用于培養細胞的結構件的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及用于培養細胞的結構件和容器。具體地，本發明涉及具有多個隔室的結構件和容器，其中，每個隔室用于培養一個或更多個細胞。
【背景技術】
[0002]仿造原始的皮氏培養皿(Petri dish)的玻璃容器或塑料容器保持了用于培養細胞的標準。然而，這種容器缺乏對于比如體外人工受精(IVF)的特定應用的有效性。例如，在IVF中，皮氏培養皿可能不是最適于一次培養多個卵。此外，難以對皮氏培養皿上的受精卵進行定位或難以對皮氏培養皿上的卵的生長或進展進行監控。
[0003]已知的改進是在單個器皿上放置多個凹陷的井狀件(indented wells)。這允許使多個卵以緊密靠近的方式受精，這與提高胚胎的生存能力相關。凹陷的井狀件可能還使得通過各種自動化系統更容易對卵進行定位并監控。已知的其他改進是采用輻條車輪式設計從而以緊密靠近的方式保持卵以用于識別。
[0004]本發明的目的是克服現有技術的問題和/或提供用于細胞培養的替代性方案。
[0005]說明書中提及的任何現有技術沒有并且不應當視為承認或以任何形式暗示:該現有技術形成澳大利亞或任何其他管轄區中的公知常識的一部分，或該現有技術可由本領域技術人員合理地預期為確定、理解并認作為相關的。
【發明內容】
[0006]根據本發明的第一方面，提供了一種結構件，該結構件與容器一起使用以用于培養多個細胞，該結構件包括:
[0007]部分封閉的腔；以及
[0008]多個隔室，所述多個隔室的每個隔室均具有與部分封閉的腔相鄰的近端和遠離部分封閉的腔的遠端，每個隔室均適于與部分封閉的腔流體連通。
[0009]其中，每個隔室均構造成將細胞保持在近端與遠端之間的位置處，并且每個隔室的至少一部分定形狀成在寬度方面朝向近端增大。
[0010]本發明的實施方式可因此通過觀察細胞在隔室內的位置而便于視覺識別或指示細胞的大小。
[0011]多個隔室中的每個隔室均可定形狀成將細胞朝向相應的隔室的遠端指引。多個隔室中的每個隔室均可包括用于將細胞朝向相應的隔室的遠端指引的傾斜的基部。傾斜的基部可朝向遠端向下傾斜。替代性地或額外地，傾斜的基部包括一個或更多個槽。
[0012]多個隔室中的至少一個隔室可適于與多個隔室中的另一隔室直接流體連通。結構件可包括用于使相鄰隔室之間便于直接流體連通的一個或更多個隔室間通道。
[0013]結構件可包括用于使部分封閉的腔與相應的一個或更多個隔室之間便于流體連通的一個或更多個入口通道或者一個或更多個開口。
[0014]結構件可包括用以使微工具便于進入的一個或更多個入口通道或者一個或更多個開口。
[0015]結構件還可包括:
[0016]內阻擋部，該內阻擋部用于限定部分封閉的腔；以及
[0017]外阻擋部，該外阻擋部用于在內阻擋部與外阻擋部之間限定多個隔室。
[0018]內阻擋部可包括緊密間隔開的柱狀件。緊密間隔開的柱狀件可包括圓形柱狀件、三角形柱狀件和多邊形柱狀件中的一者或更多者。緊密間隔開的柱狀件可限定一個或更多個入口通道或者一個或更多個開口。
[0019]結構件還可包括壁，該壁聯接至外阻擋部以用于容納培養基。
[0020]腔可包括中央腔，該中央腔由多個隔室圍繞。多個隔室可離中央腔距離相等的或大致距離相等。
[0021]優選地，多個隔室中的每個隔室均被標記。更優選地，標記包括蝕刻、雕刻、壓紋以及模制中的一者或更多者。
[0022]多個隔室中的每個隔室均可構造成保持多于一個細胞。
[0023]細胞可包括精子細胞、卵細胞、卵母細胞、受精卵、胚細胞瘤或任何其他細胞中的一者或更多者。細胞可例如為人類、牛、綿羊、豬或鼠類細胞。
[0024]根據本發明的第二個方面，提供了一種結構件，該結構件與容器一起使用以用于培養多個細胞，該結構件包括:
[0025]部分封閉的腔；以及
[0026]多個隔室，多個隔室中的每個隔室均:
[0027]適于與部分封閉的腔流體連通；以及
[0028]構造成將細胞保持在隔室內的取決于細胞的尺寸的位置處，其中，多個隔室中的至少一個隔室適于與多個隔室中的另一隔室直接流體連通。
