2ml)、鄰苯羥胺(0.67g，4.2mmol)、及dmf(10ml)的混合物在室溫下攪拌1小時。向該混合物添加水(30ml)，及隨后使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取。收集有機層，干燥，及濃縮以獲得油狀殘留物。將所得殘留物添加至pd/c及meoh(20ml)，在氫氣下于室溫下攪拌其1小時，及隨后過濾。濃縮該濾液及使用管柱層析法純化以產生白色固體(0.44g，39％)。1hnmr(500mhz，cd3od)：δ5.55(s，2h)、6.55(d，j＝3.5hz，1h)、7.11至7.14(m，1h)、7.21(d，j＝8.0hz，2h)、7.40(d，j＝3.5hz，1h)、7.65(d，j＝8.0hz，2h)、8.01(dd，j＝1.0、8.0hz，1h)、8.21(dd，j＝1.0、4.5hz，1h)。
4-(2，3-二氫-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基甲基)-n-羥基-苯甲酰胺(24)
可以用于制備23描述的方式相似的方式由化合物40h以36％總產率獲得標題化合物：1hnmr(500mhz，cd3od)：δ2.99(t，j＝8.5hz，2h)、3.43(t，j＝8.5hz，2h)、4.58(s，2h)、6.50(t，j＝6.5hz，1h)、7.29(t，j＝7.0hz，1h)、7.39(d，j＝8.0hz，2h)、7.70至7.73(m，3h)。
下文反應圖5中顯示制備本發明的化合物2a至2p、3a至3p、4a至4p、及5a至5p的合成途徑。
反應圖5.合成化合物2a至2p、3a至3p、4a至4p及5a至5p
試劑及條件：
(a)br2、吡啶、ch2cl2，0℃
(b)經取代的苯磺酰氯、吡啶，90℃
(c)pd(oac)2、tpp、tea、nahco3、丙烯酸甲酯、dmf，120℃
(d)1mlioh(水溶液)、lioh，40℃
(e)edc·hcl、hobt、nmm、nh2othp、dmf，rt，隨后10％tfa(水溶液)，meoh，rt
本發明的化合物6a、7a、8a、9a及10a可經由在下文反應圖6、7、及8中顯示的合成途徑來制備。
反應圖6
試劑及條件：
(a)edc·hcl、hobt、nmm、鄰苯二胺、dmf，rt
反應圖7
試劑及條件：
(a)10％pd/c、meoh、h2，rt
反應圖8
試劑及條件：
(a)cucn、dmf，150℃
(b)10％koh(水溶液)、meoh，回流
(c)edc·hcl、hobt、nmm、nh2othp、dmf，rt，隨后10％tfa(水溶液)，rt
本發明的化合物11a至11i、12a至12i、13a至13i、及14a至14i可使用在下文反應圖9中顯示的合成途徑來制備。
反應圖9
試劑及條件：
(a)nah、經取代的苯磺酰氯、dmf，rt
(b)pd(oac)2、tpp、tea、nahco3、丙烯酸第三丁酯、dmf，120℃
(c)tfa，rt
(d)edc·hcl、hobt、nmm、nh2othp、dmf，rt，隨后10％tfa(水溶液)，meoh，rt
下文詳細提供本發明的化合物1a、2a至2p、3a至3p、4a至4p、5a至5p、6a、7a、8a、9a、10a、11a至11i、12a至12i、13a至13i、及14a至14i的制法。
5-溴-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(1a)
在7-氮雜吲哚啉(4g，33.29mmol)、吡啶(4ml)、及dcm(40ml)的混合物中使用加料漏斗，于冰浴下在氮氣中添加含于dcm(24ml)中的br2(1.72ml，33.29mmol)及攪拌2小時。隨后使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生深棕色產物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.63)來純化該深棕色產物以產生呈黃色固體的1(4.88g，73.65％)。1hnmr(500mhz，cdcl3)：δ3.06(t，j＝8.5hz，2h)、3.64(t，j＝8.5hz，2h)、7.31(s，1h)、7.85(s，1h)。
5-溴-1-(苯基磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2a)
使1a(0.35g，1.76mmol)、苯磺酰氯(0.34ml，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.73)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2a(0.47g，78.73％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.04(t，j＝8.5hz，2h)、4.08(t，j＝8.5hz，2h)、7.46(s，1h)、7.49(t，j＝8.0hz，2h)、7.58(t，j＝7.5hz，1h)、8.08(t，j＝8.0hz，2h)、8.18(s，1h)。
(e)-3-(1-(苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3a)
將2a(0.47g，1.39mmol)、乙酸鈀(0.03g，0.14mmol)、三苯基膦(0.07g，0.28mmol)、三乙胺(0.19ml，1.39mmol)、碳酸氫鈉(0.23g，2.78mmol)及dmf(3ml)的混合物攪拌10分鐘，及，在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.15ml，1.67mmol)之后，再次攪拌過夜。隨后使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.38)來純化該混合物以產生呈黃色固體的3a(0.38g，79.38％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、3.80(s，3h)、4.12(t，j＝8.5hz，2h)、6.30(d，j＝16.0hz，1h)、7.50(t，j＝8.0hz，2h)、7.56(d，j＝16.0hz，1h)、7.57至7.60(m，2h)、8.12(t，j＝8.0hz，2h)、8.25(s，1h)。
(e)-3-(1-(苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4a)
將3a(0.38g，1.11mmol)、二惡烷(5ml)、及1mlioh水溶液(2.22ml，2.22mmol)的混合物于40℃攪拌過夜，其后移除該溶劑。持續添加水及3nhcl水溶液至所得殘留物，接著過濾。濃縮該濾液以產生呈白色固體的4a(0.36g，98.17％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.08(t，j＝8.5hz，2h)、4.08(t，j＝8.5hz，2h)、6.44(d，j＝16.0hz，1h)、7.50(d，j＝16.0hz，1h)、7.58(t，j＝7.5hz，2h)、7.68(t，j＝7.5hz，1h)、7.94(s，1h)、8.01(d，j＝8.5hz，2h)、8.26(s，1h)。
(e)-n-羥基-3-(1-(苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5a)
將4a(0.30g，0.91mmol)、edc(0.26g，1.37mmol)、hobt(0.15g，1.09mmol)、n-甲基嗎啉(nmm；0.24ml，2.18mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.13g，1.09mmol)之后，及再次攪拌過夜。移除溶劑產生殘留物。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.18)來純化該殘留物以獲得油狀產物。將meoh(5ml)及10％tfa溶液(5ml)添加至該油狀產物，接著于室溫攪拌過夜。隨后添加h2o以沉淀白色產物，藉由過濾收集該白色產物以產生5a(0.28g，89.09％)。m.p.198.1至199.0。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.08(t，j＝8.5hz，2h)、4.06(t，j＝8.5hz，2h)、6.35(d，j＝16.0hz，1h)、7.36(d，j＝16.0hz，1h)、7.58(t，j＝7.5hz，2h)、7.67(t，j＝7.5hz，1h)、7.74(s，1h)、8.00(d，j＝7.5hz，2h)、8.19(s，1h)。
5-溴-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2b)
使1a(0.99g，4.97mmol)、4-甲氧基苯磺酰氯(1.54g，7.4mmol)及吡啶(4ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.60)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2b(0.96g，52.31％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.02(t，j＝8.5hz，2h)、3.84(s，3h)、4.05(t，j＝8.5hz，2h)、6.94(d，j＝9.5hz，2h)、7.45(s，1h)、8.01(d，j＝8.0hz，2h)、8.18(s，1h)。
(e)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3b)
將2b(0.15g，0.41mmol)、乙酸鈀(0.01g，0.04mmol)、三苯基膦(0.03g，0.08mmol)、三乙胺(0.06ml，0.41mmol)、碳酸氫鈉(0.07g，0.82mmol)及dmf(1.5ml)的混合物攪拌10分鐘，及，在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.07ml，0.49mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.25)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的3b(0.10g，58.56％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.52(s，9h)、3.05(t，j＝8.5hz，2h)、3.84(s，3h)、4.08(t，j＝8.5hz，2h)、6.23(d，j＝15.5hz，1h)、6.94(t，j＝9.0hz，2h)、7.46(d，j＝16.0hz，1h)、7.51(s，1h)、8.05(d，j＝9.0hz，2h)、8.22(s，1h)。
(e)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4b)
向3b(1.26g，3.03mmol)的混合物中添加三氟乙酸(10.1ml)。隨后于室溫攪拌該混合物1小時。接著，將水添加至所得反應混合物中以沉淀淺黃色產物4b，藉由過濾收集該產物(0.81g，74.18％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、3.83(s，3h)、4.07(t，j＝8.5hz，2h)、6.42(d，j＝16.0hz，1h)、7.05(d，j＝9.0hz，2h)、7.58(d，j＝16.0hz，1h)、7.86(s，1h)、7.97(d，j＝9.0hz，2h)、8.16(s，1h)。
(e)-n-羥基-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5b)
將4b(0.80g，2.22mmol)、edc(0.64g，3.33mmol)、hobt(0.36g，2.66mmol)、nmm(0.59ml，5.33mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及，在添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.31g，2.66mmol)之后，于室溫再次攪拌過夜。移除溶劑獲得殘留物。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.18)來純化該殘留物以獲得油狀產物。添加meoh(3.5ml)及10％tfa(水溶液)(3.5ml)之后，于室溫攪拌其16小時。添加水來沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生5b(0.45g，88.79％)。m.p.201.6至202.6。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.06(t，j＝8.5hz，2h)、3.80(s，3h)、4.01(t，j＝8.5hz，2h)、6.34(d，j＝16.0hz，1h)、7.08(d，j＝9.0hz，2h)、7.38(d，j＝16.0hz，1h)、7.72(s，1h)、7.93(t，j＝9.0hz，2h)、8.19(s，1h)、8.99(br，1h)、10.70(s，1h)。
5-溴-1-(3-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2c)
使1a(0.35g，1.76mmol)、3-甲氧基苯磺酰氯(0.37ml、2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.73)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2c(0.56g，86.17％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.04(t，j＝8.5hz，2h)、3.84(s，3h)、4.07(t，j＝8.5hz，2h)、7.11(dd，j＝2.5、9.0hz，1h)、7.38(t，j＝8.0hz，1h)、7.46(s，1h)、7.62(dd，j＝1.5、8.0hz，1h)、7.65(s，1h)、8.19(s，1h)。
(e)-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3c)
將2c(0.56g，1.52mmol)、乙酸鈀(0.03g，0.15mmol)、三苯基膦(0.08g，0.30mmol)、三乙胺(0.21ml，1.52mmol)、碳酸氫鈉(0.26g，3.04mmol)及dmf(2.5ml)的混合物攪拌10分鐘。隨后于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.27ml，1.82mmol)。在攪拌過夜之后移除該溶劑以獲得殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.75)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的3c(0.61g，96.36％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.52(s，9h)、3.06(t，j＝8.5hz，2h)、3.83(s，3h)、4.09(t，j＝8.5hz，2h)、6.23(d，j＝16.0hz，1h)、7.10(d，j＝8.0hz，1h)、7.38(t，j＝8.0hz，1h)、7.46(d，j＝16.0hz，1h)、7.53(s，1h)、7.64(d，j＝8.0hz，1h)、7.69(s，1h)、8.24(s，1h)。
(e)-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4c)
將3c(0.62g，1.49mmol)及三氟乙酸(5.0ml)的混合物于室溫攪拌1小時。隨后添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生呈黃色固體的4c(0.52g，96.84％)。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、3.82(s，3h)、4.08(t，j＝8.5hz，2h)、6.42(d，j＝16.0hz，1h)、7.18(dd，j＝2.0、8.5hz，1h)、7.44(t，j＝8.5hz，2h)、7.57至7.61(m，3h)、7.83(s，1h)、8.19(s，1h)。
(e)-n-羥基-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5c)
將4c(0.40g，1.11mmol)、edc(0.32g，1.67mmol)、hobt(0.18g，1.33mmol)、nmm(0.29ml，2.66mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.16g，1.34mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.33)來純化該殘留物。由此獲得的油狀產物隨后溶于meoh(3ml)及10％tfa(水溶液)(3ml)，及于室溫攪拌過夜。向該反應混合物添加h2o以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生5c(0.17g，40.80％)。m.p.219.1至220.4。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.07(t，j＝8.5hz，2h)、3.79(s，3h)、4.03(t，j＝8.5hz，2h)、6.35(d，j＝16.0hz，1h)、7.22至7.24(m，1h)、7.37(d，j＝16.0hz，1h)、7.47至7.56(m，3h)、7.74(s，1h)、8.23(s，1h)。
