酶解提取枸杞葉礦質元素的方法
【技術領域】
[0001 ]本發明涉及一種酶解提取枸杞葉礦質元素的方法。
【背景技術】
[0002] 枸杞(Lycium Chinense miller)是前科多年生落葉小灌木，在醫藥、食品領域中 具有重要的應用價值。枸杞的傳統藥用部位是果實即枸杞子，具有悠久的開發利用價值。除 果實外，葉片、嫩莖等也具有很高的醫療保健功效。枸杞葉被稱為"天精草"，性涼，味甘，具 有解渴生津，養陰清火等功效。枸杞葉富含多種微量元素，其礦質元素含量甚至超過枸杞果 實。礦質元素對人體有很多重要的作用，人體缺乏時，會產生疾病。鈣、鐵、鋅都是人體必需 的微量元素。鐵是合成血紅蛋白必不可少的物質，人體缺乏鐵會導致貧血;鋅的缺乏會導致 發育不良、頭發枯黃、注意力分散;鈣能促進骨和骨質強壯，鈣的缺乏主要影響骨骼的發育 和結構，表現為骨質疏松癥。流行病學調查表明，中國居民較易缺乏的礦質元素主要有鈣、 鐵、鋅等元素。人們主要是從食物中攝取身體所必須的一些礦質元素。
[0003] 植物中礦質元素的提取方法僅限于灰化法和硝化法，提取的目的只是為了檢測其 含量，經過提取后這些礦質元素已經失去食用價值，這些方法對礦質元素的提取是破壞性 的。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種能夠利用超聲波和酶結合的方法非破壞性地提取枸杞 葉中所含有的礦質元素，目的是使提取的礦質元素可作為營養健康補充劑或食品強化劑。
[0005] -種酶解提取枸杞葉礦質元素的方法，其特別之處在于，包括如下步驟：
[0006] (1)原料:將枸杞葉烘干；
[0007] (2)粉碎:將烘干后的枸杞葉粉碎；
[0008] (3)篩分:將粉碎后的枸杞葉粉末過60-80目篩；
[0009] (4)脫脂：向得到的粉末中加入6號輕汽油浸泡，然后攪拌，再抽濾并干燥，得到去 除脂肪的枸杞葉粉末；
[0010] (5)酶解:取得到的枸杞葉粉末，按照Ig枸杞葉粉末/10-20mL加入去離子水，再按 照130-150u/mL加入纖維素酶，攪拌1-2小時；
[0011] (6)酸化:將酶解后的樣品按照Ig樣品/1.5-2mL加入冰醋酸或冰醋酸溶液，攪拌 0.5-1小時；
[0012] (7)超聲波提取:在30-70°C，50-100MHZ條件下超聲波提取5-25min，取超聲波處理 后的上清液，將沉淀再按照前述相同條件超聲波提取，取超聲波處理后的上清液，將沉淀再 按照前述相同條件超聲波提取，取超聲波處理后的上清液，最后合并三次提取的上清液； [0013 ](8)過濾:將得到的提取液抽濾，棄去濾渣；
[0014] (9)濃縮:用減壓蒸餾裝置對得到的提取液進行減壓濃縮到原體積的1/3-1/5; [0015] (10)干燥:將濃縮后的液體烘干即得到礦質元素提取物。
[0016]步驟⑴中烘干是指在鼓風干燥機中50-6(rC烘干8-i 2h。
[0017]步驟⑷中控制6號輕汽油液面沒過粉末H .5cm，控制攪拌時間1-2小時。
[0018] 步驟(10)中烘干是指在50-60°C下烘干。
[0019] 本發明是在現有的礦質元素工藝的基礎上，使用超聲波與酶結合的提取方法，有 效的提高礦質元素的得率，從而節約了原料，降低了生產成本。本發明方法相對于現有的技 術優點還在于：（1)提供一種高效且非破壞性的提取礦質元素的方法，利用的是在酸解和超 聲波提取的條件的基礎上，與纖維素酶相結合，使得礦質元素從枸杞葉細胞中的溶出速率 和溶出率都增加，從而達到節省原材料和時間的目的。（2)超聲波提取具有高效、經濟、成本 低的優點，節省了因勞力帶來的成本，并且一次可以同時提取多種礦質元素。（5)纖維素酶 水解纖維素具有高效性，可將纖維素水解成單糖和寡糖，從而一部分被纖維素束縛的礦質 元素在水解過程中被釋放出來，從而提高了提取率。（6)利用酶法從植物材料中提取得到的 礦質元素可以作為可食用的營養補充劑或食品添加劑用于食品加工。（6)由于此法所用的 設備較為簡單，只是用到了粉碎機、超聲設備，真空栗和真空干燥設備，因此其運行成本較 低，更適合工業化生產。綜上所述，酶法是一種高效提取枸杞葉礦質元素的方法，具有耗時 短、礦質元素得率高、礦質元素破壞程度小、節約原材料和運行成本低等優點，更有利于現 代的工業化生產和連續性生產。
【具體實施方式】
[0020] 本發明方法中不同條件下礦質元素提取量如下表：
[0022] 實施例1:
[0023] 1.將枸杞葉洗凈、在50-60°C下烘干8-12h、磨碎并過60-80目篩。
[0024] 2.準確稱取Ig過篩的粉末于燒杯中，加入6號輕汽油6mL攪拌20min后抽濾。
[0025] 3.將濾餅移入燒杯中加入IOmL的去離子水，滴入兩滴纖維素酶（130-150u/ml)，其 中u為酶活力單位，用磁力攪拌器攪拌1 · 5小時。
[0026] 4.加入2mL體積比為1:1冰醋酸溶液(冰醋酸體積濃度50 % )，用磁力攪拌器攪拌半 個小時。
