3燈銀腦通中藥組合物3的制備 1、藥材基源與產地 同實施例1。
[0031] 2、處方 燈盞細辛50kg，滿山香50kg，銀杏葉50kg，三七20 kg。燈盞細辛與滿山香、銀杏葉、三 七的重量比為50:50:50:20。
[0032] 3、制備方法 1) 稱取燈盞細辛50kg，滿山香50kg，銀杏葉50kg，三七20 kg，燈盞細辛、銀杏葉適當碎 斷至l-3cm，滿山香和三七粉碎過10目篩，置于蒸氣夾套中藥提取器中，加入2000 kg濃度為 60%的乙醇室溫浸泡1小時，然后開啟夾套加熱，于65-75°C下回流提取三次，每次2小時； 2) 合并上述提取液，用型號為2815的丙綸單絲濾布過濾，收集濾液，于65-75Γ真空噴 霧干燥，得粉末狀提取物13.9kg，即得。提取物得率8.2%(按原藥材投量計）。
[0033]實施例4燈銀腦通中藥組合物的質量檢測 1、 供試樣品 燈銀腦通中藥組合物1:簡稱"組合物Γ，按本發明實施例1制備； 燈銀腦通中藥組合物2:簡稱"組合物2"，按本發明實施例2制備； 燈銀腦通中藥組合物3:簡稱"組合物3"，按本發明實施例3制備； 2、 實驗儀器與試劑Agilent 1200高效液相色譜儀(美國安捷倫公司）;B204-N型電子天 平(瑞士 Mettler公司）。野黃芩苷對照品、人參皂苷Rgl對照品、人參皂苷Rbl對照品、三七皂 苷Rl對照品、白果內酯對照品、銀杏內酯A對照品、銀杏內酯B對照品和銀杏內酯C對照 品，由中國生物制品檢驗所提供;其他試劑均為分析純，水為去離子水。
[0034] 3、實驗方法 3.1野黃芩苷含量的測定 色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.1%磷酸溶 液(40:60)為流動相;流速為每分鐘1.0 ml;柱溫40°C ;檢測波長335nm。理論板數按野黃芩苷 峰計算應不低5000。
[0035] 對照品溶液的制備：取野黃芩苷對照品10mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加甲醇 70ml，超聲處理45分鐘，取出，放置室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0036] 供試品溶液的制備：取供試樣品IOmg，精密稱定，置100mL量瓶中，加甲醇70 m 1 ，超聲處理45分鐘，取出，放置室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0037]測定法:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5μ1，注入高效液相色譜儀，測 定，即得。
[0038] 3.2三七總皂苷含量的測定 色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相Α， 以水為流動相B，按下表進行梯度洗脫;檢測波長為203nm;理論板數按三七皂苷Rl峰計算應 不低于4000。
[0039] 對照品溶液的制備：取人參皂苷Rgl對照品、人參皂苷Rbl對照品和三七皂苷Rl對 照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含人參皂苷Rgl 0.4mg、人參皂苷Rbl 0.4mg、三七皂 苷Rl 0 · Img的混合溶液，即得。
[0040] 供試品溶液的制備:取供試樣品0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲 醇50ml，稱定重量，放置過液，置80°C水浴上加熱回流2小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足 減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
[0041] 測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10μ1，注入高效液相色譜儀，測 定，即得。
[0042] 本品三七皂苷總量以人參皂苷Rgl(C42H72014)、人參皂苷Rbl(C54H92023)和三七 皂苷RUC47H800118)的總量計。
[0043] 3.3萜類內酯的含量測定 色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以正丙醇-四氫呋 喃-水（1 : 15 : 84)為流動相；用蒸發光散射檢測器檢測。理論板數按白果內酯峰計算應 不低2500。
[0044] 對照品溶液的制備:分別取白果內酯對照品、銀杏內酯A對照品、銀杏內酯B對照 品和銀杏內酯C對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml各含2mg、Img、Img、Img的混合 液，作為對照品溶液。
