青娥方提取物抗抑郁抗焦慮用圖
【技術領域】
[0001] 本發明涉及青娥方提取物在制備用于治療或緩解抑郁癥和焦慮癥的產品和/或 藥物中的新用途。 技術背景
[0002] 目前抑郁癥在中國發病率大約為4 %。據世界衛生組織統計，抑郁癥已成為世界第 四大疾患，預計到2020年，可能成為僅次于冠心病的第二大疾病。抑郁癥不僅給患者帶來 精神上的損失，也給患者造成沉重的經濟負擔。抑郁癥在中國造成的總經濟負擔達到622 億元人民幣，美國每年因抑郁癥造成的經濟損失達到437億美元。世界衛生組織、世界銀行 和哈佛大學的一項聯合研究表明，抑郁癥已經成為中國疾病負擔的第二大疾病。
[0003] 抑郁癥伴隨單胺類神經遞質、下丘腦-垂體-腎上腺（HPA)軸功能失調、神經營養 因子和炎癥反應等生物學機制相關，很難以用單一的病因和發病機制來解釋。臨床上常用 抗抑郁藥物主要是：三環類抗抑郁藥（TCA)、單胺氧化酶抑制劑（MAOI)、選擇性5-羥色胺再 攝取抑制劑（SSRS)，普遍存在耐藥性、副作用大等弊端，因此尋找安全、高效、副作用小的抗 抑郁藥物尤其是天然抗抑郁藥物成為了該領域的研究熱點。
[0004] 青娥方為補腎良方，首載于宋代的《太平惠民和劑局方》，是臨床常用的治療腎虛 腰痛之良方。由杜仲（鹽炒）480克，補骨脂（鹽炒）240克，核桃仁（炒）150克，大蒜120 克組成。具有補肝壯筋骨，止腰痛之功效。青娥丸中，杜仲性味甘溫，入肝腎經，能補益肝腎， 強腰膝，壯筋骨，為治腎虛腰痛之要藥。補骨脂性溫助陽，溫補命門，能補腎強腰固精，善治 腎虛腰痛，與杜仲同用溫腎陽，強筋骨之效尤佳。胡桃肉入腎經，通命門，補腎陽，強腰膝，協 杜仲、補骨脂則有補腎強筋之功。大蒜辛溫走竄，能通五臟達清竅祛寒根，則疼痛可緩。諸藥 配伍，共奏溫腎壯陽，強腰固精之功效。有臨床報道，用本方加減治療骨質疏松癥、冠心病、 及黃褐斑等。本實驗室前期研究證實，青娥方對未成熟小鼠、去卵巢小鼠、衰老大鼠三種動 物模型的研究發現青娥方在體內具有擬雌激素樣活性。
[0005] 本發明涉及青娥方提取物的制備及在抗抑郁、抗焦慮方面的作用和功效，尚未見 相關報道。
【發明內容】
[0006] 本發明涉及青娥方及其提取物在抗抑郁及抗焦慮方面的制藥用途。
[0007] 本發明提供了青娥方及其提取物抗抑郁及抗焦慮的技術方案，為開拓青娥方抗抑 郁及抗焦慮的新用途提供了依據。本發明同時提供了具有抗抑郁及抗焦慮作用的青娥方提 取物的制備方法。
[0008] 青娥方為補腎良方，首載于宋代的《太平惠民和劑局方》，是臨床常用的治療腎虛 腰痛之良方。由杜仲（鹽炒）480克，補骨脂（鹽炒）240克，核桃仁（炒）150克，大蒜120 克組成
[0009] 本發明中的青娥方提取物是通過如下技術方案實現的：
[0010] 青娥方的原料藥的組成是：杜仲：補骨脂：核桃仁：大蒜（1-8) : (0. 5_4): (0. 5-6) : (0. 2-5) 〇
[0011] 青娥方的原料藥的組成是：杜仲（鹽炒）：補骨脂（鹽炒）：核桃仁（炒）：大蒜 (1-8) : (0· 5-4) : (0· 5-6) : (0· 2-5)。
[0012] 青娥方提取物由以下方法制成：
[0013] 1)原料藥按配比選取
[0014] 2)提取，