5-溴-1-(3，4-二甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2d)
使1a(0.35g，1.76mmol)、3，4-二甲氧基苯磺酰氯(0.62g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.50)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2d(0.59g，83.96％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.03(t，j＝8.5hz，2h)、3.91(s，6h)、4.04(t，j＝8.5hz，2h)、6.90(d，j＝8.5hz，1h)、7.46(s，1h)、7.64至7.66(m，2h)、8.19(s，1h)。
(e)-3-(1-(3，4-二甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3d)
將2d(0.59g，1.48mmol)、乙酸鈀(0.03g，0.15mmol)、三苯基膦(0.08g，0.30mmol)、三乙胺(0.21ml，1.48mmol)、碳酸氫鈉(0.25g，2.96mmol)及dmf(2.5ml)的混合物攪拌10分鐘，及在添加丙烯酸第三丁酯(0.26ml，1.78mmol)之后，于120℃再次攪拌過夜。藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.43)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的3d(0.46g，69.61％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.51(s，9h)、3.05(t，j＝8.5hz，2h)、3.90(s，6h)、4.06(t，j＝8.5hz，2h)、6.23(d，j＝16.0hz，1h)、6.90(d，j＝8.5hz，1h)、7.46(d，j＝16.0hz，1h)、7.52(s，1h)、7.66至7.69(m，2h)、8.23(s，1h)。
(e)-3-(1-(3，4-二甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4d)
將3d(0.46g，1.03mmol)及三氟乙酸(3.05ml)的混合物于室溫攪拌1小時。隨后將水添加至其中以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生4d(0.40g，99.47％)。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.07(t，j＝8.0hz，2h)、3.83(s，3h)、3.86(s，3h)、4.04(t，j＝8.0hz，2h)、6.42(d，j＝16.0hz，1h)、7.06(d，j＝8.5hz，1h)、7.57至7.62(m，3h)、7.82(s，1h)、8.19(s，1h)。
(e)-3-(1-(3，4-二甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(5d)
將4d(0.40g，1.02mmol)、edc(0.29g，1.53mmol)、hobt(0.16g，1.22mmol)、nmm(0.27ml，2.45mmol)及dmf(2ml)混合物攪拌10分鐘，及在添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.14g，1.22mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.23)來純化該殘留物。由此獲得的油狀產物隨后溶于meoh(5ml)及10％tfa(水溶液)(5ml)及隨后于室溫攪拌過夜。將水添加至該反應混合物以沉淀黃色固體，收集該固體以產生5d(0.31g，74.96％)。m.p.215.2至216.2。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.04(t，j＝8.0hz，2h)、3.78(s，3h)、3.79(s，3h)、3.98(t，j＝8.0hz，2h)、6.35(d，j＝15.5hz，1h)、7.11(d，j＝8.5hz，1h)、7.37(d，j＝16.0hz，1h)、7.51(s，1h)、7.56(d，j＝8.0hz，1h)、7.73(s，1h)、8.23(s，1h)。
5-溴-1-(4-氟苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2e)
使1a(0.35g，1.76mmol)、4-氟苯磺酰氯(0.51g，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.80)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2e(0.55g，87.49％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.06(t，j＝8.0hz，2h)、4.07(t，j＝8.0hz，2h)、7.15至7.18(m，2h)、7.47(s，1h)、8.10至8.13(m，2h)、8.17(s，1h)。
(e)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3e)
將2e(0.38g，1.06mmol)、乙酸鈀(0.02g，0.11mmol)、三苯基膦(0.06g，0.21mmol)、三乙胺(0.15ml、1.06mmol)、碳酸氫鈉(0.18g，2.12mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.11ml，1.27mmol)之后，及再次攪拌過夜。藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.60)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的3e(0.31g，80.70％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.07(t，j＝8.5hz，2h)、3.80(s，3h)、4.11(t，j＝8.5hz，2h)、6.31(d，j＝16.0hz，1h)、7.15至7.19(m，2h)、7.55(s，1h)、7.58(d，j＝16.0hz，1h)、8.14至8.17(m，2h)、8.23(s，1h)。
(e)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4e)
將4e(0.31g，0.86mmol)、二惡烷(5ml)、及1mlioh(水溶液)(1.72ml，1.72mmol)的混合物于40℃攪拌過夜。在移除該溶劑之后，所得殘留物溶于水中。添加3nhcl(水溶液)以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生5e(0.20g，66.76％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.08(t，j＝8.5hz，2h)、4.08(t，j＝8.5hz，2h)、6.45(d，j＝16.0hz，1h)、7.41至7.45(m，2h)、7.51(d，j＝16.0hz，1h)、7.95(s，1h)、8.07至8.10(m，2h)、8.26(s，1h)。
(e)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-n-羥基丙烯酰胺(5e)
將4e(0.40g，1.15mmol)、edc(0.33g，1.73mmol)、hobt(0.19g，1.38mmol)、nmm(0.30ml，2.76mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.16g，1.38mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.25)來純化由溶劑移除所得殘留物。由此獲得的油狀產物隨后溶于meoh(5ml)及10％tfa(水溶液)(5ml)中，及于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀淺黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生5e(0.22g，52.65％)。m.p.209.7至210.9。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、4.09(t，j＝8.5hz，2h)、6.38(d，j＝16.0hz，1h)、7.26至7.30(m，2h)、7.47(d，j＝16.0hz，1h)、7.73(s，1h)、8.10至8.13(m，2h)、8.16(s，1h)。
5-溴-1-(3-氟苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2f)
使1a(0.35g，1.76mmol)、3-氟苯磺酰氯(0.35ml，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4，rf＝0.25)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2f(0.79g，62.83％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.087(t，j＝8.5hz，2h)、4.09(t，j＝8.5hz，2h)、7.27至7.30(m，1h)、7.46至7.50(m，2h)、7.82至7.84(m，1h)、7.87至7.89(m，1h)、8.19(s，1h)。
(e)-3-(1-(3-氟苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3f)
將2f(0.15g，0.42mmol)、pd2(dba)3(0.04g，0.04mmol)、[(t-bu)3ph]bf4(0.02g，0.08mmol)、三乙胺(0.06ml，0.42mmol)、碳酸氫鈉(0.07g、0.84mmol)及dmf(1.5ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.04ml，0.50mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.25)純化以產生呈黃色固體的3f(0.12g，78.84％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、3.79(s，3h)、4.11(t，j＝8.5hz，2h)、6.31(d，j＝16.0hz，1h)、7.28至7.30(m，1h)、7.46至7.50(m，1h)、7.58(d，j＝16.5hz，2h)、7.85至7.87(m，1h)、7.91(d，j＝8.0hz，1h)、8.25(s，1h)。
(e)-3-(1-(3-氟苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4f)
將3f(0.34g，0.94mmol)、二惡烷(10ml)、及1mlioh(水溶液)(1.88ml，1.88mmol)的混合物于40℃攪拌過夜。在移除溶劑之后，所得殘留物溶于水中。添加3nhcl(水溶液)以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生4f(0.25g，76.35％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、4.11(t，j＝8.5hz，2h)、6.46(d，j＝16.0hz，1h)、7.50(d，j＝16.0hz，1h)、7.54至7.58(m，1h)、7.63至7.67(m，1h)、7.82(d，j＝8.5hz，1h)、7.86(d，j＝8.0hz，1h)、7.97(s，1h)、8.28(s，1h)。
(e)-3-(1-(3-氟苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-n-羥基丙烯酰胺(5f)
將4f(0.25g，0.72mmol)、edc(0.21g，1.08mmol)、hobt(0.12g，0.86mmol)、nmm(0.19ml，1.73mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.10g，0.86mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.38)純化。由此獲得的油狀產物隨后溶于meoh(3ml)及10％tfa(水溶液)(3ml)中，于室溫攪拌過夜，添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生5f(0.15g，57.34％)。m.p.207.1至208.0。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、4.10(t，j＝8.5hz，2h)、6.36(d，j＝16.0hz，1h)、7.36(d，j＝16.0hz，1h)、7.56(td，j＝2.5、8.5hz，1h)、7.63至7.68(m，1h)、7.77(s，1h)、7.82(d，j＝8.5hz，1h)、7.86(d，j＝8.0hz，1h)、8.22(s，1h)、10.73(br，1h)。
5-溴-1-(4-氯苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2g)
使1a(0.35g，1.76mmol)、4-氯苯磺酰氯(0.56g，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.78)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2g(0.55g，83.63％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.06(t，j＝8.5hz，2h)、4.08(t，j＝8.5hz，2h)、7.46至7.47(m，3h)、8.03(d，j＝9.0hz，2h)、8.17(s，1h)。
(e)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3g)
將2g(0.40g，1.07mmol)、乙酸鈀(0.02g、0.11mmol)、三苯基膦(0.06g、0.21mmol)、三乙胺(0.15ml、1.07mmol)、碳酸氫鈉(0.18g、2.14mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.11ml，1.28mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶3，rf＝0.28)純化以產生呈黃色固體的3g(0.37g，91.28％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、3.80(s，3h)、4.11(t，j＝8.5hz，2h)、6.31(d，j＝16.0hz，1h)、7.47(d，j＝8.5hz，1h)、7.56(s，1h)、7.58(d，j＝16.0hz，1h)、8.07(d，j＝8.5hz，2h)、8.23(s，1h)。
(e)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4g)
將3g(0.37g，0.98mmol)、二惡烷(5ml)及1mlioh(水溶液)(1.96ml，1.96mmol)的混合物于40℃攪拌過夜。在移除該溶劑之后，所得殘留物溶于水中。添加3nhcl(水溶液)以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生4g(0.18g，50.35％)。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.11(t，j＝8.5hz，2h)、4.11(t，j＝8.5hz，2h)、6.42(d，j＝16.0hz，1h)、7.56至7.60(m，3h)、7.84(s，1h)、8.03(d，j＝8.5hz，2h)、8.17(s，1h)。
(e)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-n-羥基丙烯酰胺(5g)
