本發明涉及醫藥化工領域，具體涉及常壓柱層析制備高純度6’-O-反式桂皮酰梓醇的方法。
背景技術：
已有的制備6’-O-反式桂皮酰梓醇的主要技術為采用高壓制備液相進行分離制得高純度的6’-O-反式桂皮酰梓醇，此法上樣量小、效率低、耗材昂貴，增加了6’-O-反式桂皮酰梓醇的生產成本；另種方法所用溶劑為丙酮，丙酮易燃、易揮發，有毒，為后期的殘留檢查帶來麻煩，同時也不利于工業化生產過程中的勞動保護。本技術采用常壓方法，上樣量大、成本低、效率高，采用無毒性溶劑等優點，特別適用于大規模工業化生產。
技術實現要素：
針對上述技術問題，本發明提供一種方法簡單、成本低、五毒的6’-O-反式桂皮酰梓醇提純方法。
具體技術方案為：
一種分離純6’-O-反式桂皮酰梓醇的方法，其步驟包括：
(1)先用2倍體積2mol/L的NaOH洗滌樹脂，用蒸餾水洗至中性后，再用2倍體積的2mol/LHCl洗滌，最后用蒸餾水洗至中性，得到處理好的樹脂，備用；將制備10-香莢酰梓醇后所剩的提取物為原料加入乙醇提取后獲得提取液；提取液沉淀后得到上清液；
(2)將步驟(1)處理好的樹脂各取30mL置于錐形瓶，加入上清液50mL，于室溫下振蕩6h，再用50mL30％濃度的乙醇溶液解吸，進行靜態吸附解析，得到型號為D3520、D4020、NKA-9、SIPI-DA201、D14和HD-1樹脂；
(3)將步驟(2)得到的樹脂進行動態吸附及解吸，取50mL上清液上樹脂柱，然后用50mL30％濃度的乙醇洗脫，檢測洗脫液中6’-O-反式桂皮酰梓醇含量，得到大孔樹脂NKA-9；
(4)將步驟(3)的大孔樹脂NKA-9，取50mL上清液上柱，用50mL濃度為30-70％的乙醇，pH2-7，洗脫，得到6’-O-反式桂皮酰梓醇提取物，并收集洗脫液；
(5)將步驟(4)所得的6’-O-反式桂皮酰梓醇提取物過0.45μm濾膜，再采用高效液相色譜儀進行表征；
(6)將步驟(4)的洗脫液旋轉蒸發除去乙醇，將所得的濃縮液用乙酸乙酯萃取，重復三次，合并水相，用旋轉蒸發儀濃縮得6’-O-反式桂皮酰梓醇濃縮液；
(7)將步驟(6)得到的6’-O-反式桂皮酰梓醇濃縮液上樣，用凝膠色譜柱分離純化，收集6’-O-反式桂皮酰梓醇，用高效液相色譜儀進行表征。
步驟(4)所述的6’-O-反式桂皮酰梓醇提取純化的條件為：預先用檸檬酸調乙醇的pH至2-3，再用50％濃度的乙醇洗脫。
本發明提供的一種分離純6’-O-反式桂皮酰梓醇的方法，工藝方法簡單、成本低、五毒的6’-O-反式桂皮酰梓醇提純方法。
具體實施方式
以下結合實施例對本發明作進一步的說明，但本發明不僅限于這些實施例，在未脫離本發明宗旨的前提下，所作的任何改進均落在本發明的保護范圍之內。
一種分離純6’-O-反式桂皮酰梓醇的方法，其步驟包括：
(1)先用2倍體積2mol/L的NaOH洗滌樹脂，用蒸餾水洗至中性后，再用2倍體積的2mol/LHCl洗滌，最后用蒸餾水洗至中性，得到處理好的樹脂，備用；將制備10-香莢酰梓醇后所剩的提取物為原料加入乙醇提取后獲得提取液；提取液沉淀后得到上清液；
(2)將步驟(1)處理好的樹脂各取30mL置于錐形瓶，加入上清液50mL，于室溫下振蕩6h，再用50mL30％濃度的乙醇溶液解吸，進行靜態吸附解析，得到型號為D3520、D4020、NKA-9、SIPI-DA201、D14和HD-1樹脂；
(3)將步驟(2)得到的樹脂進行動態吸附及解吸，取50mL上清液上樹脂柱，然后用50mL30％濃度的乙醇洗脫，檢測洗脫液中6’-O-反式桂皮酰梓醇含量，得到大孔樹脂NKA-9；
(4)將步驟(3)的大孔樹脂NKA-9，取50mL上清液上柱，用50mL濃度為30-70％的乙醇，pH2-7，洗脫，得到6’-O-反式桂皮酰梓醇提取物，并收集洗脫液；
(5)將步驟(4)所得的6’-O-反式桂皮酰梓醇提取物過0.45μm濾膜，再采用高效液相色譜儀進行表征；
(6)將步驟(4)的洗脫液旋轉蒸發除去乙醇，將所得的濃縮液用乙酸乙酯萃取，重復三次，合并水相，用旋轉蒸發儀濃縮得6’-O-反式桂皮酰梓醇濃縮液；
(7)將步驟(6)得到的6’-O-反式桂皮酰梓醇濃縮液上樣，用凝膠色譜柱分離純化，收集6’-O-反式桂皮酰梓醇，用高效液相色譜儀進行表征。
步驟(4)所述的6’-O-反式桂皮酰梓醇提取純化的條件為：預先用檸檬酸調乙醇的pH至2-3，再用50％濃度的乙醇洗脫。
以上所述實施例僅表達了本發明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對本發明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發明的保護范圍。因此，本發明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。