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一種降解土壤中抗生素的混合菌劑及其制備方法與流程

文檔序號:11144940閱讀:1084來源:國知局

本發明涉及微生物技術領域,特別是一種降解土壤中抗生素的混合菌劑及其制備方法。



背景技術:

抗生素(四環素類、青霉素類、磺胺嘧啶類、喹諾酮類等)是一種以低微濃度即能抑制或影響它種生物機能的化學物質。它的發現與應用,在人類保健及動植物病蟲害防治方面發揮了巨大的作用。但是,隨著其大量生產及應用,污染問題也變得越來越嚴重,其濫用可造成抗生素普遍存在于環境中(尤其是土壤環境中),造成土壤環境的嚴重污染,進而危及人類健康。我國抗生素污染來源主要有三個方面:

一是醫用抗生素污染。醫用抗生素污染被認為是目前抗生素污染的主要途徑之一,抗生素已被廣泛地用來保護人類的健康,據世界衛生組織調查顯示,目前我國住院患者抗生素藥物使用率高達80%,其中使用廣譜抗生素和聯合使用兩種以上抗生素的占58%,遠遠高于30%的國際水平。而家庭自備抗生素的也已達80%。與世界其它國家比,我國已成為世界上濫用抗生素最為嚴重的國家之一。

二是飼用抗生素污染。由于抗生素成本低,自20世紀50年代以來,被廣泛用在畜禽養殖中,在畜禽業及水產養殖業中,用作動物的疾病預防劑及生長促進劑來提高生長速率獲得較大的經濟效益。目前,大量的飼用抗生素作為飼料添加劑使用,稱之為抗菌生長促進劑(antimicrobial growthpromoter,AGP)。AGP在使用時,動物本身并無明確的病癥,目的也并不是為了治療某種疾病,而是為促進動物的生長,提高畜禽生產效率。

三是農用抗生素污染。利用抗生素防治植物病害,很早就有人研究。最早在農業上大面積應用的抗生素要推鏈霉素、土霉素及其混合液“農霉素”。它們對蘋果、梨、胡桃、柑桔、煙草、蔬菜、豆類等植物的細菌性病害等有特效,對少數真菌性病害如霜霉、疫霉等也有防治作用。殺稻瘟菌素是第一個在大面積上應用并得到十分成功的農用抗生素,它曾在日本稻瘟病大流行的1963年發揮了巨大作用。

據統計,中國是世界上最大的抗生素生產和消費國,年產21萬t,每年生產2.8萬t的青霉素和1萬t的土霉素,分別占世界總產量的60%和65%。大多數醫藥抗生素被設計成能夠迅速從體內排出,因此,通常多達30~90%的抗生素以母體化合物排出體外。長期服用抗生素的養殖動物,其腸道菌群產生耐藥菌株,耐藥基因隨糞便進入環境;另外,水產養殖廢水、制藥廠廢水和醫院廢水等排放致使環境中抗生素污染物不斷積聚進而誘導耐藥基因。在自然界,抗生素耐藥因子可以通過多種途徑如土壤、食水、糞便、微生物、植物、動物和人之間相互傳遞。土壤含有豐富的微生物資源,如果抗生素污染導致耐藥菌產生,將可導致土壤成為巨大的耐藥基因庫。若某種致病菌或條件致病菌獲得某一種或幾種抗藥因子,則會給社會帶來巨大的潛在危害。抗生素可通過多個途徑進入環境,特別是進入土壤環境以后,可使土壤微生物區系發生變化。抗生素可誘導菌體內產生耐藥基因,又由于耐藥基因的易傳播性,將極易產生高度耐藥的多重耐藥菌,使土壤變成一個極大的耐藥基因庫。研究表明,自2000—2015年,土壤中的抗生素耐藥基因數量急劇增長。如果耐藥基因從非致病菌轉入致病菌,則可對人類造成相當大的危害。