將4g(0.30g，0.82mmol)、edc(0.24g，1.23mmol)、hobt(0.13g，0.98mmol)、nmm(0.22ml，1.97mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.11g，0.98mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.20)來純化由溶劑移除所得的殘留物。由此獲得的油狀產物隨后溶于meoh(3ml)及10％tfa(水溶液)(3ml)中，及于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀淺黃色產物，藉由過濾收集該產物以產生5g(0.20g，64.22％)。m.p.207.6至208.7。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、4.07(t，j＝8.5hz，2h)、6.36(d，j＝16.0hz，1h)、7.38(d，j＝16.0hz，1h)、7.66(d，j＝8.5hz，2h)、7.76(s，1h)、8.01(d，j＝8.5hz，2h)、8.19(s，1h)、9.01(br，1h)、10.72(s，1h)。
5-溴-1-(3-氯苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2h)
將1a(0.35g，1.76mmol)、3-氯苯磺酰氯(0.37ml，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及物使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.55)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2h(0.50g，76.03％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.08(t，j＝8.5hz，2h)、4.09(t，j＝8.5hz，2h)、7.44(t，j＝8.0hz，1h)、7.49(s，1h)、7.55(d，j＝7.5hz，1h)、7.99(d，j＝8.0hz，1h)、8.10(s，1h)、8.19(s，1h)。
(e)-3-(1-(3-氯苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3h)
將2h(0.15g，0.40mmol)、pd2(dba)3(0.04g，0.04mmol)、[(t-bu)3ph]bf4(0.02g，0.08mmol)、三乙胺(0.06ml，0.40mmol)、碳酸氫鈉(0.07g，0.80mmol)及dmf(1.5ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.04ml，0.44mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正及烷＝1∶2，rf＝0.20)來純化由溶劑移除所得的殘留物以產生呈黃色固體的3h(0.13g，85.79％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.11(t，j＝8.5hz，2h)、3.79(s，3h)、4.13(t，j＝8.5hz，2h)、6.31(d，j＝16.0hz，1h)、7.44(t，j＝8.0hz，1h)、7.54至7.60(m，3h)、8.03(t，j＝8.0hz，1h)、8.13(s，1h)、8.25(s，1h)。
(e)-3-(1-(3-氯苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4h)
將3h(0.36g，0.95mmol)、二惡烷(10ml)及1mlioh(水溶液)(1.90ml，1.90mmol)的混合物于40℃攪拌過夜。在移除該溶劑之后，所得殘留物溶于水中。添加3nhcl(水溶液)以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生4h(0.31g，89.45％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、4.11(t，j＝8.5hz，2h)、6.46(d，j＝15.5hz，1h)、7.51(d，j＝16.0hz，1h)、7.63(t，j＝8.0hz，1h)、7.77(d，j＝8.0hz，1h)、7.97至7.98(m，2h)、8.02(s，1h)、8.28(s，1h)。
(e)-3-(1-(3-氯苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-n-羥基丙烯酰胺(5h)
將4h(0.31g，0.85mmol)、edc(0.25g，1.28mmol)、hobt(0.14g，1.02mmol)、nmm(0.22ml，2.04mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.29g，2.45mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經二氧化硅(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.20)純化。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(4ml)及10％tfa(水溶液)(4ml)中，再次攪拌過夜。添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生5h(0.23g，71.24％)。m.p.214.9至216.2。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、4.10(t，j＝8.5hz，2h)、6.36(d，j＝16.0hz，1h)、7.37(d，j＝15.5hz，1h)、7.63(t，j＝8.0hz，1h)、7.75至7.77(m，2h)、7.97(d，j＝8.0hz，1h)、8.03(s，1h)、8.22(s，1h)。
5-溴-1-(4-硝基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2i)
使1(0.35g，1.76mmol)、4-硝基苯磺酰氯(0.59g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.73)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2i(0.35g，51.76％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、4.13(t，j＝8.5hz，2h)、7.51(s，1h)、8.29至8.34(m，4h)。
(e)-3-(1-(4-硝基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]-吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3i)
將2i(0.35g，0.91mmol)、乙酸鈀(0.02g，0.09mmol)、三苯基膦(0.05g，0.18mmol)、三乙胺(0.13ml，0.91mmol)、碳酸氫鈉(0.15g，1.82mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.16ml，1.09mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.28)純化以產生呈黃色固體的3i(0.13g，32.11％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.52(s，9h)、3.13(t，j＝8.5hz，2h)、4.16(t，j＝8.5hz，2h)、6.25(d，j＝16.0hz，1h)、7.46(t，j＝16.0hz，1h)、7.56(s，1h)、8.22(s，1h)、8.34(s，4h)。
(e)-3-(1-(4-硝基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-丙烯酸(4i)
將3i(0.13g，0.31mmol)及三氟乙酸(1.03ml)的混合物于室溫攪拌2小時。在該反應混合物中添加水以沉淀黃色產物，藉由過濾收集該產物以產生4i(0.06g，51.56％)。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.16(t，j＝8.5hz，2h)、4.19(t，j＝8.5hz，2h)、6.44(d，j＝15.5hz，1h)、7.59(d，j＝16.0hz，1h)、7.87(s，1h)、8.22(s，1h)、8.34(t，j＝8.0hz，2h)、8.41(d，j＝9.0hz，2h)。
(e)-n-羥基-3-(1-(4-硝基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5i)
將4i(0.30g，0.80mmol)、edc(0.23g，1.20mmol)、hobt(0.13g，0.96mmol)、nmm(0.21ml，1.92mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.11g，0.96mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.23)純化。由此獲得的油狀產物隨后溶于meoh(3ml)及10％tfa(水溶液)(3ml)中，及于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生5i(0.14g，44.83％)。m.p.200.4至201.5。1h-nmr(500mhz，cd3od+dmso-d6)：δ3.14(t，j＝8.5hz，2h)、4.18(t，j＝8.5hz，2h)、6.40(d，j＝16.0hz，1h)、7.47(d，j＝16.0hz，1h)、7.76(s，1h)、8.19(s，1h)、8.33(t，j＝8.0hz，2h)、8.40(d，j＝9.0hz，2h)。
5-溴-1-(3-硝基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2j)
使1a(0.35g，1.76mmol)、3-硝基苯磺酰氯(0.59g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.50)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2j(0.36g，53.24％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.11(t，j＝8.5hz，2h)、4.16(t，j＝8.5hz，2h)、7.51(s，1h)、7.72(t，j＝9.0hz，1h)、8.18(s，1h)、8.42至8.44(m，1h)、8.46至8.49(m，1h)、8.96(t，j＝9.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(3-硝基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3j)
將2j(0.36g，1.76mmol)、乙酸鈀(0.02g，0.09mmol)、三苯基膦(0.05，0.19mmol)、三乙胺(0.13ml，0.94mmol)、碳酸氫鈉(0.16g，1.88mmol)及dmf(2ml))的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.16ml，1.13mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.20)純化以產生呈黃色固體的3j(0.30g，73.99％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.52(s，9h)、3.14(t，j＝8.5hz，2h)、4.18(t，j＝8.5hz，2h)、6.25(d，j＝16.0hz，1h)、7.46(d，j＝16.0hz，1h)、7.56(s，1h)、7.72(t，j＝8.0hz，1h)、8.23(s，1h)、8.42至8.44(m，1h)、8.50至8.52(m，1h)、9.00(t，j＝9.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(3-硝基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4j)
將3j(0.30g，0.70mmol)及三氟乙酸(2.33ml)的混合物于室溫攪拌2小時。在該反應混合物中添加水以沉淀黃色產物，藉由過濾收集該產物以產生4j(0.16g，60.89％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、4.15(t，j＝8.5hz，2h)、6.46(d，j＝16.0hz，1h)、7.51(d，j＝16.0hz，1h)、7.90(t，j＝8.0hz，1h)、7.97(s，1h)、8.29(s，1h)、8.44(d，j＝8.0hz，1h)、8.50(d，j＝8.0hz，1h)、8.74(s，1h)。
(e)-n-羥基-3-(1-(3-硝基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5j)
將4j(0.27g，0.72mmol)、edc(0.21g，1.08mmol)、hobt(0.12g、0.86mmol)、nmm(0.19ml、1.73mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.10g，0.86mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.20)純化。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(5ml)及10％tfa(水溶液)(5ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生5j(0.20g，71.16％)。m.p.158.8至160.3。1h-nmr(500mhz，cd3od+dmso-d6)：δ3.14(t，j＝8.5hz，2h)、4.17(t，j＝8.5hz，2h)、6.39(d，j＝16.0hz，1h)、7.47(d，j＝15.5hz，1h)、7.75(s，1h)、7.84(t，j＝8.0hz，1h)、8.20(s，1h)、8.46(d，j＝8.0hz，1h)、8.48至8.50(m，1h)、8.90(t，j＝9.0hz，1h)。
5-溴-1-(4-溴苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2k)
使1a(0.35g，1.76mmol)、4-溴苯磺酰氯(0.67g，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.80)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2k(0.57g，77.46％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.05(t，j＝8.5hz，2h)、4.06(t，j＝8.5hz，2h)、7.47(s，1h)、7.62(d，j＝8.5hz，2h)、7.95(d，j＝8.5hz，2h)、8.16(s，1h)。
(e)-4-(4-(5-((e)-3-第三丁氧基-3-側氧基丙-1-烯基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丁-2-烯酸第三丁酯(3k)
將2k(0.57g，1.36mmol)、乙酸鈀(0.06g，0.27mmol)，三苯基膦(0.14g，0.54mmol)、三乙胺(0.38ml，2.72mmol)、碳酸氫鈉(0.46g，5.44mmol)及dmf(3ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.47ml，3.26mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.25)純化以產生呈黃色固體的3k(0.56g，80.33％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.52(s，18h)、3.08(t，j＝8.5hz，2h)、4.12(t，j＝8.5hz，2h)、6.23(d，j＝16.0hz，1h)、6.43(d，j＝15.5hz，1h)、7.46(d，j＝16.0hz，1h)、7.52至7.55(m，2h)、7.59(d，j＝8.5hz，2h)、8.12(d，j＝8.5hz，2h)、8.22(s，1h)。
(e)-4-(4-(5-((e)-2-羧乙烯基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丁-2-烯酸(4k)
將3k(0.56g，1.09mmol)及三氟乙酸(5.50ml)的混合物于室溫攪拌2小時。在該反應化合物中添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生4k(0.23g，52.70％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、4.10(t，j＝8.5hz，2h)、6.45(d，j＝16.0hz，1h)、6.65(d，j＝16.0hz，1h)、7.50(d，j＝16.0hz，1h)、7.59(d，j＝16.5hz，1h)、7.88(d，j＝8.5hz，2h)、7.95(s，1h)、8.01(d，j＝8.0hz，2h)、8.27(s，1h)。