[0029]根據本發明的第三個方面，提供了一種容器，該容器包括根據第一方面或第二方面所限定的結構件，或該容器與根據第一方面或第二方面所限定的結構件一體地形成。
[0030]結構件為容器所包括的多個結構件中的一個結構件或與容器一體成形的多個結構件中的一個結構件。
[0031]容器可包括用于中間細胞的培養過程的一個或更多個處理井狀件。
[0032]容器可包括一個或更多個支承件，所述一個或更多個支承件用于抬高容器以允許空氣在容器下面流動。
[0033]容器可包括繞容器的蓋設置的突出部以便于定向或堆疊。突出部可繞蓋均勻分布。替代性地，突出部可圍繞蓋不均勻地分布。
[0034]容器可包括繞容器的基部設置的凹陷部以便于定向、堆疊或旋轉。凹陷部可繞基部均勻分布。替代性地，所述凹陷部可圍繞基部不均勻分布。
[0035]凹陷部與突出部的組合對稱地或不對稱地設置以便于定向。
[0036]容器可具有使器皿便于識別的特征而不會影響中央特征件的顯微透明度，比如用于待固定的標記的空間或通過記號筆繪制的名稱的。
[0037]容器可具有蓋，蓋用來防止內容物污染并減少在器皿特征件中采用的細胞培養基的蒸發。
[0038]蓋可包括一個或更多個中央向下突出部，該突出部覆蓋皮氏培養皿內的結構件的邊緣以進一步減少蒸發和潛在的污染物。
[0039]蓋可包括位于蓋上表面的凹陷部或突出部，從而使具有蓋的器皿便于堆疊。
[0040]蓋可包括與容器的用于識別器皿的特征相配的特征比如用于覆蓋器皿的標記的空間、或在使蓋能夠在器皿之間互換的同時顯示下面的識別標記的透明空間。
[0041]容器可包括邊緣，從而使在不接觸蓋的情況下通過人手或自動夾持件便于提升器皿，在接觸蓋的情況下，蓋可能滑落并導致器皿掉落。
[0042]容器的至少一部分可涂有涂層以用于下述方面中的一個或更多個方面:減少由細胞培養基在容器中的流動而導致的氣泡的形成、增強細胞至容器表面的粘附、增大容器的透明度以及提高在容器中培養的細胞的生存能力。涂層可包括親水性物質或疏油性物質。
[0043]容器可為試樣皿。試樣皿可為皮氏培養皿。
[0044]除非上下文另有要求，否則如文中使用的術語“包括”及該術語的變體，例如“包含”、“包含有”、“包括有”不意在排除其他附加物、部件、整體或步驟。
[0045]前述段落中描述的本發明的其他方面以及方面的其他實施方式將從通過示例并參照附圖給出的下文的描述變得明顯。
【附圖說明】
[0046]圖1A和圖1B示出了用于培養細胞的容器的實施方式的立體圖和俯視圖。
[0047]圖2A和圖2B示出了在圖1A和圖1B的容器中使用的結構件的第一實施方式的俯視圖和立體圖。
[0048]圖3A和圖3B示出了在圖1A和圖1B的容器中使用的結構件的第二實施方式的俯視圖和立體圖。
[0049]圖4A和圖4B示出了在圖1A和圖1B的容器中使用的結構件的第三實施方式的俯視圖和立體圖。
[0050]圖5A示出了結構件的隔室的示例的截面圖。
[0051]圖5B示出了結構件的隔室的另一示例的截面圖。
[0052]圖5C示出了由微工具觸及隔室內的細胞的示例。
[0053]圖6A和圖6B示出了具有容納卵母細胞的隔室的結構件的局部圖。
[0054]圖7A示出了具有下述隔室的結構件的局部視圖，所述隔室具有帶有傾斜表面的基部。
[0055]圖7B示出了具有下述隔室的另一結構件的局部視圖，所述隔室具有帶有傾斜表面的基部。
[0056]圖8和圖9示出了用于培養細胞的容器的另一實施方式的立體圖和俯視圖。
[0057]圖10A和圖10B示出了用于圖8和圖9中示出的容器的蓋的俯視立體圖和仰視立體圖。
[0058]圖10C示出了圖10A和圖10B中示出的蓋的立體透視圖。
[0059]圖11A示出了覆蓋有圖10中示出的蓋的圖8和圖9中示出的容器的立體圖。
[0060]圖11B示出了圖11A中示出的帶蓋的容器的立體透視圖。
[0061]圖12示出了圖8和圖9的容器中示出的結構件的實施方式的立體圖。
【具體實施方式】
[0062]本發明總體上涉及用于培養細胞的結構件和容器。具體地，本發明涉及具有多個隔室的結構件，其中，多個隔室中的每個隔室均用于培養一個或更多個細胞。如以下進一步論述的，該