038]選用上述替代PEG-PDLLA的共聚物和替代蘭考韋泰的環肽后，對于肉桂霉素等具有活性氨基的環肽，可以參考圖2的化學修飾反應制成替代Dur-PEG-PDLLA的靶向載體:即通過EDC和NHS活化共聚物末端的羧基，然后與作為靶向配體的環肽中的氨基縮合，最后通過透析和濾膜過濾，干燥濾液即得能夠與細胞膜成分磷脂酰乙醇胺特異性結合的靶向載體；
對于例如植物大環寡肽kalata BI等類似結構的環肽，其分子結構中不具有活性的氨基，則可以通過m)C和NHS活化作為靶向配體的環肽末端的羧基，然后與共聚物中的氨基縮合，最后通過透析和濾膜過濾，干燥濾液即得能夠與細胞膜成分磷脂酰乙醇胺特異性結合的靶向載體。
[0039]在本發明中，用于包覆Dur-PEG-PDLLA形成核殼結構混合膠束的pH敏感材料PEG-P(His)還可以替換為聚乙二醇和聚(β-氨基酯)的共聚物；也可以采用pH敏感化學鍵(如腙鍵、乙縮醛、原酸酯、乙烯醚等)鏈接的膠束:比如PEG與TOLLA采用腙鍵鏈接制備而成的膠束。
[0040]聚乙二醇和聚(β-氨基酯)的共聚物制備方法可以參考如圖3所示的PEG-P(His)的制備反應方法。
[0041]以上內容是結合具體的實施例對本發明所作的詳細說明，不能認定本發明具體實施僅限于這些說明。對于本發明所屬技術領域的技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應當視為屬于本發明保護的范圍。
【主權項】
1.一種腫瘤靶向聚合物膠束，其特征是，包括：對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體修飾的第一聚合物載體。2.如權利要求I所述的一種腫瘤靶向聚合物膠束，其特征是，所述對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體為蘭考韋泰、肉桂霉素和植物大環寡肽kalata BI中的一種，所述第一聚合物載體為包括親水段和疏水段的共聚物，所述親水段為聚乙二醇、聚環氧乙烷、聚乙烯吡咯烷酮、聚氨基酸、殼聚糖中的一種，所述疏水段為外消旋聚乳酸、左旋聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸-羥基乙酸共聚物、己內酯、聚氨基酸中的一種。3.如權利要求I或2所述的一種腫瘤靶向聚合物膠束，其特征是，還包括用于包覆所述第一聚合物載體形成核殼結構混合膠束的第二聚合物載體，且所述第二聚合物載體在腫瘤組織的偏酸性環境中不穩定，在PH值為6. O?6. 5時解聚合。4.如權利要求3所述的一種腫瘤靶向聚合物膠束及其制備方法，其特征是，所述第二聚合物載體為聚乙二醇和聚組氨酸的共聚物、或聚乙二醇和聚氨基酯）的共聚物、或PH敏感化學鍵鏈接的膠束，所述pH敏感化學鍵為腙鍵、乙縮醛、原酸酯和乙烯醚中的一種。5.如權利要求I所述的一種腫瘤靶向聚合物膠束的制備方法，其特征是，包括對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體修飾第一聚合物載體的制備過程： 當對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體的分子結構中具有活性的氨基時，其包括以下步驟： 步驟Al. 1、通過1-(3- 二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺活化所述第一聚合物載體末端的羧基； 步驟Al. 2、使步驟一中活化的羧基與對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體中的氨基縮合； 步驟Al. 3、對步驟二的反應產物進行透析和濾膜過濾操作，干燥濾液即得能夠與細胞膜成分磷脂酰乙醇胺特異性結合的靶向載體； 當對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體的分子結構中不具有活性的氨基時，其包括以下步驟： 步驟BI. 1、通過1-(3- 二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺活化對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體末端的羧基； 步驟BI. 2、使步驟一中活化的羧基與所述第一聚合物載體中的氨基縮合； 步驟BI. 3、對步驟二的反應產物進行透析和濾膜過濾操作，干燥濾液即得能夠與細胞膜成分磷脂酰乙醇胺特異性結合的靶向載體。6.