(e)-n-羥基-4-(4-(5-((e)-3-(羥基胺基)-3-側氧基丙-1-烯基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丁-2-烯酰胺(5k)
將4k(0.30g，0.75mmol)、edc(0.43g，2.25mmol)、hobt(0.24g，1.80mmol)、nmm(0.46ml，3.60mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.21g，1.80mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯，rf＝0.25)純化。由此獲得的油狀產物隨后溶于meoh(3ml)及10％tfa(水溶液)(3ml)中，及于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生5k(0.05g，15.49％)。m.p.194.9至196.0(分解)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.07(t，j＝8.5hz，2h)、4.07(t，j＝8.5hz，2h)、6.34(d，j＝16.0hz，1h)、6.54(d，j＝16.0hz，1h)、7.36(d，j＝16.0hz，1h)、7.45(d，j＝16.0hz，1h)、7.72至7.84(m，3h)、8.00(d，j＝8.5hz，2h)、8.18(s，1h)、10.70(s，1h)、10.83(s，1h)。
5-溴-1-(3-溴苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(21)
使1a(0.35g，1.76mmol)、4-溴苯磺酰氯(0.67g，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.75)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2l(0.56g，76.10％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.07(t，j＝8.5hz，2h)、4.09(t，j＝8.5hz，2h)、7.37(t，j＝8.0hz，1h)、7.48至7.49(m，1h)、7.69至7.71(m，1h)、8.03至8.05(m，1h)、8.19(d，j＝9.0hz，1h)、8.25(d，j＝8.0hz，1h)。
(e)-3-(3-(5-((e)-3-第三丁氧基-側氧基丙-1-烯基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸第三丁酯(31)
將2l(0.56g，1.34mmol)、乙酸鈀(0.06g，0.27mmol)、三苯基膦(0.14g，0.54mmol)、三乙胺(0.37ml，2.68mmol)、碳酸氫鈉(0.45g，5.36mmol)及dmf(3ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.47ml，3.22mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.25)純化以產生呈黃色固體的3l(0.65g，94.63％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.52(s，9h)、1.54(s，9h)、3.09(t，j＝8.5hz，2h)、4.12(t，j＝8.5hz，2h)、6.24(d，j＝16.0hz，1h)、6.48(d，j＝16.0hz，1h)、7.46(d，j＝16.0hz，1h)、7.49至7.53(m，2h)、7.57(d，j＝16.0hz，1h)、7.68(d，j＝8.5hz，1h)、8.10(d，j＝7.5hz，1h)、8.24至8.28(m，2h)。
(e)-3-(3-(5-((e)-2-羧乙烯基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(41)
將3l(0.65g，1.27mmol)及三氟乙酸(6.35ml)的混合物于室溫攪拌2小時。在該反應混合物中添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生4l(0.19g，37.36％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)，4.15(t，j＝8.5hz，2h)、6.44(d，j＝16.0hz，1h)、6.62(d，j＝16.0hz，1h)、7.49(d，j＝16.0hz，1h)、7.61至7.66(m，2h)、7.95(s，1h)、8.02(t，j＝9.0hz，2h)、8.21(s，1h)、8.26(s，1h)。
(e)-n-羥基-3-(3-(5-((e)-3-(羥基胺基)-3-側氧基丙-1-烯基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(51)
將4l(0.30g，0.75mmol)、edc(0.43g，2.25mmol)、hobt(0.24g，1.80mmol)、nmm(0.46ml，3.60mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.21g，1.80mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯，rf＝0.30)純化。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(5ml)及10％tfa(水溶液)(5ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生5l(0.12g，37.17％)。m.p.219.6至220.7。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、4.10(t，j＝8.5hz，2h)、6.35(d，j＝16.0hz，1h)、6.56(d，j＝16.0hz，1h)、7.36(d，j＝16.0hz，1h)、7.50(d，j＝16.0hz，1h)、7.61(t，j＝8.5hz，1h)、7.75(s，1h)、7.84(d，j＝8.0hz，1h)、7.97(d，j＝8.0hz，1h)、8.22(d，j＝10.0hz，2h)、10.71(s，1h)、10.84(s，1h)。
5-溴-1-(2-溴苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2m)
使1a(0.35g，1.76mmol)、2-溴苯磺酰氯(0.67g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.83)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2m(0.30g，40.77％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.18(t，j＝8.5hz，2h)、4.49(t，j＝8.5hz，2h)、7.38至7.42(m，1h)、7.48至7.52(m，2h)、7.67(t，j＝8.0hz，1h)、7.92(s，1h)、8.43(d，j＝8.0hz，1h)。
(e)-3-(2-(5-((e)-3-甲氧基-3-側氧基丙-1-烯基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸甲酯(3m)
將2m(0.31g，0.74mmol)、乙酸鈀(0.04g，0.14mmol)、三苯基膦(0.08g，0.30mmol)、三乙胺(0.20ml，1.48mmol)、碳酸氫鈉(0.24g，2.96mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及于120℃下添加丙烯酸甲酯(0.16ml，1.78mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.38)純化以產生呈黃色固體的3m(0.17g，55.11％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、3.74(s，3h)、3.79(s，3h)、4.32(t，j＝8.5hz，2h)、6.22至6.25(m，2h)、7.48(d，j＝16.0hz，1h)、7.51至7.57(m，4h)、7.98(s，1h)、8.32(d，j＝7.5hz，1h)、8.52(d，j＝16.0hz，1h)。
(e)-3-(2-(5-((e)-2-羧乙烯基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(4m)
將3m(0.30g，0.70mmol)、二惡烷(5ml)及1mlioh(水溶液)(2.88ml，2.80mmol)的混合物于40℃攪拌過夜。在移除溶劑之后，所得殘留物溶于水中。添加3nhcl(水溶液)以沉淀黃色產物，藉由過濾收集該產物以產生4m(0.17g，60.65％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.11(t，j＝8.5hz，2h)、4.32(t，j＝8.5hz，2h)、6.39至6.43(m，2h)、7.45(d，j＝16.0hz，1h)、7.64(t，j＝8.0hz，1h)、7.70(t，j＝8.0hz，1h)、7.86(d，j＝7.5hz，1h)、7.95(s，1h)、8.07(s，1h)、8.14(d，j＝8.0hz，1h)、8.33(d，j＝16.0hz，1h)。
(e)-n-羥基-3-(2-(5-((e)-3-(羥基胺基)-3-側氧基丙-1-烯基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(5m)
將4m(0.17g，0.42mmol)、edc(0.24g，1.26mmol)、hobt(0.14g，1.01mmol)、nmm(0.22ml，2.02mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.12g，1.01mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝4∶1，rf＝0.10)來純化由移除溶劑所得殘留物。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(2ml)及10％tfa(水溶液)(2ml)中，再次攪拌過夜。添加水以沉淀淺黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生5m(0.06g，33.19％)。m.p.220.2至221.4。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、4.28(t，j＝8.5hz，2h)、6.26至6.33(m，2h)、7.31(d，j＝16.0hz，1h)、7.60至7.71(m，3h)、7.74(s，1h)、7.96(s，1h)、8.14至8.17(m，2h)、8.99(br，1h)、9.17(br，1h)、10.69(s，1h)、10.83(s，1h)。
4-(5-溴-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯甲腈(2n)
將l(0.35g，1.76mmol)、4-氰基苯磺酰氯(0.39g，2.64mmol)、及吡啶(2ml)的混合物于室溫攪拌過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層及經無水mgso4攪拌，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.58)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2n(0.35g，54.60％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、4.11(t，j＝8.5hz，2h)、7.50(s，1h)、7.79(d，j＝8.5hz，2h)、8.17(s，1h)、8.23(d，j＝8.5hz，2h)。
(e)-3-(1-(4-氰基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3n)
將2n(0.15g，0.41mmol)、pd2(dba)3(0.04g，0.04mmol)、[(t-bu)3ph]bf4(0.02g，0.08mmol)、三乙胺(0.06ml，041g)、碳酸氫鈉(0.07g，0.82mmol)及dmf(1ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.07ml，0.49mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.35)純化以產生呈黃色固體的3n(0.20g，34.04％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.52(s，9h)、3.12(t，j＝8.5hz，2h)、4.14(t，j＝8.5hz，2h)、6.25(d，j＝16.0hz，1h)、7.46(t，j＝16.0hz，1h)、7.56(s，1h)、7.79(d，j＝8.5hz，2h)、8.21(s，1h)、8.27(d，j＝8.5hz，2h)。
(e)-3-(1-(4-氰基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4n)
將3n(0.20g，0.49mmol)及三氟乙酸(1.63ml)的混合物于0℃攪拌40分鐘。在該反應混合物中添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生4n(0.15g，86.14％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、4.13(t，j＝8.5hz，2h)、6.45(d，j＝16.0hz，1h)、7.50(t，j＝16.0hz，1h)、7.96(s，1h)、8.07(d，j＝9.0hz，2h)、8.18(d，j＝8.5hz，2h)、8.25(s，1h)。
(e)-3-(1-(4-氰基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)n-羥基丙烯酰胺(5n)
將4n(0.15g，0.42mmol)、edc(0.12g，0.63mmol)、hobt(0.07g，0.50mmol)、nmm(0.11ml，1.01mmol)及dmf(1ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.06g，0.50mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.25)純化。于室溫下，由此獲得的油狀產物溶于meoh(4ml)及10％tfa(水溶液)(4ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生5n(0.12g，77.14％)。m.p.226.2至227.4。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、4.12(t，j＝8.5hz，2h)、6.36(d，j＝16.0hz，1h)、7.36(t，j＝16.0hz，1h)、7.77(s，1h)、8.07(d，j＝8.5hz，2h)、8.18(d，j＝8.5hz，3h)。
5-溴-1-(萘-1-基磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(2o)
使1a(0.35g，1.76mmol)、4-萘磺酰氯(0.60g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.75)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2o(0.30g，43.79％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.06(t，j＝8.5hz，2h)、4.32(t，j＝8.5hz，2h)、7.42(s，1h)、7.55至7.59(m，2h)、7.62至7.66(m，1h)、7.91(d，j＝8.0hz，1h)、8.05(s，1h)、8.07(d，j＝8.0hz，1h)、8.53(d，j＝8.5hz，1h)、8.83(d，j＝8.5hz，1h)。
(e)-3-(1-(萘-1-基磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3o)
將2o(0.29g，0.74mmol)、乙酸鈀(0.02g，0.07mmol)、三苯基膦(0.04g，0.15mmol)、三乙胺(0.10ml，0.74g)、碳酸氫鈉(0.12g，1.48mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.08ml，0.89mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.50)純化以產生呈黃色固體的3o(0.20g，68.52％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、3.77(s，3h)、4.36(t，j＝8.5hz，2h)、6.26(d，j＝16.0hz，1h)、7.51(s，1h)、7.54至7.61(m，2h)、7.63至7.66(m，2h)、7.91(d，j＝9.0hz，1h)、8.08(d，j＝8.0hz，1h)、8.11(s，1h)、8.57(d，j＝8.5hz，1h)、8.85(d，j＝9.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(萘-1-基磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4o)