減少抗生素的使用是解決抗生素污染的根本出路,抗生素殘留的去除也是減少抗生素污染的有效途徑。土壤中抗生素污染的消除方法有許多,包括物理的、化學的和生物的。傳統的物理方法(以客土、土壤淋洗、施加穩定劑為主)和化學方法(包括氧化、還原和水解)成本高,可能產生新的污染物,且作用相對較慢。利用生物或生物產品來降解污染物的生物修復方法具有無毒、無殘留、無二次污染等優點,是消除和降解抗生素殘留的一種安全、有效、廉價的方法。目前,國外許多專家學者致力于研究土壤中抗生素的生物降解技術,國內也有許多土壤中抗生素降解技術以及降解微生物篩選方面的研究報道,已報道的能降解土壤中抗生素的微生物有細菌、真菌、放線菌和藻類等。例如,王立群等從內酰胺環類抗生素生產廢水中分離篩選到了4株對此類抗生素具有高效降解作用并有較強耐受能力的效應菌株,它們分別為不動桿菌屬、假單胞菌屬、埃希菌屬和芽孢桿菌屬;王永杰等從污泥中分離篩選到1株以共代謝方式可廣譜降解抗生素的芽孢桿菌,初步鑒定為地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)。

國內外研究比較多的降解抗生素的微生物大部分是專一性裂解,僅起到降解某一類抗生素的作用,降解范圍具有局限性,并且降解率較低。

中國專利(專利申請號為201310148812.6)公開的“一種抗生素藥物紅霉素高效降解菌劑的制備方法”,包括:(1)活性污泥接入培養基中,以梯度壓力式馴化法馴化;馴化后,靜置,取上層水樣,梯度稀釋后采用涂布分離法和平板劃線法分離,然后再進行培養、純化,將分離出的菌株接種至牛肉膏和蛋白胨培養基中,振蕩培養至其處于對數生長期;(2)將上述培養所得的菌株接入培養基中培養,即得。該發明的制備方法簡單易行、安全性高、成本低;所得的紅霉素降解菌劑使用方便,能夠高效降解抗生素藥物紅霉素,而且菌株易于滅活,能夠應用于水處理中紅霉素的有效去除。

另一中國專利(專利申請號為201410348058.5)公開的“菌根真菌菌劑及其在降解殘留四環素類抗生素方面的應用”,該菌劑包括培養基質以及混于所述培養基質中的叢枝菌根真菌的孢子和/或菌絲。所述菌根真菌菌劑在降解殘留四環素類抗生素方面的應用具體為在四環素類抗生素污染的土壤中接種上述菌根真菌菌劑,然后再在該土壤中播種宿主植物,從而構建四環素類抗生素污染的土壤修復體系。宿主植物生長90-120天收獲后測定土壤中四環素類抗生素的濃度,其降解率可達20-60%。

還有中國專利(專利申請號為201610807117.X)公開的“一種降解抗生素與農藥殘留的復合微生物菌劑及其制備與應用”,該發明的復合微生物菌劑按各活體菌占復合菌粉活菌總數的重量百分比配制成多菌體復合菌粉,其中,枯草芽孢桿菌10-15%、黑曲霉10-15%、膠質芽孢桿菌10-15%、糞腸球菌10-15%、地衣芽孢桿菌8-12%、巨大芽孢桿菌8-12%、熒光假單胞菌8-12%、植物乳桿菌5-8%、多粘芽孢桿菌5-8%、嗜熱鏈球菌6-8%。該發明的復合微生物菌劑具有降解抗生素與農藥殘留、有機物發酵腐熟、功能性肥料及修復環境的作用,應用于農業與生態環境,可解決養殖排泄物中抗生素殘留的二次污染及有機廢棄物資源化利用的難題,實現土壤中抗生素與農藥殘留的生物降解,對農業生態環境修復及保障人類健康具有重要價值與現實意義。



技術實現要素:

本發明的目的在于提供一種可以降解土壤中抗生素的生物菌劑,能有效降解土壤中殘留的多種抗生素,減輕對環境的污染。

為實現上述目的,本發明所采取的技術措施是發明一種降解土壤中抗生素的混合菌劑,是由枯草芽孢桿菌J5P2和假單胞菌J2的菌液按(0.1-3)∶1的體積比混合而成。

其優化的技術方案一是由枯草芽孢桿菌J5P2和假單胞菌J2的菌液按0.1∶1的體積比混合而成。

其優化的技術方案二是由枯草芽孢桿菌J5P2和假單胞菌J2的菌液按0.5∶1的體積比混合而成。

其優化的技術方案三是由枯草芽孢桿菌J5P2和假單胞菌J2的菌液按1∶1的體積比混合而成。

其優化的技術方案四是由枯草芽孢桿菌J5P2和假單胞菌J2的菌液按1.5∶1的體積比混合而成。

其優化的技術方案五是由枯草芽孢桿菌J5P2和假單胞菌J2的菌液按2∶1的體積比混合而成。

其優化的技術方案六是由枯草芽孢桿菌J5P2和假單胞菌J2的菌液按2.5∶1的體積比混合而成。

其優化的技術方案七是由枯草芽孢桿菌J5P2和假單胞菌J2的菌液按3∶1的體積比混合而成。

與此同時,還提供一種降解土壤中抗生素的混合菌劑的制備方法,其制備過程如下:

㈠、混懸液配制:取抗生素污染的土壤,按1:9的重量比加入到滅菌水中,攪拌成混懸液,備用;

㈡、菌落培養:

①、培養基制備:分別取NaCl 0.1g、KH2PO4 0.05g、K2HPO4 0.15g、NH3NO3 0.1g、MgSO4·7H2O 0.01g、瓊脂1.5g,混合均勻,加蒸餾水至100ml,調節pH值至5.5~7.5,再高壓滅菌后冷卻至50℃,然后,加入土霉素,使其終質量濃度為100mg/L,即得土霉素基礎鹽固體培養基,備用;

②、培養:將混懸液用滅菌水10~120倍比稀釋,然后涂布于土霉素基礎鹽固體培養基平板上,在25~37℃下,培養1~3天,成為培養菌落,備用;

㈢、菌株分離:在經過培養的土霉素基礎鹽固體培養基平板上挑取單菌落,通過平板劃線,分離純化出細菌菌株,再經生理生化和16S rDNA測序鑒定,保留枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)J5P2和假單胞菌(Pseudomonas sp.)J2,備用;

㈣、傳代馴化:

①、馴化:將分離純化的枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株,再經土霉素基礎鹽固體培養基傳代馴化,其方法是:將枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株接種入質量濃度為100mg/L的土霉素基礎鹽固體培養基上,在25~37℃下培養1~3天后;再接種入質量濃度為200mg/L的土霉素基礎鹽固體培養基上,在25~37℃下培養1~3天,……,以此類推,連續傳代培養,每次使土霉素質量濃度增加100mg/L,至土霉素最終質量濃度達500mg/L,完成傳代馴化,分別成為馴化后的枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株,備用;

②、LB培養基制備:分別取胰蛋白胨1g、酵母提取物0.5g、氯化鈉1g、瓊脂1.5g,加蒸餾水至100mL,搖動容器,直至溶質溶解,用5mol/L的NaOH調節pH值至7.0,再用去離子水定容至1L,然后在15psi高壓下蒸汽滅菌18-24min,即得LB培養基(液體),備用;

③、保存:將馴化后的枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株分別接種于LB培養基斜面,制成斜面菌種,-4℃保存,備用;

㈤、種菌液制備:在pH值5.5~7.5,取保存的枯草芽孢桿菌J5P2斜面菌種和假單胞菌J2斜面菌種,在土霉素質量濃度為100mg/L的土霉素基礎鹽培養基上活化24h~72h后,分別挑取枯草芽孢桿菌J5P2的單菌落和假單胞菌J2的單菌落接種于LB培養基中培養至對數生長期,5000r/min離心10min,收集菌體,經0.05mol/L、pH7.4的Tris-HCl洗滌3次,再用0.05mol/L、pH7.4的Tris-HCl調整菌液濃度,使其濃度為1×1010個/mL±0.5%,分別成枯草芽孢桿菌J5P2種菌液和假單胞菌J2種菌液,備用;

㈥、混合菌劑制備:將枯草芽孢桿菌J5P2種菌液和假單胞菌J2種菌液按(0.1~3)∶1的體積比混合,即成降解土壤中抗生素的混合菌劑。

其降解土壤中抗生素的混合菌劑的制備方法的優化技術方案的制備過程如下:

㈠、混懸液配制:取抗生素污染的土壤,按1:9的重量比加入到滅菌水中,攪拌成混懸液,備用;

㈡、菌落培養:

①、培養基制備:分別取NaCl 0.1g、KH2PO4 0.05g、K2HPO4 0.15g、NH3NO3 0.1g、MgSO4·7H2O 0.01g、瓊脂1.5g,混合均勻,加蒸餾水至100ml,調節pH值至6.5,再高壓滅菌后冷卻至50℃,然后,加入土霉素,使其終質量濃度為100mg/L,即得土霉素基礎鹽固體培養基,備用;

②、培養:將混懸液用滅菌水100倍比稀釋,然后涂布于土霉素基礎鹽固體培養基平板上,在30℃下,培養2天,成為培養菌落,備用;

㈢、菌株分離:在經過培養的土霉素基礎鹽固體培養基平板上挑取單菌落,通過平板劃線,分離純化出細菌菌株,再經生理生化和16S rDNA測序鑒定,保留枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)J5P2和假單胞菌(Pseudomonas sp.)J2,備用;

㈣、傳代馴化:

①、馴化:將分離純化的枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株,再經土霉素基礎鹽固體培養基傳代馴化,其方法是:將枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株接種入質量濃度為100mg/L的土霉素基礎鹽固體培養基上,在30℃下培養2天后;再接種入質量濃度為200mg/L的土霉素基礎鹽固體培養基上,在30℃下培養2天,……,以此類推,連續傳代培養,每次使土霉素質量濃度增加100mg/L,至土霉素最終質量濃度達500mg/L,完成傳代馴化,分別成為馴化后的枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株,備用;

②、LB培養基制備:分別取胰蛋白胨1g、酵母提取物0.5g、氯化鈉1g、瓊脂1.5g,加蒸餾水至100mL,搖動容器,直至溶質溶解,用5mol/L的NaOH調節pH值至7.0,再用去離子水定容至1L,然后在15psi高壓下蒸汽滅菌21min,即得LB培養基(液體),備用;

③、保存:將馴化后的枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株分別接種于LB培養基斜面,制成斜面菌種,-4℃保存,備用;

㈤、種菌液制備:在pH值6.5,取保存的枯草芽孢桿菌J5P2斜面菌種和假單胞菌J2斜面菌種,在土霉素質量濃度為100mg/L的土霉素基礎鹽培養基上活化48h后,分別挑取枯草芽孢桿菌J5P2的單菌落和假單胞菌J2的單菌落接種于LB培養基中培養至對數生長期,5000r/min離心10min,收集菌體,經0.05mol/L、pH7.4的Tris-HCl洗滌3次,再用0.05mol/L、pH7.4的Tris-HCl調整菌液濃度,使其濃度為1×1010個/mL±0.5%,分別成枯草芽孢桿菌J5P2種菌液和假單胞菌J2種菌液,備用;

㈥、混合菌劑制備:將枯草芽孢桿菌J5P2種菌液和假單胞菌J2種菌液按(0.1~3)∶1的體積比混合,即成降解土壤中抗生素的混合菌劑。

所述的滅菌水是經滅菌后的蒸餾水。

上述含土霉素質量濃度不同的土霉素基礎鹽培養基只是土霉素量的多少不同,其他組分量均是相同的。

本發明的降解土壤中抗生素的混合菌劑中的種菌液配比比例的確定過程如下:

⑴、基礎培養基制備:取NaCl 0.1g、KH2PO4 0.05g、K2HPO4 0.15g、NH3NO3 0.1g、MgSO4·7H2O 0.01g,加蒸餾水至100mL,調節pH值至6.5,成為基礎培養基,備用。

⑵、土霉素降解試驗:

①、土霉素基礎鹽液體培養基制備:將土霉素加入到基礎培養基,使其土霉素質量濃度為300mg/L,即得土霉素基礎鹽液體培養基,備用;

②、接種試驗:按4-6%接種量,將不同組合接種于100mL的土霉素基礎鹽液體培養基中,同時,以不接菌的土霉素基礎鹽固體培養基(將土霉素與基礎培養基按1:1的重量比例混合,加熱至完全溶解,再用NaOH調pH值到7.2,冷卻后就得土霉素基礎鹽固體培養基)為對照,在25~37℃下培養3~5天后,用氣相色譜測定其對土霉素的降解率為55~75%,耐受土霉素最高濃度為500mg/L。

⑶、青霉素降解試驗:

①、青霉素基礎鹽液體培養基制備:將青霉素加入到基礎培養基,使其青霉素質量濃度為300mg/L,即得青霉素基礎鹽液體培養基,備用;