[0015] 青娥方提取物的提取方法之一：
[0016] 按上述比例取上述藥材，75%乙醇回流提取2-4次，每次提取1-4小時，減壓回收 溶劑，得青娥方提取物。
[0017] 青娥方提取物的提取方法之二：
[0018] 按上述比例取鹽炒杜仲飲片，依次用石油醚，乙酸乙酯，乙醇，各回流提取2-4次， 每次提取1-4小時，以上提取液混合，減壓回收溶劑，得杜仲提取物；
[0019] 取鹽炒補骨脂，依次用石油醚，乙酸乙酯，乙醇，各回流提取2-4次，每次提取1-4 小時，以上提取液混合，減壓回收溶劑，得補骨脂提取物；
[0020] 取炒桃仁，依次用石油醚，乙酸乙酯，乙醇，各回流提取2-4次，每次提取1-4小時， 以上提取液混合，減壓回收溶劑，得桃仁提取物；
[0021] 取大蒜，依次用石油醚，乙酸乙酯，乙醇，各回流提取2-4次，每次提取1-4小時，以 上提取液混合，減壓回收溶劑，得大蒜提取物；
[0022] 充分混合以上杜仲提取物、補骨脂提取物、桃仁提取物、大蒜提取物，得青娥方提 取物。
[0023] 青娥方提取物的提取方法之二：
[0024] 按上述比例取上述藥物，水煎煮提取2-4次，每次提取1-4小時，回收溶劑，得青娥 方提取物。
[0025] 青娥方提取物的提取方法之四：
[0026] 將原料杜仲（鹽炒），75%乙醇加熱回流提取；提取液合并，濃縮至干，優選的濃縮 方式為減壓濃縮；獲得濃縮物記為EUl ;
[0027] 將原料藥補骨脂（鹽炒），75%乙醇加熱回流提取；提取液合并，濾液回收至無醇 味，可發現藥材浸膏分為上下兩層，上層蒸干，記為PC1，下層沉淀記為PC2 (黏膠狀，黑褐 色）。
[0028] 大蒜和桃仁分別采用溶劑提取法進行提取，優選的提取溶劑為乙醇，回收溶劑分 別得桃仁提取物，記為TRl，大蒜提取物，記為ASl。
[0029] 將以上各原料藥的的提取物按提取物重量配比：EUl :PC1 :PC2 :TR1 :AS1 = (10-9 0: (5-40) : (5-60) : (1-25) : (2-20)混合，得青娥方提取物
[0030] 3)青娥方提取物中，原料藥杜仲提取物中苯丙素苷類含量為0. 05-10 %，總酚酸 含量為1-5 %，綠原酸含量0. 1-5 %，環烯醚萜類化合物的含量為0.05-5 % ;原料藥補骨脂 提取物中總黃酮含量為〇. 5-10%，總香豆素的含量為0. 5-10%。
[0031] 本發明的青娥方提取物原料藥的優選配比：杜仲：補骨脂：核桃仁：大蒜4 :2 : 1. 8:1
[0032] 本發明的青娥方提取物原料藥的優選配比：杜仲：補骨脂：核桃仁：大蒜4 : 2:1. 4:1〇
[0033] 青娥方提取物的制備方法是：
[0034] 杜仲（鹽炒）480克，補骨脂（鹽炒）240克，核桃仁（炒）150克，大蒜120克
[0035] 按上述比例取上述藥材，8倍體積75%乙醇回流提取3次，每次提取1. 5小時，減 壓回收溶劑，得青娥方提取物。
[0036] 青娥方提取物的制備方法是：
[0037] 杜仲（鹽炒）480克，補骨脂（鹽炒）240克，核桃仁（炒）150克，大蒜120克
[0038] 按上述比例取鹽炒杜仲飲片480g，依次用8倍體積的石油醚，乙酸乙酯，乙醇，各 回流提取3次，每次提取1. 5小時，以上提取液混合，減壓回收溶劑，得杜仲提取物；