向3o(0.20g，0.51mmol)及二惡烷(3ml)的混合物添加1mlioh(水溶液)(1.02ml，1.02mmol)。于40℃攪拌該混合物過夜。在移除該溶劑之后，所得殘留物溶于水中。添加3nhcl(水溶液)以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生4o(0.15g，77.31％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.13(t，j＝8.5hz，2h)、4.32(t，j＝8.5hz，2h)、6.41(d，j＝16.0hz，1h)、7.45(d，j＝16.0hz，1h)、7.65(t，j＝7.5hz，1h)、7.69至7.74(m，2h)、7.92(s，1h)、8.08(d，j＝8.0hz，1h)、8.11(s，1h)、8.28(d，j＝8.0hz，1h)、8.41(d，j＝7.0hz，1h)、8.64(d，j＝8.5hz，1h)。
(e)-n-羥基-3-(1-(萘-1-基磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5o)
將4o(0.30g，0.79mmol)、edc(0.23g，1.19mmol)、hobt(0.13g，0.95mmol)、nmm(0.21ml，1.90mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.11g，0.90mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.18)純化。由此所得油狀產物隨后溶于meoh(3ml)及10％tfa(水溶液)(3ml)中，及在室溫攪拌過夜。添加水以沉淀黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生5o(0.20g，64.02％)。m.p.164.5至165.7。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.13(t，j＝8.5hz，2h)、4.31(t，j＝8.5hz，2h)、6.31(d，j＝16.0hz，1h)、7.31(d，j＝16.0hz，1h)、7.65(t，j＝7.5hz，1h)、7.69至7.74(m，3h)、8.04(s，1h)、8.08(d，j＝8.0hz，1h)、8.27(d，j＝8.5hz，1h)、8.40(d，j＝8.0hz，1h)、8.65(d，j＝8.5hz，1h)。
5-(5-溴-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)-n，n-二甲基-萘-1-胺(2p)
使1a(0.35g，1.76mmol)、丹酰基磺酰氯(0.71g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶2，rf＝0.68)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的2a(0.17g，22.34％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ2.91(s，6h)、3.06(t，j＝8.5hz，2h)、4.31(t，j＝8.5hz，2h)、7.21(s，1h)、7.42(s，1h)、7.53至7.60(t，j＝8.0hz，1h)、8.04(s，1h)、8.52(d，j＝7.5hz，2h)、8.62(s，1h)。
(e)-3-(1-(5-(二甲基胺)萘-1-基磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3p)
將2p(0.37g，0.86mmol)、乙酸鈀(0.02g，0.09mmol)、三苯基膦(0.04g，0.17mmol)、三乙胺(0.12ml，0.86mmol)、碳酸氫鈉(0.14g，1.72mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.09ml，1.03mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.50)純化以產生呈黃色固體的3p(0.17g，45.18％)。1h-nmr(500mhz，cd3od+dmso-d6)：δ2.89(s，6h)、3.19(t，j＝8.5hz，2h)、4.24(s，3h)、4.37(t，j＝8.5hz，2h)、6.50(d，j＝16.0hz，1h)、7.29(d，j＝8.0hz，1h)、7.59至7.64(m，2h)、7.69(t，j＝8.0hz，1h)、7.88(s，1h)、8.13(s，1h)、8.41(d，j＝9.0hz，1h)、8.48(d，j＝8.0hz，1h)、8.62(d，j＝8.5hz，1h)。
(e)-3-(1-(5-(二甲基胺基)萘-1-基磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4p)
向3p(0.17g，0.39mmol)及二惡烷(3ml)的混合物添加1mlioh(水溶液)(0.78ml，0.78mmol)。于40℃攪拌該混合物過夜。在移除該溶劑之后，所得殘留物溶于水中。添加3nhcl(水溶液)以沉淀黃色產物，藉由過濾收集該產物以產生4p(0.05g，30.27％)。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.12(t，j＝8.5hz，2h)、3.13(s，6h)、4.31(t，j＝8.5hz，2h)、6.37(d，j＝15.5hz，1h)、7.52(d，j＝16.0hz，1h)、7.72至7.83(m，4h)、8.01(s，1h)、8.56(t，j＝7.5hz，2h)、8.79(s，1h)。
(e)-3-(1-(5-(二甲基胺基)萘-1-基磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-n-羥基丙烯酰胺(5p)
將4p(0.23g，0.54mmol)、edc(0.16g，0.81mmol)、hobt(0.09g，0.65mmol)、nmm(0.14ml，1.30mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.08g，0.65mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.20)純化。由此獲得的油狀產物隨后溶于meoh(3ml)及10％tfa(水溶液)(3ml)中，及在室溫攪拌過夜。添加水以沉淀淺黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生5p(0.11g，46.45％)。m.p.183.1至184.7。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ2.80(s，6h)、3.14(t，j＝8.5hz，2h)、4.30(t，j＝8.5hz，2h)、6.32(d，j＝15.5hz，1h)、7.24(d，j＝7.5hz，1h)、7.32(d，j＝16.0hz，1h)、7.60(t，j＝8.0hz，1h)、7.68(t，j＝8.0hz，1h)、7.73(s，1h)、8.05(s，1h)、8.27(d，j＝9.0hz，1h)、8.38(d，j＝7.0hz，1h)、8.50(t，j＝8.0hz，1h)、10.70(s，1h)。
(e)-n-(2-胺苯基)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(6a)
將4b(0.20g，0.55mmol)、edc(0.16g，0.83mmol)、hobt(0.09g，0.66mmol)、nmm(0.15ml，1.32mmol)及dmf(1.5ml)的混合物攪拌10分鐘，隨后于室溫添加鄰苯二胺(0.07g，0.66mmol)，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝4∶1，rf＝0.28)純化以產生呈橘色固體的6a(0.16g，64.57％)。m.p.209.1至209.9。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、3.80(s，3h)、4.04(t，j＝8.5hz，2h)、4.91(s，2h)、6.56(t，j＝7.5hz，1h)、6.73(d，j＝8.0hz，1h)、6.79(d，j＝16.0hz，1h)、6.90(t，j＝7.5hz，1h)、7.09(d，j＝9.0hz，2h)、7.31(d，j＝8.0hz，1h)、7.47(d，j＝15.5hz，1h)、7.76(s，1h)、7.95(d，j＝9.0hz，2h)、8.25(s，1h)、9.35(s，1h)。
n-羥基-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-丙酰胺(7a)
將5b(0.11g，0.29mmol)及甲醇(4ml)的混合物攪拌10分鐘，及，在于室溫添加催化劑10％碳載鈀之后，再次在氫氣下攪拌過夜。藉由meoh清洗該殘留物及經由硅藻土以移除10％碳載鈀而不進一步純化以產生呈深粉色固體的7a(0.09g，82.23％)。m.p.151.0至151.7。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ2.18(t，j＝7.5hz，2h)、2.68(t，j＝7.5hz，2h)、2.97(t，j＝8.5hz，2h)、3.79(s，3h)、3.93(t，j＝8.5hz，2h)、7.06(d，j＝9.0hz，2h)、7.36(s，1h)、7.85(s，1h)、7.90(t，j＝9.0hz，2h)。
1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-甲腈(8a)
將2b(0.20g，0.54mmol)、氰化亞銅(i)(0.10g，1.08mmol)及dmf(3ml)的混合物于150℃攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.43)純化以產生呈黃色固體的8a(0.09g，52.58％)。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.10(t，j＝8.5hz，2h)、3.85(s，3h)、4.14(t，j＝8.5hz，2h)、6.96(d，j＝9.0hz，2h)、7.51(s，1h)、8.03(t，j＝9.0hz，2h)、8.40(s，1h)。
1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-甲酸(9a)
向8a(0.09g，0.29mmol)及甲醇(3ml)的混合物中添加10％koh(水溶液)(3ml)。使該混合物回流2小時。在其冷卻至室溫之后，隨后添加3nhcl(水溶液)以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生9a(0.06g，61.88％)。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.09(t，j＝8.5hz，2h)、3.83(s，3h)、4.09(t，j＝8.5hz，2h)、7.04(d，j＝9.0hz，2h)、7.97至8.00(m，3h)、8.66(s，1h)。
n-羥基-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2，3-二氫-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-甲酰胺(10a)
將9a(0.31g，0.93mmol)、edc(0.27g，1.40mmol)、hobt(0.15g，1.12mmol)、nmm(0.28ml，2.23mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.11g，1.12mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.30)純化。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(5ml)及10％tfa(水溶液)(5ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生10a(0.22g，74.09％)。m.p.198.5至199.9。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.07(t，j＝8.5hz，2h)、3.80(s，3h)、4.03(t，j＝8.5hz，2h)、7.08(d，j＝9.0hz，2h)、7.80(s，1h)、7.94(d，j＝9.0hz，2h)、8.36(s，1h)。
5-溴-1-(苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(11a)
向5-溴-7-氮雜吲哚(1.00g，5.08mmol)及dmf(3ml)的混合物添加60％nah(0.13g，5.59mmol)。攪拌該混合物10分鐘，及在添加苯磺酰氯(0.71ml，5.59mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。使用水中止該反應及使用乙酸乙酯(30mlx3)萃取該混合物。收集有機層，經無水mgso4干燥，及在真空中濃縮以產生棕色殘留物，藉由急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1，rf＝0.40)來純化該殘留物以產生呈黃色固體的11a(0.95g，55.46％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ6.55(d，j＝4.5hz，1h)、7.50(t，j＝8.0hz，2h)、7.59(t，j＝7.5hz，1h)、7.74(d，j＝4.0hz，1h)、7.97(d，j＝2.0hz，1h)、8.17(t，j＝8.0hz，2h)、8.45(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12a)
將11a(0.15g，0.44mmol)、乙酸鈀(0.01g，0.04mmol)、三苯基膦(0.03g，0.09mmol)、三乙胺(0.06ml，0.44mmol)、碳酸氫鈉(0.07g，0.88mmol)及dmf(1.5ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.08ml，0.53mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶5，rf＝0.20)純化以產生呈黃色固體的12a(0.11g，65.03％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.54(s，9h)、6.40(d，j＝16.0hz，1h)、6.61(d，j＝3.5hz，1h)、7.50(t，j＝7.5hz，2h)、7.59(t，j＝7.5hz，1h)、7.64(d，j＝16.0hz，1h)、7.75(d，j＝4.0hz，1h)、7.97(d，j＝2.0hz，1h)、8.20(t，j＝8.5hz，2h)、8.55(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13a)
將12a(1.27g，3.30mmol)及三氟乙酸(11.0ml)的混合物于室溫攪拌2小時。在該反應混合物中添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生13a(0.80g，73.84％)。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ6.57(d，j＝16.0hz，1h)、6.77(d，j＝4.0hz，1h)、7.54(t，j＝8.0hz，2h)、7.65(t，j＝7.5hz，1h)、7.75(d，j＝16.0hz，1h)、7.85(d，j＝4.0hz，1h)、8.13(t，j＝8.0hz，2h)、8.25(s，1h)、8.52(s，1h)。
(e)-n-羥基-3-(1-(苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(14a)
將13a(2.00g，6.09mmol)、edc(1.52g，9.14mmol)、hobt(0.99g，7.31mmol)、nmm(1.61ml，4.62mmol)及dmf(3ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.86g，7.31mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.25)來純化由移除溶劑所得殘留物。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(2ml)及10％tfa(水溶液)(2ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生14a(1.00g，88.79％)。m.p.210.2至211.5。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ6.57(d，j＝15.5hz，1h)、6.75(d，j＝7.0hz，1h)、7.54(t，j＝7.5hz，2h)、7.64(t，j＝7.5hz，1h)、7.69(d，j＝16.0hz，1h)、7.85(d，j＝6.5hz，1h)、8.13(t，j＝8.5hz，2h)、8.17(s，1h)、8.51(s，1h)。