②、接種試驗:按4-6%接種量,將不同組合接種于100mL的青霉素基礎鹽液體培養基中,同時,以不接菌的土霉素基礎鹽固體培養基為對照,在25~37℃下培養3~5天后,用氣相色譜測定其對青霉素的降解率為60~73%,耐受青霉素最高濃度為500mg/L。

⑷、磺胺嘧啶類降解試驗:

①、磺胺嘧啶類基礎鹽液體培養基制備:將磺胺嘧啶類加入到基礎培養基,使其磺胺嘧啶類質量濃度為300mg/L,即得磺胺嘧啶類基礎鹽液體培養基,備用;

②、接種試驗:按4-6%接種量,將不同組合接種于100mL的磺胺嘧啶類基礎鹽液體培養基中,同時,以不接菌的土霉素基礎鹽固體培養基為對照,在25~37℃下培養3~5天后,用氣相色譜測定其對磺胺嘧啶類的降解率為50~70%,耐受磺胺嘧啶類最高濃度為5000mg/L。

枯草芽孢桿菌J5P2單菌菌劑對土霉素、青霉素和磺胺嘧啶類的降解率分別為30~55%、35~55%、40~65%,假單胞菌J2單菌菌劑對土霉素、青霉素和磺胺嘧啶類的降解率分別為40~55%、35~60%、40~65%。

最終篩選出兩種種菌液的最佳配比范圍為枯草芽孢桿菌J5P2∶假單胞菌J2=(0.1~3)∶1。

本發明的降解土壤中抗生素的混合菌劑用于土壤抗生素殘留的降解,其優點在于:

1、抗逆性強、且降解酶系豐富,降解底物范圍廣,它不僅能降解以土霉素為代表的四環素族、以青霉素為代表的青霉素族抗生素,還能降解磺胺嘧啶類、喹諾酮類等抗生素。

2、應用兩種細菌配比,實現了優勢互補,有效地提高了對抗生素的降解率,縮短了降解時間。對四環素族的降解率最高達75%,對青霉素族的降解率最高達73%,對磺胺嘧啶類降解率最高達70%,比單菌菌劑的降解率高出10~40%。

3、對抗生素污染的土壤修復效果良好,能把有毒有害的抗生素在微生物作用下,使抗生素殘留物的結構發生改變,從而引起其化學和物理性質發生改變,即通過將抗生素從大分子化合物降解為小分子化合物,最后分解成為H2O和CO2,實現對環境污染的無害化處理的過程,其轉化效率高,環保效果明顯。

4、生產采用通用發酵設備,生產工藝簡單,生產原料易得,成本低,應用操作方便,無污染產生,易于推廣應用。

具體實施方式

以下結合實施例,對本發明作進一步的說明。下面的說明是以例舉的方式,但本發明的保護范圍并不局限于此。

本實施例的降解土壤中抗生素的混合菌劑,其制備過程如下:

㈠、混懸液配制:取抗生素污染的土壤,按1:9的重量比加入到滅菌水中,攪拌成混懸液,備用;

㈡、菌落培養:

①、培養基制備:分別取NaCl 0.1g、KH2PO4 0.05g、K2HPO4 0.15g、NH3NO3 0.1g、MgSO4·7H2O 0.01g、瓊脂1.5g,混合均勻,加蒸餾水至100ml,調節pH值至6.5,再高壓滅菌后冷卻至50℃,然后,加入土霉素,使其終質量濃度為100mg/L,即得土霉素基礎鹽固體培養基,備用;

②、培養:將混懸液用滅菌水100倍比稀釋,然后涂布于土霉素基礎鹽固體培養基平板上,在30℃下,培養2天,成為培養菌落,備用;

㈢、菌株分離:在經過培養的土霉素基礎鹽固體培養基平板上挑取單菌落,通過平板劃線分離純化出兩株細菌菌株,經生理生化和16S rDNA測序鑒定為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)J5P2和假單胞菌(Pseudomonas sp.)J2的留下備用;否則,重新分離純化;

㈣、傳代馴化:

①、馴化:將分離純化的枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株,再經土霉素基礎鹽固體培養基傳代馴化,其方法是:將枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株接種入質量濃度為100mg/L的土霉素基礎鹽固體培養基上,在30℃下培養2天后;再接種入質量濃度為200mg/L的土霉素基礎鹽固體培養基上,在30℃下培養2天,……,以此類推,連續傳代培養,每次使土霉素質量濃度增加100mg/L,至土霉素最終質量濃度達500mg/L,完成傳代馴化,分別成為馴化后的枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株,備用;

②、LB培養基制備:分別取胰蛋白胨1g、酵母提取物0.5g、氯化鈉1g、瓊脂1.5g,加蒸餾水至100mL,搖動容器,直至溶質溶解,用5mol/L的NaOH調節pH值至7.0,再用去離子水定容至1L,然后在15psi高壓下蒸汽滅菌21min,即得LB培養基(液體),備用;

③、保存:將馴化后的枯草芽孢桿菌J5P2菌株和假單胞菌J2菌株分別接種于LB培養基斜面,制成斜面菌種,-4℃保存,備用;

㈤、種菌液制備:在pH值6.5的條件下,取保存的枯草芽孢桿菌J5P2斜面菌種和假單胞菌J2斜面菌種,在土霉素質量濃度為100mg/L的土霉素基礎鹽培養基上活化48h后,分別挑取枯草芽孢桿菌J5P2的單菌落和假單胞菌J2的單菌落接種于LB培養基中培養至對數生長期,5000r/min離心10min,收集菌體,經0.05mol/L、pH7.4的Tris-HCl洗滌3次,再用0.05mol/L、pH7.4的Tris-HCl調整菌液濃度,使其濃度為1×1010個/mL±0.5%,分別成枯草芽孢桿菌J5P2種菌液和假單胞菌J2種菌液,備用;

㈥、混合菌劑制備:將枯草芽孢桿菌J5P2種菌液和假單胞菌J2種菌液按(0.1~3)∶1的體積比混合,即成降解土壤中抗生素的混合菌劑。

據測試,本實施例的降解土壤中抗生素的混合菌劑,當枯草芽孢桿菌J5P2種菌液和假單胞菌J2種菌液的體積比為3∶1時,對土霉素的降解率為75%。當枯草芽孢桿菌J5P2種菌液和假單胞菌J2種菌液的體積比為0.5∶1時,對青霉素的降解率為73%。

本實施例的降解土壤中抗生素的混合菌劑,經田間多次反復試驗,取得了非常好的技術效果,有關實驗情況如下:

田間試驗:選取交通便利、易于觀察及管理、有代表性的田塊,要求田塊方正、田面平整、肥力均勻、排灌方便、種植水平與當地生產水平相當的水稻田(本例選擇在湖南省永州市市東安縣內)。

本試驗共分兩組:

(1)、對照組:常規施肥+多次噴施磺胺嘧啶類抗生素(其濃度為500mg/L)的田地。

(2)、處理組:常規施肥+本實施例的降解土壤中抗生素的混合菌劑+多次噴施磺胺嘧啶類抗生素(其濃度為500mg/L)的田地,試驗設3次重復,隨機排列,小區面積不小于60平方米。

枯草芽孢桿菌J5P2種菌液和假單胞菌J2種菌液按1∶1的體積比制得降解土壤中抗生素的混合菌劑,按2mL/m2或1.3L/畝的劑量噴灑于處理組土壤表面,分別在使用降解土壤中抗生素的混合菌劑0、5、10、20天后取樣,每小區按“S”形方法采取土樣送檢,檢測土樣磺胺嘧啶類殘留量變化。磺胺嘧啶類殘留量結果如表1所示,在使用降解土壤中抗生素的混合菌劑20天后磺胺嘧啶類抗生素基本降解完全。

表1磺胺嘧啶類殘留量(mg/Kg)

上述試驗,三年內連續在不同的地方,不同面積的田間,如60㎡、80㎡、120㎡等試驗18次,均取得了相同和相近似的結果。在試驗中,未發現不良效果,這表明本發明的降解土壤中抗生素的混合菌劑具有很好的降解抗生素殘留的作用,使用安全,性能穩定可靠,能有效降低抗生素的毒副作用,有利于農業的豐產豐收和人們的身體健康。

本發明的降解土壤中抗生素的混合菌劑,可用于受四環素、青霉素、磺胺嘧啶類、喹諾酮類等抗生素污染土地的修復。

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