[0039] 取鹽炒補骨脂240g，依次用8倍體積的石油醚，乙酸乙酯，乙醇，各回流提取3次， 每次提取1. 5小時，以上提取液混合，減壓回收溶劑，得補骨脂提取物；
[0040] 取炒桃仁150g，依次用8倍體積的石油醚，乙酸乙酯，乙醇，各回流提取3次，每次 提取1. 5小時，以上提取液混合，減壓回收溶劑，得桃仁提取物；
[0041] 取大蒜120g，依次用8倍體積的石油醚，乙酸乙酯，乙醇，各回流提取3次，每次提 取1. 5小時，以上提取液混合，減壓回收溶劑，得大蒜提取物；
[0042] 充分混合以上杜仲提取物、補骨脂提取物、桃仁提取物、大蒜提取物，得青娥方提 取物。
[0043] 青娥方提取物的制備方法是：
[0044] 杜仲（鹽炒）480克，補骨脂（鹽炒）240克，核桃仁（炒）150克，大蒜120克
[0045] 按上述比例取上述藥物，20倍體積水煎煮提取3次，每次提取1小時，回收溶劑，得 青娥方提取物。
[0046] 青娥方提取物的制備方法是：
[0047] 將原料杜仲（鹽炒）480克，75%乙醇加熱回流提取；提取液合并，濃縮至干，優選 的濃縮方式為減壓濃縮；獲得濃縮物記為EUl ;
[0048] 將原料藥補骨脂（鹽炒）240克，75%乙醇加熱回流提取；提取液合并，濾液回收至 無醇味，可發現藥材浸膏分為上下兩層，上層蒸干，記為PCl，下層沉淀記為PC2 (黏膠狀，黑 褐色）。
[0049] 大蒜和桃仁分別采用溶劑提取法進行提取，優選的提取溶劑為乙醇，回收溶劑分 別得桃仁提取物，記為TRl，大蒜提取物，記為ASl。
[0050] 將以上各原料藥的的提取物按提取物重量配比：EUl :PC1 :PC2 :TR1 :AS1 = 45:10:30:5:10混合，得青娥方提取物
[0051] 青娥方提取物中，原料藥杜仲提取物中苯丙素苷類優選含量為3%，總酚酸含量為 2 %，綠原酸含量2 % ;環烯醚萜類化合物的含量為2 %，原料藥補骨脂提取物中總黃酮含量 為3%，總香豆素的含量為3%。
[0052] 青娥方提取物還可以由以下方法制成：
[0053] 1)原料藥按如下配比：杜仲：補骨脂：核桃仁：大蒜（1-8) : (0. 5-4): (0. 5-6) : (0. 2-5) 〇
[0054] 2)提取，
[0055] 3)純化，
[0056] 4)青娥方提取物中，原料藥杜仲提取物中苯丙素苷類含量為0. 05-10 %，總酚酸 含量為1-5 %，綠原酸含量0. 1-5 %，環烯醚萜類化合物的含量為0.05-5 % ;原料藥補骨脂 提取物中總黃酮含量為〇. 5-10%，總香豆素的含量為0. 5-10%。
[0057] 青娥方提取物的制備包括以下任意一種方法
[0058] 方法一：將原料杜仲用合適的溶劑提取1-5次，優選提取2-3次，優選的溶劑是 120#汽油、乙酸乙酯、丙酮、丙醇、乙醇、甲醇、乙醇水溶液或甲醇的水溶液及水等，提取方式 可以是加熱回流、微波提取、超聲提取、冷浸提取等方式；提取液合并，濃縮至干，優選的濃 縮方式為減壓濃縮；獲得部分記為EUl ;
[0059] 將原料藥補骨脂用溶劑提取1-5次，優選提取2-3次，優選的溶劑是10-90%乙醇， 提取方式可以是加熱回流、微波提取、超聲提取、冷浸提取等方式；提取