5-溴-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(11b)
將5-溴-7-氮雜吲哚(0.35g，1.78mmol)、dmf(2ml)及60％nah(0.06g，2.67mmol)的混合物攪拌10分鐘，在添加4-甲氧基苯磺酰氯(0.55g，2.67mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生11b(0.57g，87.20％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.83(s，3h)、6.52(d，j＝4.0hz，1h)、6.93(t，j＝9.0hz，2h)、7.73(t，j＝4.0hz，1h)、7.96(d，j＝2.0hz，1h)、8.11(d，j＝9.0hz，2h)、8.44(d，j＝2.5hz，1h)。
(e)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12b)
將11b(0.57g，1.55mmol)、乙酸鈀(0.04g，0.16mmol)、三苯基膦(0.08g，0.31mmol)、三乙胺(0.22ml，1.55mmol)、碳酸氫鈉(0.26g，3.10mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.27ml，1.86mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4，rf＝0.33)純化以產生呈黃色固體的12b(0.58g，90.28％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.54(s，9h)、3.82(s，3h)、6.40(d，j＝16.0hz，1h)、6.58(d，j＝4.0hz，1h)、6.94(t，j＝9.0hz，2h)、7.64(d，j＝16.0hz，1h)、7.74(t，j＝4.0hz，1h)、7.97(d，j＝2.0hz，1h)、8.14(d，j＝9.0hz，2h)、8.54(d，j＝1.5hz，1h)。
(e)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13b)
將12b(0.58g，1.40mmol)及三氟乙酸(4.67ml)的混合物于室溫攪拌1小時。在該反應混合物中添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生13b(0.49g，97.66％)。1h-nmr(500mhz，cd3od)：δ3.82(s，3h)、6.57(d，j＝16.0hz，1h)、6.73(d，j＝4.0hz，1h)、7.03(t，j＝9.0hz，2h)、7.76(d，j＝16.0hz，1h)、7.83(t，j＝4.0hz，1h)、8.08(d，j＝9.0hz，2h)、8.24(d，j＝2.0hz，1h)、8.52(d，j＝2hz，1h)。
(e)-n-羥基-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(14b)
將13b(0.44g，1.23mmol)、edc(0.35g，1.85mmol)、hobt(0.20g，1.48mmol)、nmm(0.32ml，2.95mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.17g，1.48mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.38)來純化由移除溶劑所得殘留物。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(5ml)及10％tfa(水溶液)(5ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該白色固體以產生14b(0.37g，90.91％)。m.p.192.5至193.3。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.78(s，3h)、6.52(d，j＝16.0hz，1h)、6.81(d，j＝4.0hz，1h)、7.10(t，j＝9.0hz，2h)、7.54(d，j＝16.0hz，1h)、7.89(t，j＝4.0hz，1h)、8.03(d，j＝9.0hz，2h)、8.23(d，j＝1.5hz，1h)、8.55(d，j＝1.5hz，1h)。
5-溴-1-(3-甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(11c)
將5-溴-7-氮雜吲哚(0.35g，1.78mmol)、dmf(2ml)及60％nah(0.06g，2.67mmol)的混合物攪拌10分鐘，及在添加3-甲氧基苯磺酰氯(0.38ml，2.67mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生11c(0.57g，87.20％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.84(s，3h)、6.55(d，j＝4.0hz，1h)、7.09至7.11(m，1h)、7.37(t，j＝8.0hz，1h)、7.69至7.75(m，3h)、7.98(d，j＝2.0hz，1h)、8.46(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12c)
將11c(0.60g，1.63mmol)、乙酸鈀(0.04g，0.16mmol)、三苯基膦(0.09g，0.33mmol)、三乙胺(0.23ml，1.63mmol)、碳酸氫鈉(0.27g，3.26mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.29ml，1.96mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4，rf＝0.38)來純化由移除溶劑所得殘留物以產生呈黃色固體的12c(0.49g，72.53％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.54(s，9h)、3.84(s，3h)、6.40(d，j＝16.0hz，1h)、6.60(d，j＝4.0hz，1h)、7.09(t，j＝8.5hz，1h)、7.37(t，j＝8.5hz，1h)、7.64(d，j＝16.0hz，1h)、7.71至7.78(m，2h)、7.78(s，1h)、7.98(d，j＝2.0hz，1h)、8.56(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13c)
將12c(0.49g，1.18mmol)及三氟乙酸(3.93ml)的混合物于室溫攪拌1小時。在該反應混合物中添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生13c(0.39g，92.23％)。1h-nmr(500mhz，cd3od+dmso-d6)：δ3.86(s，3h)、6.62(d，j＝16.0hz，1h)、6.81(d，j＝4.0hz，1h)、7.23(t，j＝8.5hz，1h)、7.48(d，j＝8.0hz，1h)、7.69至7.74(m，2h)、7.78(d，j＝16.0hz，1h)、7.89(d，j＝4.0hz，1h)、8.31(d，j＝2.0hz，1h)、8.60(d，j＝2.5hz，1h)。
(e)-n-羥基-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(14c)
將13c(0.39g，1.09mmol)、edc(0.31g，1.64mmol)、hobt(0.18g，1.31mmol)、nmm(0.29ml，2.62mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.15g，1.31mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.50)來純化由移除溶劑所得產物。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(5ml)及10％tfa(水溶液)(5ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該白色產物以產生14c(0.30g，83.69％)。m.p.207.3至208.3。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.78(s，3h)、6.53(d，j＝15.5hz，1h)、6.84(d，j＝3.5hz，1h)、7.26(dd，j＝2.0、7.0hz，1h)、7.50至7.56(m，2h)、7.61至7.64(m，2h)、7.92(d，j＝4.0hz，1h)、8.25(d，j＝1.5hz，1h)、8.59(d，j＝1.5hz，1h)。
5-溴-1-(3，4-二甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(11d)
將5-溴-7-氮雜吲哚(0.35g，1.78mmol)、dmf(2ml)及60％nah(0.06g，2.67mmol)的混合物攪拌10分鐘，及在添加3，4-二甲氧基苯磺酰氯(0.63g，2.67mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生11d(0.58g，82.03％)，1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ3.89(s，3h)、3.92(s，3h)、6.52(d，j＝4.0hz，1h)、6.88(d，j＝8.5hz，1h)、7.71至7.73(m，2h)、7.76(t，j＝8.5hz，1h)、7.79至8.01(m，1h)、8.44(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(3，4-二甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12d)
將11d(0.58g，1.46mmol)、乙酸鈀(0.03g，0.15mmol)、三苯基膦(0.08g，0.29mmol)、三乙胺(0.20ml，1.46mmol)、碳酸氫鈉(0.25g，2.92mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.25ml，1.75mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4，rf＝0.10)純化以產生呈黃色固體的12d(0.60g，92.45％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.54(s，9h)、3.89(s，3h)、3.93(s，3h)、6.40(d，j＝16.0hz，1h)、6.59(d，j＝4.0hz，1h)、6.89(t，j＝8.5hz，1h)、7.64(d，j＝16.0hz，1h)、7.73(t，j＝4.0hz，1h)、7.78至7.80(m，2h)、7.98(d，j＝1.5hz，1h)、8.55(d，j＝1.5hz，1h)。
(e)-3-(1-(3，4-二甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13d)
將12c(0.60g，1.35mmol)及三氟乙酸(4.5ml)的混合物于室溫攪拌1小時。在該反應混合物中添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生13c(0.48g，91.55％)。1h-nmr(500mhz，cd3od+dmso-d6)：δ3.85(s，3h)、3.87(s，3h)、6.60(d，j＝16.0hz，1h)、6.77(d，j＝4.0hz，1h)、7.08(t，j＝9.0hz，1h)、7.74至7.75(m，2h)、7.78(d，j＝16.0hz，1h)、7.86(d，j＝4.0hz，1h)、8.29(d，j＝2.0hz，1h)、8.58(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(3，4-二甲氧基苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-n-羥基丙烯酰胺(14d)
將13d(0.64g，1.65mmol)、edc(0.48g，2.48mmol)、hobt(0.27g，1.98mmol)、nmm(0.44ml，3.96mmol)及dmf(2.5ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.23g，1.98mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.43)純化。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(6ml)及10％tfa(水溶液)(6ml)中，再次攪拌過夜。添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生14d(0.37g，63.85％)。m.p.212.3至213.5。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ3.78(s，3h)、3.79(s，3h)、6.53(d，j＝15.5hz，1h)、6.80(d，j＝4.0hz，1h)、7.12(t，j＝8.5hz，1h)、7.54(d，j＝15.5hz，1h)、7.64(d，j＝2.0hz，1h)、7.69(d，j＝8.5hz，1h)、7.89(d，j＝4.0hz，1h)、8.23(d，j＝1.5hz，1h)、8.59(d，j＝1.5hz，1h)。
5-溴-1-(4-氟苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(11e)
將5-溴-7-氮雜吲哚(0.35g，1.78mmol)、dmf(2ml)及60％nah(0.06g，2.67mmol)的混合物攪拌10分鐘，及在添加4-氟苯磺酰氯(0.52g，2.67mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生11e(0.59g，93.32％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ6.55(d，j＝4.0hz，1h)、7.17(t，j＝9.0hz，2h)、7.72(t，j＝4.0hz，1h)、7.99(d，j＝2.5hz，1h)、8.21至8.23(m，2h)、8.44(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12e)
將11e(0.59g，1.66mmol)、乙酸鈀(0.04g，0.17mmol)、三苯基膦(0.09g，0.33mmol)、三乙胺(0.23ml，1.66mmol)、碳酸氫鈉(0.28g，3.32mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.29ml，1.99mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4，rf＝0.28)純化以產生呈黃色固體的12e(0.44g，65.86％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.54(s，9h)、6.40(d，j＝16.0hz，1h)、6.61(d，j＝4.0hz，1h)、7.17(t，j＝8.5hz，2h)、7.64(d，j＝16.0hz，1h)、7.73(t，j＝4.0hz，1h)、7.98(d，j＝2.0hz，1h)、8.25(dd，j＝5.0、9.0hz，2h)、8.54(d，j＝1.5hz，1h)。
(e)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13e)
將12e(0.47g，1.06mmol)及三氟乙酸(4.24ml，4.24mmol)的混合物于室溫攪拌2小時。在該反應混合物中添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生13e(0.42g，95.84％)。1h-nmr(500mhz，cd30d)：δ6.58(d，j＝16.0hz，1h)、6.77(d，j＝3.5hz，1h)、7.29(t，j＝8.5hz，2h)、7.76(d，j＝16.0hz，1h)、7.85(t，j＝4.0hz，1h)、8.22至8.25(m，2h)、8.26(s，1h)、8.53(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-n-羥基-丙烯酰胺(14e)