如權利要求5所述的一種腫瘤靶向聚合物膠束的制備方法，其特征是，包括蘭考韋泰修飾第一聚合物載體的制備過程，且所述第一聚合物載體為聚乙二醇和外消旋聚乳酸的共聚物，其包括以下步驟： 步驟I. 1、將HOOC-PEG-PDLLA溶于N，N-二甲基甲酰胺中，先加入I-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽反應一段時間后，再加入交聯劑N-羥基琥珀酰亞胺，室溫攪拌48 ?72 小時，得到 PDLLA-PEG-CONHS ； 步驟I. 2、將步驟一的最終反應液過濾后，向其中滴加洛解有蘭考韋泰的一■甲基亞諷洛液，之后加入三乙胺調節pH值至7以上，室溫攪拌至溶液澄清； 步驟I. 3、將步驟二最終獲得的溶液經經透析袋透析后過濾，得澄清透明溶液，冷凍干燥后得蘭考韋泰修飾的聚乙二醇和外消旋聚乳酸的共聚物。7.如權利要求5或6所述的一種腫瘤靶向聚合物膠束的制備方法，其特征是，還包括在腫瘤組織的偏酸性環境中不穩定，在PH值為6. O?6. 5時解聚合，且用于包覆所述第一聚合物載體形成核殼結構混合膠束的第二聚合物載體的制備過程，所述第二聚合物載體為聚乙二醇和聚組氨酸的共聚物，其包括以下步驟： 步驟2. I :將Boc-His(Dnp)-OH ■ isopropanol即溶于異丙醇的N-(叔丁氧羰基）-I-(2，4- 二硝基苯基）-L-組氨酸溶解于1，4- 二氧六環中，加入氯化亞砜反應I小時，生成沉淀過濾，用1，4- 二氧六環及乙醚洗滌沉淀，將沉淀用硝基甲烷完全溶解后，加入足量無水乙醚重結晶，得Dnp-NCA ■ Hcl ； 步驟2. 2 :將步驟2. I制得的Dnp-NCA ■ Hcl用N，N- 二甲基甲酰胺溶解后加入碳酸鈉中和鹽酸，室溫攪拌I小時后，加入mPEG-NH2 ■ Hcl的N，N- 二甲基甲酰胺溶液減壓反應72小時后，離心后用微孔濾膜過濾得醬油色溶液，向其中加入乙醚后，靜置使其沉淀，抽濾后真空干燥，得到的棕色固體PEG-b-poly (Nim-Dnp-His); 步驟2. 3 :將步驟2. 2制得的PEG-b-poly (Nim-Dnp-His)加入N，N- 二甲基甲酰胺溶解后，加入巰基乙醇反應過夜，脫去2，4-二硝基苯基將所得淡黃色溶液裝入透析袋中透析，透析后先離心再過濾，濾液冷凍干燥后即得聚乙二醇和聚組氨酸的共聚物。8.如權利要求7所述的一種腫瘤靶向聚合物膠束的制備方法，其特征是，還包括對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體修飾第一聚合物載體和第二聚合物載體制備成核殼結構混合膠束的過程，其包括以下步驟： 將所制得的對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體修飾第一聚合物載體以及第二聚合物載體溶于水中，經超聲處理后加入透析袋透析，制備成粒徑為10?1000nm的核殼結構混合膠束。9.如權利要求8所述的一種腫瘤靶向聚合物膠束的制備方法，其特征是，還包括核殼結構混合膠束包載藥物的方法： 將所制得的對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體修飾第一聚合物載體以及第二聚合物載體溶于水中制得載體溶液，通過溶劑將藥物溶解后，滴加于所述載體溶液中，通過攪拌或超聲使之均勻分散后透析，再濾膜過濾，即得載藥膠束溶液。
【專利摘要】本發明公開了一種腫瘤靶向聚合物膠束，包括對細胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有親和力的靶向配體蘭考韋泰修飾的第一聚合物載體，所述第一聚合物載體為聚乙二醇和外消旋聚乳酸的共聚物；還包括用于包覆所述第一聚合物載體形成核殼結構混合膠束的第二聚合物載體，且所述第二聚合物載體在腫瘤組織的偏酸性環境中不穩定，在pH值為6.0～6.5時解聚合，所述第二聚合物載體為聚乙二醇和聚組氨酸的共聚物。本發明基于細胞膜成分磷脂酰乙醇胺在細胞有絲分裂M相時外向化及腫瘤組織偏酸性的基礎上，實現了細胞周期特異性靶向載體的功能，是一種高效、低毒、腫瘤細胞靶向治療的載體。本發明同時公開了上述一種腫瘤靶向聚合物膠束的制備方法。
【IPC分類】A61K9/107, A61K47/34, A61K47/42
【公開號】CN105168130
【申請號】
【發明人】湯繼輝, 李俊, 劉紫薇, 宋見, 紀玢琪, 李瑤, 劉俊節
【申請人】安徽醫科大學
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2015年8月6日