[0045] 供試品溶液的制備:取供試樣品約0.15 g，精密稱定，加水I 0 m 1，置水浴中溫 熱使溶散，加2 %鹽酸溶液2滴，用乙酸乙酯振搖提取4次（15ml、IOml、IOml、IOml)，合并提取 液，用5%醋酸鈉溶液20ml洗滌，分取醋酸鈉液，用乙酸乙酯IOml洗滌。合并乙酸乙酯提取液 及洗滌液，用水洗滌2次，每次20ml，分取水液，用乙酸乙酯IOml洗滌，合并乙酸乙酯液，回收 溶劑至干，殘渣用甲醇溶解并轉移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即 得。
[0046] 測定法:分別精密吸取對照品溶液1 Ομ I、15μ 1及供試品溶液10μ 1，注入高效液相色 譜儀，測定，用外標兩點法對數方程分別計算白果內酯、銀杏內酯Α、銀杏內酯Β、和銀杏內酯 C的含量，即得。
[0047] 本品萜類內酯以白果內酯（C15H1808)、銀杏內酯A(C20H2409)、銀杏內酯B (C20H24010)和銀杏內酯C(C20H24011)的含量之和計。
[0048] 4.實驗結果 本發明燈銀腦通中藥組合物的質量檢測結果見表1。
[0049]表1本發明燈銀腦通中藥組合物的質量檢測結果
實施例5燈銀腦通中藥組合物的降壓效果及作用機理研究 1.供試樣品 燈銀腦通中藥組合物1:簡稱"組合物Γ，按本發明實施例1制備； 燈銀腦通中藥組合物2:簡稱"組合物2"，按本發明實施例2制備； 燈銀腦通中藥組合物3:簡稱"組合物3"，按本發明實施例3制備； 對照藥物卡托普利：卡托普利片，國藥準字H53021548，昆明貝克諾頓制藥有限公 司生產。
[0050] 2.實驗儀器與試劑 儀器ALC-NIBP無創血壓測定分析系統（上海奧爾科特生物科技有限責任公司）； LEGEND Micro 17 R Centrifuge 型低溫離心機（Thermo Scientific Corporation) ;MK3 酶標儀（Thermo Electron Corporation) ;B204_N型電子天平（瑞士Mettler公司）。
[0051 ] 3 ·實驗動物 自發性高血壓大鼠（SHR) 40只，雄性，體重190- 220g，昆明醫科大學實驗動物中心 提供;雄性WKY大鼠10只，體重230-250g，昆明醫科大學實驗動物中心提供。
[0052] 4.實驗方法 將自發性高血壓大鼠（SHR)40只，隨機分為模型組、燈銀腦通中藥組合物1組(簡稱"組 合物1組"，10mg/kg)、燈銀腦通中藥組合物2組（簡稱"組合物2組"，10mg/kg)、燈銀腦通中 藥組合物3組(簡稱"組合物3組"，10mg/kg)和卡托普利組（10mg/kg)，每組10只。另取WKY大 鼠10只為正常對照組。各藥物組按規定劑量灌胃給藥，模型組和正常對照組給予等量蒸餾 水，每天1次，連續給藥四周。
[0053] 血壓測定:每周在大鼠清醒狀態下用ALC-NIBP無創血壓測量分析系統測量記錄大 鼠尾動脈血壓。
[0054] 血液NO測定：大鼠末次給藥測定血壓后，腹腔麻醉，迅速取血，按照試劑盒說明書 操作測定N 0值。
[0055] 5.實驗結果 5.1燈銀腦通中藥組合物對高血壓大鼠的降壓作用 燈銀腦通中藥組合物對高血壓大鼠的降壓作用見表2. 表2.燈銀腦通中藥組合物對高血壓大鼠的降壓作用 (X土 s，n=10)
由上表可見，燈銀腦通中藥組合物能夠同時明顯地降低高血壓大鼠的收縮壓與舒張 壓，表明其具有降血壓作用，可以用于制備防治高血壓的藥物。上述實驗還表明，組合物3的 降壓作用優于組合物2和組合物1。
[0056] 5.2燈銀腦通中藥組合物對高血壓大鼠N 0的影響 燈銀腦通中藥組合物對高血壓大鼠N 0的影響見表3. 表3.燈銀腦通中藥組合物對高血壓大鼠N 0的影響 (X土 s，n=10)
由上表可見，燈銀腦通中藥組合物能夠明顯地提高高血壓大鼠的血清N O含量。NO是 一種血管內分泌物質，具有舒張血管作用，對比組合物1組、組合物2組和組合物3組的N 0 含量和降壓作用可見，組合物對NO含量的提升作用越明顯，其降壓作用也就越顯著，這提示 燈銀腦通中藥組合物的降壓作用可能是通過提高血液中的N 0含量來實現的。
[0057]實施例6燈銀腦通中藥組合物的抗缺氧和抗疲勞作用研究 1.供試樣品： 燈銀腦通中藥組合物1:簡稱"組合物Γ，按本發明實施例1制備； 燈銀腦通中藥組合物2:簡稱"組合物2"，按本發明實施例2制備； 燈銀腦通中藥組合物3:簡稱"組合物3"，按本發明實施例3制備； 對照藥物大株紅景天:大株紅景天膠囊，國藥準字Z20040023，江蘇康緣藥業股份有限 公司提供。
[0058] 2.實驗動物 昆明種小鼠 ，雄性，清潔級，體重18-22 g，昆明醫科大學實驗動物中心提供。<