將13e(0.36g，1.04mmol)、edc(0.30g，1.56mmol)、hobt(0.17g，1.25mmol)、nmm(0.27ml，2.50mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.15g，1.25mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.63)來純化由移除溶劑所得殘留物。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(4ml)及10％tfa(水溶液)(4ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該白色固體以產生14e(0.26g，86.69％)。m.p.213.6至214.5。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ6.52(d，j＝15.5hz，1h)、6.86(d，j＝4.0hz，1h)、7.47(t，j＝9.0hz，2h)、7.55(d，j＝15.5hz，1h)、7.93(d，j＝4.0hz，1h)、8.18至8.21(m，2h)、8.25(s，1h)、8.56(s，1h)。
5-溴-1-(4-氯苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(11f)
將5-溴-7-氮雜吲哚(0.35g，1.78mmol)、dmf(2ml)及60％nah(0.06g，2.67mmol)的混合物攪拌10分鐘，及在添加4-氯苯磺酰氯(0.56g，2.67mmol)之后，于室溫再次攪拌過夜。添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生11f(0.55g，83.14％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ6.56(d，j＝3.5hz，1h)、7.46(t，j＝8.5hz，2h)、7.71(t，j＝4.0hz，1h)、7.98(d，j＝2.5hz，1h)、8.12(d，j＝8.5hz，2h)、8.44(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12f)
將11f(0.49g，1.32mmol)、乙酸鈀(0.03g，0.13mmol)、三苯基膦(0.07g，0.26mmol)、三乙胺(0.18ml，1.32mmol)、碳酸氫鈉(0.22g，2.64mmol)及dmf(1.5ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.23ml，1.58mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4，rf＝0.35)來純化由移除溶劑所得殘留物以產生呈黃色固體的12f(0.38g，68.72％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.54(s，9h)、6.40(d，j＝16.0hz，1h)、6.62(d，j＝3.5hz，1h)、7.47(t，j＝9.0hz，2h)、7.64(d，j＝16.0hz，1h)、7.72(t，j＝4.0hz，1h)、7.98(d，j＝2.0hz，1h)、8.15(d，j＝8.5hz，2h)、8.54(d，j＝1.5hz，1h)。
(e)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13f)
將12f(0.54g，1.29mmol)及三氟乙酸(4.3ml)的混合物于室溫攪拌1小時。在該反應混合物中添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生13f(0.43g，91.88％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ6.63(d，j＝16.0hz，1h)、6.86(d，j＝4.0hz，1h)、7.67至7.74(m，3h)、7.94(t，j＝4.0hz，1h)、8.11(d，j＝8.5hz，2h)、8.41(d，j＝1.5hz，1h)、8.65(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)-n-羥基-丙烯酰胺(14f)
將13f(0.42g，1.16mmol)、edc(0.33g，1.74mmol)、hobt(0.19g，1.39mmol)、nmm(0.13ml，2.78mmol)及dmf(2ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.16g，1.39mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝2∶1，rf＝0.44)來純化由移除溶劑所得殘留物。于室溫下，由此獲得的油狀產物溶于meoh(5ml)及10％tfa(水溶液)(5ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀白色固體，藉由過濾收集該固體以產生14f(0.34g，86.53％)。m.p.210.4至211.5。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ6.52(d，j＝16.0hz，1h)、6.87(d，j＝4.0hz，1h)、7.56(d，j＝16.0hz，1h)、7.70(t，j＝8.5hz，2h)、7.93(d，j＝4.0hz，1h)、8.12(d，j＝8.5hz，2h)、8.25(s，1h)、8.56(s，1h)。
5-溴-1-(4-溴苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(11g)
將5-溴-7-氮雜吲哚(0.35g，1.78mmol)、dmf(2ml)及60％nah(0.06g，2.67mmol)的混合物攪拌10分鐘，及在添加4-溴苯磺酰氯(0.68g，2.67mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀黃色產物，藉由過濾收集該產物以產生11g(0.60g，81.20％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ6.56(d，j＝4.0hz，1h)、7.64(t，j＝9.0hz，2h)、7.71(t，j＝4.0hz，1h)、7.99(s，1h)、8.04(d，j＝9.0hz，2h)、8.44(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(4-(5-((e)-3-第三丁氧基-3-側氧基丙-1-烯基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸第三丁酯(12g)
將11g(0.60g，1.45mmol)、乙酸鈀(0.06g，0.30mmol)、三苯基膦(0.16g，0.58mmol)、三乙胺(0.40ml，2.90mmol)、碳酸氫鈉(0.48g，5.80mmol)及dmf(3ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.50ml，3.48mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4，rf＝0.50)純化以產生呈黃色固體的12g(0.71g，95.90％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.51(s，9h)、1.53(s，9h)、6.40(d，j＝16.0hz，1h)、6.41(d，j＝16.0hz，1h)、6.62(d，j＝4.0hz，1h)、7.51(d，j＝16.0hz，1h)、7.59(t，j＝8.5hz，2h)、7.63(d，j＝16.0hz，1h)、7.74(t，j＝4.0hz，1h)、7.98(d，j＝2.0hz，1h)、8.19(d，j＝8.5hz，2h)、8.54(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(4-(5-((e)-2-羧乙烯基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(13g)
將12g(0.71g，1.39mmol)及三氟乙酸(4.63ml)的混合物于室溫攪拌1小時。添加水以沉淀黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生13g(0.51g，92.09％)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ6.63(d，j＝16.0hz，1h)、6.65(d，j＝16.0hz，1h)、6.85(d，j＝4.0hz，1h)、7.57(d，j＝15.5hz，1h)、7.68(d，j＝16.0hz，1h)、7.91(d，j＝8.5hz，2h)、7.96(d，j＝4.0hz，1h)、8.10(d，j＝8.5hz，2h)、8.41(d，j＝2.0hz，1h)、8.67(d，j＝1.5hz，1h)。
(e)-n-羥基-3-(4-(5-((e)-3-(羥基胺基)-3-側氧基丙-1-烯基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(14g)
將13g(0.48g，1.20mmol)、edc(0.69g，3.60mmol)、hobt(0.39g，2.88mmol)、nmm(0.63ml，5.76mmol)及dmf(3ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.34g，2.88mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝4∶1，rf＝0.48)來純化由移除溶劑所得殘留物。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(2ml)及10％tfa(水溶液)(2ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀淺黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生14g(0.05g，38.90％)。m.p.188.7至190.5(分解)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ6.54(t，j＝16.0hz，2h)、6.86(d，j＝4.0hz，1h)、7.44(d，j＝15.5hz，1h)、7.54(d，j＝15.5hz，1h)、7.77(d，j＝8.5hz，2h)、7.93(d，j＝4.0hz，1h)、8.10(d，j＝8.5hz，2h)、8.25(s，1h)、8.56(s，1h)。
5-溴-1-(3-溴苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(11h)
將5-溴-7-氮雜吲哚(0.35g，1.78mmol)、dmf(2ml)及60％nah(0.06g，2.67mmol)的混合物攪拌10分鐘，及在添加3-溴苯磺酰氯(0.68g，2.67mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀白色產物，藉由過濾收集該產物以產生11h(0.63g，85.26％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ6.57(d，j＝3.5hz，1h)、7.38(t，j＝8.0hz，1h)、7.71(d，j＝4.5hz，2h)、7.99(d，j＝2.0hz，1h)、8.13(d，j＝8.0hz，1h)、8.33(s，1h)、8.46(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(3-(5-((e)-3-第三丁氧基-3-側氧基丙-1-烯基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸第三丁酯(12h)
將11h(0.63g，1.52mmol)、乙酸鈀(0.06g，0.30mmol)、三苯基膦(0.16g，0.60mmol)、三乙胺(0.42ml，3.04mmol)、碳酸氫鈉(0.52g，6.08mmol)及dmf(3ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.54ml，3.64mmol)之后，再次攪拌過夜。使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4，rf＝0.40)來純化由移除溶劑所得殘留物以產生呈黃色固體的12h(0.70g，90.19％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.53(s，9h)、1.54(s，9h)、6.40(d，j＝15.5hz，1h)、6.45(d，j＝16.0hz，1h)、6.62(d，j＝4.0hz，1h)、7.49至7.69(m，4h)、7.75(t，j＝4.0hz，1h)、7.98(d，j＝2.0hz，1h)、8.16至8.34(m，1h)、8.36(d，j＝1.5hz，1h)、8.56(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-3-(3-(5-((e)-2-羧乙烯基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(13h)
將12h(0.70g，1.37mmol)及三氟乙酸(4.57ml)的混合物于室溫攪拌1小時。添加水以沉淀黃色產物，藉由過濾收集該產物以產生13h(0.53g，97.10％)。1h-nmr(500mhz，cd3od+dmso-d6)：δ6.62(d，j＝16.0hz，2h)、6.83(d，j＝4.0hz，1h)、7.63(d，j＝8.0hz，1h)、7.69(d，j＝16.0hz，1h)、7.77(d，j＝16.0hz，1h)、7.94(d，j＝4.0hz，2h)、8.18(d，j＝8.0hz，1h)、8.31(d，j＝2.0hz，1h)、8.42(s，1h)、8.60(d，j＝2.0hz，1h)。
(e)-n-羥基-3-(3-(5-((e)-3-(羥基胺基)-3-側氧基丙-1-烯基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(14h)
將13h(0.57g，1.43mmol)、edc(0.82g，4.29mmol)、hobt(0.46g，3.43mmol)、nmm(0.75ml，6.86mmol)及dmf(3.5ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.40g，3.43mmol)，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝4∶1，rf＝0.43)純化。由此獲得的油狀產物隨后溶于meoh(3ml)及10％tfa(水溶液)(3ml)中，及于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀淺黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生14h(0.13g，67.83％)。m.p.219.4至221.3(分解)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ6.52(t，j＝15.5hz，1h)、6.59(d，j＝16.0hz，1h)、6.87(d，j＝4.0hz，1h)、7.50(d，j＝16.0hz，1h)、7.55(d，j＝15.5hz，1h)、7.64(t，j＝8.5hz，1h)、7.89(d，j＝8.0hz，1h)、7.94(d，j＝4.0hz，1h)、8.05(d，j＝8.0hz，1h)、8.25(s，1h)、8.34(s，1h)、8.59(s，1h)。
5-溴-1-(2-溴苯磺酰基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶(11i)
將5-溴-7-氮雜吲哚(0.35g，1.78mmol)、dmf(2ml)及60％nah(0.06g，2.67mmol)的混合物攪拌10分鐘，及在添加2-溴苯磺酰氯(0.68g，2.67mmol)之后，再次于室溫攪拌過夜。添加水以沉淀黃色產物，藉由過濾收集該產物以產生11i(0.66g，89.32％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ6.57(d，j＝4.0hz，1h)、7.44(t，j＝8.0hz，1h)、7.57(t，j＝8.0hz，1h)、7.63(d，j＝8.0，1h)、7.96(d，j＝4.0hz，1h)、7.99(d，j＝2.0hz，1h)、8.25(d，j＝1.5hz，1h)、8.61(d，j＝8.0hz，1h)。
(e)-3-(2-(5-((e)-3-第三丁氧基-3-側氧基丙-1-烯基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸第三丁酯(12i)
