無菌 懸浮液在單次使用的小瓶中提供。
[0053] 所要求保護的制劑的給藥可W根據已知的方法進行，例如通過氣管內滴藥、噴霧 給藥、或通過通常可購得的噴射式超聲霧化器（jetultrasonicnebuliser)或振網式霧化 器（mesh-vibratingnebuliser)霧化給藥。
[0054] 在制劑通過氣管內滴藥給藥時，取決于呼吸窘迫綜合征的嚴重程度，有不同的方 法適用。例如，可W通過氣管內滴藥將所要求保護的制劑對保持連續或間歇性正壓呼吸的 早產嬰兒給藥。
[0055] 或者，可W使用被放入氣管中的細的導管給予所述制劑，且根據在WO 2008/148469中所述的操作通過被稱為連續氣道正壓通氣（nasalContinuous化sitive AirwayPressure，nCPAP)的方法通過專口設計的鼻用裝置如面罩、叉頭或管來支持患者呼 吸。
[0056] 后一種方法僅在外源性表面活性物質如豬肺憐脂具有低粘度時才是可能的，因為 高粘度會使表面活性物質更難W通過細導管的通道。
[0057] 在其中懸浮所述兩種被組合的活性物質的水溶液的體積取決于期望的濃度。
[0058] 有利地，制劑的體積應該不超過5.Oml,優選為4. 5到2.Oml,更優選3. 5到2. 5ml。
[0059] 例如，對于200mg豬肺憐脂和0. 8mg丙酸倍氯米松的量，在使用2. 5ml體積時，豬 肺憐脂和丙酸倍氯米松的最終濃度分別為80mg/ml和0. 32mg/ml。
[0060] 如果使用4. 5ml的體積，對于相同的劑量，最終濃度分別是約44mg/ml和約 0. 18mg/ml。
[0061] 如果使用IOOmg劑量的豬肺憐脂，對于2. 5ml的體積，最終濃度分別是40mg/ml和 0. 32mg/ml〇
[0062] 在其它實施方案中，在將豬肺憐脂和丙酸倍氯米松分別給藥時，單個活性物質可 W單獨配制。在運種情況中，兩種單個活性物質并非無條件地必須同時給予。
[0063] 在運種單獨的給藥的情況中，可W將兩種單個活性物質的制劑同時包裝在適當的 容器裝置中。各組分在適當的容器裝置中的運種單獨包裝也被描述為試劑盒化it)。
[0064] 因此，本發明還設及試劑盒，包括：a)在第一單元劑型中的100到200mg的量的豬 肺憐脂和可藥用的載體或稀釋劑；b)在第二單元劑型中等于或大于0. 4mg的量的丙酸倍氯 米松和可藥用的載體或稀釋劑；和C)用于包含所述第一和第二劑型的容器裝置。
[0065] 優選地，第一單元劑型是填充有2. 5ml無菌制劑的單次使用的小瓶，所述無菌制 劑是懸浮在經過緩沖的生理鹽水（0. 9%w/v氯化鋼）水溶液中的80mg/ml豬肺憐脂，而第 二單元劑型是填充有2ml無菌制劑的單次使用的小瓶，所述無菌制劑是懸浮在包含聚山梨 醋（吐溫）20、脫水山梨醇單月桂酸醋和氯化鋼的水溶液中的0. 8mg/ml微粒化丙酸倍氯米 松。
[0066] 可W根據本領域技術人員確定的病癥，對出生之后的嬰兒給藥的本發明的組合適 合于預防、延遲、減輕、阻滯或抑制支氣管肺發育不良的進展。
[0067]優選地，本發明的組合適合于預防患重癥的呼吸窘迫綜合征（RD巧早產兒的支氣 管肺發育不良的進展。
[0068] 然而，其也可W用于預防和/或治療與內源性表面活性物質不足或功能障礙相關 的其它疾病如成人的呼吸窘迫綜合征（ARD巧、急性肺損傷（ALI)和胎糞吸入綜合征（M巧。
[0069] 通過W下發現使得將豬肺憐脂與比目前治療實踐所使用的劑量更高的丙酸倍氯 米松組合的利益顯而易見。
[0070] 實際上，已經在患有RDS的早產黑羊中進行的隨機研究中發現，豬肺憐脂與大于 0. 4mg/kg的劑量的丙酸倍氯米松的組合W加合的方式作用于某些肺組織氧化應激標志物， 且W協同方式作用于肺機械學參數。
[0071] 通過W不同的劑量氣管內給予丙酸倍氯米松加上豬肺憐脂并與僅有表面活性物 質對比實施所述研究。
[0072]通過測量支氣管吸出物樣品中的總的氨過氧化物（TH)、晚期氧化蛋白產物 (advancedoxidationproteinproduct) (AOPF0 和非蛋白結合鐵（NPBI)來研究肺組織氧 化。用表面活性物質加上400或800yg/kg的丙酸倍氯米松治療的組的TH比表面活性物 質組的TH低，而用表面活性物質加上800yg/kg的丙酸倍氯米松治療的組的AOPP比其它 組的AOPP低；NPBI在所有組中相似。還評價了肺順應性。
[0073] 在表面活性物質治療之后發現潮氣量（TV)和氣道阻力（Raw)的持續改善，如所預 料的，運種改善并不由丙酸倍氯米松的存在改變，即使W最高劑量存在也是如此。然而，令 人驚訝的是，加入800yg/kg劑量的丙酸倍氯米松產生協同的獲得相同TV值所需平均氣道 壓力（MA巧降低。相反，在用表面活性物質加上400mg/kg劑量的丙酸倍氯米松治療的組中， 對于MAP的作用與僅用表面活性物質治療組相比沒有統計上的差異。