[0027] 5.在30°C，50MHz下超聲波提取5min，取提取后的上清液，對提取后的濾渣(在相同 條件即30°C，50MHz下超聲波提取5min)進行反復提取，超聲波(在相同條件即30°C，50MHz下 超聲波提取5min)提取三次，將三次超聲波提取后的上清液合并后進行抽濾，合并濾液并用 去離子水定容到50mL。
[0028] 6.在定容好的濾液中加入200mL無水乙醇，靜置2h充分沉淀，離心得到上清液，將 上清液旋蒸到原來體積的1/5。
[0029] 7 .將濃縮后的液體烘干，得到鈣的含量是1.522mg/g，鐵的含量是0.0045mg/g，鋅 的含量是〇.〇l〇2mg/g。
[0030] 實施例2:
[0031] 1.將枸杞葉洗凈、在50-60°C下烘干8-12h、磨碎并過60-80目篩。
[0032] 2.準確稱取Ig過篩的粉末于燒杯中，加入適量的6號輕汽油6mL攪拌20min后抽濾；
[0033] 3.將濾餅移入燒杯中加入IOmL的去離子水，滴入兩滴纖維素酶（130-150u/ml )，用 磁力攪拌器攪拌1小時。
[0034] 4.加入2mL體積比為1:1冰醋酸(冰醋酸體積濃度50% )，用磁力攪拌器攪拌半個小 時。
[0035] 5.在30°C，50MHz下超聲波提取IOmin，取提取后的上清液，對提取后的濾渣進行反 復提取，超聲波提取三次，將三次超聲波提取后的上清液合并后進行抽濾，合并濾液并用去 離子水定容到50mL。
[0036] 6.在定容好的濾液中加入200mL無水乙醇，靜置2h充分沉淀，離心得到上清液，將 上清液旋蒸到原來體積的1/5。
[0037] 7.將濃縮后的液體烘干，鈣的含量是1.543mg/g，鐵的含量是0.0049mg/g，鋅的含 量是0.0104mg/g。
[0038] 實施例3:
[0039] 1.將枸杞葉洗凈、在50-60°C下烘干8-12h、磨碎并過60-80目篩。
[0040] 2.準確稱取Ig過篩的粉末于燒杯中，加入適量的6號輕汽油6mL攪拌20min后抽濾。
[00411 3.將濾餅移入燒杯中加入IOmL的去離子水，滴入兩滴纖維素酶（130-150u/ml )，用 磁力攪拌器攪拌1-2小時。
[0042] 4.加入2mL體積比為1:1冰醋酸(冰醋酸體積濃度50% )，用磁力攪拌器攪拌半個小 時。
[0043] 5.在30°C，50MHz下超聲波提取15min，取提取后的上清液，對提取后的濾渣進行反 復提取，超聲波提取三次，將三次超聲波提取后的上清液合并后進行抽濾，合并濾液并用去 離子水定容到50mL。
[0044] 6.在定容好的濾液中加入200mL無水乙醇，靜置2h充分沉淀，離心得到上清液，將 上清液旋蒸到原來體積的1/5。
[0045] 7.將濃縮后的液體烘干，鈣的含量是1.511mg/g，鐵的含量是0.0051mg/g，鋅的含 量是 0.0107mg/g。
[0046] 實施例4:
[0047] 1.將枸杞葉洗凈、在50-60°C下烘干8-12h、磨碎并過60-80目篩。
[0048] 2.準確稱取Ig過篩的粉末于燒杯中，加入適量的6號輕汽油6mL攪拌20min后抽濾。
[0049] 3.將濾餅移入燒杯中加入IOmL的去離子水，滴入兩滴纖維素酶（130-150u/ml )，用 磁力攪拌器攪拌1-2小時。
[0050] 4.加入2mL體積比為1:1冰醋酸(冰醋酸體積濃度50% )，用磁力攪拌器攪拌半個小 時。
[00511 5.在30°C，50MHz下超聲波提取20min，取提取后的上清液，對提取后的濾渣進行反 復提取，超聲波提取三次，將三次超聲波提取后的上清液合并后進行抽濾，合并濾液并用去 離子水定容到50mL。
[0052] 6.在定容好的濾液中加入200mL無水乙醇，靜置2h充分沉淀，離心得到上清液，將 上清液旋蒸到原來體積的1/5。
[0053] 7.將濃縮后的液體烘干，鈣的含量是1.504mg/g，鐵的含量是0.0055mg/g，鋅的含 量是 0.0107mg/g。
[0054] 實施例5:
[0055] 1.將枸杞葉洗凈、在50-60°C下烘干8-12h、磨碎并過60-80目篩。
[0056] 2.準確稱取Ig過篩的粉末于燒杯中，加入適量的6號輕汽油6mL攪拌20min后抽濾。
[0057] 3.將濾餅移入燒杯中加入IOmL的去離子水，滴入兩滴纖維素酶（130-150u/ml )，用 磁力攪拌器攪拌2小時。
[0058] 4.加入2mL體積比為1:1冰醋酸(冰醋酸體積濃度50% )，用磁力攪拌器攪拌半個小 時。
[0059] 5.在30°C，50MHz下超聲波提取25min，取提取后的上清液，對提取后的濾渣進行反 復提取，超聲波提取三次，將三次超聲波提取后的上清液合并后進行抽濾，合并濾液并用去 離子水定容到50mL。
[0060] 6.在定容好的濾液中加入200mL無水乙醇，靜置2h充分