將11i(0.98g，2.36mmol)、pd2(dba)3(0.43g，0.47mmol)、[(t-bu)3ph]bf4(0.27g，0.94mmol)、三乙胺(0.66ml、4.72mmol)、碳酸氫鈉(0.79g，9.44mmol)及dmf(2.5ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.82ml，5.66mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝1∶4，rf＝0.45)純化以產生呈黃色固體的12i(1.17g，97.09％)。1h-nmr(500mhz，cdcl3)：δ1.52(s，9h)、1.56(s，9h)、5.99(d，j＝15.5hz，1h)、6.36(d，j＝16.0hz，1h)、6.59(d，j＝4.0hz，1h)、7.49至7.51(m，1h)、7.57至7.60(m，3h)、7.89(d，j＝4.0hz，1h)、7.95(s，1h)、8.29(d，j＝16.0hz，1h)、8.37(s，1h)、8.52至8.53(m，1h)。
(e)-3-(2-(5-((e)-2-羧乙烯基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(13i)
將12i(0.23g，0.45mmol)及三氟乙酸(1.5ml)的混合物于室溫攪拌1小時。添加水以沉淀黃色產物，藉由過濾收集該產物以產生13i(0.15g，83.67％)。1h-nmr(500mhz，cd3od+dmso-d6)：δ6.15(d，j＝16.0hz，1h)、6.55(d，j＝16.0hz，1h)、6.76(d，j＝4.0hz，1h)、7.66至7.74(m，4h)、7.91(d，j＝4.0hz，1h)、8.26(s，1h)、8.39至8.42(m，2h)、8.45(d，j＝16.0hz，1h)。
(e)-n-羥基-3-(2-(5-((e)-3-(羥基胺基)-3-側氧基丙-1-烯基)-1h-吡咯并[2，3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(14i)
將13i(0.90g，2.26mmol)、edc(1.30g，6.78mmol)、hobt(0.74g，5.42mmol)、nmm(1.20ml，10.84mmol)及dmf(3ml)的混合物攪拌10分鐘，及在于室溫添加鄰(四氫-2h-吡喃-2-基)羥胺(0.64g，5.42mmol)之后，再次攪拌過夜。移除溶劑后所得殘留物使用急驟管柱經硅膠(乙酸乙酯∶正己烷＝4∶1，rf＝0.45)純化。由此獲得的油狀產物于室溫溶于meoh(8ml)及10％tfa(水溶液)(8ml)中，及攪拌過夜。添加水以沉淀淺黃色固體，藉由過濾收集該固體以產生14i(0.38g，67.20％)。m.p.159.6至161.9(分解)。1h-nmr(500mhz，dmso-d6)：δ6.19(d，j＝15.5hz，1h)、6.49(d，j＝5.5hz，1h)、6.84(d，j＝4.0hz，1h)、7.51(d，j＝16.0hz，1h)、7.65至7.70(m，2h)、7.76(t，j＝7.0hz，1h)、7.86(d，j＝4.0hz，1h)、8.10(d，j＝15.5hz，1h)、8.24(s，1h)、8.27(d，j＝8.0hz，1h)、8.41(s，1h)。
hdac活性分析法
使化合物1至21、23、5a至5p、6a、7a、10a、14a至14i接受若干如下文描述的hdac活性分析法。
更特定而言，測試化合物的ic50值是藉由根據制造商指示進行熒光組蛋白去乙酰酶分析法來測定。對于泛hdac分析法而言，hela核萃取物用作組蛋白去乙酰酶源(biovisioninc.)。使用經純化的各種異構體的重組體組蛋白去乙酰酶蛋白質(bpsbioscienceinc.)進行組蛋白去乙酰酶異構體抑制分析法。反應是在0.1mol/lkcl、20mmol/lhepes/naoh(ph7.9)、20％甘油、0.2mmol/ldta、0.5mmol/ldtt及0.5mmol/l苯甲磺酰氟中進行。fluordelys底物及各種濃度(nmol/l至μmol/l)的測試化合物是在37℃于緩沖液中使用，該緩沖液含有25mmol/ltris-cl，ph8.0、137mmol/lnacl、2.7mmol/lkcl及1mmol/lmgcl2。以在360nm的波長激發測量熒光及檢測460nm的發光(tecanultra384)。包括陰性(無酶、無抑制劑、無hdac抑制活性的藥物)及陽性對照(不具有hdac抑制劑及熟知hdac抑制劑saha的hela核萃取物)。半數最大抑制濃度(ic50)測定為測試化合物濃度，該濃度導致在培養期間hdac活性增加相對對照孔減少50％。對于各測試化合物重復三次進行反應。各點代表復本的平均值±sd。
化合物1至21、23、5a至5p、6a、7a、10a、14a至14i各者顯示在kb細胞系(口腔癌)中抑制hdac的低于6μm的ic50值。其中，化合物5、6、7、12、5a至5j、5n至5p、7a及14a至14f各者具有低于1μm的ic50值。值得注意的是，化合物7顯示在全部10個測試細胞系中的抑制活性。參見下文表2。
表2.在人類癌細胞系中抑制hdac
化合物5b及14a在24個細胞系中的抑制作用顯示在下文表3中。
表3.5b及14a抗人類癌細胞系的ic50值
二維/三維細胞生長抑制分析法
使化合物5b及7接受按照下述程序的二維/三維細胞生長抑制分析法。
對于二維分析法而言，將處于對數期的癌細胞于37℃及5％co2下培養于96孔板的完全培養基中，培養過夜，及使用各種濃度測試化合物處理持續三個繁殖期。隨后用含有0.5mg/mm的最終濃度的溴化3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基四唑鎓(mtt)的無血清培養基培養細胞4小時。mtt由代謝活細胞轉化為三苯基甲臜。三苯基甲臜隨后在37℃溶于含有20％sds的50％dmf溶液中過夜。使用spectramaxm5微板讀取儀(moleculardevices，uk)于570nm測量吸亮度。
對于三維分析法而言，將處于對數期的細胞于37℃及5％co2下培養在96孔板的含50％基質膠的完全培養基中，培養5天，及使用適當濃度的測試化合物處理持續三個繁殖期。在顯微鏡下取球體影像，及藉由mtt分析法來測定球體細胞存活率。
結果顯示在下文表4至7中。
表4.與紫杉醇、長春新堿、亞德里亞霉素及saha相比的化合物7
表5.抗前列腺癌細胞化合物7的ic50值
上文表5顯示化合物7及saha對前列腺癌細胞的2d細胞培養物及3d細胞球體培養物的抗腫瘤效應。在2d培養物中，細胞在完全培養基中培養過夜；在3d細胞球體培養物中，細胞在由gfr-matrigeltm(bdbiosciences，目錄號356231)及完全培養基(v∶v＝1∶1)組成的半固體培養基中培養五至七天以允許形成三維細胞球體。該等細胞(在2d培養物中)及細胞球體(在3d培養物中)經測試化合物處理72小時，及隨后接受mtt比色分析法。各值代表三個獨立實驗的平均值。在半固體中形成的細胞球體及對細胞球體的藥物影響是使用相差光顯微鏡來檢測。化合物5b在人類前列腺癌細胞的二及三維細胞培養物系統中均具有相似抗增殖活性。
表6.與紫杉醇、長春新堿、亞德里亞霉素及saha相比的化合物5b
表7.在人類前列腺癌細胞的二及三維細胞培養物系統中的化合物5b的ic50值
測試化合物7抗3d培養物中生長的pc3前列腺癌細胞的抗腫瘤效應。更特定而言，在半固體中形成的細胞球體及對細胞球體的藥物影響是使用相差光顯微鏡檢測。使用4x放大、10x放大、及20x放大分析細胞的3d結構。化合物7以濃度依賴性方式破壞pc3腫瘤的球體結構。化合物7的細胞毒性在3d球體培養物及2d培養物中均強有效。
sds-page及西方墨點分析
使化合物7、5b、及14a接受按照下文描述程序的sds-page及西方墨點分析。
更特定而言，最初將處在對數期中的細胞以1x106的密度接種在100mm2盤中。在使用各種濃度測試化合物(即，0.5x、1x、2x、及4xic50；ic50化合物指示活體外效能)處理指定時間(即，24及48小時)之后，收集貼附細胞以用于蛋白質萃取物制備。簡言之，使用含有1mmdtt、1mmpmsf及蛋白酶抑制劑的細胞裂解試劑cellytictmm(sigma-aldrich)裂解細胞用于完整細胞溶胞產物制備。等量溶胞產物(在蛋白質基礎上)隨后使用sds-page去分化，涂印在pvdf膜上，與各種特異性一級抗體結合，及隨后由適當二級抗體探測。免疫反應譜帶是使用ecl方法來檢測及在kodakbio-maxmr薄膜上可見。
萃取獲自細胞的蛋白質及使其接受西方墨點分析。β肌動蛋白用作內部對照。該去乙酰酶分析法是基于均勻熒光釋放分析法。使用底物及各種濃度測試化合物(即，對于化合物7及5b，1nm、10nm、100nm及1000nm；對于化合物14a，0.5x、1x、2x及4xic50)培育經純化重組的hdac酶24小時。在去乙酰底物的熒光團之后，檢測熒光標記。
化合物7以濃度依賴性方式抑制pc3細胞中的hdac1至10的活性持續48小時。
在24小時研究中，化合物5b在50nm或更低下誘發hdac1及hdac2的抑制及在約100nm誘發hdac6的抑制。
化合物7、5b及14a均以濃度依賴性方式誘發pc3細胞中的組蛋白及α-微管蛋白乙酰化作用。此外，化合物5b亦誘發在人類bjabb細胞淋巴瘤及mda-md-231乳癌中的組蛋白及α-微管蛋白的乙酰化作用；及化合物14a亦誘發在人類du145細胞中的組蛋白及α微管蛋白的乙酰化作用。
細胞周期分析法
使化合物7、5b及14a接受按照下文描述程序的細胞周期分析法。
更特定而言，起初將處在對數期中的細胞以1x106的密度接種在100mm2盤中。在使用各種濃度的測試化合物處理指定時間之后，細胞經胰蛋白酶處理，使用pbs清洗，及固定在70％乙醇中。經固定細胞隨后使用50μg/ml核糖核酸酶處理及使用50μg/ml碘化丙啶于室溫下染色20分鐘。藉由bdfacscalibur流式細胞儀(bdbioscience)測定dna含量。對于各個分析法而言，計數10,000個細胞，及使用modfitlt軟件(veritysotfwarehouse，inc.)來計算各個時期的細胞百分數。
使用各種劑量(即，0.5x、1x、2x、4x、及8xic50)的化合物7、5b及14a處理人類雄激素依賴性pc3前列腺癌細胞不同時間(即，對于化合物7及5b，24及48小時；對于化合物14a，6、12、24及48小時)。
化合物7、5b及14a全部誘發在雄激素非依賴性pc3前列腺癌細胞中的細胞周期抑制及細胞凋亡。化合物5b亦誘發p21上調。
活體外c6膠質瘤中的細胞增殖
使用化合物7處理大鼠c6膠質瘤細胞系及根據下文描述程序進行分析。
c6膠質瘤細胞系系獲自美國菌種保藏中心(americantypeculturecollection)。使用媒劑或者化合物7處理經培養細胞24、48、或72小時及進一步藉由mtt分析法(liu等人，toxicol.res，2015)測量。簡言之，于37℃下，使用0.25mg/mlmtt(sigma)培育細胞1小時及在晶體于dmso中溶解之后由分光亮度法(μquant，bio-tak)在595nm測量mtt三苯基甲臜。
對于細胞周期分析而言，使用各種濃度化合物7預處理c6膠質瘤細胞系指定時間(參見「細胞周期分析」，前述)。在處理之后，細胞進一步經胰蛋白酶處理，使用pbs清洗，及固定在70％乙醇中。隨后使用核糖核酸酶處理經固定細胞及使用50mg/ml碘化丙啶于室溫下染色20分鐘。指示dna含量的染色熒光強度是藉由bdfacscalibur流式細胞儀(bdbiosciences)來測定。對于各個分析而言，計數10,000個細胞，及計算各個時期(即，subg1、g0至g1、s、或g2-m)中細胞的百分數。
出乎意料，化合物7以濃度依賴性方式抑制細胞增殖及在30μm顯示約50％細胞增殖抑制。相對而言，saha(一種hdac6抑制劑)在相同濃度不發揮任何抑制作用。
活體外c6膠質瘤細胞凋亡
使用化合物7處理大鼠c6膠質瘤細胞系及按照下文描述程序進行分析。
細胞凋亡系藉由乳酸脫氫酶(ldh)分析法進行分析。在實驗之后離心培養基及使用ldh細胞毒性檢測套組(roche)檢測釋放至培養基中的ldh活性。可藉由以下等式測定細胞毒性百分數：[(實驗組-對照組)/(經氚核-100處理組(100％最大凋亡)-對照組)]x100％。已發現該測試化合物以濃度依賴性方式誘發細胞凋亡。意外地顯示在3天后于30μm下誘發約100％細胞凋亡，相比較，藉由saha誘發約70％。
活體外人體神經膠母細胞瘤(u87mg或gbm8401)中細胞存活率
使用化合物7處理u87mg人類神經膠母細胞瘤細胞系及根據下文描述程序進行分析。
藉由mtt分析法評定細胞存活率。簡言之，在37℃使用0.25mg/mlmtt(sigma)培養細胞1小時及在晶體于dmso中溶解之后由分光亮度法(μquant，bio-tek)于595nm測定mtt三苯基甲臜。
化合物7以濃度依賴性方式降低人類神經膠母細胞瘤(u87mg或gbm8401)細胞的存活率及在30μm顯示約70％降低細胞存活率。
活體內hdac抑制分析法
使化合物7接受根據下文描述程序的小鼠活體內hdac抑制分析法。
更特定而言，在人類pc3異種移植的小鼠中檢測化合物7的抗腫瘤效應。采用源自臺灣實驗動物中心(nationallaboratoryanimalcenter，taiwan)的皮下接種5x106個pc3細胞的無特異性病原體雄性無胸腺小鼠(菌株balb/cann.cg-foxn1nu/crlnarl)。隨后在無特異性病原體條件下飼養該等小鼠及提供無菌水及食物。當腫瘤體積達到150至200mm3時，將小鼠隨機分組及藉由經口投與使用媒劑對照及25mg/kg化合物7處理4、8、及24小時(n＝3)，及隨后在指定時間殺死。獲得腫瘤樣品及于液氮中冷凍再于-80℃儲藏。萃取腫瘤蛋白質及接受西方墨點分析。β肌動蛋白用作內部對照。
藉由監測pc3異種移植模型中的p21、p27、組蛋白及α-微管蛋白乙酰化作用，化合物7于25mg/kg下在抑制hdac方面有效。
活體內抗腫瘤活性分析法
在根據下文描述程序的活體內抗腫瘤活性分析法中測試化合物7及5b。
在具有人類pc3前列腺癌細胞或hct116結腸直腸癌細胞的異種移植小鼠中檢測該兩種測試化合物的抗腫瘤效應。
將5百萬個pc3細胞皮下接種至源自臺灣實驗動物中心的無特異性病原體雄性無胸線小鼠(菌株balb/cann.cg-foxn1nu/crlnarl)。隨后在無特異性病原體條件下飼養小鼠及提供無菌水及食物。當腫瘤體積達到150至200mm3時，將小鼠隨機分組及使用媒劑對照或25/50/100mg/kg的化合物7或5b處理。藉由經口投與，每天投與該化合物一次，5天/周持續2周(n＝6)。一周兩次地測量腫瘤體積及體重變化。在實驗結束時(首次給藥后第25天)，在含co2室中使動物安樂死，及收集腫瘤并固定在甲醛中。進行末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dutp缺口末端標記分析法(tunel)檢測細胞凋亡。使用fitc原位細胞凋亡檢測套組(roche)及熒光顯微鏡分析腫瘤組織切片。使用經脫氧核糖核酸酶處理的組織作為陽性對照。綠色熒光標記核表示已引發dna片段化。
在首次給藥后第25天，25mg/kg及50mg/kg的化合物7均抑制人類pc3異種移植生長約50％而不引起大幅度體重改變。
在首次給藥后第22天，25mg/kg、50mg/kg及100mg/kg的化合物7亦抑制人類結腸直腸hct116異種移植生長約50至60％，仍然不引起大幅度體重改變。
在首次給藥后第29天，50mg/kg的化合物5b抑制人類pc3異種移植生長約70％。出乎意料地，100mg/kg的化合物5b完全抑制人類pc3異種移植生長及在首次給藥后第8天至第29天達到腫瘤退化。
化合物7對抗人類神經膠母細胞異種移植的活體內抗腫瘤活性
在異種移植小鼠模型中，在人類神經膠母細胞瘤(u87-mg-lucneo細胞)中檢測化合物7的抗腫瘤效應。使用一種hdac6抑制劑(即，saha)及臨床第一線及抗神經膠母細胞瘤藥物替莫唑胺(temozolomide)(tmz)作為對照。
5至6周齡雄性無胸腺裸小鼠獲自biolasco(臺灣)及維持在無特異性病原體設施中。全部實驗程序由臺北醫科大學動物保護及使用委員會協會核準。使用腹膜腔內注射賽拉嗪(xylazine)(sigma)及唑拉西泮(zolazepam)(zoletil50，virbac)麻醉各裸小鼠，及隨后固定在立體定位架中。如先前所述(liu等人，toxicol.res.，2015)，將表現熒光酶的u87細胞(含于pbs中的106個細胞)顱內植入右紋狀體。植入一周后，使用tmz(50mg/kg，p.o.)、saha(150mg/kg，p.o.)或化合物7(50至100mg/kg，p.o.)處理裸小鼠及在包括媒劑組的4組中分析其存活率。存活率分析顯示化合物7與tmz相比意外地較長地延長存活。
原位腫瘤尺寸測量
本實驗中使用如上文所述的經藥物或媒劑處理的異種移植裸小鼠的另一平行組處理。
生物發光ivis2000成像系統用于測量如先前描述(liu等人，toxicol.res.，2015)的體內腫瘤尺寸。成像分析揭示低劑量的化合物7(25mg/kg)與較高劑量的saha(150mg/kg)或相同劑量的tmz(25mg/kg)相比降低腫瘤尺寸更多。
其他實施例
無需進一步詳細描述，據信熟習此項技術者可基于上文描述，將本發明運用至其完整程度。本文列舉的全部公開案以引用的方式并入本文中。
在本說明書中揭示的全部特征可以任何組合方式組合。在本說明書中揭示的各個特征可由用于相同、等效、或相似目的的替代特征替代。由此，除非另作明確說明，否則揭示的各個特征僅是一系列等效或相似特征的一實例。
根據上文描述，熟習此項技術者可輕易確定本發明的基本特征，及在不脫離其主旨及范圍下，可制作本發明的各種變化及改良以使其適應各種用途及條件。例如，亦可制備及篩選結構相似于本發明化合物的化合物針對抗吲哚胺2，3-二加氧酶(ido)/色胺酸2，3-二加氧酶(tdo)的抑制活性及治療ido/tdo相關聯病狀。由此，其他實施例亦在申請專利范圍內。