[0074] 運意味著可W對接受本發明的組合的患者進行更柔和的機械通氣，伴隨更小的氣 壓性損傷風險。
[00巧]因此，考慮到上述發現，即氧化性肺應激的減少和一種肺機械學參數的協同改善， 本發明提供對于預防支氣管肺發育不良尤其有效的組合。
[0076]此外，因為丙酸倍氯米松是高度親脂性的皮質類固醇，運可能有利于其粘膜吸收 和跨越憐脂細胞膜的攝取而伴隨可W忽略的全身吸收，運些使得所述組合對于嬰兒的治療 應用是安全的。
[0077]W下實施例更具體地舉例說明本發明。
【具體實施方式】
[0078] 實施例1-通過毛細血管表面活性測量計體外評價豬肺憐脂在丙酸倍氯米松的存 在下的表面活性
[0079]通過購自化ImiaMedical,Inc.，USA的毛細血管表面活性測量計與單獨的豬肺憐 脂進行對比評價豬肺憐脂（在丙酸倍氯米松（2ml，0.8mg)的存在下）的表面活性。
[0080] 制備了兩個樣品：通過用鹽水稀釋到Img/ml憐脂的濃度，自豬肺憐脂的小瓶 (1.5ml，80mg/ml)制備一個樣品，另一個樣品制備自與豬肺憐脂小瓶（1.5ml，80mg/ml)混 合的丙酸倍氯米松（2ml，0.8mg)的小瓶，并用鹽水稀釋到相同濃度（Img/ml憐脂）。然后在 毛細血管表面活性測量計中評價兩種溶液的0. 5ml樣品。
[0081] 毛細血管表面活性測量計的原理是模擬人末端氣道。將樣品引入到玻璃毛細管的 收窄部分，其內徑為0. 25mm，與人末端氣道相似。在毛細管的一端連接于風箱和壓力傳感 器。在慢慢壓縮風箱時，使壓力上升和記錄壓力。升高的壓力引起樣品被從毛細管的收窄 部分壓出。隨著空氣通過，壓力驟然降低。如果樣品包含適當地起作用的肺表面活性物質， 則樣品液體不會回到收窄部分。通過連續壓縮風箱獲得的穩定的氣流不會遇到阻力且記錄 的壓力為零。另一方面，如果樣品不含適當地起作用的肺表面活性物質，則樣品液體會重復 地返回。
[0082] 結果，豬肺憐脂加丙酸倍氯米松的性能并不顯著區別于單獨的豬肺憐脂的性能， 表明所述劑量的丙酸倍氯米松不影響表面活性物質的表面活性。
[0083] 實施例2-與丙酸倍氯米松組合的豬肺憐脂的體內評價
[0084] 材料和方法 [00財動物和儀器
[0086] 所有動物通過剖腹產術（Cesareansection)從Massa母羊（妊娠期為145天） 在124+1. 7天胎齡產出。在胎的頭和頸露出之后，插頸動脈導管用于連續的血壓監護和采 血；導管連接于壓力傳感器，W中間胸部水平（mid-chestlevel)為零基準。
[0087] 在右頸內靜脈插靜脈導管，用于連續輸送液體（葡萄糖10%，100ml/kg/d)和藥 物，并將氣管內導管系到氣管中。取得可W容易地通過注射器吸出的胎畜的肺液，并將黑羊 產出并稱重（2425+410克）。使用標準的肢體導聯屯、電圖巧CG)。使用電熱墊保持直腸溫 度在正常范圍內。
[008引在第一次呼吸之前，黑羊隨機接受200mg/kg的豬肺憐脂CUr敝Utf?:化ieSi SpA,Parma,Italy)隨后通過注射器給予IOml空氣到氣道中，或隨機接受與400或800yg 的丙酸倍氯米松（ClenilA'w,QiiesiSpA,Parma,Italy)組合的200mg/kg的相同表面活 性物質。在產出之前使用封閉信封法進行隨機化。
[0089] 所有的動物用時間周期型和壓力限制型嬰兒通氣機（Newport化eeze Ventilator,SomaTechnologyInc.，Bloomfield,CT，USA)使用相似的通氣策略通氣 6 小 時。采用不變的60呼吸/分鐘的速率，0.5秒的吸氣時間，和4cm&0的呼氣末正壓通氣 (P邸巧。改變最大吸氣壓力（PIP)W保持pC〇2為35-65托。將壓力限制在PIP35cmHzO W避免氣胸。調節吸入的氧的級分W保持IOO-ISOmm化的目標p〇2。為了排除通氣機設置 的變化影響研究結果的可能性，對負責通氣機調節的人隱瞞治療任務。
[0090] 至少每30分鐘或者在胸運動和潮氣量的變化所示的換氣狀態改變時通過血氣、 電解質和代謝物系統（RadiometerCopenhagenUSA,WestLake,OH)分析血氣、抑和堿過 剩度巧。
[0091] 在整個實驗期間，根據需要給予血漿擴容劑聚明膠膚（Emagel⑩，Novaselect, 化tenza，Italy)和/或多己胺，10-20Jig/kg/min，W保持大于30mmHg的平